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收稿日期:2011 － 01 － 20
基金项目:江西省卫生厅中医药科研课题(2008A092)
作者简介:刘丹(1979 －) ，女，江西南昌人，助理研究员，研究方向:中药
学。
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HPLC法测定南丹参中丹酚酸 B的含量
刘丹，余良忠，文萍
(江西省中医药研究院，江西 南昌 330046)
摘 要:目的:建立南丹参中丹酚酸 B 的含量测定方法。方法:色谱柱:Dikma Diamonsil C18 柱(4. 6mm × 250mm，
5μm) ，流动相:甲醇 －乙腈 － 1. 5%甲酸溶液(16∶ 16∶ 68) ，流速:1mL /min，检测波长 286nm，柱温:室温。结果:线性范围
为 11. 984 ～ 299. 6 mg·mL －1(r = 0. 9998) ，平均回收率为 99. 57%，RSD = 1. 83%，精密度 RSD = 1. 66%(n = 6) ，重复性
RSD = 1. 08%(n = 6) ，稳定性 RSD = 1. 60%。结论:方法稳定、可靠，可作为该药材的质量控制方法。
关键词:南丹参;丹酚酸 B;高效液相色谱
中图分类号:R284 文献标识码:A 文章编号:1000 － 1719(2011)09 － 1872 － 02
Determination of Salvianolic Acid B in Radix Salvie Bowleyanae by HPLC
LIU Dan，YU Liang-zhong ，WEN Ping
(Jiangxi Institute of Traditional Chinese Medicine，Nanchang 330046，Jiangxi，China)
Abstract:Objective:To establish the method for determination content of salvianolic acid B in Radix salvie bowleyanae． Meth-
ods:The chromatographic conditions were as follows:a Dikma Diamonsil C18(4． 0mm × 250mm，5μm)column，a mobile phase of
methanol － acetonitrile － 1． 5% formic acid(16:16:68)． and a UV detector at 286nm． Results:A linear ranger of 11． 984 ～ 299．
6mg·mL －1(r = 0． 9998) ，the average recovery of 99． 57%(RSD = 1． 83%) ，precision with RSD of 1． 66% (n = 6) ，repetition
with RSD of 1． 08% (n = 6)and stability with RSD of 1． 60% were obtained． Conclusion:The method is accurate，reliable，and
can be used for quality control of the production．
Key words:radix salvie bowleyanae;salvianolic acid B;HPLC
南丹参为唇形科植物南丹参 Salvia bowleyana
Dunn．的干燥根及根茎。收载于江西省中药材标准
1996 年版，功能为祛瘀止痛，活血通经，清心除烦，用
于月经不调，经痛闭经，癥瘕积聚，胸腹刺痛，疮疡肿
痛，心烦不眠，肝脾肿大;原标准中有根横切面显微鉴
别，及水提取液的荧光观察和显色反应，无相关成分的
含量测定，以南丹参为关键词未检索到相关的该药材
含量研究文献报道，为提高南丹参的质量标准，参考中
国药典一部丹参药材项下方法［1］，用高效液相色谱法
测定了该药材中丹参酚酸 B的含量。
1 仪器与药品
高效液相色谱仪(型号:HP － 1100，生产地:美国，
泵:G1311A，检测器:G1315A) ，丹酚酸 B 对照品(批
号:111562 － 201009，供含量测定用，中国药品生物制
品检定所提供) ，南丹参药材，乙腈、甲醇为色谱纯，其
他试剂均为分析纯级。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件的选择 色谱柱为 Dikma Diamonsil
C18(2)柱(5μ，4. 6mm × 250mm) ，流动相为甲醇 －乙
腈 － 1. 5%甲酸溶液(16∶ 16∶ 68) ，流速为 1. 0mL /min，
检测波长为 286nm，柱温为常温。理论板数不低于
2000。在此条件下南丹参药材供试品溶液中丹酚酸 B
色谱峰有良好的分离(见图 1)。
2. 2 对照品溶液及供试品溶液的制备 取丹参酚酸
B对照品，精密称取适量，以 50%甲醇为溶剂制成每
1ml含约 0. 1mg的溶液，得对照品溶液。
取本品粉末(过三号筛)约 0. 2g，精密称定，置具
塞锥形瓶中，精密加入 50%甲醇 50mL，精密称定总重
·2781· 辽宁中医杂志 2011 年第 38 卷第 9 期
DOI：10.13192/j.ljtcm.2011.09.179.liud.080
量，超声处理提取 45min，放冷，再精密称定总重量，以
50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为
供试品溶液。
2. 3 线性关系的考察 取丹参酚酸 B 对照品，精密
称取 7. 49mg，置 25mL容量瓶中，以 50%甲醇为溶剂，
使完全溶解，并加至刻度，摇匀，备用(每 1mL 含丹参
酚酸 B对照品为 299. 6μg)。取此对照品溶液，分别加
50%甲醇进行稀释成以下浓度:11. 984、29. 96、74. 9、
89. 88、149. 8μg /mL，分别精密吸取 10μL，注入液相色
谱仪中，按确定的色谱条件测定峰面积，将丹参酚酸 B
浓度与相应峰面积进行回归处理，得回归方程:Y =
15. 0813X － 27. 6698，r = 0. 9998(n = 6) ，线性关系良
好，浓度范围在 11. 984 ～ 299. 6μg /mL。
2. 4 精密度试验 精密吸取同一供试品溶液 10μL，
进行测定，并进样连续 6 次，测定供试品溶液中丹参酚
酸 B峰面积值，数据结果分析 RSD为 1. 66%。
2. 5 稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液 10μL，
分别间隔一定的时间注入液相色谱仪中进行测定丹参
酚酸 B峰面积，结果表明，本品在 12 h内稳定，数据结
果分析 RSD为 1. 60%。
图 1 对照品、供试品液相色谱图和光谱图
表 1 回收率测定结果
样品中量
(mg)
加入量
(mg)
测出量
(mg)
回收率
(%)
平均回收率
(%)
RSD
(%)
4. 2627 3. 9195 8. 2957 102. 90
4. 1614 3. 9195 8. 0662 99. 62
4. 3113 3. 9195 8. 2358 100. 13 99. 57 1. 83
4. 2911 3. 9195 8. 1329 98. 02
4. 3194 3. 9195 8. 3194 98. 38
4. 3559 3. 9195 8. 2129 98. 41
2. 6 重复性试验 取同一批样品以确定法进行提取
和测定，共 6 份，测得丹参酚酸 B 平均含量为
40. 49mg /g，数据结果分析 RSD为 1. 08 %。
2. 7 回收率试验 取本品粉末(过三号筛)共 6 份，
精密称定约 0. 1g，置锥形瓶中，精密加入丹参酚酸 B
对照品溶液(以 50%甲醇为溶剂，浓度为 0. 2613 mg·
mL －1)15mL，再精密加入 50%甲醇溶剂 35mL，余下同
确定方法制备，并进行测定，计算回收率，结果见表 1。
2. 8 样品测定 按确定的制备方法制成供试品溶液，
并选择优化的色谱条件进行测定。测得另二批结果为
37. 5、32. 0mg /g。
3 讨 论
本次丹酚酸 B含量测定方法研究中，对不同的提
取方式、提取溶剂的种类、提取溶剂的用量及提取时间
均进行了考察，根据试验结果确定了最佳的方案。
南丹参为地区习惯用药，在不同地区亦作丹参入
药，主要分布于江西、浙江、福建等地，含丹参酮Ⅱ、隐丹
参酮等成分［2 －3］。李静等曾对南丹参中的化学成分进行
研究，表明其含丹参酮Ⅱ、丹参酮Ⅰ、丹酚酸 A、B、C 等成
分，含有与丹参相同的两大类成分［4 －5］。本课题对南丹
参药材进行质量标准化研究，提高南丹参药材的质量控
制技术方法，保证其临床用药的安全性和有效性，为相
关南丹参的深入开发和应用提供技术支撑。
参考文献
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·3781·辽宁中医杂志 2011 年第 38 卷第 9 期