全 文 ：2010 年 6月第 7卷第 18期 ·制剂与技术·
CHINA MEDICAL HERALD 中国医药导报
“达里”始载于八世纪的《月王药珍》[1]，现代藏医药著作
《甘露本草明镜》[2]称其“花味甘、苦、涩，消化后变为甘，功效
轻、热、干，主治浮肿、水土不适、肺病、气管炎、体弱、声哑。叶
味苦、涩，消化后变苦，功效热、锐，治胃寒、饮食不正、皮肤
病、四肢僵硬”。樱草杜鹃（Rhodendron primulaeflorum Bur. et
Franch.）为杜鹃花科杜鹃属植物，著名藏药“达里”的原植物
之一，分布于我国云南、四川、西藏[3]。黄酮类化合物为药材樱
草杜鹃的主要药效成分，其中槲皮素为黄酮类化合物的主要
代表性物质 [4]。本课题组也从藏产樱草杜鹃中分得槲皮素等
多种黄酮类化合物且含量较大。目前尚未见对其黄酮类化合
物的提取工艺研究的报道，本文以芦丁为评价依据，以黄酮
质量分数为指标，利用正交试验对樱草杜鹃中总黄酮提取的
影响因素进行了考察，确定了超声提取樱草杜鹃中总黄酮最
佳提取工艺，为更好地利用该药材提供了理论依据。
1 仪器与试药
1.1 仪器
TU-1901 型双光束紫外-可见分光光度计（北京普析仪
器有限责任公司）； DJZ 型中草药粉碎机（上海淀久中药机械
制造有限公司）； SHB-B88 型循环水式多用真空泵（郑州长
城科工贸有限公司）；BS224S万分之一电子天平（北京赛多利
斯仪器系统有限公司）；SK8200LH 型超声波仪（上海科导超
声仪器有限公司）。
1.2 试药
芦丁标准品购自中国药品生物制品检定所 （100080-
200707），其他试剂均为分析纯。樱草杜鹃叶采自西藏地区，
由西藏自治区食品药品检验所格桑索朗副主任药师鉴定，低
温干燥，粉碎成粗粉备用。
2 方法与结果
2.1 对照品溶液的制备
精密称取芦丁标准品 5.4 mg，置于 50 ml 量瓶中，加 60%
乙醇水溶液，超声使之溶解，定容，即得。
2.2 检测波长的选择
取对照品溶液 0.5 ml，置于 10 ml 量瓶中，加 60%乙醇水
溶液 5 ml，加 5%NaNO2 溶液 0.3 ml，放置 6 min；加 10%
Al（NO3）3 溶液 0.3 ml，放置 6 min；加 1.0 mol/L NaOH 溶液
4.0 ml，加水稀释至刻度，摇匀，放置 15 min 后，在分光光度
计上，于 400～600 nm波长处测定最大吸收波长。结果在 506 nm
处有最大吸收峰，故选定 506 nm 作为检测波长。
[基金项目] 国家自然科学基金 (项目编号：20872122)。
[作者简介] 谢明德 (1981-)，男，硕士研究生，主要从事天然药物化学成
分提取分离研究。
*通讯作者
樱草杜鹃黄酮类成分的提取工艺研究
谢明德 1，吴 娟 1，彭 括 2，周先礼 1*
（1.西南交通大学生命科学与工程学院，四川成都 610031；2.西藏自治区藏药厂，西藏拉萨 850000）
[摘要] 目的：优选樱草杜鹃中总黄酮的最佳提取工艺。方法：以芦丁为评价指标，考察黄酮质量分数，通过正交试验对
超声法提取黄酮的工艺进行优化。 结果：超声提取法的最佳工艺条件为以樱草杜鹃叶为原料，75%乙醇为提取液，
m（樱草杜鹃）∶v（提取液）=1∶10，超声时间为 60 min，提取 3次；在该条件下，总黄酮的提取率为 11.01%，RSD 为 0.43%
（n=3）。 结论：优选了樱草杜鹃总黄酮的最佳提取工艺，提高药材的利用率，为更好地利用该药材提供了理论依据。
[关键词] 樱草杜鹃；分光光度法；正交试验；黄酮；提取工艺
[中图分类号] R943 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2010）06（c）-067-02
Optimal technology for extracting flavonoids from Rhodendron primulaeflo-
rum Bur. et Franch.
XIE Mingde1, WU Juan1, PENG Kuo2, ZHOU Xianli1*
(1.College of Life Science and Engineering, Southwest Jiaotong University, Chengdu 610031, China; 2.Tibetan Traditional
Medicine Pharmaceutical Factory, Lasa 850000, China)
[Abstract] Objective: To optimize the best extraction technology of flavonoids in leaves of Rhodendron primulaeflorum
Bur. et Franch. Methods: For the evaluation of rutin to study the mass fraction of flavonoids, ultrasonic extraction process
was optimized flavonoids by orthogonal test. Results: The optimum ultrasonic extraction conditions as follows: the Rhoden-
dron primulaeflorum Bur. et Franch. leaves was as raw material, 75% ethanol for the extract, m (Rhodendron primulae-
florum Bur. et Franch.)∶v (extract) was 1∶10, ultrasonic was 60 min, extracted three times; in this condition, the extraction
rate of flavonoids was 11.01% with a RSD of 0.43% (n=3). Conclusion: Optimize the best extraction technology of
flavonoids in Rhodendron primulaeflorum Bur. et Franch. leaves and improve the utilization of medicinal herbs in order to
better use of the medicine provides a theoretical basis.
[Key words] Rhodendron primulaeflorum Bur. et Franch.; Spectrophotometry; Orthogonal design; Flavonoids; Extracting
technology
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2010 年 6月第 7卷第 18期·制剂与技术·
中国医药导报 CHINA MEDICAL HERALD
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22.041 3
6.200 7
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24.450 1
26.028 3
26.736 4
2.286 3
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26.726 9
24.393 7
26.094 2
2.333 2
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23.309 1
25.417 4
28.488 3
5.179 2
8.067 6
8.518 7
10.345 2
9.453 1
8.819 6
9.969 3
6.929 4
8.680 0
6.421 9
序号 总黄酮（%）
因素
A B C D
表 2 正交实验设计及结果
Tab.2 Design and results of orthogonal experiment
2.3 标准曲线的绘制
参照文献 [5]的实验方法，精密吸取对照品溶液 0、0.5、
1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 ml于 7只 10 ml量瓶中，分别加入 60%乙
醇溶液至 5 ml，加 5%NaNO2溶液 0.3 ml，放置 6 min；加 10%
Al（NO3）3 溶液 0.3 ml，放置 6 min；加 1.0 mol/L NaOH 溶液
4.0 ml，加水稀释至刻度，摇匀，放置 15 min 后，以第 1 瓶中溶
液作为空白对照，在确定的最大吸收波长 506 nm 处测定其
吸光度。 以溶液中芦丁浓度 Y 为纵坐标， 吸光度 A 为横坐
标，绘制标准曲线，得 Y=80.878 4A+0.193 9（r=0.999 3）。结果
显示，在芦丁在 5.4～32.4 μg/ml 范围内与吸光度呈良好线性
关系。
2.4 精密度试验
取樱草杜鹃粉末约 1 g，精确称定，加入 10 ml 75%乙醇
溶液，常温超声提取 3 次，每次 1 h，提取液用石油醚萃取
5 次，每次 20 ml，萃取后水液定容至 100 ml。 准确吸取提取
液 0.25 ml，置于 10 ml 量瓶中，按“2.3”项下方法操作，进行
显色反应，以不加芦丁标准品的溶液作空白，测定其吸光度；
连续测定 6 次，RSD=0.16%，结果表明，本法精密度良好。
2.5 稳定性试验
准确吸取“2.4”项下所得提取液 0.25 ml，置于 10 ml 量
瓶中，按“2.3”项下方法操作，进行显色反应，以不加芦丁标
准品的溶液作空白，分别于放置 0、10、20、30、40、50 min 后测
定其吸光度，RSD=2.66%。 结果表明，样品在 50 min 内基本
稳定。
2.6 加样回收率试验
向已知质量分数的樱草杜鹃提取液中加入一定量的芦
丁对照品进行试验，结果平均回收率为 100.6%，RSD=1.63%，
结果表明该法回收率良好（n=5）。
2.7 正交试验设计[6]
采用超声提取法，在粒度、提取工艺相同条件下，考察
m （樱草杜鹃）∶v （提取液）、提取次数、提取时间、乙醇体积分
数等因素，选用 L9（34）正交表安排试验，见表 1。
表 1 正交试验因素水平表
Tab.1 Factors and levels of extraction orthogonal test
2.8 样品含量测定
取樱草杜鹃粉末约 1 g，精密称定，置 100 ml 三角瓶中，
按“2.7”项下方法进行正交试验，提取液抽滤，滤液用石油醚
反复萃取 5 次，每次 20 ml，萃取液定量转移至 100 ml 量瓶
中，加 60%乙醇溶液定容。 精密吸取滤液 0.25 ml 于 10 ml 量
瓶中，按“2.4”项下方法操作，进行显色，测定其吸光度，由标
准吸收曲线计算出总黄酮质量分数，结果见表 2。
3 讨论
由表 2 极差分析可知，以樱草杜鹃为原料超声法提取总
黄酮各因素对黄酮提取的影响大小顺序：乙醇浓度＞提取次
数＞m （樱草杜鹃）∶v（提取液）＞提取时间。 最佳工艺为 75%乙
醇溶液，m （樱草杜鹃）∶v （提取液）=1∶10，超声提取 60 min，提
取 3次；在该条件下，黄酮提取率为 11.01%，RSD=0.43%（n=3）。
本实验用分光度法对樱草杜鹃总黄酮进行了测定，以芦
丁作标准曲线测定总黄酮的含量，通过对精密度、稳定性及
回收率的考察，认为该方法可行，但稳定性较差。通过对组成
单一的标准物质溶液及提取液对比测定，组成单一的标准物
质溶液较长时间放置，其吸光度值稳定不变，但对于组成复
杂的提取溶液，其吸光度值随着时间的延长而呈现逐渐下降
的趋势，通过对标准溶液吸光度值的分析，可选择最佳测试
时间为定容后 15～35 min。
通过本实验最佳工艺的研究，樱草杜鹃总黄酮含量高达
11.01%，与其他杜鹃花科植物相比，含量较高[6-7]。
[参考文献]
[1] 江伯阳.月王药诊[M].北京:民族出版社,1985:253.
[2] 嘎玛群培.甘露本草明镜[M].拉萨:西藏人民出版社,1993:82.
[3] 张雯洁 ,李忠琼 ,余珍 ,等 .樱草杜鹃的挥发油成分 [J].药物分析杂志 ,
1997,17(6):386-390.
[4] 李雪峰 ,金慧子,陈刚,等.樱草杜鹃中的黄酮类化合物 [J].天然产物研
究与开发,2009,4(21):612-615.
[5] 赵二劳 ,王爱玲.金银花中总黄酮提取工艺的优化[J].精细化工 ,2009,
12(26):1186-1210.
[6] 李艳芝 ,张波 ,王建安 ,等 .正交试验法优化石岩杜鹃叶中黄酮的提
取[J].济宁医学院学报,2009, 3(32):162-163.
[7] 汪洪武,刘艳清.紫花杜鹃中总黄酮的提取工艺优选[J].精细化工,2009,
3(26):252-254.
（收稿日期：2010-03-22）
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60 min
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水平
因素
乙醇浓度（A） 提取时间（B） 料液比（C） 提取次数（D）
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