全 文 ：　　　　 天然产物研究与开发　 　　　　　
2003　Vo1.15　No.2 NATU RAL PRODUCT RESEARCH AND DEVELOPMENT　 　　　　　　　　　　
　
　
　
　
　　收稿日期:2002-12-10　　　修回日期:2003-01-03
　　＊通讯联系人(Corresponding author)
翅果藤的细胞毒活性和化学成分研究
李玉元　张国林＊
(中国科学院成都生物研究所　成都　610041)
摘　要　对翅果藤(Myriopteron ex tensum (Wight)K.Schum)的甲醇提取物及其不同的极性部位进行的
细胞毒活性筛选发现乙酸乙酯 、正丁醇部分具有一定的细胞毒活性。首次对其成分的研究分离得到 7
个化合物 ,通过波谱分析鉴定为 β-谷甾醇 , 齐墩果酸 , α-香树素乙酸酯 , β-香树素乙酸酯 , 羽扇豆烷乙酸
酯 , 乌沙甙元和胡萝卜甙。进一步的活性测试和化学研究仍在进行。
关键词　翅果藤;细胞毒活性;三萜;甾体
　　翅果藤(Myriopteron extensum (Wight)K.
Schum)是萝摩科翅果藤属植物。该属在中国只有
一种 , 分布于贵州 、云南和广西 ,生于海拔 600 ～
1600米疏林或灌木中。云南元江地区民间药用其
根部 ,具有消炎 、润肺 、止咳的作用 ,全草用于治疗肺
结核[ 1] 。目前对其成分的研究未见报道。本研究
中在对其乙醇提取物及其不同的极性部位进行的细
胞毒活性筛选发现乙酸乙酯 、正丁醇部分具有一定
的细胞毒活性。首次对其成分的研究过程中分离得
到7个化合物 ,通过波谱分析鉴定为 β-谷甾醇(1),
齐墩果酸(2),α-香树素乙酸酯(3),β-香树素乙酸酯
(4),羽扇豆烷乙酸酯(5),乌沙甙元(6)和胡萝卜甙
(7)。
1　实验部分
1.1　材料及仪器
翅果藤新鲜枝叶于 2000年 8月采于云南西双
版纳 ,由中国科学院西双版纳热带植物园崔景云研
究员鉴定 ,标本保存于中国科学院成都生物研究所
标本馆。
熔点用 XRC-1 型显微熔点仪测定;旋光度用
POLAX-2L 型旋光仪测定;EIM S 用 VG AutoSpec-
3000型质谱仪测定;核磁共振谱在 Brucker AM-400
型和 DRX-500型波谱仪上测定 , TMS 作内标;柱层
析采用 120目的聚酰胺和 200-400目的硅胶(青岛
海洋化工厂出品)为填料;薄层硅胶采用 G60型。
1.2　提取与分离
4.6 kg 翅果藤干品粉碎后用 95%乙醇冷浸提
取(4×50 L ,每次 7 天),提取液浓缩后得到浸膏约
240 g 。然后将浸膏溶于 300 ml水中 ,依次用乙酸
乙酯(20×3 L)、正丁醇(15×3 L)对其进行萃取 ,回
收溶剂 ,分别得到乙酸乙酯部分 78 g 、正丁醇部分
152 g 以及水部分 50 g 。乙酸乙酯部分经硅胶柱层
析 ,用石油醚 ,石油醚∶丙酮(100∶1 ,50∶1),氯仿 ,氯
仿∶甲醇(50∶1 ,20∶1 , 10∶1)梯度洗脱分成 A1至 A8
八个部分 ,再经硅胶柱反复层析 ,从乙酸乙酯 A3部
分氯仿∶甲醇(30∶1)硅胶柱层析得到化合物 1(25
mg),A4部分得到化合物 2(6.1 g)和 3(18 g), A5
部分得化合物 4(15mg),5(21mg),6(8mg),正丁醇
部分氯仿∶甲醇(5∶1)硅胶柱层析得到化合物 7(25
mg)。
2　抗肿瘤活性筛选
采用 SRB 法进行抗肿瘤活性筛选[ 2 ～ 3] 。本法
的优点是用 TCA 固定细胞后 ,可随时用 SRB作蛋
白含量测定 ,不受测定时间的影响 。表 1和表 2为
加样组细胞 50%生长抑制所需的药物浓度(GI50)。
在此样品浓度下 ,细胞数的增长降低为对照组的
50%。
3　结构鉴定
3.1　谷甾醇 1
白色鳞片状结晶 , mp.138 ～ 138 ℃;与 β-谷甾
醇已知品对比 ,薄层层析 Rf 值一致 ,混合熔点不下
降 ,故鉴定为 β-谷甾醇 。
3.2　齐墩果酸 2
白色粉末 , mp.308 ～ 309 ℃;1H NMR(CDCl3 ,
400 MHz)δ:0.93(3 H , s , CH3), 1.05(9 H , s ,
3CH3), 0.93(3 H , s , CH3), 1.26(6 H , s , 2CH3),
113
5.25(1 H , s ,C12-H).以上波谱数据与文献[ 4] 报道
一致。13C NMR (CDCl3 , 100 MHz ):183.4 (S , C-
28),143.6(s ,C-13),122.6(d , C-12),79.0(d ,C-3),
55.2(d ,C-5),47.6(d ,C-9), 46.5(d , C-17),45.9(t ,
C-19), 41.6(s , C-14), 39.3(s , C-8), 38.8(s , C-4),
37.1(s , C-10), 33.8(d , C-1), 33.1(d , C-29), 32.6
(d ,C-22),30.7(d ,C-20), 28.1(d ,C-23),27.7(d ,C-
15),26.0(d , C-27), 23.6(d , C-30), 23.4(d , C-16),
23.0(d , C-11), 18.3(q , C-6), 17.1(q , C-26), 15.5
(d ,q-24),15.3(q ,C-25)。
表 1　乙酸乙酯和正丁醇萃取分段后的细胞毒活性(μg/ ml)
Table 1　Cy to to xic activity after partitio n by ethyl acetate and n-butanol(μg/ ml)
肺癌细胞 Lu04
Lung cancer cells Lu04
神经癌细胞 N04
Neuroma cells N04
乳腺癌细胞 Bre04
Breast cancer cells
乙酸乙酯部分 ethyl acetate fraction 3.50 3.61 9.26
正丁醇部分 n-butanol fraction 1.02 1.48 3.43
水部分 w ater fraction >100 >100 >100
表 2　乙酸乙酯部分分段后细胞毒活性(μg/ml)
Table 2　Cy totoxic activity of the fractions of ethyl acetate ex tracts(μg/ ml)
肺癌细胞 Lu04
Lung cancer cells Lu04
神经癌细胞 N04
Neuroma cells N04
乳腺癌细胞 Bre04
Breast cancer cells Bre04
A1　A2　A3　A4 >100 >100 >100
A5 3.73 5.29 27.43
A6 5.47 8.72 8.64
A7 3.64 2.27 4.71
A8 0.73 1.21 3.90
3.3　α-香树素乙酸酯 3
白色结晶 , mp.224 ～ 226 ℃;EIMS m / z(%):
468(M+ , 22), 289(9), 218(85), 71(99), 57
(100);1H NMR (CDCl3 , 400 MHz)δ:5.10(t , J =
6.6 Hz),4.51(dd , J =5.6 Hz ,3.6 Hz),2.02(3 H ,
s),1.13(3 H , s), 0.97(3 H , s), 0.89(3 H , d), 0.87
(3 H , d),0.86(3 H , s),0.81(3 H , s),0.77(3 H , s),
0.94(3 H , s);13C NMR(CDCl3 , 100 MHz):38.3
(t ,C-1),23.6(t ,C-2), 81.0(d , C-3), 37.8(s , C-4),
55.3(d , C-5), 18.3(t , C-6), 33.0(t , C-7), 39.9(s ,
C-8),47.8(d , C-9), 36.9(s , C-10), 23.4(t , C-11),
124.4(d , C-12), 139.7(s , C-13), 42.1(s , C-14),
28.8(t , C-15), 26.7(t , C-16), 33.8(s , C-17), 59.2
(d ,C-18),39.7(d ,C-19),39.7(d ,C-20), 31.3(t , C-
21), 41.6(t , C-22), 28.1(q , C-23), 16.9(q , C-24),
15.7(q , C-25), 16.8(q , C-26), 23.2(q , C-23), 28.1
(q ,C-27),28.1(q ,C-28), 17.5(q , C-29), 21.4(q , C-
30), 170.9(-C-)。1H NMR 和13C NMR 数据与文
献[ 5]一致 。
3.4　β-香树素乙酸酯 4
白色结晶 , mp.235 ～ 237 ℃;EIMS m / z(%):
468(M+ ,19), 289(9), 289(11), 218(86),71(90),
57(100);1H NMR(CDCl3 ,400 MHz)δ:5.16(t , J =
6.7 Hz),4.49(dd , J =11.7 Hz ,4.2 Hz), 2.08(3H ,
s),1.16(3H , s),0.97(3 H , s),0.90(3 H ,d),0.88(3
H ,d),0.87(3 H , s), 0.81(3 H , s), 0.78(3 H , s),
0.77(3 H , s);13C NMR(CDCl3 , 100 MHz):38.3(t ,
C-1), 23.6(t , C-2), 81.9(d , C-3), 37.8(s , C-4),
55.3(d ,C-5), 18.3(t ,C-6),32.7.0(t ,C-7),39.7(s ,
C-8),47.8(d , C-9), 36.9(s , C-10), 23.4(t , C-11),
121.7(d , C-12), 145.2(s , C-13), 41.6(s , C-14),
28.7(t , C-15), 26.7(t , C-16), 32.6(s , C-17), 47.6
(d ,C-18),46.9(d ,C-19), 31.3(S , C-20),34.8(t ,C-
21),37.2(t , C-22), 28.1(q , C-23), 16.9(q , C-24),
15.7(q ,C-25), 16.7(q ,C-26), 26.2(q ,C-27), 27.1
(q , C-28), 33.3(q , C-29), 23.4(q , C-30), 172.3(-
CO-)。1H NMR和13C NMR数据与文献[ 5]一致 。
3.5　羽扇豆醇乙酸酯 5
白色针晶 , mp.215 ～ 216 ℃;EIM S m/ z(%):
468(M+), 453 , 393 , 249 , 218 , 189 , 175;1H NMR
114　　　　　　　　　 天然产物研究与开发 2003　Vo1.15　No.2
(CDCl3 , 400 MHz)δ:4.5 (1 H , m , C3-3H), 2.1(3
H , s),2.0(3 H , s), 1.6(3 H , s),0.97(3 H , s), 0.88
(3 H , s),0.81(3 H , s),0.79(3 H , s),0.78(3 H , s),
0.73(3 H , s);13C NMR(CDCl3 ,100 MHz):38.0(t ,
C-1), 27.4(t , C-2), 81.0(d , C-3), 38.3(s , C-4),
55.3(d ,C-5),18.3(t ,C-6),34.2(t ,C-7),40.8(s ,C-
8), 50.3(d , C-9), 37.7(s , C-10), 20.9(t , C-11),
25.1(t , C-12), 38.0(s , C-13), 42.9(s , C-14), 27.4
(t ,C-15),35.5(t , C-16), 43.0(s , C-17), 48.3(d , C-
18),48.0(d ,C-19), 151.0(s ,C-20), 28.8(t , C-21),
39.9(t , C-22), 28.0(q , C-23), 15.4(q , C-24), 10.0
(q ,C-25),15.9(q ,C-26), 14.5(q , C-27), 18.0(q , C-
28),109.3(t ,C-29), 19.3(q ,C-30), 171.0(- CO-)。
以上数据与文献[ 6]羽扇豆醇乙酸酯一致。
3.6　乌沙甙元 6
白色结晶。 EIMS m /z (%):375(M+);1H
NMR(CDCl3 , 400 MHz)δ:6.1(C22-1 H), 3.64(C
3-1 H ,m);13C NMR(CDCl3 ,100 MHz ):27.2(t , C-
1),27.4(t , C-2), 66.8(d , C-3), 33.3(t , C-4), 35.9
(s ,C-5),33.3(t ,C-6),22.2(t , C-7), 42.1(d , C-8),
37.7(d ,C-9),40.0(s ,C-10),21.7(t ,C-11), 40.1(t ,
C-12), 50.1(s ,C-13),84.4(s ,C-14),28.7(t , C-15),
27.4(t ,C-16), 51.7(d , C-17), 16.4(q , C-18), 24.1
(q ,C-19),176.2(S ,C-20), 73.9(t , C-21), 117.8(d ,
C-22),174.7(s ,C-23)。1H NMR和13C NMR数据与
文献[ 7 ～ 8]一致。
3.7　胡萝卜甙 7
白色粉末 , mp.295 ～ 297 ℃;与胡萝卜甙已知
品对比 ,薄层层析 Rf值一致 ,混合熔点不下降 ,故鉴
定为胡萝卜甙。
参考文献
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CHEMICAL CONSTITUTES AND THE CYTOTOXIC ACTIVITYOF
MYRIOPTERON EXTENSUM
LI Yu-yuan ,ZHANG Guo-lin
(Chengdu Institute of Biology , the Chinese Academy of Sciences , Chengdu　610041 , China)
Abstract　The in vi tro test showed that ethy l acetate and n-butanol f ractions of the methanolic ext ract of
Myriopteron extensum (Wight)K.Schum possess cy totoxic effect.In the prelimilary investigation seven com-
pounds , β-sitosterol , oleanolic acid ,α-amyt in acetate ,β-amy tin acetate , lupane acetate ,uzarigenin and daucosterol ,
were isolated and their structures w ere elucidated by spect ral evidence.Further study on biological activity and
chemical investigation are still under way.
Key words　Myriopteron ex tensum (Wight)K.Schum;cy totox ic activity ;t riterpenoid;steroid
1152003　Vo1.15　No.2 李玉元等:翅果藤的细胞毒活性和化学成分研究