全 文 ：河南中医药学刊 2阅 1年 第 6 1卷 第 2期
· 实验研究 ·
黑桑堪提取液对小鼠过氧化脂质含量等影响
施洪飞 ’ ,杨立坤 2 , , 晖 , .陆广念 , ,陈健 , .
( 1
. 杨川大学旅游烹饪学院烹饪与营养科学系 , 江苏 杨 州 2 50 1 ; 2 . 杨州市医学检脸中心 , 江苏 杨 州 2 50 1)
摘要 :方法 : 以黑桑格水提液予老龄 B AB L C/ 小鼠 ,灌胃 45 天一 60 天后测 定与杭氧化延缓衰老及美容有关的生化
指标 。 结果 : 黑桑格提取液都能使肝脏过乳化脂质 ( L P O ) 明显降低 ; 全血谷脱甘肤过氧化物吟 ( G S H 一 xP )和过氧
化氮酶( C入 T )活性显著提高( P < 0 . 01 ) ;心肌脂褐素明显减少 ( P < 0 . 0 5 ) 。 结论 : 黑桑格提取液具有一定的抗氧化
延缓衰老的作用和润肤美容的功效 。
关键词 :黑桑楼 提取液 /分析 ;过氧化脂质 /分析 ;含量浏定
中图分类号 : 2R 82 . 7 10 . 5 文献标识码 : A 文章编号 : 100 6 一 32 34 (2 00 1 )0 1 一 0() 2 4 一 02
黑桑搭为桑科植物桑 ( N肠川5 al ba L . )的干燥果穗 ,既是
常用补益肝肾的中药 , 又是人们常用的果品 ,施氏等报道含
有黑桑格成分的桑源口 服液有一定的抗氧化延缓衰老的作
用川 。 为了进一步探索其补肾益精抗衰延年的保健效果 ,我
们用黑桑堪提取液灌老龄 B AL B C/ 小鼠 ,观察与抗氧化延缓
衰老及润肤美容相关的生化指标 。
材料及方法
1
.
1 提取液制备
于扬州市医药采购供应站购黑桑堪 5 0 9 ,采用常规煎中
药方法 。 首煎 50 分钟取汁 , 2一 3 煎各 巧m in 取汁 , 3 次煎液
合并后浓缩至 1X() 0耐成黑桑棋提取液备用 。
1
.
2 动物分组及饲养
于扬州大学农学院实验动物中心购 12 月龄雄性 曰仍 L /
c 小鼠 10 只 (体重 25 9一 28 9 ) ,适应性饲养 l 周后 ,按体重
分为 5 组 (经 t 检验 ,组间体重差异无显著性 ) 。 对照组每日
每只灌胃白水 l间 ,阳性对照组每 日每只灌胃生脉饮 1同 ,低
剂量组每 日每只灌胃黑桑堪提取液 0 . 5时 ,中剂量组每 日每
只灌胃黑桑梅提取液 1 . 0耐 ,高剂量组每 日每只灌胃黑桑堪
提取液 2 . 0司。 各组小鼠置于扬州大学农学院清洁级动物房
饲养 ,垫料为高温消毒过的木屑 ,各组小鼠自由进食饮水 ,室
温为 18 ℃ 一 25 ℃ ,相对湿度为 40 ℃ 一 50 ℃ 。 饲养 45 天后取
肝 、脑 、 肾 、攀丸 、脾脏及皮肤测定相关生化指标 。
1
.
3 组织匀浆液制备
将各组织置 4℃生理盐水中 ,洗去表面残血 ,滤纸吸干 ,
取一定量组织 (肝 0 . 49 、 半脑 、 一只皋丸 、 一 只肾脏及整 只
脾 ) ,置组织研磨器中研磨制备成 7 . 5 % 、 2% 、 2 % 、 2 % 、 2 . 5%
的组织匀浆液 , 3以用转 /分 ,离心 1 5而 n ,取上清液备用 。
1
.
4 皮肤经脯氮酸测定液制备
取皮肤去毛去脂肪烘干 ,精确称取 sngr 左右 ,置于具塞
带刻度试管内 ,加人 6仰l /1盐酸 2 . 5耐 加塞 ,置于 140 ℃烘箱
中水解 3 n ,冷却后取出 ,分别以 10 n l o l刁N日O H 调 PH 至 ,
.
0
,
以蒸馏水稀释至 10 耐过滤 ,过滤液即为经脯氨酸测定液 。
1
.
5 实验器材
T G L 16 型高速台式离心机 , B EC K M叭N · D U 型生化自
动分析仪 , 754 型分光光度计 ,荧光分光光度计 , 可调定量加
液器 , BE C K入4N 一 11 型高精确稀释器 , 75 ~ 型组织研磨器
,
低速离心机 ,电子台称等 。
1
.
5 实验试剂与方法
M D A 测定试剂盒 、 T 一 AO C 测定试剂盒 、 C A江, 活力测定
试齐」盒 、 经脯氨酸试剂盒 、 CS H 叫xP 活力测定试剂盒 (批号
5 10 )
、微量蛋白测定试剂盒 (批号 57 60 ) ,以上试剂盒均由南
京建成生物试剂研究所提供 。 各项指标测定均严格按试剂
盒说明进行 。
1
.
6 统计分析
所得数据经方差剂性分析后选择 t 检验进行处理 。 所
用的软件是 : Q 军州 g ih ( 。 ) 19 90 GP A O 3 fVt 眨『 e . v 眺 ion 1 . 13
Dr
.
aP ont
.
U n i出 i ty of 川b叮 t 9 11 0 14 5 。 在 AS T dA van 。召 e +
31 3 5微机上进行处理 。
2 实验结果
从表 l 可见 ,黑桑堪提取液能降低小鼠脑 、 皋丸中 L P O
含量 ,中高剂量组与对照组比有显著差异 ( P < 0 . 05 , P < 0 .
0 1 )
。
从表 2 可见 , 黑桑棋提取液能提高老龄小鼠的脑 、 肾脏
总抗氧化能力 ,中 、 高剂量组与对照组比有显著性差异 ( P <
0
.
05
,
P < 0
.
0 1 )
,中高剂量组皮肤经脯氛酸含量有所提高 ,与
对照组 比差异有显著性 ( P < 0 . 0 5 ) 。
DOI : 10. 16368 /j . i ssn. 1674 -8999. 2001. 02. 014
2 01 0年 第 6 1卷 第 2期 河南中医药学刊
表 1黑桑搭液对小鼠过暇化脂质和心肌脂褐素含 t的影响 (X士 D)
组别 过氧化脂质含量 ( ~
I M D A /r g n
.
r P )
皋丸中含量
心肌脂褐素含量
(呢川 3】 Q卜叮 9. e ht r )
U no 0n
,`
2,`,ù对照组
阳性对照组
黑桑堪低剂量组
黑桑棋中剂量组
黑桑棋高剂量组
8
.
3 7士 1 . 2 3
6
.
86 士 1 . 2 1& &
7
.
86 士 1 . 0 3
6
.
9 2 士 1 . 8 2 .
6
.
8 8 土 1 . 2 4 二
脑中含量
10
.
0 9 上 1 . 3 7
7
.
8 8 土 1 . 0 4& 及
9
.
7 0 士 1 . 2 8
8
.
7 6 土 1 . 2 5 .
7
.
8 9 士 1 . 0 9 .
4
.
8 士 1
.
02
2
.
5 6士 1 . 12 & &
4
.
6 8土 1 . 3 7
3
.
5 9土 0 . 8 1 “
2
.
4 6土 0 . 7 6 “ .
& P ( 0
.
0 5
,
& & P ( 0
.
0 1
,
& & & P < 0
.
0() 1 以 1 11钾 r曰 诚: h咖。 。 1; . P < 0 . 0 5 , “ P ( 0 . 0 1 , , “ P < 0 . 0() 1 com四曰 州 th co n tolr
表 2 黑桑堪提取液对小鼠总抗权化能力和皮肤轻脯氮酸含 , 的影响【X士 D )
组别 总抗氧化能力 (
u
.
1刊卯 r ) (X士 D )
对照组
阳性对照组
黑桑格低剂量组
黑桑搭中剂量组
黑桑格高剂童组
脑总抗能力
2
.
3 5土 0 . 44
3
.
15士 0 . 34 & &
2
.
4 3士 0 . 5 5
2
.
7 4士 O, 60 .
3
.
05 士 0 . 4 0 ’ “
肾脏总抗能力
2
.
4 1 士0 . 7 8
3
.
0 4 士0 . 6 6 & &
2
.
3 9 士0 . 67
2
.
8 5 士0 . 57 “
3
,
1 1 生0 . 6 5二
皮肤径脯氨酸含量
(吨 . 9 组织 ) ( x 上D )
84
.
5 6 土 9 . 2 3
1 10
.
2 4 土 11 . 2 1 & &
8 2
.
2 3 士 9 . 6 0
9 7
.
7 6 士 10 . 2 5 .
9
.
0 2 士 10 . 4 .
20
表 3 黑桑堪液对小鼠谷眯甘肚过氛化物酶活力和过权化氮酶活力的影响 (X 士D )
组别 谷脸甘肘过氧化物酶活力
(X 士D )
全血 (以而 )
脾脏过氧化氢酶活力
(X 土 D ) (可吨 . p r )
20对照组
阳性对照组
黑桑格低剂量组
黑桑棋中剂量组
黑桑根高剂量组
14
.
9 2 土 3 . 5 3
2 8
.
2 4 士 4 . 22 & &
2 2
.
5 0 士 4 , 3 5
2 5
.
9 7 士4 . 3 5 “
3 1
.
0 3 土 3 . 38 二
肝脏 ( u . rng
.
rP )
16
.
6 5 土2 . 7 7
22
.
3 6 士2 . 4 6 & &
18
.
6 2 士3 . 创)
2 0
.
0 1 士2 . 3 3 ’
2 3
.
4 0 士3 . 6 4二
2 9
.
4 5 士 8 . 5 9
3 5
.
2 3 士 4 . 2 1 &
2 8
.
04 士 7
.
32
2 9
.
5 7 士 4 . 8 2
3 4
.
6 6 士 6 . 0 5 .
从表 3 可见 , 黑桑棋提取液能提高老龄小鼠全血和
G SH
一
xP 活力的脾脏 CA T 活力 ,中高剂量组与对照组比有显
著差异 ( P < 0 . 05 , P < 0 , 0 1 ) 。
3 讨论
生物体内的谷胧甘肤过氧化物酶 、 过氧化氢酶等 ,也具
有抗氧化的作用 ,其活力是随年龄下降的 , 当这些酶的活性
下降时 ,会使脂质过氧化产生过氧化脂质 ,继而形成脂揭素
沉积在细胞中而导致细胞功能发生障碍。 因此 G S] H~ xP 、
。砚 、 、 L P O 、心肌脂褐素都可作为衰老指标 l2] 。 心肌脂褐素
是过氧化脂质堆积在心脏肌肉细胞的产物 ,其含量高低实际
上反应了全身的过氧化脂质的含量 ,过氧化质堆积在皮肤就
会出现脂褐斑 ,所以其含量高低直接影响皮肤的润泽美观的
情况 ,故心肌脂褐素的含量亦可作为美容的指标之一 。 本次
实验可见黑桑棋中高剂组较对照组心肌脂褐素含量均有显
著降低 。 经脯氨酸是胶原蛋白内特有的氨基酸之一 ,约占胶
原全部残基的 10 % ,胶原是动物皮肤等器官的组成成分 。 随
着动物增龄 ,胶原代谢十分缓慢 ,组织中经脯氨酸含量下降 ,
皮肤的润泽度就变差 3[] 。 本实验可见黑桑根中高剂量组亦
高于对照组 。 综上可知本黑桑堪提取液具有良好抗氧化延
缓衰老和润肤美容的效果 。
参考文献 :
【l] 施鸿飞 ,曹晖 ,孙鸿才等 . 桑源口服液延缓小鼠衰老指标
观察 [J ] . 南京中医药大学学报 , 199 8 , 14 ( 6 ) : 35 3一 35 4 .
〔幻 唐粉芳 ,金宗镰 , 王磊 ,等 . 香菇发酵液对小鼠抗衰老及
增强免疫功能的评估〔J] . 北京联合大学学报 , 1994 , 8
( 1 )
: 9一 11 .
〔3 〕金宗赚 ,文镜 , 唐粉芳 , 等 . 功能食 品评价原理及方法
[M 〕. 北京 :北京大学出版社 , 199 5 ; 6一 23 .
(收稿 日期 : 20( 刃一 06 一 1 5 )