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聚合草打浆技术的研究



全 文 :中国饲料 2009 年第 6 期
基金项目:河南省自然科学基金资助项目(0211031300)
聚合草(SympHytum pezegrinum L.)又名紫根
草,俄罗斯饲料草,属于紫草科聚合草属,丛生多
年生草本植物,植株可供药用,茎叶可作家畜青饲
料(朱长山等,2004)。其地上部分和根部含有大量
的尿囊素,可预防和治疗牲畜肠炎,增进畜体健康
(卢隆杰和苏浓,2007)。聚合草中的多糖具有调节
机体免疫,降血糖血脂,抗辐射,抗菌抗病毒等功
能。聚合草提取叶蛋白、尿囊素、多糖、香料等活性
成分时,打浆破壁是关键技术,而聚合草打浆后的
黏胶状直接影响了有效成分的溶解、提取,解决的
方法至今未见报道。为此,本试验研究了聚合草的
打浆技术。
1 材料与方法
1.1 试验材料 聚合草由郑州牧业工程高等专
科学校饲料生产基地提供, 取初花期的聚合草茎
叶洗净晾干, 切成 1 cm 左右的碎段混合均匀备
用。
1.2 试验仪器和设备 BS124S 型电子天平 (北
京赛多利斯仪器有限公司);恒温水浴锅;九阳家
用打浆机;pHS-3C 数字酸度计(杭州东星仪器设
备厂);WFZUV-2000 型分光光度计(龙尼柯仪器
有限公司)。
1.3 试验试剂 盐酸,双缩脲试剂,酪蛋白,标准
蛋白溶液。
1.3.1 双缩脲试剂的制备 溶解 1.5 g 硫酸铜
(CuSO4·5H2O) 和 6.0 g 酒石酸钠 (NaKC4H4O6·
4H2O)于 500 mL蒸馏水中,在搅拌下加入 300 mL
10 %氢氧化钠溶液,用水稀释到 1000 mL,储存
于内壁涂有石腊的瓶内, 保存备用 (李巧枝,
2007)。
1.3.2 标准蛋白溶液的制备 准确称取蛋白质
含量为 85 %的酪蛋白 294.12 mg, 溶于 50 mL
0.05 mol/L 氢氧化钠溶液中制成储备液, 冰箱保
存备用。
1.3.3 蛋白质标准曲线的制作 分别吸取储备液
0,0.2,0.4,0.6,0.8 mL 和 1.0 mL,加蒸馏水稀释到
1 mL,制成蛋白质含量为 0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0
mg/mL的标准溶液, 向各管加入制备的双缩脲试
聚合草打浆技术的研究
郑州牧业工程高等专科学校 李凤玲 梁月丽 郭 孝
[摘要] 本试验通过调整打浆用水的 pH 值并采取合理的固液比例,研究有效降低聚合草草浆的黏度和提高有效
成分溶解度的具体措施。 通过试验,3 个固液比之间单位草重的蛋白质溶解率差异极显著(P < 0.01),固液比 1∶8 时
打浆效果最好;3 个 pH 之间单位草重的蛋白质溶解率差异极显著 (P < 0.01),pH=3.5 时打浆效果最好; 固液比和
pH 值之间有极其显著交互效果(P < 0.01),通过多重比较确定的最优打浆组合是固液比 1∶8,pH 值 3.5。
[关键词] 聚合草;打浆;pH 值;固液比
[中图分类号] S816.34 [文献标识码] A [文章编号] 1004-3314(2009)06-0024-02
[Abstract] This experiment were conducted to study the measurement of declining viscosity of grass serum of common
comfrey and enhancing solubility of its effective ingredients based on regulation of pH of beating water and solid-liquid
ratios.The result showed that protein dissolubility per grass weight had significant differences (P < 0.01)among 3 solid-
liquid ratios and grass beating had the best effects when the solid-liquid ratio was 1∶8.Protein dissolubility per grass weight
also had significant difference (P < 0.01)among 3 different pH values,and grass beating had the best effect when pH was
3.5.Interaction effects between solid-liquid ratios and pH values were significant(P < 0.01).Optimum beating combination
was solid-liquid ratio(1∶8)and pH(3.5)by multiple comparisons.
[Key words] common comfrey;beating;pH value;solid-liquid ratio
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DOI:10.15906/j.cnki.cn11-2975/s.2009.06.005
中国饲料2009 年第 6 期
水平组合 平均值
a1b3 24.96e
a2b3 21.66e
a1b2 18.79d
a2b2 17.98d
a3b3 17.19c
a2b1 16.34c
a1b1 13.14b
a3b2 12.74b
a3b1 10.27a
表 2 方差分析
差异源 SS df MS F P-value F crit
样本(pH) 117.4927444 2 58.74637222 118.4243 3.43626E-07 4.256495
列(固液比) 195.4870111 2 97.74350556 197.037 3.71415E-08 4.256495
交互 23.49142222 4 5.872855556 11.83884 0.001242889 3.633089
内部 4.4646 9 0.496066667
表 3 多重比较
表 1 不同打浆条件下单位草重的蛋白质溶解率
1∶4(b1) 1∶6(b2) 1∶8(b3)
pH 3.5(a1) 13.14 18.79 24.96
pH 4.0(a2) 16.34 17.98 21.67
pH 4.5(a3) 10.27 12.74 17.19
pH 值
mg/g
mg/g
注:同列数据肩标字母不同表示在 0.01 水平差异显著。
剂 4.0 mL并充分混匀,在室温下(20 ~ 25)℃放置
30 min,在波长 540 nm 处比色,以空白管调零点,
测定各管吸光度,得回归方程为:
Y=31.026X+0.5298,r=0.9816,呈良好的线性
关系。
1.3.4 调节 pH 值 用盐酸将蒸馏水酸化到 pH
值分别为 4.5、4.0、3.5备用。
1.4 试验方法
1.4.1 固液比对聚合草打浆效果的影响 分别称
取剪碎的聚合草 50,30,20 g,准确量取 pH=4.5的
酸化水 200、180、160 mL,打浆 2 min,双层纱布过
滤, 各得固液比为 1∶4、1∶6、1∶8 的滤液 200、180、
160 mL,滤液用活性炭脱色备用。 pH 为 4.0和 pH
为 3.5的滤液制备同上。
1.4.2 pH 值对聚合草打浆效果的影响 称取剪
碎的聚合草 50 g,分别加入 pH 为 4.5、pH 4.0、pH
3.5 的酸化水各 200 mL,打浆 2 min,双层纱布过
滤,得 pH 4.5、4.0、3.5 的固液比为 1∶4 的滤液 200
mL,滤液用活性炭脱色备用。 固液比为 1∶6、1∶8的
滤液制备同上。
1.4.3 测定指标 聚合草打浆效果用单位草重的
蛋白质溶解率来衡量。
取待测滤液 1.0 mL 于试管中,加入双缩脲试
剂 4.0 mL并充分混匀,测吸光度值。
根据所测的吸光度值和回归方程求得该滤
液的蛋白质含量。 将滤液的蛋白质含量换算成单
位草重的蛋白质溶解率。 单位草重的蛋白质溶
解率 (mg/g)=滤液的蛋白质含量×滤液体积/草
重。
2 结果与分析
2.1 打浆水酸化后不同 pH 值和不同固液比条
件下单位草重的蛋白质溶解率 见表 1。 试验表
明,用不酸化的水打浆,3 种固液比所得打浆水都
是胶状, 草浆不分离, 无法过滤。 向草浆中加
NaOH 溶液至 pH 值 12时草浆仍为胶状。 加盐酸
至 pH 值 4.5左右时胶状开始解离。
由表 1可见,在打浆水酸化条件下,固液比越
大,单位草重的蛋白质溶解率越高,越有利于蛋白
质的提取。 3种固液比,单位草重蛋白质溶解率随
pH 值增加而减小。 说明在试验范围内,pH 值越
小,蛋白质溶解率越高,打浆效果越好。
2.2 最优组合的选择 对表 1 结果进行方差分
析,分析结果见表 2。由表 2可见,3个固液比之间
单位草重的蛋白质溶解率差异极显著(P < 0.01);
3 个 pH 之间单位草重的蛋白质溶解率差异极显
著(P < 0.01);固液比和 pH 值之间的交互作用达
到极显著水平(P < 0.01),进行多重比较选择最优
打浆组合,比较结果见表 3。 从表 3 可知,在 9 个
组合中,pH=3.5、固液比 1∶8 组合(即 a1b3)是聚合
草打浆的最佳条件。
3 结论
pH 在 3.5 ~ 4.5 内,pH 越低,打浆效果越好。
在使用酸化水前提下和试验用固液比范围内,蛋
白质的溶解率随着固液比的增加而增加。 打浆效
果最好组合是 pH=3.5和固液比 1∶8。
参考文献
[1] 李巧枝.生物化学实验技术[M].北京:中国轻工业出版社,2007.
[2] 卢隆杰,苏浓.聚合草的开发及利用[J].四川畜牧兽医,2007,34(1):47 ~
48.
[3] 朱长山,田朝阳,万四新.《河南植物志》紫草科增补与订正[J].河南师范
大学学报,2004,32(3):137 ~ 138.
[通讯地址:郑州市,邮编:450011]
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