全 文 ：昆 明学院学 报　　2008, 30(4):79 ～ 80 CN53-1131/G4　ISSN1008-7958
JournalofKunmingUniversity
收稿日期:2008-10-22
作者简介:许立松(1971—), 男 ,云南昆明人 , 实验师 ,主要从事天然产物研究.
滇黄芩中的提取黄芩苷优化工艺探索
许立松 ,李维莉 ,傅　江 ,张金文
(昆明学院 化学科学与技术系 ,云南 昆明 650031)
摘要:以黄芩苷提取率和干膏率作为鉴定指标 , 采用 L9(34)正交实验法对滇黄芩中黄芩苷提取工艺进行优化.
结果表明 ,碱水倍量 、提取时间 、提取次数 、pH值等对鉴定指标具有显著性影响.黄芩苷最佳提取工艺为:碱水倍
量 12倍 , pH为 10, 回流提取 2次 ,每次 2h.
关键词:滇黄芩;黄芩苷;正交实验;优化工艺
中图分类号:O629.9　文献标识码:A　文章编号:1008-7958(2008)04-0079-02
StudiesonExtractionofBaicalinfromScutelariaAmoenaC.H.Wright
XULi-song, LIWei-li, FUJiang, ZHANGJin-wen
(ChemicalScienceandTechnologyDepartment, KunmingUniversity, YunnanKunming650031, China)
Abstract:TheextractionconditionsofbaicalinfromScutelariaAmoenwerestudiedwithorthogonaltest(L9(34)), thecontentofba-
icalinanddryextractivematerialtakenasindexesandalcoholconcentration, extractiontimesandextractiontimeasfactor.Theresult
showsthatmassratioofalkalinewatertomaterial, extractiontime, thenumberofextraction, PHvalue, indicatorsofthesestudieshave
significantimpact.TheoptimumconditionsfortheextractionofbaicalinfromScutellariaAmoenarethatmassratioofalkalinewaterto
materialis12∶1, thepHis10, thetimeofback-flowextractsis2 times, andeverytimeis2 hours.Keywords:ScutelariaAmoen;baicalin;orthogonaltest;extractionprocess
　　黄芩苷(Baicalin)是唇形科黄芩属滇黄芩(Scute-
lariaamoenaC.H.Wright)中的主要药用成分 , 在清
除氧自由基、减轻组织的缺血再灌注损伤、调节免疫、
促进细胞凋亡等方面有较好的作用.随着生物技术的
发展以及中药化学成分分离水平的进步 ,黄芩苷在抗
氧化 、抗肿瘤、抗 HIV以及治疗心血管疾病等方面均
具有潜在的开发应用价值 [ 1-3].此外 ,据最新文献报
道 ,黄芩苷还具有防SARS的功效 [ 4].
黄芩苷在碱性条件下易于溶解 , 而且碱性离子
水既有碱性 ,又有乳化性 ,适合提取黄芩 [ 5].因此 ,本
文采用碱性离子水加热回流提取滇黄芩根中黄芩苷
工艺 , 并进行不同 pH值的碱水 、提取次数、溶剂倍
量 、不同提取时间对黄芩苷得率和含量影响的研究 ,
探索其合理的提取工艺与流程 ,并以黄芩苷含量为
鉴定指标 ,采用 L9(34)正交实验对黄芩苷提取工艺
进行优化.
1　材料与方法
1.1仪器
Agilent1100高效液相色谱仪;自动进样器、柱
温箱、紫外检测器;Agilent1100工作站;微量电子天
平(德国赛多利斯 CP-224S).
1.2试药
滇黄芩(购于云南药材市场 , 经鉴定为 Scutel-
lariaamoenaC.H.Wright的根);黄芩苷标品(中国
药品生物制品检定所 , 编号为:110715-200212, 含
量测定用),乙醇(色谱纯),其它试剂均为分析纯.
1.3方法
1.3.1样品溶液的制备
取滇黄芩药材 100g,按下页表 1加一定量的碱
水 , 回流提取一定的时间 ,一定的次数 , 合并滤液.加
酸 , 沉降 , 减压蒸馏除去大部分水分 ,转移至烘箱 ,低
温烘至恒重 ,精密称取黄芩苷样品 25mg, 置 25mL
量瓶中 ,加甲醇超声溶解 , 冷却至室温 ,再用甲醇稀
释至刻度 ,摇匀 ,取适量用 0.45μm微孔滤膜过滤 ,
备用.
1.3.2标样液的制备
精密称取黄芩苷对照品 4.3mg, 置 10mL量瓶
中(相当于 1mL中含黄芩苷 0.43mg/mL), 加甲醇
超声溶解冷却至室温 , 再用甲醇稀释至刻度 , 摇匀 ,
取适量用 0.45μm微孔滤膜过滤 ,备用.
1.3.3黄芩苷的 HPLC法测定
色谱柱 ,安捷伦 C18柱(4.6mm×150mm;i.d,
5μm);流动相 ,甲醇∶水∶磷酸 =42∶58∶0.2;检测波
长 280nm;流速 1.00mL/min[ 6].
1.3.4干膏的测定
将正交试验提取液加酸沉降 ,静置 ,减压除去大
部分水 ,转移至已干燥恒重的蒸发皿中 ,放置烘箱中
DOI :10.14091/j.cnki.kmxyxb.2008.04.018
低温干燥至恒重 ,精密称量 ,算出干膏率.
1.4正交实验设计
以黄芩苷的含量为指标 ,考察不同加碱水量、pH
值、提取时间和提取次数 4个因素 , 每个因素 3个水
平设计正交实验方案.根据预实验结果 ,将碱水用量
定为:第一次 8倍量 , 第二次 10倍量 , 第三次 12倍
量;以黄芩苷提取率和提取液干膏率为综合评价指
标 ,选用L9(34)正交试验表安排实验 ,详见表 1.
表 1　正交实验因素水平表
水平 因素碱水倍量 A/倍 提取次数 B/次 提取时间 /h pH值
1 8 1 1 9
2 10 2 1.5 10
3 12 3 2 11
2　结果与分析
正交实验结果见表 2,方差分析结果见表 3.
表 2　正交试验表及结果
水平 因素A B C D 黄芩苷含量 /g
1 1 1 1 1 2.96
2 1 2 2 2 3.91
3 1 3 3 3 2.83
4 2 1 2 3 2.91
5 2 2 3 1 4.56
6 2 3 1 2 1.82
7 3 1 3 2 5.10
8 3 2 1 3 4.47
9 3 3 2 1 2.98
K1 9.70 10.97 9.25 10.50 —
K2 9.29 12.94 9.80 10.83 —
K3 12.55 7.63 12.49 10.21 —
R 0.41 1.97 0.55 0.33 —
　　注:黄芩苷的量 =提取物干膏量 ×黄芩苷的含量
表 3　方差分析结果
来源 离差平方和 自由度 方差 F值 P值
A 2.1020 2 1.0510 32.7645 0.02962
B 4.8036 2 2.4018 74.8746 0.01318
C 2.0040 2 1.0020 31.2369 0.03102
D 0.0642 2 0.0321 1.0000 0.50000
误差 0.0642 2 0.0321 — —
合计 8.9738 8 — — —
从表 2试验结果与计算可以看出:K3a>K2a>
K1a,故因素 A选择水平 3,即碱水的倍量为 12倍;
K2b>K1b>K3b,故因素 B选择水平 2,即提取次数
为 2次;K3c>K1c>K2c, 因此因素 C应选择水平
3,即提取时间 2h;K2d>K3d>K1d, 因此因素 D应
选择水平 2, 即pH值为 10.(因素 B的 R值最大 ,说
明提取次数对检测指标影响最大)各因素对黄芩提
取工艺的影响程度依次为 B>C>A>D,即提取次
数 >提取时间 >碱水倍量 >pH值.从表 3方差分析
结果同样得出:各因素影响都比较显著.影响黄芩苷
提取率因素大小顺序为:B >C>A>D, 即提取次
数 >提取时间 >碱水倍量 >pH值.
[参考文献]
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[ 2]延卫东 ,王瑞君 ,何琰 ,等.黄芩苷药理作用研究进展 [ J] .陕西中
医 , 2002, 23(12):1127-1128.
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[ 4]邓杨梅,张水鹃,陈季强 ,等.可用于 SARS治疗的抗病毒药物 [ J] .
世界临床药物 , 2005, 26(1):11-15.
[ 5]韩鲁佳 ,阎巧娟 ,江正强.黄芩甙提取分离方法及工艺研究 [ J].
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[ 6]国家药典委员会.中华人民共和国药典:一部 [ M].北京:化学工
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80 　　　　　　　　　　　　　　昆明学院学报　　　　　　　　　　　　　　　　　　　2008年 12月