全 文 ：［4］ Hsu C P，Lin Y H，Chou C C，et al． Mechanisms of grape
seed procyanidin-induced apoptosis in colorectal carcinoma cells
［J］． Anticancer Ｒes，2009，29(1) :283-289．
［5］ Shao Z H，Wojcik K Ｒ，Dossumbekova A． Grape seed proan-
thocyanidins protect cardiomyocytes from ischemia and reperfu-
sion injury via Akt-NOS signaling［J］． Cell Biochem，2009，
107(4) :697-705．
［6］ Sharma S D，Meeran S M，Katiyar S K． Proanthocyanidins in-
hibit in vitro and in vivo growth of human non-small cell lung
cancer cells by inhibiting the prostaglandin E(2)and prosta-
glandin E(2)receptors［J］． Mol Cancer Ther，2010，9(3) :
569-580．
［7］ Catherine T，Cyril A，Williamo M． The absorption，metabo-
lism and excretion of flavan-3-ols and procyanidins following the
ingestion of a grape seed extract by rats［J］． Brit J Nutr，
2005，94:170-181．
［8］ Gonthier M P，Donovan J L，Texier O，et al． Metabolism of
dietary procyanidins in rats［J］． Free Ｒadic Biol Med，2003，
35(8) :837-844．
［9］ 黄朝晖，陆 平，孟宪军，等． 不同产地高粱的原花青素
含量测定及其抗氧化活性分析［J］． 食品工业科技，2008，
29(9) :140-144．
［10］ 李 高，陈 鹰，王瑞华． 长春西汀自微乳化释药系统的
研究［J］． 中国药学杂志，2006，41(23) :1795-1798．
二次展开薄层色谱法同时分析山蜡梅中 8 种化合物
周 斌， 程 丹， 李 洁， 崔小弟， 郑鹏武
(江西科技师范大学药学院，江西 南昌 330013)
收稿日期:2013-02-01
基金项目:江西省教育厅资助项目 (12750) ，江西科技师范大学校级科研项目 (Ky2012zy17)
作者简介:周 斌，男，副教授，博士，研究方向:中药活性成分。E-mail:tju_ zhoubin@ 163. com
摘要:目的 建立二次展开薄层色谱法同时测定山蜡梅中 8 种成分。方法 采用薄层层析对山蜡梅样品进行分离，第
1 次展开剂用三氯甲烷-甲醇 (9 ∶ 1，V /V) ，展距为 50 mm，第 2 次展开剂用石油醚-乙酸乙酯 (10 ∶ 1，V /V) ，展开至
100 mm，温度为室温，显色剂为 1%香草醛硫酸溶液，烘烤温度为 110 ℃，扫描波长分别为 545 nm和 606 nm。结果
桉油精的线性范围为 0. 76 ～ 11. 4 μg，r2 = 0. 990 9，精密度 ＲSD 为 3. 98%;β-石竹烯的线性范围为 0. 72 ～ 10. 87
μg，r2 = 0. 991 7，精密度 ＲSD为 1. 49%;芳樟醇的线性范围为 1. 8 ～ 18 μg，r2 = 0. 990 3，精密度 ＲSD 为 0. 61%。
结论 本方法操作简单，重复性好，可作为控制山蜡梅药材质量的方法。
关键词:山蜡梅;薄层色谱;芳樟醇;桉油精
中图分类号:Ｒ284. 1 文献标志码:B 文章编号:1001-1528(2013)12-2752-03
doi:10. 3969 / j． issn． 1001-1528. 2013. 12. 047
山蜡梅 Chimonanthus nitens Oliv． 为我国特有的蜡梅科
蜡梅属植物［1-2］，药用部位为其干燥的叶，主要分布于江西
德兴、婺源和安徽徽州一带山区，又名香风茶、毛山茶等，
当地民间习惯用其叶泡茶治疗感冒。药理研究表明，山蜡
梅叶具有清凉排毒、防抗感冒、防暑解暑等作用［3］，其化
学成分主要有挥发油［4-5］、生物碱、黄酮类、香豆素类
等［6-8］。临床上常用来治疗小儿风热感冒、呼吸道感染、手
足口病和慢性盆腔炎等［9-12］。目前对山蜡梅及其制剂的质
量控制研究报道很少［13-14］，为了更好地控制山蜡梅药材及
其制剂的质量，在前期研究基础上［15］，采用二次展开薄层
色谱法先分离大极性成分，第 2 次对小极性成分进行分离，
建立了同时分离分析山蜡梅中 8 种化合物的方法，包括 3
个萜类化合物和 5 个极性较大的未知成分。
1 仪器与试药
G60 高效薄层板 (德国 Merck 公司) ，AS30 薄层自动
点样仪 (德国 Desaga公司) ，CD60 薄层扫描仪 (德国 De-
saga公司) ，Allegra X-15Ｒ 冷冻离心机 (美国 Beckman 公
司)。BＲANSON8510E-DTH 超声仪 (美国 BＲANSON 公
司) ，纯水系统 (美国 Millipore 公司) ，硅胶 G60 薄层板
(德国 Merck公司) ，薄层显色加热器及电动喷雾器 (武汉
药科技术有限公司)。
芳樟醇对照品 (批号 ALＲ-018N)购自 Accustandard
USA公司，桉油精 (99%，批号 A12269)购自 Alfa Aesar
公司，β-石竹烯 (98%，批号 C0796)购自 TCI 公司。甲
醇、三氯甲烷、甲酸、石油醚 (30 ～ 60 ℃)、乙酸乙酯等
所有试剂均为分析纯，山蜡梅叶购自江西婺源地区，经江
西中医药大学药学院邓可众副教授鉴定为山蜡梅 Chimonan-
thus nitens oliv．，40 ℃干燥烘至恒定质量，粉碎，过筛，密
封备用。
2572
2013 年 12 月
第 35 卷 第 12 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
December 2013
Vol． 35 No． 12
2 方法与结果
2. 1 混合对照品溶液的制备 分别称取芳樟醇、桉油精和
β-石竹烯适量，置 2 mL小瓶中，用乙酸乙酯溶解，制备成
1 800 μg /mL芳樟醇，760 μg /mL桉油精，725 μg /mL β-石
竹烯的混合对照品溶液。
2. 2 供试品溶液的制备 精密称取山蜡梅叶干燥样品粉末
500 mg，置试管中，加入5 mL甲醇，密封，混匀约30 s，于
室温 (25 ±2)℃下超声 (881 W，43 kHz)60 min，离心 10
min (3 500 r /min) ，取上清液置洁净干燥试管中密封备用。
2. 3 薄层色谱条件 薄层板为 Merck 板，条带宽 7 mm，
间隔 8 mm，离底端 10 mm，第 1 次以三氯甲烷-甲醇 (9 ∶
1)为展开剂，展距为 50 mm，取出晾干，第 2 次以石油
醚-乙酸乙酯 (10 ∶ 1)为展开剂，展距为 100 mm，温度为
室温，显色剂为 1%香草醛硫酸溶液，烘烤温度为 110 ℃，
扫描波长为 606 nm和 545 nm，检测方式为反射法，钨灯为
光源，狭缝大小为 0. 04 mm × 4 mm。对照品和样品的 TLC
色谱见图 1 所示，扫描色谱见图 2 所示。
S． 混合对照品 C1 ～ C5． 样品 1． 桉油精 2． β-石竹烯
3． 芳樟醇 4 ～ 8． 5 个未知成分
图 1 薄层色谱图
1． 桉油精 2． β-石竹烯 3． 芳樟醇 4 ～ 8． 5 个其他物质
图 2 对照品 (A)和样品 (B)的薄层扫描色谱
2. 4 扫描波长的选择 吸取混合对照品溶液 10 μL 按照
2. 3 项下条件点样，展开，晾干后喷显色剂至斑点清晰，在
400 ～ 800 nm范围内对 3 个斑点进行光谱扫描，确定 β-石竹
烯的最大吸收波长为 545 nm，桉油精和芳樟醇的最大吸收
波长为 606 nm。
2. 5 线性关系考察 精密量取混合对照品溶液 1、2、4、
6、8、10、15 μL分别点于同一硅胶 G薄层板上，按 2. 3 项
下方法操作展开，在 545 nm 波长下扫描 β-石竹烯，在 606
nm下扫描桉油精和芳樟醇，以峰面积为纵坐标，点样量为
横坐标，求得回归方程。桉油精为 Y = 206. 27 X + 199. 94，
r2 = 0. 990 9;β-石竹烯为 Y = 142. 71 X + 78. 29， r2 =
0. 991 7;芳樟醇为 Y = 125. 14 X + 368. 82，r2 = 0. 990 3。
3 种物质的点样量分别在 0. 76 ～ 11. 4 μg、0. 72 ～ 10. 87 μg、
1. 8 ～ 18 μg范围内线性良好。
2. 6 仪器精密度试验 对混合对照品斑点用薄层扫描仪连
续扫描 6 次，测定峰面积，计算桉油精、β-石竹烯和芳樟
醇的 ＲSD分别为 3. 98%、1. 49%和 0. 61%。
2. 7 稳定性试验 对 10 μL点样量的混合对照品斑点在 30
min内每隔 6 min扫描 1 次，测定每次的扫描峰面积，计算
桉油精、β-石竹烯和芳樟醇的 ＲSD 分别为 2. 03%、2. 97%
和 3. 26%。结果表明，显色之后的 3 种物质斑点在 30 min
之内稳定性很好。
2. 8 重复性试验 分别精密称取 6 份山蜡梅药材粉末，按
照上述的样品处理方法处理，点样于同一薄层板上，展开，
显色后薄层扫描，计算峰面积，桉油精、β-石竹烯和芳樟
醇的 ＲSD分别为 2. 69%、4. 37%和 3. 18%。
2. 9 回收率试验 在每个对照品的线性范围内，取高浓度
(120%)、中间浓度 (100%)和低浓度 (80%)3 个浓度，
每个浓度分别吸取 3 个样品点于同一薄层板上，按照 2. 3
项下操作，计算回收率和 ＲSD，结果见表 1 所示。
表 1 回收率试验结果 (n =3)
对照品
检测回收率 /%(ＲSD /%)
低浓度 中浓度 高浓度
芳樟醇 109. 78(1. 87) 95. 8(2. 93) 97. 5(2. 03)
β-石竹烯 96. 7(3. 62) 90. 7(2. 18) 86. 1(3. 25)
桉油精 82. 3(2. 65) 93. 4(3. 98) 87. 6(4. 12)
2. 10 样品测定 应用建立的薄层色谱方法定量分析山蜡
梅叶中已知 3 种萜类化合物的量，以芳樟醇作为基准，计
算出其他 5 个未知化合物的相对含有量，结果见表 2 所示。
3 讨论
在进行薄层色谱分离优化时，分别考察了乙酸乙酯-甲
酸-水 (8 ∶ 1 ∶ 1、7 ∶ 1. 5 ∶ 1. 5)、乙酸乙酯-甲醇 (7 ∶ 3、
8 ∶ 2)为首次展开剂，展开分析山蜡梅叶中大极性的化合
物，再用石油醚-乙酸乙酯 (9 ∶ 1、10 ∶ 1、15 ∶ 1)为二次
展开剂，来展开分离萜类化合物。经比较各次不同展开剂
及斑点分离情况，最终确定三氯甲烷-甲醇 (9 ∶ 1)为首次
展开剂，展距为 50 mm，石油醚-乙酸乙酯 (10 ∶ 1)为二次
3572
2013 年 12 月
第 35 卷 第 12 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
December 2013
Vol． 35 No． 12
表 2 5 批山蜡梅药材中 8 种化合物的量
样品
各化合物含有量 /(mg·g － 1) (ＲSD /%)
桉油精 β-石竹烯 芳樟醇 化合物 4 化合物 5 化合物 6 化合物 7 化合物 8
1 0. 56(2. 52) 0. 53(3. 18) 2. 85(1. 29) 0. 13(2. 67) 1. 50(1. 89) 0. 22(3. 38) 0. 06(3. 26) 1. 32(1. 98)
2 0. 63(3. 16) 0. 51(2. 62) 3. 32(1. 78) 0. 16(3. 35) 1. 75(1. 97) 0. 25(3. 57) 0. 07(4. 12) 1. 53(2. 07)
3 0. 49(2. 81) 0. 44(2. 95) 2. 49(1. 65) 0. 12(3. 29) 1. 31(2. 12) 0. 19(3. 29) 0. 06(3. 83) 1. 15(2. 53)
4 0. 63(3. 06) 0. 50(3. 27) 3. 24(2. 07) 0. 15(2. 48) 1. 70(2. 35) 0. 24(2. 99) 0. 07(3. 79) 1. 49(1. 45)
5 0. 55(2. 29) 0. 47(2. 58) 3. 63(2. 23) 0. 17(2. 69) 1. 91(1. 78) 0. 27(2. 86) 0. 08(4. 06) 1. 68(1. 88)
展开剂，展距为 100 mm，药材中不同极性的物质在同一薄
层板上能获得很好的分离。
本实验中比较了 10%硫酸乙醇和 1%香草醛硫酸溶液
显色，发现后者显色更加灵敏，色彩更丰富。显色时可用
浸渍法、喷雾法。前者虽然完全，均一，但因显色剂含有
硫酸，加热后，板面发黄，而且桉油精看不到斑点，故采
用喷雾法较好。
通过二次展开薄层色谱方法，建立山蜡梅药材的薄层
色谱多成分分析，同时定量分析 3 种已知化合物和 5 种未
知化合物的量，能直观地评价药材的品质，且方法简捷，
经济，可以用来控制山蜡梅药材的质量。
参考文献:
［1］ 孙延军，张 冰，林石狮，等． 江西三清山优势种群钩锥-
山蜡梅群落研究［J］． 广西植物，2011，31(1) :70-74．
［2］ 曾宪锋，邱贺媛． 广东省野生植物一新记录科———蜡梅科
［J］． 西北植物学报，2010，30(1) :205-207．
［3］ 张尊敬，刘忠达． 山腊梅的成分及药理作用研究近况［J］．
浙江中医杂志，2009，44 (11) :849-850．
［4］ 詹忠根，徐 程． 山蜡梅叶挥发油化学成分析［J］． 药物分
析杂志，2006，26(8) :1168-1170．
［5］ 徐年军，白海波，严小军，等． 山腊梅中挥发油成分分析
［J］． 分析测试学报，2006，25(1) :90-93．
［6］ 肖炳坤，刘耀明，冯淑香，等． 山蜡梅叶的化学成分研究
(I) ［J］． 中草药，2005，36(2) :187-189．
［7］ 舒任庚，李莎莎，胡浩武，等． 山蜡梅化学成分研究［J］．
中国药学杂志，2010，45(15) :1134-1135．
［8］ 孙丽仁，何明珍，冯育林，等． 山蜡梅叶的化学成分研究
［J］． 中草药，2009，40(8) :1214-1216．
［9］ 张 辉，沙丽颖，郭海燕，等． 山腊梅叶颗粒剂治疗小儿
风热感冒 89 例体会［J］． 山东医药，2008，48(31) :37．
［10］ 田 琳，张立明，董春晓． 山腊梅叶颗粒治疗儿童急性上
呼吸道感染疗效观察［J］． 临床合理用药杂志，2010，3
(12) :57．
［11］ 王爱晖． 山蜡梅叶颗粒治疗手足口病的疗效观察［J］． 医学
信息，2011，24(4) :1517．
［12］ 江伟华，杨林波，徐旭群． 山腊梅灌肠剂治疗慢性盆腔炎
74 例临床观察［J］． 浙江中医杂志，2008，43 (7) :
402-403．
［13］ 李诒光，卢建中，陈 杰，等． 江西道地药材山蜡梅叶质
量标准的研究［J］． 中草药，2010，41 (5) :836-838．
［14］ 白会强，蔡少华，徐 亮，等． HPLC法测定山蜡梅中东莨菪
素、槲皮素、夏蜡梅碱［J］． 中草药，2010，41(3):486-487．
［15］ Zhou Bin，Tan Miao，Lu Jingfeng，et al． Simultaneous determi-
nation of five active compounds in chimonanthus nitens by doub-
le-development HPTLC and scanning densitometry［J］． Chem
Cent J，2012，6(1) :46．
舒康平喘胶囊的薄层色谱鉴别
李 阳， 韩 涛， 景 明， 吴红彦， 赵 磊， 余晓晖
(甘肃中医学院，甘肃省高校中 (藏)药化学与质量研究省级重点实验室，甘肃 兰州 730000)
收稿日期:2013-02-11
作者简介:李 阳 (1977—) ，女，硕士，讲师，主要从事中药化学教学和科研工作。
摘要:目的 建立舒康平喘胶囊 (威灵仙、仙鹤草、桔梗、地龙)的定性鉴别方法。方法 采用薄层色谱法，分别
以对照品或对照药材为对照，对舒康平喘胶囊中的威灵仙、仙鹤草、桔梗及地龙进行定性鉴别。结果 4 个薄层色谱
的供试品色谱均分离良好、斑点清晰，与对照品或对照药材对应位置上，显现相同颜色的斑点。结论 定性鉴别方法
重复性好，专属性强，可作为该胶囊质量控制指标。
关键词:舒康平喘胶囊;薄层色谱
中图分类号:Ｒ927. 2 文献标志码:B 文章编号:1001-1528(2013)12-2754-03
doi:10. 3969 / j． issn． 1001-1528. 2013. 12. 048
4572
2013 年 12 月
第 35 卷 第 12 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
December 2013
Vol． 35 No． 12