全 文 ：!#
吴兰芳!，，景永帅!，，张振东!，，杨# 娟，!
（!贵州大学生命科学学院，贵州贵阳 ##$$%#；
%贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室，贵州贵阳 ##$$$%）
摘& 要：目的：评价吊灯花提取物的体外抗氧化活性。方法：以乙醇、石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇和水为样品提取
剂，以 ’( 作阳性对照，采用水杨酸法、二苯代苦味基肼自由基（)**+·）法和 ,-
. /还原能力实验，对吊灯花不同极性
溶剂提取物的体外抗氧化能力进行评价。结果：吊灯花各提取物均对羟基自由基有较强的清除作用，其中粗多糖的清
除能力最强，半清除率浓度为 $0!12 3 14，但效果不如 ’( 明显；各提取物对 )**+ 自由基有很强的清除作用，以乙酸
乙酯萃取物清除能力为最强，半清除率浓度为 $!.12 3 14。同时以上提取物还对 ,-. /具有很强的还原能力，其中石油
醚提取物的还原能力最强。结论：吊灯花具有明显的抗氧化活性，在抗衰老方面有广泛应用前景。
关键词：吊灯花，抗氧化活性，自由基，还原力
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中图分类号：ML%$!!& & & & 文献标识码：K& & & & 文 章 编 号：!$$%5$.$0（%$!$）!!5$$NO5$.
收稿日期：%$!$5$!5$0& !通讯联系人
作者简介：吴兰芳（!PO#5），女，硕士研究生，研究方向：药食资源利用。
基金项目：国家自然科学基金（.$N0$%PN）；国家重点基础研究发展计
划（%$$P(Q#%0#!%）。
& & 吊灯花为萝藦科（ !#$%&’()(#%(%）吊灯花属
（*%+,&%-’(）植物［!］，又名灯笼花、假西藏红花［%］，该属
植物约 !N$ 种，分布于亚洲东南部，经印度、马达加
斯加到非洲，中国产 !R 种，四川、贵州、云南和广西
等省区有栽培［.5R］。全草或根入药，具有清热解毒，
补虚，祛风除湿等功效，主治劳伤虚弱，风湿关节痛，
脚气病等［#］。据报道，吊灯花属植物灯心草吊灯花总
生物碱成分有保肝、退热、止痛、局部麻醉、抗溃疡、
降压等活性，且无毒副作用；从中分离出的吊灯花素
是从自然界得到的第一个呋喃骈吡啶类生物碱，具
有较强的止痛作用［05O］。除此而外，关于吊灯花属植
物的化学成分、现代药理研究方面的文献报道很
少［P5!$］。为了更好开发利用吊灯花资源，本实验运用
水杨酸法、二苯代苦味基肼自由基（)**+·）法、
,-. /还原能力的方法对吊灯花不同极性溶剂提取物
体外抗氧化活性进行评价。
!# 材料与方法
!9!# 材料与仪器
吊灯花药材& %$$P 年 N 月购自贵州省贵阳市万
东桥药材市场，经贵阳中医学院陈德媛教授鉴定为
长叶吊灯花（*%+,&%-’( ),$’#.&,./$$( LJ=7CA）；二苯代
苦味基肼自由基（)**+·）& 百灵威公司；’(、无水
乙醇、+%S%、水杨酸、硫酸亚铁、铁氰化钾、三氯化铁、
!#
磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、三氯乙酸! 均为国产分析
纯试剂。
#$%&’( 型紫外可见分光光度计 ! 惠普公司；
)*+,,( 精密电子天平 ! 上海恒平科学仪器有限公
司；-.$/%$00 电热恒温水浴锅! 天津市泰斯特仪器
有限公司。
!#$ 实验方法
01+10! 样品的提取和制备! 将干燥的长叶吊灯花根
0(’2粉碎，加 %,3乙醇回流提取 4 次，每次 +5，乙醇
提取液减压浓缩至无醇味，真空干燥后，得长叶吊灯
花总醇提物。取 +,2 醇提物用水混悬后依次用两倍
体积的石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取 4 次，
各萃取液及萃取后的水层部分减压浓缩，经真空干
燥后得石油醚提取物 (1%2、氯仿提取物 +102、乙酸乙
酯提取物 01/2、正丁醇提取物 &1/2 及水层部分 &142，
作为待测样品置于干燥器中保存备用。
将乙醇浸提后的药材残渣在室温下挥去乙醇，
加入蒸馏水，沸水浴提取 4 次，每次 +5。合并水提液
减压浓缩至一定的体积，加入乙醇沉淀多糖，乙醇最
终浓度不低于 %,3，沉淀依次用 /’3的乙醇、丙酮洗
涤后，真空干燥得长叶吊灯花粗多糖 001’2，作为待测
样品置于干燥器中保存备用。
01+1+! 抗氧化活性测定
01+1+10! 清除羟基自由基［00］! 采用 6789:8 反应，利
用 +;+ 与 67
+ <混合产生羟基自由基，在该体系中加
入水杨酸捕捉羟基自由基并产生有色物质，该物质
在 ’0,8= 处有最大吸收。取醇提部分萃取物各
’,=2，用无水乙醇溶解并定容至 +’=>；取粗多糖
’,=2，用蒸馏水定容至 +’=>，配制得质量浓度为
+=2 ? => 的母液备用。加入一定浓度样品 &=>，
/==:@ ? > 67A;& ,1’=>，/==:@ ? > 水 杨 酸 ,1’=>，
%1%==:@ ? > +;+ ,1’=>，混匀，于 (BC 水浴中加热
(,=D8，’0,8=测定样品吸光度（*D），将体系中的样
品改为加入 &=> 蒸馏水，测定得空白对照吸光度
（*,），当向体系中加入 ,1’=>蒸馏水代替 %1%==:@ ? >
+;+ 时，测定得样品本底吸光度（*E），其中（*D）每
个质量浓度做三个平行，取平均值，以 FG 作阳性对
照，按公式（0）计算清除率。
! 清除率（3）H［*,$（*D$*E）］? *, I 0,,3 式（0）
01+1+1+! 清除 -##自由基［0+$0(］! -##自由基是一
种稳定的自由基，在有机溶剂中呈紫色，在 ’0B8= 波
长处有较大吸收，当加入抗氧化剂，一部分自由基被
清除掉，使在该波长下的吸收减弱，可借此来评价某物
质的抗氧化活性。取醇提部分萃取物各 ’,=2，分别用
无水乙醇溶解并定容至 +’=>；取粗多糖 ’,=2，蒸馏水
溶解并定容至 +’=>，配制得质量浓度为 +=2 ? =>各样
品，再以该质量浓度配制成所需浓度。以无水乙醇
配制 ,104==:@ ? > -## 溶液，置于棕色容量瓶中。
取 (=>样品溶液加入 (=> -##溶液于 +’C水浴中
加热 0’=D8 后，在 ’0B8= 测得试样吸光度（*D），取
(=>蒸馏水代替样品测得空白吸光度（*,），以 (=>
样品中加入 (=>蒸馏水测得样品本底吸光度（*E），
其中（*D）每个样品质量浓度做三个平行，取平均值。
以 FG 作阳性对照，按公式（+）计算清除率。
! 清除率（3）H［*,$（*D$*E）］? *, I 0,,3 式（+）
01+1+1(! 67( <还原力实验测定［0&］! 取 +1’=> 不同质
量浓度的样品溶液，加入 ,1+=:@ ? >磷酸缓冲液 +1’=>
及 03 铁氰化钾 +1’=>，’,C水浴反应 +,=D8 后急速
冷却，加入 0,3三氯乙酸溶液 +1’=> 混匀，过滤，取
上清液 ’=>，加入 ,1,+3三氯化铁溶液 ’=>，0,=D8
后立即于 B,,8=处测定吸光值。吸光值越大则还原
能力越强，以 FG 作为对照。
#$ 结果与讨论
#!$ 对羟基自由基的清除作用
结果见图 0 和表 0。图 0 显示，各部分提取物对
羟基自由基都表现出一定程度的清除能力，且水溶
性成分对羟基自由基的清除作用强于醇溶性成分，
醇提物的各萃取部分随着极性增大而清除能力变
弱，各部分的清除效果均弱于 FG。在实验选取的质
量浓度范围内，清除能力大小依次为：粗多糖部分 J
水层部分 J总醇提取物 J石油醚提取物 J乙酸乙酯
提取物 J氯仿提取物 J正丁醇提取物。
图 0! 清除羟基自由基作用
表 0 显示，长叶吊灯花提取物对羟基自由基清
除活性的半清除率浓度（ KG’,）值顺序为：FG L粗多糖
L水层部分 L石油醚提取物 L乙酸乙酯提取物 L总
醇提取物 L氯仿提取物 L正丁醇提取物。半清除率
浓度越小则清除能力越强。除乙酸乙酯提取物外，
醇提物的各提取部分的半清除率浓度随着提取溶剂
极性增大而增大。
##$ 对 %&&’自由基的清除作用
-##自由基是一类较为稳定的芳香类自由基，
天然抗氧化物质对 -## 自由基的清除能力被认为
是抗氧化物质清除自由基的总能力［0’］。结果见图 +
和表 +。图 + 显示，长叶吊灯花水提取物和醇提取物
均能清除 -##自由基，其清除率随反应体系含提取
物质量的增加而加大，在质量浓度相同的情况下，醇
提取物对 -## 自由基的清除作用高于水提取物。
但各部分的清除能力都低于 FG，清除能力大小依次
为 FG J乙酸乙酯提取物 J氯仿提取物 J总醇提取物
J石油醚提取物 J正丁醇提取物 J水层 J粗多糖。
表 + 显示，对 -## 清除作用的半清除率浓度
（ KG’,）大小依次为 FG L乙酸乙酯提取物 L氯仿提取
物 L总醇提取物 L石油醚提取物 L正丁醇提取物 L
粗多糖 L水层部分。半清除率浓度大小与清除能力
大小成负相关，即半清除率浓度越小，清除能力越
大。结果表明，乙酸乙酯提取物部分清除 -##自由
基效果较好。
!#
表 ! 长叶吊灯花提取物对·#$清除活性的 %&’(值
样品 粗多糖 总醇提物
石油醚
萃取物
氯仿
萃取物
乙酸乙酯
萃取物
正丁醇
萃取物
水层部分 对照品 )&
%&’(（*+ , *-） (./! !.01 !.!2 !.’2 !.00 !.3! (.3! (.(!
表 0 长叶吊灯花提取物对 455$·清除活性的 %&’(值
样品 粗多糖 总醇提物
石油醚
萃取物
氯仿
萃取物
乙酸乙酯
萃取物
正丁醇
萃取物
水层部分 对照品 )&
%&’(（*+ , *-） (.3! (.’! (.’2 (.06 (.!1 (./! (.60 (.(0
图 0 清除 455$自由基作用
!#$ %&# ’还原力的测定
抗氧化剂的抗氧化能力与其还原力有关，还原
力越大，抗氧化能力越强。抗氧化剂能够在一定的
条件下将 781 9还原为 780 9，因此，根据 781 9还原为
780 9的多少来间接评价各种提取物的抗氧化能力。
结果见图 1。图 1 显示，各提取物的还原能力与其质
量浓度呈正相关。醇提物的各萃取部分随着极性的
增大，还原能力变弱。各部分的还原能力大小依次
为：)& :石油醚提取物 :氯仿提取物 :总醇提取物
:水层部分 :粗多糖部分 :乙酸乙酯提取物 :正丁
醇提取物。
图 1 对 781 9的还原能力曲线
#$ 结论
自由基理论认为衰老是氧自由基过度反应的结
果，有机体的新陈代谢速率越高，氧自由基的产生就
越快，衰老过程就加快，清除自由基可起到延年益寿
的作用［!/］。在实验所选的三种体外抗氧化评价方法
中，从对两种自由基的清除率和半清除率浓度看，长
叶吊灯花各提取物对 455$ 自由基的清除作用优于
羟基自由基。在同一个抗氧化评价指标中，不同溶
剂提取物的抗氧化能力存在较大差异，在羟基自由
基的清除实验中，粗多糖的清除效果最强，醇提部分
的活性集中体现在乙酸乙酯提取物和氯仿提取物。
而在 455$·实验中，醇溶性成分的清除能力比水溶
性成分的强，尤其以乙酸乙酯提取物和氯仿提取物
的清除效果为好。在铁离子的还原能力测定实验
中，石油醚提取物对 781 9的还原能力最强。由此可
以看出，长叶吊灯花中的抗氧化活性成分除粗多糖
外，主要集中在醇提物的中小极性部分。本研究为
吊灯花的开发和应用提供了科学依据。
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