全 文 ：湖 北 农 业 科 学 2011 年
收稿日期：2010－09－17
基金项目：青海省重点攻关项目（2009－Z－705）
作者简介：包锦渊（1958－），男，甘肃通渭人，教授，主要从事植物化学的研究，（电话）13897421878（电子信箱）baojinyuan＠126．com；
通讯作者，李军乔，教授，（电子信箱）ljqlily2002＠126．com。
第 50 卷第 8 期
2011年 4 月
湖北农业科学
Hubei Agricultural Sciences
Vol． 50 No.8
Apr．，2011
密花香薷 （Elsholtzia densa Benth．） 为唇形科
（Labiatae）香薷属 （Elsholtzia）植物 ，一年生草本植
物，别称咳嗽草、野紫苏、臭香茹、蟋蟀巴，主要分布
在河北、山西、陕西、甘肃、青海、四川、云南、西藏、
新疆等地，生于林缘、高山、草甸、林下、河边及山坡
荒地，海拔 2 800～4 100 m 的范围内 ［1］。 其作为正品
香薷的代用品 ［2］，全草入药，具有治疗夏季感冒、发
热无汗、中暑急性胃炎、胸闷、口臭、小便不利之功
效［3］，藏医用全草治培根病、胃病、梅毒性鼻炎、喉炎
及寄生虫病，并外用治脓疮及皮肤病［4］。目前关于密
花香薷总黄酮的研究基本未见报道，近年来对黄酮
类化合物的药理作用研究较多，发现其具有抗心脑
血管病、抗氧化、镇痛、抗病毒、抗肿瘤、免疫调节等
作用［5］。为了研究密花香薷中总黄酮的功效，开发并
保护密花香薷植物资源，我们对其总黄酮的提取工
艺进行了研究，并测定了不同地区密花香薷中总黄
酮的含量，为其进一步开发利用提供了科学依据。
1 材料与方法
1．1 材料
1．1．1 密花香薷 密花香薷全草，分别采自青海湟
源、海北、海东 3 个地区并经青海大学韦梅琴副教
授鉴定，晾干后将全草用粉碎机粉碎，过 60 目筛备
用。 提取工艺选取湟源地区的密花香薷粉末进行试
验。
1．1．2 试剂 无水乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化
钠等试剂皆为分析纯。
1．1．3 仪器 722 型分光光度计 （上海欣茂仪器有
限公司）；HH－4 数显恒温水浴锅 （国华电器有限公
司）；ME2353 型电子天平 （北京赛多利斯仪器有限
公司）；芦丁标准品（国药集团化学试剂有限公司，
批号：F20091204）。
密花香薷中总黄酮的含量测定及提取工艺
包锦渊，李军乔，张璐璐
（青海民族大学化学与生命科学学院，西宁 810007）
摘要：通过分光光度法测定不同地区密花香薷中总黄酮的含量，采用正交试验优化提取密花香薷中总黄
酮的提取工艺。结果表明，密花香薷中总黄酮的最佳提取工艺为于 80℃，加入 30 倍量 60％乙醇回流提取
2 h；密花香薷中总黄酮提取含量为 13．72％。 总黄酮正交提取工艺结果可靠，含量测定方法简便准确，适
合于工业化生产。
关键词：密花香薷；总黄酮；正交试验；含量测定
中图分类号：R284.2 文献标识码：A 文章编号：0439－8114（2011）08－1666-03
Study on Extraction Process and Determination of Total Flavonoids in Elsholtzia densa
BAO Jin－yuan，LI Jun－qiao，ZHANG Lu－lu
（Department of Chemistry and Life Science， Qinghai University For Nationalities， Xining 810007，China）
Abstract： The conditions for extracting total flavonoids in Elsholtzia densa Benth． was optimized through orthogonal test； and
the content of flavonoids was determined by spectrophotometry． The optimum process of the extraction technology was 60％
ethanol at 80℃， thirty－fold solvent， extracting for 2 h； and the extracting ratio could reach 13．72％ by using this process．
Ethanol refluxing was the best way for extracting and was trustworthy； while the determinating method was simple and practi-
cable for industrial production．
Key words： Elsholtzia densa Benth.； total flavonoids； orthogonal desigh； determination
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2011.08.022
第 8 期
1．2 密花香薷中总黄酮的测定
1．2．1 标准溶液的配制 精密称取烘干至恒重的
芦丁标准品 19 mg，用 60％乙醇溶液溶解定容至 50
mL 容量瓶中，摇匀，即得浓度为 0．38 mg ／ mL 的芦
丁标准溶液。
1．2．2 标准曲线的绘制 分别移取上述芦丁标准
液 0．5、1．0、1．5、2．0、2．5、3．0、3．0、4．0、4．5、5．0 mL 至
10 个 50 mL 容量瓶中， 再依次加入 60％乙醇 4．5、
4．0、3．5、3．0、2．5、2．0、1．5、1．0、0．5、0mL， 加入 50 g ／ L
亚硝酸钠溶液 1．5 mL，摇匀，静置 6 min；再加入 100
g ／ L 硝酸铝溶液 1．5 mL，摇匀，静置 6 min；再加 40
g ／ L 氢氧化钠溶液 20 mL，用 60％乙醇稀释至刻度，
摇匀。 10 min后以 60％乙醇调零，在 510 nm 处测定
吸光度。 以吸光度（A）为纵坐标，芦丁浓度（C）为横
坐标，绘制标准曲线，得回归方程为：A赞 ＝1．204 8C－
0．005 7，r＝0．999 6。 在 0．038～0．38 mg ／ mL 范围内线
性关系良好。
1．2．3 精密度试验 精密吸取芦丁标准品溶液 4
mL，置于 50 mL 容量瓶中，按 1．2．2 项操作，60％乙
醇调零 ，510 nm 处测定吸光度 ，6 次重复 ，CV ＝
1．68％，表明仪器精密度良好。
1．2．3 稳定性试验 将同一待测密花香薷提取液按
1．2．2 项操作，分别于 0、0．5、1．0、1．5、2．0 h 后测定吸
光度，CV＝1．41％，表明各供试品溶液在 2．0 h 内能够
保持稳定。
1．2．4 重复性试验 将同一批密花香薷粉末，按
1．2．2 项操作， 测定吸光度， 重复 6 次， 结果 CV＝
2．14％，表明该测定方法重复性良好。
1．2．5 回收率试验 精密称取已知含量的密花香薷
粉末 5份，分别加入精密称定的芦丁标准品适量，按
1．2．2 项操作，测定吸光度，计算回收率，结果平均回
收率为 101．96％，CV＝2．41％，表明该方法准确可靠。
1．2．6 密花香薷中总黄酮的含量测定 精密称取密
花香薷粉末 3 g，置于 250 mL圆底烧瓶中，以不同的
条件进行提取。 定容后以芦丁为标样，按 1．2．2项操
作，60％乙醇调零，于 510 nm 处测吸光度，根据回归
方程测定总黄酮含量，计算提取率。
总黄酮质量（mg）=总黄酮含量×溶液体积
总黄酮提取率 （%）=（总黄酮质量/药粉质量）×
100
2 结果与分析
2．1 单因素试验结果分析
2．1．1 提取温度对总黄酮提取率的影响 精密称
取密花香薷粉末 3 g，置于 250 mL圆底烧瓶中，加入
60％乙醇 60 mL，分别在不同的温度（20、30、40、50、
60、70、80、90℃）下水浴回流 1 h，提取 1 次。 过滤提
取液，定容后测定总黄酮的含量，计算提取率。 结果
见图 1。 由图 1 可知，随着温度的升高，提取率也随
之升高， 当温度达到 80℃时， 提取率达到最大值，
90℃时，提取率反而下降。
2．1．2 乙醇体积分数对总黄酮提取率的影响 精
密称取密花香薷粉末 3 g，置于 250 mL圆底烧瓶中，
分别加入不同体积分数的乙醇 （10％、20％、30％、
40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％）60 mL，60℃
下水浴回流 1 h，提取 1 次。 过滤提取液，定容后测
定总黄酮的含量，计算提取率，结果见图 2。 由图 2
可以看出，乙醇体积分数达到 60％时总黄酮提取率
最高，随后则逐渐下降。
2．1．3 提取时间对总黄酮提取率的影响 精密称
取密花香薷粉末 3 g，置于 250 mL圆底烧瓶中，加入
60％乙醇 60 mL，60℃下水浴回流提取 1次， 提取时
间分别为 1、2、3、4、5 h。 过滤提取液，定容后测定总
黄酮的含量，计算提取率，结果见图 3。 由图 3 可以
看出，提取时间为 2 h 时，提取率最高。 再增加提取
时间并不利于提取率的提高。
图 1 不同提取温度对总黄酮提取率的影响
图 2 不同乙醇体积分数对总黄酮提取率的影响
14
12
10
8
6
4
2
0
提
取
率
//%
20 30 40 50 60 70 80 90
温度//℃
图 3 不同提取时间对总黄酮提取率的影响
12
10
8
6
4
2
0
提
取
率
//%
10 20 30 40 50 60 70 80 90 100
乙醇体积分数//%
12
10
8
6
4
2
0
提
取
率
//%
1 2 3 4 5
提取时间//h
包锦渊等：密花香薷中总黄酮的含量测定及提取工艺 1667
湖 北 农 业 科 学 2011 年
2．1．4 料液比对总黄酮提取率的影响 精密称取
密花香薷粉末 3 g，置于 250 mL圆底烧瓶中，分别加
入 60％乙醇 15、30、45、60、75、90 mL，60℃下水浴回
流 1 h，提取 1 次。 过滤提取液，定容后测定总黄酮
的含量，计算提取率，结果见图 4。由图 4可以看出，
料液比为 1∶25（W/V，g∶mL，下同）时提取率最高。
2．2 正交试验结果分析
以单因素试验为基础，对影响密花香薷中总黄
酮提取率的因素：提取温度、乙醇体积分数、提取时
间、料液比进行 L9（34）正交试验，因素与水平设计见
表 1，正交试验结果见表 2。由表 2可知，4个因素对
总黄酮提取率的影响大小依次为 A＞B＞D＞C，4 个因
素的最佳组合为 60％乙醇，料液比 1∶30，80℃水浴回
流 2 h，密花香薷中总黄酮的提取率可达13．72％。
2．3 验证试验结果
根据以上所选择的最佳提取工艺，提取 3 个地
区的密花香薷，进行总黄酮的含量测定，结果见表
4， 结果表明该工艺条件下总黄酮的提取率比较稳
定。
3 结论
通过单因素试验和正交试验结果，确定密花香
薷中总黄酮的最佳提取工艺参数为提取温度 80℃，
乙醇体积分数 60％，料液比 1∶30，提取时间 2 h，此
条件下提取率可达 13．72％； 乙醇具有选择性好、渗
透性强、浸出率高、毒性小等优点，因此选取乙醇作
为密花香薷总黄酮的提取溶剂；曾将回流提取与超
声提取和乙醇冷浸提取进行比较，结果发现回流提
取比另两种方法较完全彻底，因此选用回流提取作
为提取方法。
参考文献：
［1］ 中国科学院中国植物志编辑委员会．中国植物志（第 66 卷）［M］．
北京：科学出版社，1977．
［2］ 中国科学院西北高原生物研究所．藏药志［M］．西宁：青海人民出
版社，1991．11．
［3］ 张 继，王振恒，姚 健，等．密花香薷挥发油成分的分析研究［J］．
草业学报，2005，14（1）：112－116．
［4］ 青海省藏医药研究所，青海省药品检验所．中国藏药［M］．上海：
上海科学技术出版社，1996．10．
［5］ 蔡丹昭，刘华钢，韦 琦．番石榴叶总黄酮提取工艺研究［J］．时珍
国医国药，2009，20（1）：44－45．
表 1 因素与水平
水平
1
2
3
提取温度（A）
℃
70
80
90
乙醇体积分数（B）
%
50
60
70
提取时间（C）
h
1
2
3
料液比（D）
g∶mL
1∶20
1∶25
1∶30
因素
表 2 正交试验结果
试验号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
x1
x2
x3
R
A
1
1
1
2
2
2
3
3
3
10.27
12.59
11.86
2.32
B
1
2
3
1
2
3
1
2
3
11.08
12.23
11.41
1.15
C
1
2
3
2
3
1
3
1
2
11.52
11.70
11.51
0.20
D
1
2
3
3
1
2
2
3
1
11.67
11.27
11.79
0.53
提取率//%
9.81
10.75
10.26
12.44
13.27
12.06
10.99
12.68
11.92
表 4 验证试验结果
地区
湟源
湟源
湟源
海东
海东
海东
海北
海北
海北
称取量//g
3.0
3.0
3.0
3.0
3.0
3.0
3.0
3.0
3.0
提取率//%
13.48
13.58
13.72
10.36
10.43
10.50
11.26
11.40
11.13
图 4 不同料液比对总黄酮提取率的影响
12
10
8
6
4
2
0
提
取
率
//%
1∶05 1∶10 1∶15 1∶20 1∶25 1∶30
料液比//g∶mL
（责任编辑 温 亮）
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