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GC-MS法研究深裂竹根七挥发性成分



全 文 :GC-MS法研究深裂竹根七挥发性成分
林奇泗,杨冬芝,牟杰
(徐州医学院药学院,江苏徐州 221004)
摘 要:分析深裂竹根七的挥发性成分。分别用索氏提取器和水蒸气蒸馏装置提取深裂竹根七,并对提取物用 GC-
MS联用仪进行测定,峰面积归一化法测定各成分的相对含量。从深裂竹根七水蒸气蒸馏提取物中鉴定了 11种组分,
占总峰面积的 78.6 %;从深裂竹根七索氏提取物提取物中鉴定了 10种组分,占总峰面积的 69.0 %。两种提取方法得
到的挥发性成分主成分有一定不同,本研究为深裂竹根七的综合开发提供了参考依据。
关键词:深裂竹根七;气质联用;挥发性组分
Analysis of the Volatile Components of Disporopsis perryi by GC-MS
LIN Qi-si,YANG Dong-zhi,MOU jie
(School of Pharmacy,Xuzhou Medical College,Xuzhou 221004,Jiangsu,China)
Abstract:Analyze the volatile chemical constituents of Disporopsis perryi. The volatile chemical constituents
were obtained by Naphtha extraction device and Soxhlet extraction device respectively, which were subjected to
GC-MS analysis. Area normalization method was used to determine the relative content of each constituent.
11 components were identified in the steam distillation extract, representing 78.6 % of the total oil compositions;
10 components were identified in the Soxhlet extraction device extract, representing 69.0 % of the total oil
compositions. There was remarkable difference of volatile components checked in the Disporopsis perryi among
two extraction methods.It is helpful to provide reference data for Disporopsis perryis comprehensive utilization.
Key words:Disporopsis perryi;GC-MS;volatile components
基金项目:江苏省教育厅课题(10KJB350005)
作者简介:林奇泗(1980—),男(汉),讲师,博士,研究方向:药物
分析。
食品研究与开发
Food Research And Development
2014年 2月
第 35卷第 3期分离提取
DOI:10.3969/j.issn.1005-6521.2014.03.005
深裂竹根七(Disporopsis perryi(Hua)Diels),又名
黄脚鸡、十样错等,为百合科(Liliaceae)竹根七属
(Disporopsis)植物 [1],是一种民间常用的中药,其根具
有养阴润肺、生津止渴等功效。多用于虚汗多咳、产后
虚弱、月经不调等症,有的还用于感冒扁桃体炎、眼结
膜炎等症[2]。
目前对深裂竹根七的化学成分研究仅限于初步
的探讨,如《现代本草纲目》只记载深裂竹根七包含甘
露糖、果糖等单糖及多糖成分[3]。Yang QX等阐述了深
裂竹根七中所含有的几种主要以甾体皂苷为主的化
合物[4]。张素英对深裂竹根七根的化学成分进行了研
究[5],从中确定了 3种成分,分别是 β-胡萝卜苷,△2-
(25R)-螺甾-3β-醇,(25R)-5β-螺甾-3β-醇。但对于
深裂竹根七挥发性组分的研究较为滞后。
本研究分别用索氏提取器和挥发油提取器对深
裂竹根七挥发性成分进行提取,并计算各组分峰保留
指数[6-7],为深裂竹根七成分研究提供实验依据。
1 仪器与材料
QP5050A 气质联用仪:日本 SHIMADZU 公司;
HH-2数显恒温水浴锅:浙江省嘉兴市俊思仪器设备
厂;HH-3数显恒温油浴锅:江苏金坛市江南仪器厂;
SC-97自动三重纯水蒸馏器:上海亚荣生化仪器厂;
BS110电子天平:德国 Sartorius公司;PE-52AA型旋
转蒸发仪:上海亚荣生化仪器厂;SHB-Ⅲ型循环水式
多用真空泵:河南省太康县科教仪器厂。
邻苯二甲基-2甲基丙基酯、棕榈酸、棕榈酸甲酯、
亚油酸乙酯、9,12-十八碳二烯酸、硬脂酸、棕榈酸乙
酯、C16-C30正构烷烃对照品(纯度质量分数>98.0 %,购
自上海阿拉丁试剂公司),无水硫酸钠(分析纯,天津
大茂化学试剂厂),实验用水为实验室自制三重蒸馏
水,正己酸、正己烷均为分析纯,购自山东禹王实业有
限公司。
15
50
μV
25 50
时间/min
0
1211
9
8
7
5
4
3
2
6
(B)索氏提取器法
图 2 深裂竹根七不同提取物的总离子流图
Fig.2 Total ion chromatogram of different extracts of Disporopsis
pernyi(Hua)Diels
深裂竹根七(Disporopsis pernyi(Hua)Diels)药材
于 2011年 8月采自贵州省松桃县,经沈阳药科大学中
药学院贾景明教授鉴定,用水洗去浮土,再用去离子
水冲洗 2、3次,于 40℃条件下烘干,粉碎过二号筛,密
闭存放。
2 方法
2.1 提取与分析方法的考察
2.1.1 提取溶剂的考察
称取深裂竹根七粗粉约 5 g,精密称定,共 5份,分
别加入 20倍溶剂,溶剂依次为石油醚、乙醚、丙酮、正
己烷和乙酸乙酯,采用索氏提取法在 80℃的水浴锅中
提取 8 h,计算得率,结果见图 1。
由图 1可知,石油醚提取所得的浸膏量比其他溶
剂提取得到的浸膏量大,故采用石油醚作为提取溶剂
较好。
2.1.2 色谱柱的选择
气相色谱分析过程中,毛细管柱固定相的种类对
成分的分离有较大的影响。实验中比较了 PEG-20M、
OV-1701和 HP-5三种色谱柱。结果表明,采用 HP-5
非极性毛细管色谱柱,能够实现对深裂竹根七中的脂
肪酸和挥发油等低极性成分较好地分离,色谱峰数目
较多,出峰时间合适,能够满足实验需要。
2.2 提取方法
2.2.1 索氏提取器法
取 20 g深裂竹根七粗粉,加入石油醚 200 mL,用
索氏提取器提取 8 h。将所得提取液分别旋转蒸发浓
缩至近干,再加入石油醚定容至 1.0 mL,用无水硫酸
钠干燥后密封保存,即得供试品溶液 1。
2.2.2 水蒸气蒸馏法
取 20 g深裂竹根七粗粉,用水蒸气蒸馏装置提取
8 h,馏出液经石油醚萃取,并定容到 1.0 mL,用无水硫
酸钠干燥后密封保存,即得供试品溶液 2。
2.3 气相色谱条件
色谱柱为HP-5石英毛细管柱(0.25μm ×0.25mm ×
30 m);载气为 99.999 %的氦气;样口温度 280 ℃;进
样量 1.0 μL;分流比 5 ∶ 1;流速 1 mL/min;升温程序:在
120℃下保持 4 mins,以 10℃/min速度升温至 180℃,
保持 10 mins,以 5 ℃/min速度升温至 270 ℃并保持
35 min。
2.4 质谱条件
离子源为电子轰击(EI)离子源;离子源温度 230℃;
电子能量 70 eV;气相色谱质谱接口温度 230 ℃;质量
扫描范围 m/z 33~500。
2.5 色谱峰的鉴定方法
本研究采用 GC-MS法对深裂竹根七挥发性组分
进行分离、分析和鉴定,通过检索 NIST107谱图库,并
结合保留指数和对照品,对各色谱峰进行了鉴别。各
色谱峰的保留指数依据公式(1)进行计算。
Ix = 100 × [Z + n × lgt′R(x) - lgt′R(z)lgt′R(z+n) - lgt′R(z)
] (1)
t′R(x) < t′R(z) 式中:t′R(x)、t′R(z)、t′R(z+n)分别代表待测物质 x和具有
Z 及 Z+n 个碳原子数正构烷烃的相对保留时间;n=
1,2,……
3 结果与讨论
供试品溶液 1和供试品溶液 2的 GC-MS总离子
流色谱图分别见图 2,化合物的鉴定见表 1。从深裂竹
根七水蒸气蒸馏提取物中鉴定了 11种组分,占总峰面
积的 78.6 %;从深裂竹根七索氏提取物提取物中鉴定
图 1 溶剂考察
Fig.1 The investigation of the solvents
3.0
2.5
2.0
1.5
1.0
0.5
0



/%
石油醚 乙醚 丙酮 乙酸乙酯
溶剂
正己烷
50
μV
25 50
时间/min
0
12
1110
9
8
7
5
4
3
2
1
(A)水蒸气蒸馏法
分离提取林奇泗,等:GC-MS法研究深裂竹根七挥发性成分
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了 10种组分,占总峰面积的 69.0 %。
从结果可知,无论是水蒸气蒸馏法还是索氏提取
法所提取得到的组分都并不全面。可能由于含量太
低,在索氏提取法所得提取物中未检测到甲氧基丁香
酚(Methoxyeugenol)和二十二烷(n-Tetracosane);在水
蒸气蒸馏法所得提取物中未见棕榈酸乙酯(Hexade-
canoic acid,ethyl ester)。故提取方法对深裂竹根七提
取物中挥发性组分的影响非常大。
4 结论
经过 NIST107谱库比对、保留指数计算和对照品
比对,最终鉴别了深裂竹根七中 12种组分。在所鉴别
的组分中,以脂肪酸及其酯类为主。经过提取溶剂和
提取方法的筛选,在气相测定挥发性组分时,仅以谱
库进行比对,所得结果不够准确,因为相似结构易产
生混淆。相同化合物在相同性质的色谱柱上,保留指
数较为稳定,具有参考意义。本研究为深裂竹根七的
应用与产品开发提供参考。
参考文献:
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155-157
[2] 王冠元,聂凤禔.深裂竹根七化学成分研究[J].中成药, 2010, 32
(11):1936-1938
[3] 黄泰康.现代本草纲目[M].北京:中国医药科技出版社,2000:2681
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Disporopsis pernyi[J]. Helv Chim Acta,2004,87(5):1248-1253
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[6] S姚KRBIE B D. Unified retention concept-statistical treatment of Ko-
va′ts retention index[J]. Journal of Chromatography A , 1997(764):
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[7] 徐铸德,赵如松,张晓东.由气相色谱程序升温数据计算恒温保
留指数[J].色谱,1994,12(3):164-165
收稿日期:2013-07-31


成分
鉴别
方法 a
保留
指数 b
相对峰面积/%
水蒸气
蒸馏
索氏提
取器
1 4-烯丙基-2,6-二甲氧
基苯酚
MS,RI 1614.3 4.63 -
2 邻苯二羧酸甲基丙基酯 MS,RI,S 1842.2 1.35 12..65
3 十五烯酸甲酯 MS 1874.5 3.89 4.58
4 棕榈酸甲酯 MS,RI,S 1941.0 26.84 11.40
5 棕榈酸 MS,RI,S 1984.6 8.59 18.43
6 棕榈酸乙酯 MS,RI,S 1995.4 - 0.23
7 9,12-十八碳二烯酸 MS,RI,S 2125.1 4.18 6.48
8 亚麻酸 MS,RI,S 2136.8 0.87 0.43
9 硬脂酸 MS,RI,S 2149.6 25.63 25.82
10 二十二烷酸 MS,RI,S 2203.9 0.54 -
11 二十四烷酸 MS,RI,S 2398.5 0.38 0.87
12 二十五烷酸 MS,RI,S 2497.5 1.67 0.76
Total 78.57 69.00
表 1 深裂竹根七两种提取物的主要成分
Table 1 Major components of two extractions of Disporopsis
pernyi
注:a.鉴别方法:MS,与 NIST107谱库数据进行比对;RI,与文献报
道的保留指数进行比对;S,与对照品进行比对。b. 保留指数
(retention index,RI)根据 C16-C26正构烷烃在 HP-5气柱色谱柱上的
调整保留时间进行计算,取平均值。“-”表示未检测到该组分。
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
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林奇泗,等:GC-MS法研究深裂竹根七挥发性成分分离提取
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