全 文 ：66
第 1 5卷 第 7 期
2013 年 7 月
辽 宁 中 医 药 大 学 学 报
JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM
Vol. 15 No. 7
Jul .，2013
花叶假杜鹃Barleria lupurina Lindl.，又名七星
剑、血路草、刺血红等，为爵床科Acanthaceae假杜鹃
属Barleria植物[1]。岭南民间以地上部分入药。其
性温，味辛、苦，入心、肝经 ；通经活络，解毒消肿，
主治毒蛇咬伤、犬咬伤、跌打损伤、痈肿、外伤出血
等[2-3]。根据目前的文献记载[4]，黄酮类化合物为假
杜鹃属的主要活性成分之一，故采用紫外分光光度
法测定假杜鹃中总黄酮的含量。
1 仪器、试剂和材料
1.1 仪器
DHG-9140A型电热恒温鼓风干燥箱，购自上海
精宏实验设备有限公司；sartorius CP225D十万分之一
电子天平；JA2003千分之一电子天平，购自上海良平
仪器仪表有限公司；SK300LHC型超声波清洗仪，购
自上海科导超声仪器有限公司；HP8453型紫外分光
光度仪，购自美国惠普（HEWETT PACKARD）公司。
1.2 试剂
芦丁对照品（中国药品生物制品检验所，批号 ：
10008-200707）；乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠
等试剂均为分析纯。
1.3 材料
样品采自广州市南方医科大学岭南药植物
园，经南方医科大学中医药学院药植鉴定教研
室马骥教授鉴定为爵床科假杜鹃属花叶假杜鹃
Barleria lupurina Lindl.，地上部分切成10~50 cm段
落，于45 ℃烘干，粉碎，备用。
2 方法与结果
2.1 对照品溶液的制备
精密称取于120 ℃下减压干燥至恒重的芦丁对
照品0.00834 g，置于25 mL容量瓶中，加入30%乙醇
20 mL，超声溶解，冷却至室温，再用30%乙醇定溶
至刻度，摇匀，得到浓度为0.1668 mg·mL-1的芦丁
对照品溶液，冷藏，备用。
2.2 供试品溶液的制备
新鲜采集药材，在鼓风式烘箱中（40 ℃）干燥
16 h，打粉机将其打成粗粉。取花叶假杜鹃茎、叶混
花叶假杜鹃总黄酮含量测定
邵帅1，2，马骥1，张宏伟1
（1.南方医科大学中医药学院，广东 广州 510515 ；2.中国疾病预防控制中心辐射防护与核安全医学所，北京 100088）
摘 要：目的：建立花叶假杜鹃中总黄酮含量的测定方法，并测定其含量。方法：采用超声提取法，以80%乙
醇为提取溶剂提取药材中黄酮类成分，以紫外-可见分光光度法于510 nm处测定其吸光光度，建立标准曲线，计算
总黄酮含量。结果：以芦丁为对照品，总黄酮在0.02502~0.08340 mg·mL-1浓度范围内符合Beer定律，回归方程为
A=10.339 C + 0.0115（r=0.9996）；平均加样回收率为96.2%（RSD=2.65%）；得花叶假杜鹃每克生药中总黄酮平均
含量为47.797 mg。结论：利用紫外分光光度法测定花叶假杜鹃中总黄酮的含量，简便快速且有良好的稳定性、准确
性和重现性，可用于药材的质量控制。
关键词：花叶假杜鹃；总黄酮；紫外-可见分光光度法
中图分类号：R282 文献标志码：A 文章编号：1673-842X (2013) 07- 0066- 03
收稿日期：2012-12-23
作者简介：邵帅（1986-），女，辽宁本溪人，实习研究员，硕士，研究方向 ：中药药理学。
通讯作者：张宏伟（1968-），女，浙江温岭人，副教授，硕士，研究方向 ：药用植物资源及质量方面的工作。E-mail ：zhwjyl@fimmu.com。
Determination of Total Flavones in Barleria Lupurina Lindl.
SHAO Shuai1，2，MA Ji1，ZHANG Hongwei1
（1.College of Traditional Chinese Medicine，Southern Medical University，Guangzhou 510515，
Guangdong，China ；2.National Institute for Radiological Protection，China CDC，Beijing 100088，China）
Abstract ：Objective ：To establish a method on determination of total flavones in Barleria lupurina
Lindl.，and its content. Methods ：The flavonoids were extracted with the ultrasonic extraction method in the
aqueous solution of 80% ethanol.The absorptiometry was measured by UV-Vis spectrophotometry in the
wavelength of 510 nm to establish a standard curve.Then，the total flavones content was calculated with the
standard curve. Results ：Using rutin as comparison sample，the result showed a good linear relationship
at the range of 0.02502~0.08340 mg·mL-1，and the curve was A=10.339 C+0.0115（r=0.9996）.The
average recovery was 96.2% and RSD was 2.65%（n=5）.There were 47.797 mg total flavones in every
gram of Barleria lupulina. Conclusion ：UV-Vis spectrophotometry can be used to measure the content of
total flavones in Barleria lupulina Lindl..The method is simple and fast with good stability，accuracy and
repeatability，and can be used for quality control of herbal medicine.
Key words ：Barleria lupulina Lindl. ；total flavones ；UV-Vis spectrophotometry
DOI：10.13194/j.jlunivtcm.2013.07.68.shaosh.084
67
1 5 卷 辽 宁 中 医 药 大 学 学 报
合粉末6 g，用索氏提取装置加石油醚，60 ℃回流3 h
至虹吸管内，石油醚为无色，放冷，倾出石油醚，粉末
挥干至恒重。
精密称取药材1.0 g，按参考文献[5]中方法，分
别加80%乙醇20 mL，在59 kHz超声下提取30 min。
过滤，用80% 乙醇冲洗至下滴液无色，滤液转移至
25 mL容量瓶中，80%乙醇定容至刻度。冷藏，备用。
2.3 测定波长的选择
精确量取对照品溶液3.0 mL和供试品溶液各
0.2 mL，分别置于10 mL容量瓶中，加5% NaNO2溶液
0.3 mL摇匀，放置6 min加入10% Al（NO3）3溶液0.3
mL摇匀，放置6 min加入4% NaOH溶液4 mL，30%
乙醇定容至刻度，摇匀，放置15 min。以相应试剂为
空白。置比色杯中，用紫外-可见分光光度计在波
长400~780 nm扫描，测定结果显示 ：两种溶液在510
nm处均有最大吸收，其他成分对测定无干扰。见图
1。
a.芦丁标准品 ；b.花叶假杜鹃
图1 测定波长的选择
2.4 标准曲线的绘制
精密量取对照品溶液1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、
4.5、5.0 mL，分别置于10 mL的容量瓶中，加5% NaNO2
溶液0.3 mL摇匀，放置6 min加入10% Al（NO3）3溶
液0.3 mL摇匀，放置6 min加入4% NaOH溶液4 mL，
30%乙醇定容至刻度，摇匀，放置10 min。以相应试
剂为空白。置比色杯中，用紫外-可见分光光度计
在波长510 nm处测定其吸光度。以浓度为横坐标，
吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。见图2。
y = 10.339x + 0.0155
R2 = 0.9992
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1
吸
光
度
值
吸
光
度
值
浓度（mg·mL-1）
图2 标准曲线的测定
2.5 精确度考察
精密量取对照品溶液3.0 mL，按2.4项下处理方
法，从“分别置于10 mL的容量瓶中”起，测定样品，
连续测定5次。见表1。
表1 精密度试验结果
测定次数 吸光度A 平均值Ā RSD（%）
1 0.53884
0.53828 0.14
2 0.53877
3 0.53886
4 0.53764
5 0.53727
2.6 重复性考察
按2.2项从“新鲜采集药材”至“粉末挥干至
恒重”的方法处理花叶假杜鹃原药材粗粉，平行取
花叶假杜鹃粗粉5份，制备样品溶液，精密量取0.2
mL，按2.4项下方法操作，从“分别置于10 mL的容
量瓶中”起测定样品吸光度。见表2。
表2 重复性试验结果
组别 样品重量（g）
吸光度A RSD（%）A1 A2 A3 平均值Ā
1 1.015 0.39675 0.39624 0.39471 0.39590
2.65
2 1.002 0.37858 0.37861 0.37820 0.37846
3 1.008 0.38217 0.38196 0.38205 0.38206
4 1.003 0.36812 0.36663 0.36820 0.36765
5 1.011 0.38024 0.37968 0.38004 0.37999
2.7 稳定性考察
精密量取花叶假杜鹃供试品1.0 mL，置于25 mL
的容量瓶中，按2.4项下方法，从“加5% NaNO2溶液
0.3 mL摇匀”始处理样品液，分别于15、25、35、45、
55、65 min测定吸光度。见表3。
表3 稳定性试验结果
时间
（min） A1 A2 A3 Ā
RSD（%）
45 min前 55 min前 65 min前
15 0.83103 0.83246 0.83282 0.832103
1.65 2.41 5.07
25 0.83486 0.83267 0.83128 0.832937
35 0.81593 0.81765 0.81032 0.814633
45 0.80512 0.80475 0.80605 0.805307
55 0.78433 0.78678 0.78686 0.785990
65 0.72272 0.72410 0.72753 0.724783
2.8 加样回收率实验
取已知含量的花叶假杜鹃，每份1 g，精密称定，
制备样品溶液。分别精密量取供液0.2 mL 5份，各
加入对照品溶液2.5 mL。按2.4项下方法，从“分别
置于10 mL的容量瓶中”开始操作，于510 nm处测
定吸光度。见表4。
表4 加样回收率试验结果
组
别
称样
量（g）
样品含
量（mg）
对照品加
入量（mg）
吸光度 测得量
（mg）
回收率
（%）
平均回收
率（%）
RSD
（%）A1 A1 A3 Ā
1 0.999 47.749 52.125 0.81857 0.81737 0.81698 0.81764 97.463 95.0
96.2 2.65
2 1.002 47.893 52.125 0.83692 0.83559 0.83431 0.83561 99.636 99.2
3 1.008 48.179 52.125 0.83482 0.83647 0.83575 0.83568 99.645 98.6
4 1.003 47.940 52.125 0.81255 0.81895 0.81784 0.81645 97.320 94.3
5 0.997 47.654 52.125 0.81198 0.81301 0.81146 0.81215 96.800 93.7
2.9 样品含量的测定
精密量取花叶假杜鹃供试品溶液0.2 mL，按2.4
项下方法，从“分别置于10 mL的容量瓶中”开始操
作，于510 nm处测定供试液的吸光度，以标准曲线
计算得各样品总黄酮含量。
经方法学验证，花叶假杜鹃的总黄酮含量测定
方法中仪器精密度良好（见表1），操作重复性良好
（见表2），待测定样品在45 min中内稳定（见表3），
且该方法准确性良好，加样回收率为96.2%（见表
4）。其标准曲线为A =10.339 C+0.0115（r=0.9996），
在0.02502~0.08340 mg·mL-1浓度范围内符合Beer
定律。测得花叶假杜鹃Ā=0.410838 ；计算得花叶假
杜鹃每克生药中总黄酮平均含量为47.797 mg。
3 讨 论
黄酮类化合物为爵床科假杜鹃属植物的主要
成分，具有抗菌、抗病毒、抗炎症、抗过敏作用，这与
花叶假杜鹃在民间应用中多用于跌打损伤，蛇、犬咬
伤的功效记载有一定相关性，故将其列为主要检测
68
第 1 5卷 第 7 期
2013 年 7 月
辽 宁 中 医 药 大 学 学 报
JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM
Vol. 15 No. 7
Jul .，2013
成分[2-6]。紫外-可见分光光度法测定花叶假杜鹃
每克生药总黄酮含量约为47.797 mg。可为其质量
标准的制定提供实验依据。
以紫外-可见分光光度法测定花叶假杜鹃
的总黄酮含量，在45 min内测定结果的RSD值为
1.65%，在55 min内RSD值为2.41%，而65 min内测
定结果的RSD值为5.07%。可以观察到 ：在55~65
min，总黄酮与铝盐生成的有色络合物的吸光度急
剧降低，溶液红色变浅。45~55 min，其络合物吸光
度亦下降。说明络合物在45 min后稳定性降低。
结果提示 ：以紫外-可见分光光度法测定花叶假杜
鹃总黄酮含量时，时间应控制在45 min内。◆
参考文献
[ 1 ] 中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志第七十卷[ M ] .
北京 ：科学出版社，1999 ：62-67.
[ 2 ] 《中药辞海》责编组.中药辞海·第二卷[ M ] .北京 ：中国医药
科技出版社，1996 ：83-84.
[ 3 ] 国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草（第七册）
[ M ] .上海 ：上海科学技术出版社，1999 ：454-455.
[ 4 ] 姚振生.药用植物学[ M ] .北京 ：中国中医药出版社，2003 ：
354.
[ 5 ] 刘冬珠，朱全红，张宏伟.假杜鹃中总黄酮的含量测定[ J ] .中
医药导报，2009，15 ( 2 ) ：77-78.
[ 6 ] 延玺，刘会青，邹永青，等.黄酮类化合物生理活性及合成研究
进展[ J ] .有机化学，2008，28 ( 9 ) ：1534.
中药羌活为伞形科多年生草本植物羌活
（Notopterygium incisum Ting ex H.T. Chang）或宽叶
羌活（Notopterygiun forbesii Boiss）的干燥根茎及
根[1]，春、秋两季采挖，除去泥土及须根，晒干或烘
羌活HPLC指纹图谱研究
李英梅1，王东1，宋爽1，赵丹奇2，曲扬1，梁朔1，暴凤伟1
（1.辽宁中医药大学药学院，辽宁 大连 116600 ；2.沈阳药科大学中药学院，辽宁 沈阳 110016）
摘 要：目的：建立药材羌活的高效液相色谱指纹图谱，为科学评价及有效控制羌活药材质量提供可靠的方法。
方法：采用diamonsilTM（钻石）C18色谱柱（200 mm×4.6 mm，5 μm），甲醇 -0. 1%磷酸水为流动相梯度洗脱，流速
1 mL·min-1，检测波长254 nm，洗脱时间120 min，研究羌活药材的指纹图谱，并对其主要色谱峰进行指认。结果：
分析了10批不同产地的羌活药材，建立了羌活药材的高效液相指纹图谱，确立了15个共有峰，并且对其中5个色谱
峰进行了指认。结论：该方法准确可靠、重复性好，为羌活药材的质量控制提供科学准确的依据。
关键词：羌活；指纹图谱；色谱峰指认
中图分类号：R284 文献标志码：A 文章编号：1673-842X (2013) 07- 0068- 03
收稿日期：2012-12-19
基金项目：辽宁省科技厅资助项目（20102148）
作者简介：李英梅（1987-），女，吉林松原人，硕士研究生，研究方向 ：羌活化学成分及指纹图谱研究。
通讯作者：王东（1967-），男，辽宁葫芦岛人，教授，博士，研究方向 ：中药药效物质基础和质量标准研究。
Study on HPLC Fingerprint of Notopterygium Incisum Ting ex H.T. Chang
LI Yingmei1，WANG Dong1，SONG Shuang1，ZHAO Danqi2，QU Yang1，LIANG Shuo1，BAO Fengwei1
（1. College of Pharmacy，Liaoning University of Traditional Chinese Medicine，
Dalian 116600，Liaoning，China ；2.School of Traditional Chinese Materia Medica，
Shenyang Pharmaceutical University，Shenyang 110016，Liaoning，China）
Abstract ：Objective ：To study the HPLC fingerprint spectrum of Notopterygium incisum Ting ex
H.T. Chang and establish a chromatographic standard for the quality control and evaluate as well as to
comparatively study the HPLC fingerprint spectrum among germplasm. Methods ：The sample were separated
on diamonsilTM column C18（200 mm×4.6 mm，5 μ m） with methanol-0.1 acetic acid as the mobile
phase at a flow rate of 1.0 mL/min in 60 min adopting the gradient elution process with the wavelength 254
nm. Results ：10 sample of different origins Notopterygium incisum Ting ex H.T. Chang were detected and
15 peaks in the chromatogram were common. Conclusions ：The method is accurate，reliable，reproducible
and the fingerprint spectrum provides scientific and accurate basis for the quality control of Notopterygium
incisum Ting ex H.T. Chang.
Key words ：Notopterygium incisum Ting ex H.T. Chang ；fingerprint spectrum ；chromatographic peak
identification