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剑麻渣果胶提取工艺的研究



全 文 :第 33 卷 第 1 期
2012 年 1 月
华南农业大学学报
Journal of South China Agricultural University
Vol. 33,No. 1
Jan. 2012
收稿日期:2011-04-19
作者简介:陈芳艳(1971—) ,女,讲师,博士;通信作者:刘伟强(1972—) ,男,高级实验师,E-mail:liuweiqiang@ scau. edu. cn
基金项目:广东省产学研项目(4300-E11089)
剑麻渣果胶提取工艺的研究
陈芳艳1,王林川2,杨 艳1,陈 希1,刘伟强1
(1 华南农业大学 动物科学学院,广东 广州 510642;2 华南农业大学 兽医学院,广东 广州 510642)
摘要:以剑麻渣为原料提取果胶,采用正交试验优化提取条件,并对剑麻果胶的分离及脱色进行研究,得出制备剑
麻果胶的最佳工艺条件为:以 2. 2 mol·L -1的草酸 -草酸铵缓冲溶液为提取剂,料液比为 0. 1 g·mL -1,时间 90
min,温度 80 ℃,在 pH4. 0 条件下用乙醇沉淀果胶,果胶产率为 14. 87%;用 w为 1. 8% ~ 2. 4%的过氧化氢脱色,获
得浅黄色果胶.理化性质研究表明,剑麻果胶为酯化度 23%的低酯果胶,w(半乳糖醛酸)为 66%,pH、灰分等指标
均符合国家轻工行业标准.
关键词:剑麻渣;果胶;提取;沉淀;脱色
中图分类号:Q539. 8 文献标志码:A 文章编号:1001-411X(2012)01-0077-05
Extraction of Pectin from Sisal Residue
CHEN Fang-yan1,WANG Lin-chuan2,YANG Yan1,CHEN Xi1,LIU Wei-qiang1
(1 College of Animal Science,South China Agricultural University,Guangzhou 510642,China;
2 College of Veterinary Medicine,South China Agricultural University,Guangzhou 510642,China)
Abstract:The method of pectin extraction from sisal residue was optimized by orthogonal experiments,
and pectin separation and decoloration were also studied. The optimized extraction conditions were as fol-
lows:2. 2 mol·L -1 oxalic acid-ammonium oxalate buffer as extracting agent,the solid to liquid ratio 0. 1
g·mL -1,time 90 min,temperature 80 ℃ . Pectin was precipitated by alcohol at pH 4. 0;the yield of
sisal pectin was 14. 87% . The primrose yellow pectin was decolored by 1. 8% - 2. 4% H2O2 . The re-
sults of physicochemical property were that the degree of esterification of sisal pectin was 23%,galactu-
ronic acid 66%,pH and ash all complying with Chinese light industey standards.
Key words:sisal residue;pectin;extraction;precipitation;decoloration
果胶具有良好的凝胶和乳化稳定作用,是在食
品、医药和其他工业中应用的重要多糖之一.在食品
中可用做胶凝剂、增稠剂、组织成型剂、乳化剂和稳
定剂等,用来制造果酱、果冻、果脯、冰制品、酸奶制
品、饮料和烤肉调味酱等[1],在医药上具有抗菌、止
血、消肿、解毒、止泻、降血脂、抗辐射等作用,还是一
种优良的药物制剂基质,可与其他制剂合用配制软
膏、膜、栓剂、胶囊等药物.果胶对维持血液中正常的
胆固醇含量具有非常好的效果,还能够防止阳离子
中毒,能有效地除去肠胃和呼吸道中的铅和汞[2].剑
麻 Agave sisalana是一种龙舌兰科龙舌兰属的叶纤维
作物,它含有多种皂苷元、蛋白质、多糖类化学成分,
具有降胆固醇、抗炎、抗肿瘤等药理作用. 性味甘、
辛、凉;功能为凉血止血、消肿解毒;主治肺痨咯血、
衄血、便血、痢疾、痈疮肿毒、痔疮等,在广西长期作
为地方植物药应用[3]. 剑麻根茎中的汁液可用于酿
酒,如墨西哥的剑麻酒世界闻名,被称为墨西哥国
酒.墨西哥亦开发利用剑麻作为动物饲料[4].我国华
南地区有丰富的剑麻资源,为麻工业提供了大量的
原料,但同时也产生了大量的剑麻渣,不仅占用场
地,而且污染环境.国内通常直接用来作为有机肥料
或废渣处理,利用程度低,亟待对剑麻渣进行综合利
用.剑麻渣中含有大量的果胶、皂甙、纤维素等物质,
对其开发利用,不仅提高剑麻的经济效益,而且有利
于保护环境.生产食品工业上需求量极大的果胶,是
提高剑麻渣经济价值的有效方法.
本试验从提取了皂甙之后的剑麻渣中提取果
胶,研究剑麻果胶的提取工艺及其理化性质,为果胶
制备提供新的材料来源.
1 材料与方法
1. 1 材料与试剂
剑麻渣:湛江剑麻厂提供;咔唑:分析纯,中国医
药集团上海化学试剂公司;半乳糖醛酸(D - (+)
Galacturonic acid) :纯度 > 93%,Sigma 公司;其余试
剂均为国产分析纯试剂.
1. 2 剑麻果胶制备工艺流程
剑麻渣→漂洗灭酶→抽提→过滤浓缩→滤液脱
色→醇析(过滤)→干燥→剑麻果胶.
1. 3 剑麻果胶提取液的制备
1. 3. 1 剑麻果胶提取的正交试验 将萃取完皂甙
后的剑麻渣按料液比 0. 1 g·mL -1的比例加入蒸馏
水,在水浴中加热保温 0. 5 h,使其吸水充分软化,并
适当加以搅拌,然后用纱布过滤,挤干,反复三四次,
以达到漂洗及灭酶的目的.
准确称取 9 份各 10 g 经上述处理后的剑麻渣,
加入草酸 -草酸铵缓冲溶液,在一定温度下提取果
胶.以料液比、温度、时间、草酸 -草酸铵缓冲溶液浓
度 4 个因素确定最佳的果胶提取条件,每个因素各
取 3 个水平,以果胶产率为指标,进行 4 因素 3 水平
的正交试验 L9(34) (表 1) ,反应结束后用乙醇沉淀,
过滤,70 ℃烘至衡质量后,称质量,计算果胶得率.
果胶得率 =果胶质量 /剑麻渣质量 × 100% .
表 1 剑麻果胶提取的正交试验设计
Tab. 1 Orthogonal test table of extracting pectin from sisal
水平
料液比 /
(g·mL -1)
(A)
θ /℃
(B)
t /min
(C)
c(缓冲液)/
(mol·L -1)
(D)
1 1∶ 10 60 30 0. 2
2 1∶ 15 80 60 0. 5
3 1∶ 20 100 90 0. 8
1. 3. 2 草酸 -草酸铵浓度对果胶得率的影响 分
别称取 5 g 经处理的剑麻渣 9 份,在料液比为 0. 1
g·mL -1、温度 80 ℃、浸提 90 min 的条件下,加入浓
度分别为 0. 1、0. 4、0. 7、1. 0、1. 3、1. 6、1. 9、2. 2、2. 5
mol /L的草酸 -草酸铵缓冲溶液(pH = 3)进行抽提,
比较果胶得率.
1. 4 剑麻果胶脱色
取 10 mL果胶提取液 6 份,分别置于具塞试管
中,加入质量分数为 30%的 H2O2,使果胶提取液中
过氧化氢的质量分数分别为 0、0. 6%、1. 2%、1. 8%、
2. 4%、3. 0 %,混匀后放置 12 h,观察颜色变化,然后
加乙醇,沉淀,过滤,烘干得到脱色果胶.
1. 5 剑麻果胶的分离
1. 5. 1 沉淀剂对果胶分离效果的影响 取 100 mL
果胶 提 取 液 3 份,分 别 加 入 5 g CaCl2、5 g
(NH4)2SO4、100 mL φ为 95%的乙醇,搅拌混匀后放
置 12 h,过滤得到果胶,70 ℃烘干至恒质量,比较果
胶得率.
1. 5. 2 醇析 pH对果胶分离效果的影响 分别在 6
份 50 mL果胶提取液中加入等体积的 φ 为 95%的乙
醇后,用 HCl调节 pH分别为 1、2、3、4、5、6,放置 12 h
后,过滤得到果胶,70 ℃烘干至恒质量,比较果胶得
率.
1. 6 剑麻果胶中半乳糖醛酸含量的测定
采用咔唑硫酸比色法,在波长 530 nm 处测定果
胶溶液的光密度[5].
1. 7 果胶酯化度(DE)的测定
取 3 份干样品分别测果胶酯化度.参考 Pinheiro
等[6]的方法,称取 0. 2 g果胶移入 250 mL锥形瓶中,
用乙醇润湿,加入 20 mL 40 ℃不含 CO2 的蒸馏水,
用瓶塞塞紧并振摇,使样品全部溶解. 加入 5 滴酚
酞,用 0. 1 mol /L 的 NaOH 标准溶液进行标定,记录
所消耗 NaOH 的体积(V1)即为初滴定度. 继续加入
0. 1 mol /L 的 NaOH标准溶液 10 mL,加塞后强烈振
摇 2 h,加入 0. 1 mol /L 的 HCl 10 mL,振摇至粉红色
消失为止. 然后加入 3 滴酚酞指示剂,用 0. 1 mol /L
的 NaOH滴定至呈微红色.记录所消耗 NaOH的体积
(V2) ,即为皂化滴定度.
果胶酯化度 =
V2
V1 + V2
× 100% .
1. 8 剑麻果胶 pH、总灰分的测定
剑麻果胶 pH、总灰分按照国标 QB2484—
2000[7]中规定的方法进行测定.
2 结果与分析
2. 1 剑麻果胶提取条件的确定
2. 1. 1 正交试验结果
从表 2 可看出,各因素的最优组合为 A1B2C3D3,
即提取剑麻果胶的最佳工艺条件:料液比为 1 g∶ 10
mL、草酸 -草酸铵溶液浓度为 0. 8 mol /L、温度为 80
℃、反应时间 90 min. 由 R 可知,各因素对果胶提取
87 华 南 农 业 大 学 学 报 第 33 卷
率影响的主要次序为 D > C > B > A,D的极差最大,A
的极差最小.极差越大,反映该因素水平变动时,总
指标变化越大,即草酸 -草酸铵缓冲液的浓度对果
胶提取率的影响最大.
表 2 剑麻果胶提取正交试验结果
Tab. 2 Orthogonal test results of extracting pectin from sisal
水平
料液比 /
(g·mL -1)
(A)
θ /℃
(B)
t /min
(C)
c(缓冲液)/
(mol·L -1)
(D)
果胶
产率 /%
1 1∶ 10 60 30 0. 2 3. 23
2 1∶ 10 80 60 0. 5 3. 98
3 1∶ 10 100 90 0. 8 10. 59
4 1∶ 15 60 60 0. 8 4. 49
5 1∶ 15 80 90 0. 2 5. 21
6 1∶ 15 100 30 0. 5 4. 08
7 1∶ 20 60 90 0. 5 3. 62
8 1∶ 20 80 30 0. 8 8. 31
9 1∶ 20 100 60 0. 2 2. 72
K1 5. 93 3. 78 5. 21 3. 72
K2 4. 59 5. 83 3. 73 3. 89
K3 4. 88 5. 80 6. 47 7. 80
R 1. 34 2. 05 2. 74 4. 08
2. 1. 2 草酸 -草酸铵缓冲液浓度对果胶得率的影
响 由于浓度对果胶提取率的影响最大,因此在其
他条件相同的情况下,进一步确定草酸 -草酸铵缓
冲溶液的浓度,结果如图 1 所示:
图 1 缓冲液浓度对剑麻果胶产率的影响
Fig. 1 Effect of buffer solution concentration on pectin yield
from sisal
由图 1 可知,随着草酸 -草酸铵缓冲液浓度的
升高,果胶的提取率逐渐增大,当浓度为 2. 2 mol /L
时,果胶的产率达到最大,继续升高缓冲液浓度,果
胶产率不再增大反而下降.因此,确定草酸 -草酸铵
缓冲溶液的最佳提取浓度应为 2. 2 mol /L.
2. 2 H2O2 质量分数对剑麻果胶颜色及产率的影响
在果胶溶液中加入不同质量分数的 H2O2 脱色,
比较脱色效果和果胶得率,结果如表 3.随着 H2O2 质
量分数的增大,果胶的脱色效果越来越好.但是由于
H2O2 有强氧化性会破坏果胶分子,影响果胶的得
率,所以从脱色效果和得率两方面考虑,果胶溶液中
过氧化氢质量分数为 1. 8% 时为最佳.
表 3 H2O2 质量分数对剑麻果胶脱色效果的影响
Tab. 3 Effect of hydrogen peroxide concentration on decol-
oration of pectin from sisal
w(H2O2)/% 颜色 果胶产率 /%
0 褐色 12. 24
0. 6 浅褐色 8. 77
1. 2 浅褐色 8. 59
1. 8 浅黄色 8. 40
2. 4 浅黄色 5. 36
3. 0 浅黄色 5. 17
2. 3 剑麻果胶的分离
2. 3. 1 沉淀剂对果胶产率的影响 选择 CaCl2、
(NH4)2SO4、乙醇作为果胶的沉淀剂,研究不同的沉
淀剂对果胶产率的影响,结果表明,3 种沉淀剂均能
使果胶析出,采用 CaCl2 作为沉淀剂时,果胶产率为
8. 64%,(NH4)2SO4 沉淀果胶产率为 4. 77%、乙醇沉
淀果胶产率最高,为 10. 60%,因此选用乙醇来沉淀
果胶.
2. 3. 2 醇析 pH对果胶产率的影响 控制乙醇沉淀
时的 pH,研究不同 pH对沉淀效果的影响,结果如图
2.当溶液 pH <4 时,果胶的沉淀率随 pH的增大而升
高,而当 pH > 4 时,果胶沉淀率随 pH 增大而减小,
在溶液 pH =4 时,果胶得率最高,达 14. 87% .这是因
为果胶是弱酸性物质,在酸性条件下稳定,pH偏离 4
时,果胶会带上电荷而呈溶解状态,不利于醇析. 且
pH越低,果胶的糖苷键和酯键的水解程度也会加
大,更不利于醇析沉淀. 因此调节醇析时的 pH = 4,
使果胶易于沉淀析出.
图 2 pH对果胶沉淀效果的影响
Fig. 2 Effect of pH on the result of pectin precipitation
2. 4 果胶理化性质
2. 4. 1 剑麻果胶鉴别 剑麻果胶浅黄绿色,无异
味.溶于 40 倍水中呈粘稠状液体,说明其溶于水;加
入乙醇,即出现悬浮絮状沉淀,说明剑麻果胶不溶于
乙醇;剑麻果胶与蔗糖和柠檬酸按一定比例混合,在
一定条件下加热,冷却后呈现柔软而有弹性的胶冻,
说明果胶具有胶凝性.
97第 1 期 陈芳艳等:剑麻渣果胶提取工艺的研究
2. 4. 2 剑麻果胶质量分析 果胶是一种食品添加
剂,国家对其有一定的质量标准.本文分别检测了剑麻
果胶的半乳糖醛酸含量、酯化度、pH和灰分,并与国家
轻工业标准[7]进行对比,结果如表 4.由表 4 可知,剑
麻果胶几项指标均符合国标,可用作食品添加剂.剑麻
果胶的酯化度为 23%,低于 50%,属于低酯果胶.
表 4 剑麻果胶质量指标
Tab. 4 Quality index of sisal pectin
指标 测定值
国家轻工业
标准[7]
w总(半乳糖醛酸)/% 66. 0 ≥65. 0
酯化度(DE)/% 23. 0 高酯果胶:DE≥50
低酯果胶:DE < 50
pH(25℃) 6. 67 高酯果胶:2. 6 ~ 3. 0
低酯果胶:4. 5 ~ 7. 0
w(灰分)/% 3. 00 ≤5
3 讨论与结论
果胶的提取方法主要有酸法[8]、离子交换法[9]、
微波法[10-12]、超滤法[13-14]、酶法[15]和草酸铵法[16]
等.剑麻果胶含量丰富,每 100 g 新鲜剑麻柄中含糖
量约 6. 6 %、蛋白质 2. 2%、纤维 60%、果胶 5. 29%、
淀粉 11. 5%[17].本试验以去除了纤维后的风干剑麻
渣为材料提取果胶,采用 pH 3 的 2. 2mol /L 草酸 -
草酸铵缓冲溶液在温度为 80 ℃、反应时间 90 min的
条件下提取,然后用乙醇在 pH4. 0 的条件下沉淀,剑
麻果胶得率可达到 14. 87%,而过去单独用草酸铵溶
液从其他材料中提取果胶的得率由 3. 82% 到
11. 59%不等[16-20]. 可见,用草酸 -草酸铵缓冲溶液
从剑麻渣中提取果胶的得率较高.
剑麻果胶黄褐色,很难满足市场的需求,因此需
对果胶进行脱色处理. 目前较为成熟的果胶脱色方
法有:活性碳脱色、醇氨溶液脱色、过氧化氢脱色、树
脂脱色等[21].本试验选用了活性炭和 H2O2 2 种方法
进行脱色,虽然采用活性碳脱色效果明显,但活性炭
颗粒会混入果胶中,无论是过滤还是在12 000 r /min
的条件下超速离心,都无法将活性炭从果胶溶液中彻
底去除. H2O2 的脱色效果好,脱色后处理简单,但由于
H2O2 有强氧化性会使果胶分子受到破坏,影响产率.
通过对 H2O2 用量与脱色效果及产率的比较,可以看
出果胶提取液中 H2O2 质量分数控制在1. 8% ~
2. 4%,果胶的脱色效果好,产率高.本研究也曾利用
还原剂亚硫酸钠进行脱色,但脱色效果不理想.
果胶沉淀方法有盐析法[22]和醇沉淀法[23].本研
究对 CaCl2,(NH4)2SO4 和乙醇 3 种沉淀剂的沉淀效
果进行了比较. 用乙醇沉淀的果胶产率最高,CaCl2
次之,(NH4)2SO4 最低. 虽然采用乙醇和 CaCl2 沉
淀,二者间的产率相差不是很大,但采用 CaCl2 沉淀
问题较多,CaCl2 用量多会造成果胶的过滤、洗涤较
困难,烘干后的果胶成品有细小的白色颗粒,用量少
则沉淀不彻底.因此,选用乙醇作为剑麻果胶的沉淀
剂,工艺简单,得到的果胶色泽好、灰分少,但也存
在乙醇的用量大,不易回收,能耗大,生产成本高等
问题.据报道,在痕量电解质存在的条件下,沉淀会
更完全,这可能由于离子在果胶分子间形成了桥梁,
使果胶分子连接、聚合,从而加速了果胶沉淀,一般
选用 HCl作为电解质加入到乙醇中[23].在乙醇沉淀
时利用 HCl控制提取液 pH4. 0,沉淀效果更加理想,
使果胶产率提高到 14. 87% .
该法制备的剑麻果胶各项指标均符合国家标
准.剑麻果胶为低酯果胶,天然低酯果胶很少,它在
Ca2 +或其他二价阳离子存在下,有糖或无糖均能形
成性质优良的凝胶. 与高酯果胶只能在可溶性固形
物高于 55%才能胶凝而主要用于高糖类食品的生产
相比,低酯果胶更符合人们低糖、低热量食品的消费
观念,因此有着广阔的市场前景[24].
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【责任编辑 李晓卉
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【责任编辑 李晓卉】
18第 1 期 陈芳艳等:剑麻渣果胶提取工艺的研究