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紫背金盘水提物和醇提物抑菌作用的研究



全 文 :紫背金盘为唇形科植物紫背金盘 (Ajugae
nipponensis Makino)的全草,又名白毛夏枯草,破血
丹,筋骨草,石灰菜,九味菜,散瘀草,散血丹,退血
草,散血草等。具有清热解毒、凉血散瘀、消肿止痛等
功效。 民间用于咽喉肿痛,乳痈,肠痈,疮痈肿毒,跌
打肿痛,外伤出血,毒蛇咬伤等具有很好的疗效。 该
〔收稿日期〕2010-07-01
〔基金项目〕湖南省教育厅科研项目(08C629);湖南省中医药科研计划项目(2010023);2008 湖南省大学生研究性学习和创新性实验计划项目。
〔作者简介〕易刚强(1965-),男,湖南岳阳人,副教授,主要从事中医药治疗心血管疾病新药研究。
〔通讯作者〕* 何桂霞,女,教授,E-mail:heguixia@tom.com。
紫背金盘水提物和醇提物抑菌作用的研究
〔摘要〕 目的 研究紫背金盘不同溶剂提取物的抑菌作用。 方法 采用不同菌种体内和体外抑菌实验。 结果 体
外抑菌实验:紫背金盘水提物和醇提物对金黄色葡萄球菌和链球菌具有中敏抑菌作用(10 mm<d≤15 mm),对大
肠杆菌和铜绿假单胞菌具有低敏抑菌作用(5 mm<d<10 mm)。体内抑菌实验:紫背金盘水提物高剂量组、醇提物高
剂量组均能显著延长小鼠存活时间,差异具有统计学意义(P<0.01);其水提物低剂量组和醇提物低剂量组均能延长
小鼠存活时间,差异具有统计学意义(P<0.05)。 结论 紫背金盘水提物和醇提物都具有抑菌作用,能够提高小鼠的
存活时间,具有一定的量效关系,为其抑菌作用提供了一定科学的依据。
〔关键词〕 紫背金盘;体外抑菌;体内抑菌;小鼠
〔中图分类号〕R285.5 〔文献标识码〕A 〔文章编号〕doi:10.3969/j.issn.1674-070X.2011.03.008.031.02
Study on bacteriostasis of aqueous
and ethanol extracts of Ajugae nipponensis Makino
YI Gang-qiang, LI Yun-yao, LI Xiao-long, HE Gui-xia, ZHU Xiao-feng,
SHEN Xiao-hua
(TCM University of Hunan, Changsha, Hunan 410208, China)
〔Abstract〕 Objective To study the bacteriostasis of extracts of Ajugae nipponensis Makino
extracted with aqueous and alcohol. Method The antibacterial actions in vivo and in vitro were
observed. Result The water extract and ethanol extracts of the material could inhibit S. aureus
and Streptococcus (10 mm<d≤15 mm) in vitro, and inhibit E. coli and Pseudomonas aeruginosa
(5mm<d<10mm) and prolong the survival time of mice in vivo (P<0.01); both water extract and
alcohol extract with the lower dose could prolong significantly the survival time of mice(P<0.05).
Conclusion Both aqueous and ethanol extracts of Ajugae nipponensis Makino are effective to in-
hibit the bacteria and prolong the survival time of mice, and there exist the relationships be-
tween them, which provides a basis for bacteriostasis.
〔Key words〕 Ajugae nipponensis Makino; bacteriostasis in vitro; bacteriostasis in vi-
vo; mice
易刚强,李云耀,李晓龙,何桂霞*,朱小凤,申小花
(湖南中医药大学中药现代化重点实验室;湖南省中药学重点学科;
国家中医药管理局药性与药效三级科研实验室,湖南 长沙 410208)
2011 年 3 月第 31 卷第 3 期
Mar. 2011 Vol. 31 No. 3
湖 南 中 医 药 大 学 学 报
Journal of TCM Univ. of Hunan 31
植物主要分布在我国东部、南部及西南各省,西北至
秦岭南坡,此外,日本,朝鲜亦有分布 [1-7]。 本文分别
采用体外和体内抑菌实验, 观察紫背金盘的水提物
和醇提物的抑菌作用, 为其临床运用提供科学的依
据,现将实验方法及结果报道如下。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 药物 紫背金盘, 由民间赤脚医生阮炳胜在
湖南省宁乡县草地、林地及阳坡地采集,经湖南中医
药大学药学院彭菲教授鉴定, 为唇形科筋骨草属紫
背金盘(Ajugae nipponensis Makino)全草,切成大约
2cm长度,晒干,备用。氨苄西林胶囊(湖南中和制药
有限公司,批号 090303)。
1.1.2 动物 昆明种小鼠 18~22 g,雌雄兼用,清洁
级, 由长沙市开福区东创实验动物科技服务公司提
供,动物许可证号:SYXK(湘)2009-0001。
1.1.3 菌株 金黄色葡萄球菌(GIMZ.221);大肠埃
及菌(GIMZ.223);甲型溶血性链球菌(GIMZ.179);
铜绿假单胞菌(GIMZ.201)。 以上菌株来源于湖南中
医药大学药学院生物工程实验室和微生物实验室。
1.1.4 培养基 普通肉汤琼脂培养基 (上海沪峰化
工有限公司生产,批号:20090213,按说明配制)。
1.2 方法
1.2.1 药物的制备 称取紫背金盘药材粉末
500 g,加蒸馏水 10、8 倍量分别回流 3、2 h,合并滤
液 , 浓缩后得水提物浸膏 57.5 g, 浸膏得率为
11.5%;同水提法用乙醇提取、浓缩、100 ℃干燥得醇
提物干浸膏 61.0 g,浸膏得率为 12.2%[8]。
1.2.2 菌种活化培养 将金黄色葡萄球菌、 大肠埃
及菌、 甲型溶血性链球菌和铜绿假单胞菌接种到普
通肉汤琼脂培养基中,37 ℃培养 24 h 后,用无菌水
配制成浓度约为 7.6×106CFU/mL的菌悬液,备用。
1.2.3 抑菌实验造模、分组及给药方法[9-11] (1)体外
抑菌实验 将金黄色葡萄球菌、大肠埃及菌、甲型溶
血性链球菌和铜绿假单胞菌菌株接种到普通肉汤琼
脂培养基中,37 ℃培养 24 h后,用无菌水配制成浓度
为 7.6×106CFU/mL的菌悬液,备用。 取紫背金盘水提
物和醇提物浸膏,配制含生药量 1 g/mL溶液。 以生理
盐水作为对照,采用纸片扩散法测量滤纸片周围抑菌
圈直径,重复 3 次,取其平均值。 (2)体内抑菌实验
按照预试实验方法和结果,取小鼠 70只,随机分成 7
组,每组 10只,紫背金盘水提物高剂量组、低剂量组
(简称紫背金水提高组、紫背金水提低组)、醇提物高
剂量组、低剂量组(简称紫背金醇提高组、低组)、氨苄
西林阳性药物对照组、空白组、模型组,造模组用金黄
色葡萄球菌 0.1 mL腹腔注射。 给药方法,水提物按成
人 70 kg体表面积换算 20 g/d,为临床等效剂量,每天
分别给予紫背金盘水提物 301.3、1 205.2 mg/kg;醇提
物 319.6、1 278.6 mg/kg 以及氨苄西林 157.2 mg/kg;
模型组及空白组给予等量的生理盐水 (20 mL/kg),连
续灌胃 3 d。 末次给药 1 h后,除空白组外,其他 6组
均腹腔注射含金黄色葡萄球菌的营养肉汤培养液
0.1 mL,连续观察 5 d,记录小鼠死亡情况。
1.3 统计学分析
采用 SPSS 15.0 软件进行统计处理,方差齐用 t
检验,方差不齐用秩和检验。
2 结果
2.1 紫背金盘水提取物和醇提取物以及不同浓度
的抑菌圈直径的影响
紫背金盘水提物和醇提物对金黄色葡萄球菌和
链球菌具有中敏抑菌作用 (抑菌直径:10 mm<d≤
15 mm),对大肠杆菌和铜绿假单胞菌具有低敏抑菌
作用(抑菌直径:5 mm<d<10 mm),两者相比较,紫
背金盘水提物抑菌作用更为明显。 结果见表 1。
2.2 紫背金盘水提取物和醇提取物对金黄色葡萄
球菌感染小鼠的影响
紫背金盘水提物高剂量组、 醇提物高剂量组均
能显著延长小鼠存活时间(P<0.01);其水提物低剂
量组和醇提物低剂量组均能延长小鼠存活时间(P<
0.05)。 结果见表 2。
3 讨论
紫背金盘为湖南长沙宁乡城郊赤脚医生阮炳胜
采集的草药,主要用于疮疡、无名中毒等症状,在民
间使用中具有很好的疗效。 同时根据 《本草图经》、
《全国中草药汇编》、《云南中草药》等
表 1 紫背金盘提取物的抑菌圈直径 (x±s,mm)
注:15 mm10 mm(低敏抑菌)。
金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 链球菌 铜绿假单胞菌
紫背金盘水提物 15 9 12 8
紫背金盘醇提物 14 8 11 7
提取物
(下转第 54页)
湖南中医药大学学报 2011 年第 31 卷32
表 2 紫背金盘提取物对金黄色葡萄球菌
感染小鼠的影响 (x±s)
注:与模型组比较 *P<0.05,**P<0.01。
组 别
空白组
模型组
氨苄西林组
紫背金水提高组
紫背金水提低组
紫背金醇提高组
紫背金醇提低组
记载:“紫背金盘清热解毒,凉血散瘀,消肿止痛。 主
治咽喉肿痛,乳痈,肠痈,疮疖肿毒,痔疮出血,跌打
肿痛,外伤出血,水火烫伤,毒蛇咬伤”等[1,5,12]。 而本
实验结果证明紫背金盘提取物对金黄色葡萄球菌、
大肠杆菌、 链球菌和铜绿假单胞菌都具有一定的抑
制作用, 体内实验紫背金盘明显能提高腹腔注射致
死量细菌模型小鼠的存活率, 对感染模型小鼠具有
较好的保护作用并能延长其存活时间, 而且具有一
定的量效关系,为紫背金盘治疗疮疡、无名中毒等在
抑菌方面提供实验依据。
参考文献:
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南中医药大学学报,2010,30(8):64-65,77.
药物剂量(mg/kg)


157.2
1 205.2
301.3
1 278.6
319.6
死亡数(n)
0
10
1
2
6
1
4
存活率(%)
100**
0
90**
80**
40*
90**
60*
存活时间(h)
1 200±0**
420±54
1 120±43**
1 030±47**
630±53*
1 110±45**
770±51*
(上接第 32页)
(本文编辑 彭芝配)
重及舌苔黄腻等脾虚湿热证候。本证虚实夹杂,治则
当扶正祛邪,标本同治;治本当健脾益气、培养后天,
治标当清肠化湿、行气祛瘀。三黄丸由黄芪、黄芩、黄
连、白术、茯苓、白芍、仙鹤草、当归、木香等 9 味药物
组成,其中黄芪治脾虚之本,益气升清,托毒生肌,为
君药;白术甘温健脾,芩、连治湿热之标,苦寒清肠燥
湿止痢,共为臣药;茯苓渗湿止泻,白芍缓急止痛,当
归、木香活血行气,取其“行血则便脓自愈,调气则后
重自除”之意,仙鹤草收敛止血、涩肠止痢、补虚消
积,诸药共为佐使之用。
既往我们的研究表明, 三黄丸治疗溃疡性结肠
炎取得与西药 SASP 相近的疗效,且没有 SASP 的不
良反应。本研究表明,三黄丸治疗溃疡性结肠炎脾虚
湿热证疗效显著。
超微速溶颗粒是采用超细粉碎技术 (以植物细
胞破壁为目的) 加工而成的粒度为微米级的新型中
药制剂。中药超微饮片具有增加药物吸收率,提高生
物利用度,保持药效学物质基础,提高临床疗效,节
省药材资源,便于应用,质量可控等优点[6],是替代传
统饮片,摆脱“药罐子”的良好剂型,具有很好的临床
应用价值和市场前景。 但对于使用中药超微饮片与
传统饮片的等效剂量目前仍无定论, 临床应用有较
大的盲目性,很难保证既安全有效,又最大限度节约
药材资源。
本研究表明 1/3 剂量的三黄丸超微速溶颗粒与
传统汤剂取得相似的疗效, 且无明显副作用和不良
反应, 提示传统汤剂的 1/3 倍量可能是中药超微颗
粒剂配方临床应用的等效剂量。 这对于今后确定超
微颗粒剂配方中药临床应用的最佳剂量有一定的参
考价值,对临床用药有一定的指导意义。
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868. (本文编辑 马 薇)
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湖南中医药大学学报 2011 年第 31 卷54