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匙羹藤根的化学成分预试验研究



全 文 :2011,Vol.14 No.1Journal of Guangxi Traditional Chinese Medical University
匙羹藤Gymnema sylvestre(Retz.)schult又名武靴藤、羊角
藤、金刚藤,为木质藤本,分布于广西、浙江、福建、台湾、广州、
海南、云南等地[1]。全株可药用,民间用于治疗风湿关节痛、糖
尿病;其根用于治疗痈疖肿毒、毒蛇咬伤、枪弹伤、杀虱等症[2],
近年来国内外学者通过对其叶和茎化学成分和药理作用的研
究,发现其提取物具有降血糖、抗龋齿及抑制甜味反应等作用[3],
其有效成分匙羹藤酸(gymnemic acid,简称GA)有防治糖尿病
和肥胖症作用,作为保健食品在日本、美国和欧洲已面市。国
内研究成功的匙羹藤复方冲剂[4]等也有降血糖、降血脂作用,
可用于糖尿病和高脂血症的预防和治疗,具有重要的研究和
开发价值。研究表明,匙羹藤根具有收敛、健胃、滋补强壮、清
热等作用,但目前其化学成分研究未见有文献报道,因此,本
实验对其化学成分进行初步的系统预试验,为今后进一步的
研究提供科学依据。
1 实验材料与仪器
1.1 药材 匙羹藤根采于广西来宾,经广西中医学院药学院
中药鉴定教研室廖月葵高级实验师鉴定为萝藦科匙羹藤属植
物匙羹藤Gymnema sylvestre(Retz.)Schult的根。
1.2 试剂 95%乙醇、石油醚(60~90 ℃)均为分析纯。
1.3 仪器 HH-S4数显恒温水浴锅(金坛市医疗仪器厂)、架
盘药物天平(上海医疗器械八厂)、ZF-20C暗箱式紫外分析仪
(上海宝山顾村电光仪器厂)。
2 方法与结果
2.1 样品的制备
2.1.1 水提取液的制备 取药材粗粉10 g,置具塞锥形瓶中,
加入蒸馏水100 ml,不时振摇,冷浸24 h,滤过,取滤液即得冷
水提取液,作氨基酸、多肽、蛋白质检查。剩余药渣在60 ℃水
浴上加热30 min,滤过,即得热水提取液,作糖类、多糖、皂苷、
苷类、鞣质、有机酸等检查。
2.1.2 乙醇提取液、酸水提取液的制备 取药材粗粉15 g,置
圆底烧瓶中,加入10倍量 95%乙醇,加热回流1 h,放冷,滤过,
即得。取1/2滤液作黄酮、蒽醌、酚、苷、香豆素、内酯、萜类、强
心苷、甾类等检查;剩余1/2滤液置水浴上浓缩成膏状(至无醇
味),加入5%盐酸溶液振摇使之溶解,滤过,取滤液即得酸水
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药学研究
匙羹藤根的化学成分预试验研究
姜建萍1,黄小秋1,丘 琴1,2,甄汉深1,曹 音1,陈广钜1
(1.广西中医学院,广西 南宁 530001;2.成都中医药大学,四川 成都 611137)
摘 要:[目的]采用系统预试法对匙羹藤根可能含有的化学成分进行定性试验。 [方法]采用化学反应鉴别方法分别对匙
羹藤根的水提取液、乙醇提取液和石油醚提取液进行试验,通过多种指示剂和显色剂的沉淀反应或颜色反应,初步探索匙羹藤
根可能含有的化学成分。 [结果]匙羹藤根可能含有蛋白质、糖类、多糖、苷类、皂苷、鞣质、有机酸、酚类、植物甾醇及三萜类、生
物碱和挥发油等成分。 [结论]初步确定匙羹藤根含有多种化学成分,为进一步研究其生物活性成分提供实验基础。
关键词:匙羹藤根;预试验;化学成分
中图分类号:R284.1 文献标识码:A 文章编号:1008-7486(2011)01-0038-03
收稿日期:2010-12-12
基金项目:广西自然科学基金项目(合同编号:桂科自0832165)
Preliminary Tests on Chemical Composition of Gymnema sylvestre(Retz.)Schult Root
JIANG Jian ̄ping1, HUANG Xiao ̄qiu1, QIU Qin1,2, ZHEN Han ̄shen1, CAO Yin1 ,CHEN Guang-ju1
(1. Guangxi Traditional Chinese Medical University, Nanning, 530001, Guangxi;
2. Chengdu TCM University, Chengdu, 611137)
Abstract:[Objective]To identify the chemical components of Gymnema sylvestre(Retz.)Schult root by comprehensive preliminary
tests.[Methods]The mixture extracted from Gymnema sylvestre(Retz.)Schult root with water,95% ethanol and petrol ether was respec-
tively experimented by test tube method. The chemical components of Gymnema sylvestre(Retz.)Schult root were preliminarily explored by
precipitation reaction and color reaction of multiple indicators.[Results]The chemical constituents of Gymnema sylvestre(Retz.)
Schult root may contain as protein, sugars, polysaccharide, nucleoside, saponin, tannic acid, organic acids, phenols, phytosterol, triter-
penes, alkaloids, volatile oil etc.[Conclusion]The research of preliminary tests provides foundation for further study of biological activities
of Gymnema sylvestre(Retz.)Schult root.
Key words: Gymnema sylvestre(Retz.)Schult Root;Preliminary Test; Chemical Components
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广西中医学院学报2011年 第 14卷 第 1期
3 讨 论
本文采用化学成分系统预试验对匙羹藤根的水提液、乙
醇提取液、石油醚提取液进行化学成分鉴别,预试验结果表明
匙羹藤根中可能含有蛋白质、糖类、多糖、苷类、皂苷、鞣质、有
机酸、酚类、植物甾醇及三萜类、生物碱和挥发油等成分,初步
确定了匙羹藤根可能含有的化学成分,为进一步研究其有效
活性成分提供物质研究基础。
提取液,作生物碱检查。
2.1.3 石油醚提取液的制备 取药材粗粉1 g,置锥形瓶中,
加入石油醚(60~90 ℃)5 ml,密塞,放置2~3 h后滤过,滤液作
挥发油、油脂检查。
2.2 实验结果 根据各提取液可能含有的化学成分类型,分
别对匙羹藤根的水提取液、乙醇提取液、酸水提取液和石油醚
提取液进行化学鉴别试验。结果见表1、表2、表3。
检查项目
挥发油
油脂
结 论
正反应
负反应
试剂或反应名称
滤纸试验
滤纸试验
正反应指标
油斑消失
滤纸有油斑
表3 匙羹藤根石油醚提取液预试验结果
检查项目
氨基酸,多肽,蛋白质
糖、多糖
苷类
皂苷
鞣质
有机酸
结 论
负反应
负反应
正反应
正反应
正反应
正反应
正反应
负反应
正反应
负反应
试剂或反应名称
茚三酮试验
双缩脲反应
沉淀反应
酚醛缩合反应
菲林反应
泡沫试验
三氯化铁试验
氯化钠明胶试验
pH试纸检查
溴甲酚绿试验
正反应指标
呈蓝、紫色
呈紫、红色
产生沉淀
界面处形成紫红色环
棕红色沉淀
振摇产生大量泡沫,
放置10 min后不消失
呈绿、蓝或暗紫色
出现白色沉淀或浑浊
试纸颜色在pH7以下
蓝色背景显黄色斑点
表1 匙羹藤根水提取液预试验结果
表2 匙羹藤根乙醇提取液预试验结果
检查项目
黄酮类
蒽醌类
酚类
香豆素和内酯
强心苷
植物甾醇
和三萜类
生物碱
结 论
负反应
正反应
负反应
负反应
负反应
负反应
正反应
正反应
负反应
正反应
负反应
负反应
负反应
负反应
负反应
正反应
正反应
正反应
正反应
试剂或反应名称
盐酸-镁粉反应
三氯化铝反应
氨熏试验
荧光试验
碱性试验
醋酸镁反应
明胶试验
三氯化铁反应
异羟肟酸铁反应
偶合反应
荧光试验
3,5-二硝基苯甲酸试验
碱性苦味酸反应
亚硝酰铁氰化钠反应
醋酸-浓硫酸反应
氯仿-浓硫酸反应
碘化汞钾反应
碘化铋钾反应
硅钨酸反应
正反应指标
呈红色
荧光变黄或加深
显黄色荧光
有强烈荧光
加碱变红色,酸化后红色褪去
呈红色
白色沉淀或浑浊
呈绿、蓝或暗紫色
显紫色
显红或紫色
蓝色或绿色荧光
显红色或紫色
显红色或橙色
显红色且红色逐渐消失
黄→红→紫→青→污绿色
氯仿层显红色或青色,
硫酸层有绿色荧光
白色或淡黄色沉淀
淡黄色或棕红色沉淀
淡黄色或白色沉淀
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2011,Vol.14 No.1Journal of Guangxi Traditional Chinese Medical University
复方消炎颗粒是由黄芩、蒲公英等多味中药组成的验方,
具有清热解毒、消肿散结的功效,用于治疗咽喉肿痛、红肿热
痛诸症,临床效果良好。原方以汤剂入药,需临用时煎煮,服用
剂量大且携带不方便,因此笔者对其进行提取并制成了颗粒
剂。本文采用HPLC测定复方消炎颗粒中黄芩苷的含量,为该
制剂质量标准的制定提供参考。
1 仪器与试药
1.1 仪器 Angilent1100高效液相色谱仪(美国安捷伦公
司);LG16-W离心仪(北京医用离心机厂);循环水真空泵
SHZ-DⅢ(巩义市英峪予华仪器厂);BS224S电子分析天平
(北京赛多利斯仪器系统有限公司);SB5200DT超声波清洗机
(宁波新芝生物科技股份有限公司);色谱柱为Welchrom C18
(4.6 mm×150 mm,5 μm,北京分析仪器厂出品)。
1.2 试药 黄芩苷对照品(购自中国药品生物制品检定所,批号
为110715-200815,供含量测定用);甲醇为色谱纯(天津四友公
司);95%乙醇为分析纯(中国医药集团上海化学试剂公司);磷酸
为分析纯(中国医药集团上海化学试剂公司);复方消炎颗粒(自
制,批号为091201,091202,091203);缺黄芩阴性对照颗粒(自制)。
2 方法与结果
2.1 测定波长的选择 参照《中华人民共和国药典》2005年
版(一部)黄芩中黄芩苷的HPLC测定条件[1],并进行黄芩苷的
UV图谱扫描,最后选择280 nm为检测波长。
2.2 色谱条件与系统适用性试验 色谱柱为Welchrom C18
(4.6 mm×150 mm,5 μm);流动相:甲醇-0.1%磷酸(45∶55);检
测波长为280 nm;流速为1.0 ml/min;柱温为35 ℃;理论塔数按
黄芩苷峰计算应不低于3 000。
2.3 溶液的制备
2.3.1 对照品溶液的制备 精密称取黄芩苷对照品适量,置
10 ml量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,制成浓度为
406 μg/ml的对照品溶液。再精密量取上述对照品溶液1 ml,置
5 ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,制成浓度为81.2 μg/ml
的对照品溶液。
2.3.2 供试品溶液的制备 取复方消炎颗粒20 g,研细,取约
0.25 g上述细粉,精密称定,置10 ml量瓶中,加入适量95%乙
醇,超声提取30 min,加95%乙醇定容至刻度,摇匀,即得。
2.3.3 阴性样品溶液的制备 按处方比例称取除黄芩外的其
他药材,制成缺黄芩的阴性对照颗粒,按“2.3.2”项下的方法制
成阴性样品溶液。
2.3.4 测定方法 分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴
性对照溶液各5 μl,注入高效液相色谱仪,按“2.2”项下的色谱
条件进行测定。结果表明,黄芩苷与其他峰分离良好,阴性无
干扰。结果见图1。
2.4 线性关系考察 分别精密量取浓度为81.2 μg/ml的黄芩
苷对照品溶液2,5,10,15,20 μl,注入高效液相色谱仪,按
“2.2”项下的色谱条件进行测定,记录峰面积。以峰面积(A)为
纵坐标、进样量(μg)为横坐标,得线性方程为Y=6073.3X+
13.44(r=0.9999)。结果表明,黄芩苷含量在0.1624~1.624 μg范
围内,线性关系良好。
2.5 精密度试验 精密吸取浓度为81.2 μg/ml的黄芩苷对照
品溶液5 μl,按“2.2”项下的色谱条件重复进样5次,测得平均
峰面积为2 740,RSD为0.62%,结果表明仪器精密度良好。
2.6 重复性试验 取本品细粉(批号:091201)5份,按“2.3.2”
HPLC 法测定复方消炎颗粒中黄芩苷的含量
韦秀芝1,邓超澄2
(1.广西壮族自治区人民医院,广西 南宁 530021;2.广西中医学院,广西 南宁 530001)
摘 要:[目的]建立复方消炎颗粒中黄芩苷的含量测定方法。 [方法]采用HPLC法,色谱柱为WelchromC18(4.6mm×150mm,5μm),
以甲醇-0.1%磷酸(45∶55)为流动相,检测波长为280 nm;流速为1.0 ml/min,柱温为35 ℃。 [结果]黄芩苷含量在0.1624~1.624 μg
范围内线性关系良好,r=0.9999,平均回收率为102.4%,RSD=1.34%。 [结论]该法操作简便、可靠,可用于复方消炎颗粒的质量控制。
关键词:复方消炎颗粒;HPLC;黄芩苷
中图分类号:R284.1 文献标识码:A 文章编号:1008-7486(2011)01-0040-02
收稿日期:2011-01-12
作者简介:韦秀芝(1968-),女,主管药师,主要从事临床药学工作
参考文献
[1]黄泰康,丁志遵,赵守训,等.现代本草纲目(上卷)[M].
北京:中国医药出版社,2001:1437.
[2]夏玉凤,刘欣,余国奠.匙羹藤的开发研究[J].中国野生
植物资源,2000,19(3):1-6.
[3]韦宝伟,施骞.匙羹藤的研究概况[J].国外医药:植物药
分册,1996,11(3):107.
[4]朱家谷,陈有根,李慧,等.匙羹藤复方冲剂降糖降脂作用
研究[J].中成药,1997,19(8):38-39.
(编辑 陈明伟)
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