全 文 ：表 3　方差分析结果
方差来源 离均差平方和 自由度 均方 F P
A 106. 520 3 2 53. 260 1 54. 4749 ﹤ 0. 05
B 12. 187 5 2 6. 093 7 6. 232 7 ﹥ 0. 05
C 3 866. 794 4 2 1 933. 397 2 1 977. 495 3 ﹤ 0. 05
D 1. 955 3 2 0. 977 7
　　 F 0. 05(2 , 2) =19
2. 3　验证实验 按正交实验所得最佳工艺进行挥发油的 β -CD
包合 , 包合物得率为 89. 17%, 挥发油利用率为 73. 02%, 均优于
正交实验中的最佳结果。
3　讨论
挥发油是中药的一种重要有效成分 ,但其易挥发 , 易氧化 ,不
易贮存 , 在长期的放置过程中极易失效。这些不利条件制约了一
些含有挥发油的中药的制剂发展。 β -CD包合挥发油是中药制
剂领域应用的一种新技术 ,该技术能针对挥发性成分的特点 ,有
效地增加了挥发油的稳定性 ,且简单易行 , 成本较低。本实验通
过正交设计得出了 β - CD包合癃闭治颗粒中挥发油的最佳工
艺 , 为工业大生产提供了条件。 实验因素 “包合时间”虽然对实
验结果有显著影响 ,但包合 2 h与最佳工艺包合 3 h的结果差距
不大 , 建议工业生产中包合 2 h, 以节省能源。 β -CD与挥发油
的比例对实验结果没有显著影响 ,建议使用比例 1∶4。
参考文献:
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收稿日期:2006-11-15;　修订日期:2007-03-15
作者简介:苏　健(1972-),男(汉族),云南昆明人 ,现任云南省食品药品
检验所中药室主管药师 , 硕士学位 ,主要从事中药质量检验与标准研究
工作.
滇黄芩不同炮制品中黄芩苷的含量测定研究
苏　健
(云南省食品药品检验所 ,云南 昆明　650011)
摘要:目的 测定滇黄芩不同炮制品中黄芩苷的含量。方法 采用高效液相色谱法 , 色谱条件为:十八烷基硅烷键合硅胶
为填充剂 , 甲醇-0. 2%磷酸(45∶55)为流动相 , 柱温为 25℃,流速为 1 m l m in- 1 , 紫外检测波长为 280 nm。结果 滇黄芩
不同炮制品中黄芩苷的含量差异很大 ,含量依次为生药 5. 98%,生片 4. 96%, 酒片 4. 03%。 结论 该法简便易行 ,灵敏度
高 , 重现性好 ,可用于滇黄芩药材及其制剂的质量控制。
关键词:滇黄芩;　黄芩苷;　高效液相色谱法
中图分类号:R283. 1　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2007)07-1717-02
Determ ination of Ba icalin in D ifferent PreparedM ed icalM ater ia ls of Scutellaria amoena
C. H. W right by HPLC
SU J ian
(Yunnan Institute for Food and Drug Con trol, Kunm ing 650011, China)
Abstract:Objective To e stablish an HPLC m ethod fo r the de term ination of baica lin in the different prepared m edical m ateria ls
o f Scutellaria am oena C. H. W righ.t Methods The conten ts we re de te rm ined byH PLC w ith the use o f C18 co lum n, and am ob ile
phase of m ethano l-0. 2% phosphoric acid(45∶55). The flow ratew as 1. 0 m l m in -1 and the de tection w ave leng th w as 280 nm.
R esu lts The diffe rence of ba icalin contents in the d iffe rent prepared m edicalm a te rials of Scutellaria amoena C. H. W right was ob-
v ious. The conten ts we re in the dec reasing order o f raw Scute llaria(5. 98%) >dried Scu te llaria (4. 96%) >p repa red Scute l-
laria (4. 03%). Conclu sion The m ethod is sim ple, sensitive and repea table. It is suitab le for the qua lity con tro l of scute llaria
and its p repa ra tions.
Key words:Scutellaria am oena C. H. W right;　Baica lin;　HPLC
　　滇黄芩为唇形科黄芩属植物西南黄芩 S cutellaria amoena C.
H. W righ t的干燥根 ,是西南地区药用黄芩的主流品种 ,现收载于
《云南省药品标准》[ 1] 。滇黄芩的化学成分以黄酮衍生物为主 ,
主要有黄芩苷 、黄芩素 、汉黄芩苷 、滇黄芩苷等 , 其中黄芩苷为主
要有效成分之一 , 具有抗脂质过氧化活性 、抗血小板聚集活性 、抗
肿瘤活性。由于该类成分结构相似 ,给分离带来较大困难。本文
报道采用高效液相色谱法对滇黄芩的不同炮制品中黄芩苷的含
量测定 , 以期为滇黄芩药材及其制剂的质量控制提供方法。
1　仪器与材料
Ag ilent 1100型高液相色谱仪 (美国惠普公司)。 Sh im adzu
L ibro rAEG - 45SM 型百万分之一分析天平(日本岛津公司)。上
海 B ranson B3200S超声清洗器。 Ag ilent ZORBAX SB -C18色谱柱(4. 6 mm ×150 mm , 5 μm ,美国惠普公司 )。黄芩苷(供含量测定
用 , 中国药品生物制品检定所提供 , 批号 715 - 200111)。甲醇为
色谱纯 ,水为重蒸水 , 其余试剂均为分析纯。滇黄芩生药 、生片 、
酒片药材样品均购自昆明天紫红饮片厂 ,并经鉴定为唇形科植物
西南黄芩 Scutellaria am oena C. H. W right的干燥根。
2　方法与结果
2. 1　测定条件
2. 1. 1　色谱条件 色谱柱为 Ag ilent ZORBAX SB -C
18
柱 (4. 6 mm
×150 mm, 5 μm);流动相为甲醇-0. 2%磷酸溶液 (45∶ 55);柱
1717
LISH IZHEN M EDIC INE AND MATER IA MED ICA RESEARCH 2007 VOL. 18 NO. 7 时珍国医国药 2007年第 18卷第 7期
温:25℃;流速 1 m l m in- 1;检测波长 280 nm;进样量:对照品溶
液和供试品溶液各 5 m l;理论塔板数以黄芩苷峰计算应不低于
5000。对照品及样品色谱图见图 1。
2. 1. 2　检测波长的选择 黄芩苷对照品用流动相制备的溶液 ,在
200 ～ 500 nm的波长范围内进行扫描 , 在 280 nm 波长处有最大
吸收 , 故选择 280 nm波长进行含量测定 。
2. 2　对照品溶液的制备 精密称取经五氧化二磷减压干燥至恒
重的黄芩苷对照品 2. 92 m g,置 25 m l容量瓶中 , 加甲醇溶解并稀
释至刻度 , 摇匀 ,即得浓度为 0. 116 8 mg /m l的对照品溶液。
2. 3　供试品溶液的制备
2. 3. 1　提取溶剂的选择 精密称取 3份生药粉末约 0. 15 g, 置
具塞三角瓶中 , 分别精密加入甲醇 、水以及 70%乙醇 100 m l, 超
声提取 20 m in, 补足减失重量 , 滤过 , 弃去初滤液 , 取续滤液用
0. 45 μm的微孔滤膜滤过 ,滤液作为供试品溶液。精密吸取上述
溶液各 5 μl, 按上述方法进行测定。结果表明 , 甲醇对黄芩苷的
提取率最高 , 提取所得色谱峰数目最多。
a-对照品　　b-生药　　 c-生片　　 d-酒片
图 1　对照品和样品的 HPLC色谱图
2. 3. 2　提取方法的选择 精密称取 4份生药粉末约 0. 15 g,精密
加入甲醇 100 m l,分别采用超声提取 、回流提取 、索氏提取和冷浸
4种提取方式 , 按上述方法进行测定。结果表明 , 超声提取黄芩
苷的提取率最高且操作简单。
2. 3. 3　提取时间的选择 以甲醇为溶剂 , 分别超声提取 10, 20,
30, 40 m in,以及超声处理 20 m in并静置 12 h。结果表明 ,超声处
理 20 m in并静置 12 h与超声处理 40 m in黄芩苷即可提取完全。
故采用超声处理 20 m in并静置 12 h的方法。
2. 4　线性关系的考察 精密量取对照品溶液 2, 4, 6, 8, 10 μl,按
上述色谱条件测定 , 以进样量(μl)为横坐标(X), 对照品峰面积
积分值为纵坐标(Y)进行线性回归 ,回归方程为:Y =461. 13X +
35. 079, r=0. 999 9 (n =5), 黄芩苷在 0. 233 6 ～ 1. 168 0μg内线
性关系良好。
2. 5　精密度实验 精密吸取对照品溶液 5 μl, 按上述色谱条件 ,
连续进样 9次 , 测得峰面积积分值的平均值为 2313. 76, RSD 为
0. 53%(n =9)。
2. 6　稳定性实验 精密吸取滇黄芩生药供试品溶液 5 μl, 按上述
色谱条件测定 8次 , 间隔 4 h /次 , 测得峰面积积分值并计算含量 ,
黄芩苷的含量平均值为 5. 93%, RSD 为 0. 12%(n =8)。结果表
明 , 黄芩苷含量在 28 h内稳定。
2. 7　重现性实验 取同一批生药粉末 8份如法制备供试品溶液 ,
按上述色谱条件外标法测定黄芩苷的含量 , 黄芩苷含量的 RSD
为 2. 19%(n=8)。结果表明 ,该法重现性良好。
2. 8　加样回收率实验 取已知含量的生药粉末 9份 , 每份 0. 1 g,
精密称定 , 分别加入黄芩苷对照品适量 , 按供试品溶液的制备和
样品测定项下操作 ,平均回收率为 99. 13%, RSD 为 1. 13%(n =
9)。结果见表 1。
表 1　加样回收率测定结果
取样量
m /g
测得量
m /mg
样品中含量
m /mg
对照品测得量
m /mg
对照品加入量
m /mg
回收率
(%)
0. 100 1 6. 992 3 5. 993 8 0. 998 5 1. 003 2 99. 53
0. 099 6 6. 938 4 5. 963 9 0. 974 5 1. 0032 97. 14
0. 103 4 7. 189 3 6. 191 4 0. 997 9 1. 003 2 99. 47
0. 086 4 7. 197 9 5. 173 5 2. 024 4 2. 006 4 100. 90
0. 088 3 7. 274 6 5. 287 3 1. 987 4 2. 006 4 99. 05
0. 096 8 7. 781 1 5. 796 2 1. 984 9 2. 006 4 98. 93
0. 080 7 7. 851 7 4. 832 2 3. 019 5 3. 009 6 100. 33
0. 085 8 8. 108 2 5. 138 8 2. 969 4 3. 009 6 98. 67
0. 082 4 7. 887 2 4. 932 8 2. 954 5 3. 009 6 98. 17
2. 9　样品测定 精密称取滇黄芩生药 、生片 、酒片粉末各约 0. 15
g,置具塞三角瓶中 , 分别精密加入甲醇 100 m l, 超声处理 20 m in
并静置 12 h,加甲醇补足减失重量 ,滤过 , 弃去初滤液 , 取续滤液
用 0. 45μm的微孔滤膜滤过 ,按上述色谱条件进行测定 , 采用外
标法定量。结果见表 2。
表 2　滇黄芩中黄芩苷的含量测定结果 %
供试品 含　　　量　1　　　　　2　　　　　3　 平均含量 RSD
生药 5. 95 6. 03 5. 97 5. 98 0. 70
生片 5. 01 4. 92 4. 96 4. 96 0. 91
酒片 4. 00 4. 07 4. 02 4. 03 0. 89
3　讨论
本文考察了滇黄芩生药和两种炮制品的黄芩苷含量 ,目前黄
芩的炮制品主要为生片和酒片及炒炭 3种 [ 2] , 另外还有焦黄芩 、
姜黄芩 、蜜黄芩等。黄芩苷在黄芩酶的作用下会被酶解成黄芩素
和葡萄糖醛酸 , 黄芩素不溶于水又不稳定 , 易沉淀在黄芩表面在
空气中被氧化而成绿色醌类衍生物 ,所以传统炮制黄芩时常在切
制饮片时见有泛绿现象 ,原因就在于此。据报道 [ 3] ,黄芩酶是一
种活性物质 , 必须在一定温度和湿度条件下才能被杀灭 , 黄芩苷
才能得以保存。有人研究证明 [ 4] , 用沸水煮 10 m in的软化切制
工艺可以既破坏酶又保存其药效成分 ,保证了黄芩饮片的质量。
测定结果表明 ,滇黄芩的不同炮制品中黄芩苷的含量相差很
大 , 生片中的含量为生药中的 80%左右 , 而酒片仅存 67%, 这可
能与炮制过程中黄芩苷被酶解有关。
传统上认为炮制方法不同则产生药效的差异 ,应根据证候的
不同而采用不同的炮制品入药 ,目前滇黄芩中黄芩苷含量与不同
炮制品药效的相关性并未得到证实。因此 ,黄芩苷含量是否与滇
黄芩炮制品的药效均呈正相关以及滇黄芩经炮制后指标成分是
否会改变 ,有待进一步的化学和药理研究来证明。
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时珍国医国药 2007年第 18卷第 7期 LISH IZHEN MED IC INE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2007 VOL. 18 NO. 7