全 文 ：网络出版地址：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／４６．１０４９．Ｒ．２０１２１０２６．１５３７．０１１．ｈｔｍｌ
［基金项目］国家自然科学基金资助项目（３１１６００３０）
［作者简介］高新征（１９７８－），女，山东郯城人，讲师，电话：０８９８－６６８９３７４８，电子信箱：ｇｏｏｄｌｕｃｋｇｘｚｈ＠１２６．ｃｏｍ。
［通信作者］蒋洁，海南医学院理学院病理学教研室，电话：０８９８－６６８９３６００，电子邮箱：ｊｉａｎｇｊｉｅ０３０５＠１６３．ｃｏｍ。
［收稿日期］２０１２－１０－１５　　［修回日期］２０１２－１０－２３　　网络出版时间：２０１２－１０－２６　１５：３７
夏侧金盏花虾青素合成相关基因Ａｄｋｅｔｏ和Ａｄｋｃ的表达
高新征１，李　栎１，邬　强２，蔡群芳２，唐历波１，黎岳南１，蒋　洁１
（海南医学院　１．理学院；２．热带医学与检验医学院，海南 海口　５７１１９９）
　　［摘要］目的：研究夏侧金盏花中虾青素合成相关基因Ａｄｋｅｔｏ和Ａｄｋｃ在不同组织部位的表达，从而从
基因表达角度探讨这两个基因与虾青素合成的关系。方法：根据ＧｅｎＢａｎｋ上的Ａｄｋｅｔｏ和Ａｄｋｃ基因
以及内参Ａｄａｃｔｉｎ基因的序列设计荧光定量ＰＣＲ引物，通过Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ　ＰＣＲ分析Ａｄｋｅｔｏ和Ａｄｋｃ基因
的组织部位表达情况。结果：Ａｄｋｅｔｏ和Ａｄｋｃ基因均只在花中大量表达（３％），其余组织内只能检测到
少量或微量表达（１０－５～１０－３）。结论：虾青素主要在夏侧金盏花的花中合成具有正相关关系，为证明
Ａｄｋｅｔｏ和Ａｄｋｃ是虾青素合成相关基因添加了又一证据。
［关键词］夏侧金盏花；虾青素；基因表达
［中图分类号］Ｒ９１７　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１００７－１２３７（２０１２）１２－１６８９－０３
Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ａｓｔａｘａｎｔｈｉｎ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｒｅｌａｔｅｄ　ｇｅｎｅ　Ａｄｋｅｔｏ　ａｎｄ　Ａｄｋｃ　ｉｎ　Ａｄｏｎｉｓ　ａｅｓｔｉｖａｌｉｓ
ＧＡＯ　Ｘｉｎ－ｚｈｅｎｇ１，ＬＩ　Ｌｉ　１，ＷＵ　Ｑｉａｎｇ２，ＣＡＩ　Ｑｕｎ－ｆａｎｇ２，ＴＡＮＧ　Ｌｉ－ｂｏ１，ＬＩ　Ｙｕｅ－ｎａｎ１，ＪＩＡＮＧ　Ｊｉｅ１
（１．Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｈａｉｎａｎ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ；２．Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｔｒｏｐｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ｍｅｄｉ－
ｃｉｎｅ，Ｈａｉｎａｎ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｉｋｏｕ５７１１０１，Ｃｈｉｎａ）
［Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ　Ｐｒｏｊｅｃｔ］：Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ｎａｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｃｈｉｎａ（３１１６００３０）
［Ａｕｔｈｏｒ］：ＧＡＯ　Ｘｉｎ－ｚｈｅｎｇ （１９７８－），Ｆｅｍａｌｅ，Ｔａｎｃｈｅｎｇ　Ｓｈａｎｄｏｎｇ，Ｌｅｃｔｕｒｅｒ，Ｔｅｌ：０８９８－６６８９３７４８，
Ｅ－ｍａｉｌ：ｇｏｏｄｌｕｃｋｇｘｚｈ＠１２６．ｃｏｍ．
［Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｅｎｃｅ　ｔｏ］：ＪＩＡＮＧ　Ｊｉｅ，Ｔｅｌ：０８９８－６６８９３６００，Ｅ－ｍａｉｌ：ｊｉａｎｇｊｉｅ０３０５＠１６３．ｃｏｍ．
Ｒｅｃｅｉｖｅｄ：２０１２－１０－１５　　Ｒｅｖｉｓｅｄ：２０１２－１０－２３　 ＪＨＭＣ，２０１２；１８（１２）：１６８９－１６９１
Ｖｉｅｗ　ｆｒｏｍ　ｓｐｅｃｉａｌｉｓｔ：Ｉｔ　ｉｓ　ｃｒｅａｔｉｖｅ，ａｎｄ　ｏｆ　ｃｅｒｔａｉｎ　ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ　ａｎｄ　ｅｄｕｃａｔｉｏｎａｌ　ｖａｌｕｅ．
［ＡＢＳＴＲＡＣＴ］Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ａｎａｌｙｚｅ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ａｓｔａｘａｎｔｈｉｎ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｇｅｎｅ　Ａｄｋｅｔｏ
ａｎｄ　Ａｄｋｃ　ｉｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｔｉｓｓｕｅｓ　ｏｆ　Ａｄｏｎｉｓａｅｓｔｉｖａｌｉｓ，ａｎｄ　ｔｏ　ｅｘｐｌｏｒｅ　ｔｈｅ　ｒｅｌａｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｏｓｅ　ｔｗｏ　ｇｅｎｅｓ　ａｎｄ
ａｓｔａｘａｎｔｈｉｎ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ａｔ　ｔｈｅ　ｌｅｖｅｌ　ｏｆ　ｇｅｎｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｐｒｉｍｅｒｓ　ｆｏｒ　ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ　ＰＣＲ　ｗａｓ　ｄｅｓｉｇｎｅｄ
ａｃｃｏｒｄｉｎｇ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ　ｏｆ　Ａｄｋｅｔｏ，Ａｄｋｃ　ａｎｄ　ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ　ｇｅｎｅ　Ａｄａｃｔｉｎ　ｉｎ　ｇｅｎｂａｎｋ，ｔｈｅｎ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ
Ａｄｋｅｔｏ　ａｎｄ　Ａｄｋｃ　ｉｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｔｉｓｓｕｅｓ　ｏｆ　Ａｄｏｎｉｓ　ａｅｓｔｉｖａｌｉｓ　ｗａｓ　ａｎａｌｙｚｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ａｄｋｅｔｏ　ａｎｄ　Ａｄｋｃ　ｗｅｒｅ　ｅｘ－
ｐｒｅｓｓｅｄ　ｉｎ　ｆｌｏｗｅｒ　ａｔ　ｈｉｇｈ　ｌｅｖｅｌ，ｗｈｉｌｅ　ｌｉｔｔｌｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｗａｓ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｉｎ　ｏｔｈｅｒ　ｔｉｓｓｕｅｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ：Ｅｘｐｒｅｓ－
ｓｉｏｎ　ｏｆ　Ａｄｋｅｔｏ　ａｎｄ　Ａｄｋｃ　ｉｓ　ｓｉｍｉｌａｒ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｆａｃｔ　ｔｈａｔ　ａｓｔａｘａｎｔｈｉｎ　ｉｓ　ｏｎｌｙ　ｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄ　ｉｎ　ｆｌｏｗｅｒ　ｏｆ　Ａｄｏｎｉｓ
ａｅｓｔｉｖａｌｉｓ．Ｉｔ　ｐｒｏｖｉｄｅｓ　ｅｖｉｄｅｎｃｅ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｒｅｌａｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｅ　ｇｅｎｅｓ　Ａｄｋｅｔｏ　ａｎｄ　Ａｄｋｃ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｏｆ
ａｓｔａｘａｎｔｈｉｎ．
［ＫＥＹ　ＷＯＲＤＳ］Ａｄｏｎｉｓ　ａｅｓｔｉｖａｌｉｓ；Ａｓｔａｘａｎｔｈｉｎ；Ｇｅｎｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ
９８６１
海南医学院学报　２０１２，１８（１２）
Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｈａｉｎａｎ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　
DOI:10.13210/j.cnki.jhmu.2012.12.001
　　虾青素（Ａｓｔａｘａｎｔｈｉｎ）是类胡萝素生物合成途
径中的终产物，具有极强抗氧化活性，在保健食品、
药品、高档化妆品等方面均有很大需求和应用前
景［１－４］。植物一般不能合成虾青素，但作为特例，夏
侧金盏花（Ａｄｏｎｉｓ　ａｅｓｔｉｖａｌｉｓ）的花瓣中含有虾青素，
含量为花瓣干重的１％左右，且虾青素占类胡萝卜
素总量的８０％以上［５，６］。但夏侧金盏花的花器官
小，花瓣生物量低，难以达到商业化生产的要求。夏
侧金盏花虽然不适合直接用于虾青素生产，但它却
是研究植物虾青素合成途径的好材料。
虾青素的生物合成是以β－胡萝卜素为底物，经
β－胡萝卜素羟化酶和β－胡萝卜素酮化酶作用，在β－
紫罗酮环的３，３＇和４，４＇位置上引入羟基和酮基。植
物一般含有β－胡萝卜素羟化酶（ＣＨＹｂ），但没有β－
胡萝卜素酮化酶，因此无虾青素合 成［７，８］。由于夏
侧金盏花的花瓣中有较高含量虾青素，因此以它为
研究材料，研究人员从中分离了２个虾青素合成相
关基因 Ａｄｋｅｔｏ和 Ａｄｋｃ。Ａｄｋｃ与 Ａｄｋｅｔｏ共同作
用可以将β－胡萝卜素转化为虾青素，但目前还只在
大肠杆菌中得到验证［６］。本研究运用实时荧光定量
ＲＴ－ＰＣＲ法，研究Ａｄｋｅｔｏ和Ａｄｋｃ基因在夏侧金盏
花不同组织部位的表达，从而从基因表达角度探讨
这两个基因与虾青素合成的关系。
１　材料与方法
１．１　供试材料
夏侧金盏花种子点播于营养土，在光照培养箱
中于２３℃、长日照条件（１６ｈ光照，８ｈ黑暗）下培养
３个月左右，获得花期植株（图１）。
注：Ａ：植株；Ｂ：花。
图１　利用光照培养箱种植夏侧金盏花
１．２　引物设计
根据ＧｅｎＢａｎｋ上的Ａｄｋｅｔｏ和Ａｄｋｃ基因以及
内参 Ａｄａｃｔｉｎ 基 因 （ＧｅｎＢａｎｋ 登 录 号 分 别 为
ＡＹ６４４７５７、ＤＱ９０２５５６、ＪＸ４３６１６２）的序列设计荧光
定量ＰＣＲ引物，由大连宝生物公司合成，引物序列
见表１。
表１　引物序列
引物 序列（５＇－３＇）
ＡｄｋｅｔｏＦ　 ＴＴＣＡＡＴＧＡＴＴＧＧＡＣＣＴＧＣＴＧ
ＡｄｋｅｔｏＲ　 ＣＧＴＧＣＣＡＧＡＧＴＴＣＴＴＴＧＴＧＡ
ＡｄｋｃＦ　 ＧＴＧＣＧＡＴＣＡＧＣＡＡＧＡＧＡＴＧＡ
ＡｄｋｃＲ　 ＴＣＧＡＣＴＴＴＴＴＣＧＣＣＴＴＣＡＣＴ
ＡｄａｃｔｉｎＦ　 ＣＣＣＣＴＧＡＡＧＡＡＣＡＣＣＣＡＧＴＡ
ＡｄａｃｔｉｎＲ　 ＧＧＡＧＡＧＣＡＣＡＧＣＣＴＧＧＡＴＡＧ
１．３　ＲＮＡ提取和反转录
采用天根生物公司（北京）的ＲＮＡｐｒｅｐ　ｐｕｒｅ植
物总ＲＮＡ提取试剂盒（离心柱型）提取夏侧金盏花
植株的根、茎、叶、花四个组织部位的总ＲＮＡ，并通
过琼脂糖凝胶电泳和ＯＤ值测量检测ＲＮＡ的完整
性、纯 度 和 浓 度。使 用 大 连 宝 生 物 公 司 的
ＳＹＢＲＲＰｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔ　Ｔ　Ｍ　ＲＴ－ＰＣＲ　ＫｉｔⅡ试剂盒的反
转录试剂将ＲＮＡ反转录成ｃＤＮＡ。
１．４　荧光定量ＲＴ－ＰＣＲ
使用 大 连 宝 生 物 公 司 的 ＳＹＢＲＲ　Ｐｒｉｍｅ－
Ｓｃｒｉｐｔ　ＲＲＴ－ＰＣＲ　ＫｉｔⅡ试剂盒的ＰＣＲ试剂，按下列
组份配制ＰＣＲ反应液：ＳＹＢＲ　Ｐｒｅｍｉｘ　Ｅｘ　ＴａｑＴＭ
Ⅱ（２×）１０μＬ，ＰＣＲ　Ｆｏｒｗａｒｄ　Ｐｒｉｍｅｒ（１０μｍｏｌ／Ｌ）
０．５μＬ，ＰＣＲ　Ｒｅｖｅｒｓｅ　Ｐｒｉｍｅｒ（１０μｍｏｌ／Ｌ）０．５μＬ，
ＲＯＸ　Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ　ＤｙｅⅡ（５０×）０．４μＬ，模板（ｃＤＮＡ
溶液，阴性对照不加模板）２μＬ，加入ｄｄＨ２Ｏ补足到
２０μＬ。采用Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ　ＭＸ３０００Ｐ荧光定量ＰＣＲ
仪进行反应，反应条件为：９５ ℃ ３ｍｉｎ预变性后
９５℃７ｓ、５７℃１５ｓ、７２℃１５ｓ进行４０个循环，最
后９５℃１ｍｉｎ，５５℃３０ｓ，９５℃３０ｓ进行溶解曲线
分析。基因表达量以参照基因Ａｄａｃｔｉｎ作为标准进
行相对定量。相对定量方法采样普遍使用的２－ΔΔＣＴ
法［９］。
２　结果
２．１　总ＲＮＡ提取
分别提取夏侧金盏花植株的根、茎、叶、花四个
组织部位的总ＲＮＡ，并通过琼脂糖凝胶电泳和ＯＤ
值测量检测ＲＮＡ的完整性、纯度和浓度。总ＲＮＡ
的琼脂糖凝胶电泳结果见图２，结果显示 ＲＮＡ中
２８Ｓ和１８Ｓ两条带清晰且亮度比接近于２∶１，其
ＯＤ２６０／ＯＤ２８０比值均在１．８５左右，表明 ＲＮＡ完
整性和纯度均较好，可用于下一步研究。
注：１～４分别为根、茎、叶、花。
图２　不同组织总ＲＮＡ的提取
０９６１ 　海南医学院学报 Ｖｏｌ．１８Ｎｏ．１２Ｄｅｃ．２０１２
２．２　荧光定量ＲＴ－ＰＣＲ
对夏侧金盏花根、茎、叶、花四个组织部位的
ｃＤＮＡ样品进行荧光定量ＰＣＲ分析，同时扩增Ａｄ－
ｋｅｔｏ、Ａｄｋｃ和 Ａｄａｃｔｉｎ（内参）基因。从扩增曲线可
看出，曲线走势正常、基线平、无上扬现象（图３Ａ）。
从溶解曲线可看出，各样品溶解曲线无杂峰出现（图
３Ｂ）。说明实验过程中无污染和异常扩增，荧光定
量ＰＣＲ分析结果可靠。
注：Ａ：扩增曲线；Ｂ：溶解曲线。
图３　Ａｄｋｅｔｏ、Ａｄｋｃ和Ａｄａｃｔｉｎ基因的扩增曲线和溶解曲线
采用２－ΔΔＣＴ法，对夏侧金盏花不同组织部位的
Ａｄｋｃ和Ａｄｋｅｔｏ基因表达量进行相对定量分析。
结果表明，Ａｄｋｃ和Ａｄｋｅｔｏ基因均只在花中大量表
达，其余组织内可见少量的Ａｄｋｅｔｏ基因表达，但与
花中表达量差异很大。除叶中Ａｄｋｅｔｏ基因的表达
量为花中的３％外，其余部位Ａｄｋｃ和Ａｄｋｅｔｏ基因
的表达量为花中的１０－５～１０－３（图４）。
图４　不同组织部位Ａｄｋｃ和Ａｄｋｅｔｏ基因的相对表达量
３　讨论
虾青素具有超强抗氧化活性，在淬灭活性氧、清
除自由基等方面的能力是β－胡萝卜素的１０倍，比维
生素Ｅ强百倍以上［１０］。目前，虾青素在延缓衰老，
提高免疫力，防治心血管疾病、糖尿病、肿瘤等方面
的作用均见报道。因此，虾青素在保健食品、药品、
高档化妆品等方面有很大需求和应用前景。植物一
般不能合成虾青素，但作为特例，夏侧金盏花的花瓣
中含有虾青素，含量为花瓣干重的１％左右，且虾青
素占类胡萝卜素总量的８０％以上。但夏侧金盏花
的花器官小，花瓣生物量低，难以达到商业化生产的
要求。夏侧金盏花虽然不适合直接用于虾青素生
产，但它却是发掘植物虾青素合成相关基因、研究植
物虾青素合成途径的好材料。目前研究人员已从夏
侧金盏花中鉴定了２个虾青素合成相关基因Ａｄｋｅ－
ｔｏ和Ａｄｋｃ。Ａｄｋｅｔｏ与其它植物的ＣＨＹｂ具有较
高相似性，如 Ａｄｋｅｔｏ与拟南芥ＣＨＹｂ在催化功能
区的相似性大于６０％，但 Ａｄｋｅｔｏ并不表现为羟化
酶活性，而是具有在β－环的Ｃ－３，４位去饱和以及在
Ｃ－４位羟化２个作用。Ａｄｋｃ与Ａｄｋｅｔｏ共同作用可
以将β－胡萝卜素转化为虾青素，但目前还只在大肠
杆菌中得到验证［６］。本研究通过荧光定量ＰＣＲ分
析，发现夏侧金盏花中Ａｄｋｅｔｏ和Ａｄｋｃ基因均只在
花中大量表达，其余组织内只能检测到少量或微量
表达，这与虾青素主要在夏侧金盏花的花中合成具
有正相关关系，进一步表明Ａｄｋｅｔｏ和Ａｄｋｃ基因与
虾青素合成相关，为证明Ａｄｋｅｔｏ和Ａｄｋｃ是虾青素
合成相关基因添加了又一证据。
综上所述，夏侧金盏花中Ａｄｋｅｔｏ和Ａｄｋｃ基因
均只在花中大量表达，其余组织内只能检测到少量
或微量表达，这与虾青素主要在夏侧金盏花的花中
合成具有正相关关系，表明Ａｄｋｅｔｏ和Ａｄｋｃ基因与
虾青素合成相关，为进一步发掘和利用这两个基因
提供了数据参考。
参考文献
１　杨艳，周宇红，徐海滨，等．虾青素抗氧化作用动物实
验研究［Ｊ］．现代预防医学，２００９，１３：２４３２－２４３３．
２　曹秀明，杨贵群，杨菲菲．虾青素对过氧化氢所致
ＨｅｐＧ２细胞线粒体氧化损伤及生存能力下降的保护作
用［Ｊ］．中国海洋药物，２０１０，５：２６－３２．
３　Ｈｕｓｓｅｉｎ　Ｇ，Ｕ　Ｓａｎｋａｗａ．Ａｓｔａｘａｎｔｈｉｎ，ａ　ｃａｒｏｔｅｎｏｉｄ
ｗｉｔｈ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ｉｎ　ｈｕｍａｎ　ｈｅａｌｔｈ　ａｎｄ　ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｊ　Ｎａｔ
Ｐｒｏｄ，２００６，６９（３）：４４３－４４９．
４　Ｌｕ　ＹＰ，ＳＹ　Ｌｉｕ．Ｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ａｓｔａｘａｎｔｈｉｎ
ｏｎ　Ｈ（２）Ｏ（２）－ｉｎｄｕｃｅｄ　ｎｅｕｒｏｔｏｘｉｃｉｔｙ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ａｎｄ　ｏｎ　ｆｏ－
ｃａｌ　ｃｅｒｅｂｒａｌ　ｉｓｃｈｅｍｉａ　ｉｎ　ｖｉｖｏ［Ｊ］．Ｂｒａｉｎ　Ｒｅｓ，２０１０，１３
（６０）：４０－４８．
５　Ｍａｏｋａ　Ｔ，Ｔ　Ｅｔｏｈ．Ｃａｒｏｔｅｎｏｉｄｓ　ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ｆａｔｔｙ　ａｃｉｄ　ｅｓ－
ｔｅｒｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｐｅｔａｌｓ　ｏｆ　Ａｄｏｎｉｓ　ａｅｓｔｉｖａｌｉｓ［Ｊ］．Ｊ　Ｏｌｅｏ　Ｓｃｉ，
２０１１，６０（２）：４７－５２．
６　Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ　ＦＸ．Ａ　ｓｔｕｄｙ　ｉｎ　ｓｃａｒｌｅｔ：ｅｎｚｙｍｅｓ　ｏｆ　ｋｅｔｏ－
ｃａｒｏｔｅｎｏｉｄ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｆｌｏｗｅｒｓ　ｏｆ　Ａｄｏｎｉｓ　ａｅｓｔｉｖａ－
ｌｉｓ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ　Ｊ，２００５，４１（３）：４７８－４９２．
７　Ｎｏｒｉｈｉｋｏ　Ｍｉｓａｗａ．Ｐａｔｈｗａｙ　ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　ｏｆ　ｐｌａｎｔｓ　ｔｏ－
ｗａｒｄ　ａｓｔａｘａｎｔｈｉｎ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ，
２００９，２６：９３－９９．
８　Ｚｈｕ　Ｃ，Ｓ　Ｎａｑｖｉ．Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ　ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　ｏｆ　ｋｅｔｏｃａｒｏｔｅ－
ｎｏｉｄ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｉｎ　ｈｉｇｈｅｒ　ｐｌａｎｔｓ［Ｊ］．Ａｒｃｈ　Ｂｉｏｃｈｅｍ
Ｂｉｏｐｈｙｓ，２００９，４８３（２）：１８２－１９０．
９　Ｌｉｖａｋ　ＫＪ，Ｓｃｈｍｉｔｔｇｅｎ　ＴＤ．Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｇｅｎｅ　ｅｘ－
ｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｄａｔａ　ｕｓｉｎｇ　ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ　ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ＰＣＲ　ａｎｄ　ｔｈｅ　２
（－Ｄｅｌｔａ　Ｄｅｌｔａ　Ｃ（Ｔ））Ｍｅｔｈｏｄ［Ｊ］．Ｍｅｔｈｏｄｓ，２００１，２５：
４０２－４０８．
１０　张晓丽，刘建国．虾青素的抗氧化性及其在营养和医药
应用方面的研究［Ｊ］．食品科学，２００６，１：２５８－２６２．
１９６１高新征等．夏侧金盏花虾青素合成相关基因Ａｄｋｅｔｏ和Ａｄｋｃ的表达