全 文 ：江苏农学院学报
8 9 1 2年 3卷 3期
聚合草喂猪的毒性试验
朱望熹 王秉栋 许益 民 王宝安 杨训伊 ” 韩士烈 ` ’
王 军` ’ 储东洲 2’ 蒙妙枝 2’ 唐士余 2, 尤广凤 2 ,
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【提 要】
用 10 0%和 50 %聚合草作为青饲料喂猪 6个月后 , 在血液生化值上表现 出 丫 一
谷氨酞转肤酶 (Y 一 G T ) 的活性随喂饲时间的延长而明显升高 。 病理变化 上 为 显
现毗咯烷碱 中毒的特征 , 包括肝脏出现巨肝细胞 、 胞浆内嗜酸性小球和 核 内 包 涵
体 , 以及汇管区间质增生和胆管上皮细胞轻度增生 。 试验结果还表明 , 只要适当控
制聚合草的喂饲量 , 作为猪的青饲料是安全的 。
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聚合草是一种生长快 、 产量高和营养成分 良好的饲料植物 , 广泛用于喂猪和其他畜禽 。
但近年来 , 我省有的养猪场反映 , 生猪大量喂饲聚合草屠宰时发现似有某些毒性反应 。 有关
这个 问题 国内外的试验报告很少 。
江苏所种的聚合草 ( S . P e er g万。哪 ) 多从朝鲜引入 。 它含有多种生物碱 , 包括聚合草素
( S y m p h y t i n e )
、 聚合草醇碱 ( E e h i n i d i n e ) 、 毛果天芥菜碱 ( L a s i o e a r p i n e ) 、 倒壶碱
( A m a b i l i n e )
、 尿囊素 ( A l a n t o i n ) 、 天门冬酞胺 ( A s p a r a g i n ) 等 。 生物碱的含量约
为干重的 0 . 2一 0 . 3% , 其中主要是聚合草素。 这些生物碱都属于毗咯烷碱 ( P y r r ol i z i d i n e )
毗咯烷碱已知是一种肝性毒物 , 存在于多种植物 。 据国外报道 , 植物中的生物碱含量 , 因植
物的品系 、 季节 、 生长状态 、 气候条件以及土壤 成分等而有不同 , 动物的易感性则因个体 、
年龄 、 性别 、 营养状况等而有差异 , 可以被影响肝脏代谢的多种理化 因素所改变。 因而在不
1司地区 , 用聚合草喂猪的毒性作用 , 也可能存在差别 。 为了弄清楚江苏省内聚合草对猪的毒
性作用和安全利用问题 , 特进行本试验 。
1 ) 在海安县多管局工作 。
2 ) 在海安县种畜场工作 。
.
4 4
·
材料与方法
本试验共应用 2月龄仔猪 63 头 , 试验体重平均 2 0 . 9 3公斤 , 均为本场繁殖的苏 白 x 姜 曲
海杂交一代仔猪 。 试验猪分成三组 , 每组 12 头 , 公母各半 。 第一组 10 0%聚合草组 。 青 饲 料
全部用聚合草喂饲 。 第二组 50 % 聚合草组 。 青饲料 中聚合草占 50 % 。 第三组 以不喂聚合草为
对照 。 其他饲料的种类和配合比例相同 。 青料和精料的比例为 2 : 1。 各组试验猪在预试 期 间
进行防疫注射和药物驱虫 , 健康观察均属正常。
喂饲试验从 1 9 8 1年 6 月初开始 , 至 12 月初结束 , 共 6 个月 。 聚合草每天刘割后放在室内
稍加荫干 , 切碎后称重 , 定时定量喂饲 。 试验开始前逐头采血作血液生化测定 。 试验开始之
后每隔 2 个月各组猪群分别作血液生化测定和每一组随机剖杀 2 头 , 作病理学检查 。 试验结
束后全部剖杀作病理检查 。
血液生化检验重点测定肝 、 肾功能和血清蛋白方面的一些指标 , 包括项 目及 测 定 方 法
为 : 血清谷丙转氨酶 S G P T (改良M o h u m 氏比色法 ) , 血清碱性磷酸酶 A L P ( 改 良 金 氏
法 ) , 血清乳酸脱氢酶 L D H (比色测定法 ) , 血清丫 一 谷氨酞转肤酶丫 一 G T (重氮试剂比色
法 ) , 血清尿素氮 B U N (二 乙酞 一厉显色法 ) , 血浆肌醉 (苦味酸比色法 ) , 血浆尿酸 (磷
钨酸比色法 ) , 血清总蛋 白 (改良双缩脉法 ) , 血清蛋 白电泳 (醋酸纤维薄膜电泳法 ) 。
各组试验猪剖杀后采取肝 、 肾 、 心 、 脾 、 肺等器官组织 , 用 10 %福尔马林固定 , 常规石腊切
片和苏木紫 一 伊红染色 , 作病理组织学检查 。
试 验 结 果
1 0 % 和 50 % 聚合草组试验猪在整个试验期间摄食的聚合草总量 , 表 1 。
试验结束时试验猪平均 日增重 (克 ) 分别为 4 1 1 . 8 1 士 21 . 9 7 、 4 17 . 3 8 士 27 . 7和 432 。 5 士 16 。 6 `4 ,
表 1 各组试验猪的聚合草摄食量 (公斤 )
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三者无显著 差异 。 每增重 1公斤听消耗的饲料量 也看不 出明显差别 , 表 2 。 外观上也未发 现任何
中毒症状 。 三组各屠宰 6 头猪 , 屠宰率和对照组相比也并无差异 。 但聚合草组的肝 、 肾及脾的
重量略高于对照组 , 其 中 l ()0 九试验组的肝重比对照组重。 . 14 公斤 ( P < 0 . 0 1) 。
血液生化测定 : 各组测定数值见表 3 。
肾功能测 定 血清尿素氮 、 血浆肌醉及血浆尿酸的测定指标在整个试验过程中 , 聚合草
试验组和对照组均无显著差异 。
表 2 每 增 重 1 公 斤 所 消 耗 的 饲 料 量 (公斤 、 大卡 )
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血清蛋白电泳图谱均属正常范围 。
肝功 能测 定 在整个 试验过程中 , 丫 一 G T 、 A l · P 、 1才 I ) H和 S G P T 四种酶的测定结果 ,
经均数差异显著性 t 检验 , 其结果见表 4 。
( 1 ) 聚合草试验组的 Y 一 G T 、 A L P 、 L )I H 及 S G 尸 T 的酶活性在不 同试验阶段均有变
异 , 尤其是在 试验 4一 6个月期间有明显变化 。 10 % 和50 % 聚合草组的 Y 一 G T 酶活性均显著
升高 , 与对照组相比差异极其显著 。 10 %和 50 %聚合草组的 A L P及 L D H的活性也 有 一 定
的升高 , 而 S G P T 则仅在喂饲 2 个月时稍有变化 。
( 2 ) 从表 3 可以看出 , 试验组的丫 一 G T酶活性在喂饲聚合草 4 个月时最为显著 , 但到
6 个月时酶活性的变化较不显著 。
病理剖检变化 10 0 % 、 50 %聚合草组试验猪和对照组猪在喂饲 2 和 4 个月时 , 各 组 分
别随机剖检 2 头猪 , 至 6 个月试验结束时各组分别剖检 6 头猪 , 进行病理检查 。
肉眼 变化 试验猪和对照猪生长 良好 , 在剖检上均无明显病理变化可见 。 虽肝 、 肾的色
泽稍淡 , 有一 定程度的浊肿变化 , 一 部分猪的肝脏表面 见到蛔 虫幼虫侵袭形成的乳斑 , 但试
验组和对照组都有同样发现 。
显 微 变化 聚合草组试验猪的病理组织学检查 , 具有特征意 义的变化主要是在肝脏 , 包
括出现巨肝细胞 、 肝细胞胞浆内含有嗜酸性小球和出现核内包涵体 , 以及汇管区和小叶间质
内发生局部增生和胆管上皮细胞轻度增生 。 其他变化与对照组猪相比并无意义 。 各组猪的肝
脏病理变化见表 5 。
聚合草组试验猪大多数肝脏切片中均可见到散在出现的巨大肝细胞 , 即巨肝细胞 (图版
I 一 1 ) 。 这种细胞形体明显增大 , 显有颗粒变性 , 有的细胞分界不太清楚 。 胞 核 显 著 增
大 , 约比正常肝细胞核增大 5 倍 以上 , 核膜清晰 , 核内染色质颗粒松散 , 整个胞 核 染 色 较
淡 , 核仁多清晰可见 。 巨肝细胞一般为散在地夹杂在正常肝细胞间 , 数量不太多 。
有些肝细胞的胞浆内可见含有嗜酸性染色的红色包涵体样小体 ( 图 版 I 一 2 ) , 圆 球
形 , 同质无结构 , 大小不一 , 大的比红细胞还大 , 小的如玻璃样滴 。 这种小球也见于肝细胞
外的间隙内 。 关于这种胞浆包涵体样小球的性质 , 据报道可见于各种动物的毗咯烷碱 中毒的
肝细胞内 , 有人认为可能是扩张的溶酶体或细胞离解颗粒 ( C y t OS 。 : : Os o m 。 ) , 也可 能 是
一种压实的红细胞所形成 。
多数聚合草试验猪的肝细胞内可发现核内包涵体 (图版 I 一 3 ) , 大都含存在巨肝细胞
的核内 , 一般肝细胞 的核内也有发现 。 包涵体染红色 , 圆球形 , 轮郭清楚 , 有的可以看到具
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表 5 各组试验猪的肝脏病理变化
核 内
包 涵 体
间质及胆管
上皮轻度增生
胞肝巨死点 细坏小胀浊混肿饲间喂时
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5 0 % 组
对 照 组
1 0 0 % 组
5 0 % 组
2个月ō4万
月 一 对 照 组
有 界膜 , 直径可达一个红细胞大小 , 有的一个细胞核内可以含有 2一 3个大小不一的红色圆珠
状包涵体 (图版 I 一 4 ) 。 包涵体的形态结构与胞浆 内的嗜酸性小球相似 。 很可能是由于胞
浆内陷入核内所形成 . 据 国外报告 , 由于其他有毒植物 (如千里光属 ) 引起的毗咯烷碱中毒 ,
肝细胞核内也发现含有嗜酸性染色的包涵体样小体 , 认为是胞浆内陷被胞核包围形成的胞浆
球状囊 . 我们在同一 肝组织切片的不同视野中 , 确实发现胞浆中嗜酸性小球陷入胞核和被胞核
逐渐包裹的形态变化过程 (图版 I 一 5 、 6 ) . 证明这种嗜酸性核内包涵体是由胞浆 内陷所形成 。
除了嗜酸性核内包涵体之外 , 还发现另一种核内包涵体样结构物 。 在 50 %聚合草组有一
尖试验猪 (7 5号 , 4 个月时剖检 ) 的肝组织切片中 , 巨肝细胞数量较多 , 并见多数核内包涵
体 , 小体具有清楚的界膜 , 呈圆形或卵圆形 , 内容物着紫红色 , 偏于一侧 , 外形 很 似 浆 细
胞 , 小体周围为一不着色的空隙 (图版 I 一 7 ) , 有的包涵体旁核仁还清晰可见 (图版 I 一
8 )
。 在同一切片 中也见到嗜酸性的核内包涵体 。
聚合草组约有三分之一的肝脏 汇管区和小叶间质组织有轻度增生 , 并局部地伸展入肝小
叶的周边实质部分 , 呈分枝状 , 同时见有轻微的胆管上皮细胞增生 (图版 I 一 g 、 10 ) ,细胞
核呈卵圆形 , 染色淡 , 胞浆很少 , 即所谓卵圆细胞 , 常为数个细胞聚集在一起 , 不 形 成 胆
管 。 间质小动脉管壁增生变厚 。
10 0% 聚 合草组有 2 例 ( 68 号及 65 号 ) 的心脏有轻度的局灶性间质性心肌炎变化 , 局 部
心肌纤维之间有淋 巴细胞和组织细胞浸润 (图版 I 一 1 1) , 浸润较大的病灶中肌纤维萎缩消
失 (图版 I 一 12 ) , 但不见渗出变化 。 68 号猪同时有间质性肝炎变化 。
肾脏的变化为肾小球增大 , 肾小管 _L皮浊肿 , 管腔中有蛋白性颗粒或圆珠含存 , 不过对
照组也可见到 同样变化 。 1 0 % 聚合草组有一头猪 (2 3号 ) 的肾脏切片中有少数局灶性 间 质
性肾炎区 , 肾小管间有少量淋 巴细胞浸润 。
其他器官无明显改变 。
讨 一论
.1 根据本试验的结果 , 喂饲 0] o % 和 50 % 聚合草组试验猪在为期 6 个月的试验过程中 ,
未发现 中毒症状或异常表现 。 试验组的生 长发育 、 日增重和饲料报酬 , 与不喂聚合草的对照
组比较 , 并无明显差别 。 从而说明在本试验中虽然青饲料全部是聚合草 , 1 0 %组在 6 个 月
的试验期间累计喂饲聚合草的总量每头猪平均为 60 8公斤 , 对猪的生长发育和生产性能 , 均
未发现不 良影响 。
2
. 从聚合草组试验猪的血液生化测定结果来 看 , 肾功能并无明显影响 , 对测定肝 功 能
的各项指标表现 有一定变化 , 其 中S G P T 只是在喂饲 2 个月时活性稍有升高 , A L P和 L D H
也有一定升高 。 最具有意义的是丫 一 G T 随着喂饲聚合草时间的延长而逐步升高 。 试验组和对
照组比较 , 试验组内1 0 % 聚合草组和 50 % 组比较 , Y 一 G T酶活性的差异都很显著 。 据W a 卜
k e r ( 2 9 8 1 ) 用千里光 ( S e n e e i o l a n t u s , 也是一种含有毗咯烷碱的有毒植物 ) 喂牛的毒性
试验报告 , 发现试验牛的血液生化变化主要为 Y 一 G T持续升高 , 认为这是毗咯烷碱 中毒的一
项有意义的血液生化变化 , 而其他生化指标并无多大意义 。 这个结果和本试验基本符合 , 看来
也是 由于聚合草中所含的毗咯烷碱引起的 。
Y 一 G T 是细胞膜运转氨基酸入细胞 内的膜结合酶 , 在胎儿和肝癌期间很高 , 出 生 后 的
丫 一 G T 酶活性升高 , 往往与肝细胞的增生过程有关 。 总的来说 , 聚合草所含的生物碱 , 随着
喂伺时间的延长 , 可以引起肝功能的一定变化 , 主要是表现在丫一 G T 酶活性的升高 。 不过这
种改变 , 程度较轻 , 在临床上尚未见中毒症状 。
3
. 在病理组织学上 , 聚合草试验组和对照组相比 , 主要是肝脏出现数量和程度不 等 的
巨肝细胞 , 其次是肝细胞胞浆内出现嗜酸性小球和核内包涵体 , 一部分试验猪肝脏 的汇管区
和小叶间组织 内发生轻度的纤维组织增生和胆管上皮细胞增生 。 总之 , 1 0 % 和 50 %聚 合 草
组试验猪的肝脏都出现同样性质的病理变化 , 在程度上也未发现明显的差异 。 在喂饲聚合草
4 个月时剖检 , 50 %组 2 头试验猪均出现 巨肝细胞和其 中一头有很明显的核内包 涵 体 , 而
10 0%组 2 头试验猪却并未出现巨肝细胞和核内包涵体 。 这和阶段剖检的试 验 猪 数 量 很 少
(每组 2 头 ) 以及猪的个体差别 , 有一定关系 。 但在喂饲 50 % 聚合草达到 4 个月时 , 就可 以
引起肝脏的组织学变化 , 出现具有特征意义的巨肝细胞和核内包涵体 。
国外已有报道 , 巨肝细胞是毗咯烷碱中毒的一个特征性病理变化 , 可以出现在多种含毗
咯烷碱的植物中毒时 , 其发生机制是 由于毗咯烷碱的代谢产物毗咯 ( P y r r ol e ) 能够抑制细
胞的有丝分裂 , D N A 的合成正常而不能分裂 , 以致胞核的形体增大 、 D N A含量增多以及染
色体套数增多 。 当然 , 由于植物中生物碱含量的差别 , 肝脏的病理形态学变化也存在程度上
的不 同 , 低剂量的生物碱往往 引起缓慢发生的巨肝细胞症 。 从本试验喂饲聚合草所产生的肝
脏组织学变化 , 可以看到毗咯烷碱的毒性反应 , 但和对照组比较 , 病变的程度是轻微的 。
4
. 根据以上分析 , 我们认为用大量聚合草喂猪 , 在血液生化指标和 肝 脏 组 织 学 变 化
上 , 可以产生一定的毒性反应 , 但这些变化还不会影响到猪的正常生长发育和增重 , 对健康
和生产性能尚无明显的不 良影响 。 不过 , 也要注意到毗咯烷碱在体内有蓄积作用 , 如果喂饲
时间过久 , 可能产生较严重的毒性反应 。 好在江苏地区聚合草的生长时间一般都在 6 个月左
右 , 入冬即告枯萎 , 不可能长期喂猪 , 所 以只要适当地控制聚合草的喂饲量 , 注意饲料的合
理搭配 , 作为猪的青饲料还是安全的 。 关于喂饲聚合草的猪体内脏和肉品中是否含有毗咯烷
碱残毒的问题 , 尚需作进一步的分析研究 。
参 考 文 献
1
.
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. , 19 8 1 , A u s
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. , 1 9 7 0 , p a t h o l o g y o f D o m e s t i e A n i m a l s s e e
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.
3
. 林秉诚等 , 1 98 1 猪实验性聚合草中毒 , 全国青饲料协作组编
4
. 中国农科院情报研究所 , 19 8 0 , 聚合草
朱壁熹等 :聚合草喂猪的毒性试验 图版 I
右上角示巨肝细胞 , 细胞形体增大 , 分界不清 , 胞核明显增大 , 含有小泡
状的核内包涵体
示一个巨肝细胞胞浆内的嗜酸性小球
一个巨肝细胞的核内包涵体
一个 巨肝细胞含有数个大小不等的核内包涵体
示一个巨肝细胞胞浆内的嗜酸性小球正在内陷入核内
示肝细胞胞浆内嗜酸性小球被包入细胞核内
JI23456图
图7 示一个巨肝细胞的核内包涵体 , 外形似浆细胞 , 周围为一不着色的空隙
图 8 同上巨肝细胞的核内包涵体 , 上方为清楚的核仁
图 9 肝小叶间质内纤维组织和胆管上皮细胞增生
图 10 伸展入肝小叶边缘实质内的增生的成纤维细胞 和胆管上皮细胞
图 n 局灶性间质性心肌炎 , 肌纤维间有少量淋 巴细胞和组织细胞浸润
图 1 2 局灶性间质性心肌炎 , 局部有多量淋 巴细胞和组织细胞浸润 , 肌纤维姜缩鱼矍四
(本图版均系 50 倍)