免费文献传递   相关文献

正交试验法优选浙产山药(参薯)炮制工艺



全 文 :第 32 卷 第 7 期
2 0 1 4 年 7 月
中 华 中 医 药 学 刊
CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol. 32 No. 7
Jul. 2 0 1 4





1597


DOI:10. 13193 / j. issn. 1673-7717. 2014. 07. 019
正交试验法优选浙产山药(参薯)炮制工艺
周函钰1,杨培培1,华一卉1,丛晓东1,蔡宝昌2
(1.浙江中医药大学中药炮制技术中心,浙江 杭州 310053;
2.南京中医药大学江苏省中药炮制重点实验室,江苏 南京 210049)
摘 要:目的:确定浙产山药(参薯)的最佳炮制工艺。方法:采用正交试验法和多指标综合加权评分法,以
参薯多糖含量和饮片性状为考察指标,对影响浙产山药(参薯)炒制过程的因素进行考察;结果:参薯的最佳炮制
工艺为温度 155 ℃,炒 11 min,蜜麸量为 10%,转速为 20 r /min;结论:通过验证结果表明,选择的最佳炮制工艺较
为合理,可以指导实际生产。
关键词:参薯;炮制工艺;正交试验;中试规模
中图分类号:R283 文献标志码:A 文章编号:1673-7717(2014)07-1597-03
Study on Preparation Processing Technique of Rhizoma Dioscoreae
Alatae by Orthogonal Experiment
ZHOU Hanyu1,YANG Peipei1,HUA Yihui1,CONG Xiaodong1,CAI Baochang2
(1. Research Center of TCM Processing Technology,Zhejiang Chinese Medical University,Hangzhou 310053,Zhejiang,China;
2. Nanjing University of Chinese Medicine,Jiangsu Provincial Key Lab of Chinese Medicine Processing,Nanjing 210046,Jiangsu,China)
Abstract:Objective:To establish the best processing technique of Rhizoma Dioscoreae alatae stir - frying with bran.
Methods:The best processing technique was gained through determining the content of polysaccharides and the character
of decoction pieces as the index,and the orthogonal design experiment - L9(3
4)was used to investigate the factors of stir
- frying time,temperature,honey - bran amount and rotary speed. Results:The best processing technique was to add
10% honey - bran and stir - fry11 minutes at 155 ℃ and 20 r /min rotary speed. Conclusion:This best processing tech-
nique is feasible,and could guide the production.
Key words:Rhizoma Dioscoreae alatae;processing technique;orthogonal experiment;pilot scale
收稿日期:2014 - 02 - 16
基金项目:国家自然科学基金项目(81173546)
作者简介:周函钰(1989 -) ,女,浙江诸暨人,硕士研究生,研究方
向:中药炮制学及质量控制。
通讯作者:丛晓东(1956 -) ,男,副教授,研究方向:中药炮制学及
质量研究。E-mail:283222761@ qq. com。
参薯来源于薯蓣科植物参薯 Dioscorea alata L.的根茎,
别名毛薯,方山药。参薯在我省均有大面积栽培,有多年栽
培历史,当地地区又习称为“温州山药”[1],我国传统的用
药习惯,也常将其作为淮山药入药[2 - 3],《浙江省中药炮制
规范》亦明确把其列为淮山药的一个品种来源[4],2005 版
《中华人民共和国药典》中没有收载[5]。在《浙江省中药炮
制规范》中明确了浙产山药(参薯)的炮制方法,但对麸炒
山药的炮制工艺描述过于简单,没有量化的指标,而诸如温
度、时间等,对炮制品的质量影响十分重要。本实验在生产
车间按中试规模,以对饮片质量影响较大的炮制温度、时
间、辅料用量以及炒药锅转速等为主要考察因素,以参薯多
糖含量和饮片性状为考察指标,采用正交试验法优选参薯
炮制工艺,以其为产业化作指导。
1 仪器与试药
1. 1 仪器
TU - 1800S紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器
有限责任公司) ,AG285 电子天平(0. 01mg,METTLER,
SWITERLAND) ,LOOYE ZX98 - 1 旋转蒸发仪(上海鲁伊工
贸有限公司) ,DZF - 6050 型真空干燥箱(上海精宏实验设
备有限公司) ;CG - Y75Z 智能化控制炒药机(杭州海善制
药设备有限公司)。
1. 2 试药
参薯,购自浙江瑞安,经浙江中医药大学中药饮片厂郑
建宝鉴定为薯蓣科植物参薯的根茎;蜂蜜为炼蜜(中蜜) ,
麸皮,皆由浙江中医药大学中药饮片厂提供。
葡萄糖对照品购自中国医药(集团)上海化学试剂公
司(纯度≥99%,批号:2005 年 8 月 8 日) ;浓硫酸、无水乙
醇、丙酮、乙醚均为分析纯;水为重蒸水。
5%苯酚溶液:取苯酚 100 g,加铝片 0. 1 g 和碳酸氢钠
0. 05 g,蒸馏,收集 182 ℃馏分。称取此馏分 5 g,加 95 mL
蒸馏水,置棕色试剂瓶中,得 5%苯酚试液。
2%淀粉酶溶液:取 2 g 淀粉酶,加水 100 mL 使溶解,
7951
第 32 卷 第 7 期
2 0 1 4 年 7 月
中 华 中 医 药 学 刊
CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol. 32 No. 7
Jul. 2 0 1 4





1598


即得。
碘 -碘化钾试液:取碘 0. 5 g,与碘化钾 1. 5 g,加水 25
mL使溶解,即得。
2 方法与结果
2. 1 粗多糖的制备
称取各工艺制得的参薯麸炒品(小块状)各 10 g,加 10
倍量体积的蒸馏水,回流 1. 5 h,重复两次,合并两次的滤
液,室温放凉,加入 2%新鲜配制淀粉酶溶液,60 ℃水浴保
温 5 min,以碘 -碘化钾试管反应呈阴性(不变蓝)为止,溶
液抽滤,弃去滤渣。滤液减压浓缩至一定体积,以 95%乙
醇醇沉至含醇量为 80%,静置过夜。抽滤,滤渣依次以无
水乙醇、丙酮、乙醚洗涤,50 ℃真空干燥,即得参薯粗多糖。
2. 2 供试品制备
精密称定参薯麸炒品粗多糖 5 mg,加蒸馏水溶解,稀
释定容于 50 mL容量瓶中,摇匀,备用。
2. 3 对照品制备
精密称定 105 ℃干燥至恒重的无水葡萄糖 50 mg,加
蒸馏水溶解,定容于 100 mL 容量瓶中,摇匀的对照品储备
液。准确吸取此溶液 1、2、3、4、5、6、7 mL 转移至 50 mL 容
量瓶中,稀释至刻度,摇匀,备用。得 0. 01、0. 02、0. 03、
0. 04、0. 05、0. 06、0. 07 mg /mL系列对照品溶液。
2. 4 方法学考察
2. 4. 1 波长选择 精密移取对照品原溶液、样品溶液、蒸
馏水各 2 mL,分别加入 5%苯酚溶液 1 mL,再垂直快速加
入浓硫酸 7 mL,振摇。100 ℃水浴 20 min,然后放入冰水中
冷却至室温。在 200 ~ 600 nm 间扫描。结果表明,对照品
原溶液、样品溶液在 483 nm 处有最大吸收,且此处空白溶
液无干扰,因此确定检测波长为 483 nm。
2. 4. 2 标准曲线的绘制 分别准确吸取系列标准溶液 2
mL于具塞试管中,以蒸馏水 2 mL做空白,按“2. 4. 1”下方
法测定吸光度。以标准品浓度 X为横坐标,吸光度 Y为纵
坐标绘制标准曲线,回归方程为:Y =13. 961X - 0. 0023,r =
0. 9998(n = 7) ,结果表明在 0. 01 ~ 0. 07 mg·mL -1范围内
线性关系良好。
图 1 葡萄糖标准曲线
2. 4. 3 精密度实验 精密吸取参薯麸炒品多糖供试液(工
艺 6 样品,下同) ,按“2. 4. 1”下方法连续 6 次测定吸光度,
结果 RSD = 0. 07%,可见该方法精密度良好。
2. 4. 4 重复性实验 精密称取粗多糖 5 mg 各 6 份,加蒸
馏水溶解,定容于 50 mL容量瓶中,摇匀。按“2. 4. 1”下方
法测定吸光度,计算其中多糖含量,得平均含量为71. 49%,
RSD = 2. 86%,可见重现性良好。
2. 4. 5 稳定性实验 精密吸取参薯麸炒品多糖供试液,在
0、10、20、30、60、90、120、180 min 按“2. 4. 1”下方法测定吸
光度,结果 RSD = 0. 25%,可见样品在 3 h内稳定。
2. 4. 6 加样回收率实验 精密称取参薯麸炒品多糖 6 份,
每份 5 mg(含多糖约 3. 7 mg) ,分别精密加入相当于多糖含
表 1 加样回收率结果
编号
样品量
(mg)
多糖含
量(mg)
加入葡萄
糖量(mg)
测得量
(mg)
回收量
(mg)
回收率
(%)
0 5. 00 3. 70 - 3. 71 - -
1 5. 05 3. 74 3. 00 6. 76 3. 02 100. 65
2 5. 05 3. 74 3. 00 6. 67 2. 94 97. 86
3 5. 04 3. 73 3. 73 7. 57 3. 84 102. 97
4 5. 04 3. 73 3. 73 7. 35 3. 62 96. 96
5 5. 01 3. 71 4. 45 8. 05 4. 34 97. 51
6 5. 02 3. 71 4. 45 8. 12 4. 41 99. 02
均值与
方差
珋x ± s = 99. 16% ±2. 28,RSD = 2. 30%
量 80%、100%、120%的葡萄糖,加蒸馏水溶解,稀释定容
到 50 mL容量瓶中,摇匀。按“2. 4. 1”下方法测定吸光度,
计算回收率。结果见表 1。
3 麸炒参薯工艺优选
3. 1 因素水平设计
《浙江省中药炮制规范》收载的为蜜炙麸炒参薯,由于
其中没有具体可量化的操作工艺参数,给生产和质量控制
带来不便,因此本试验选用智能化控制炒药机,采用正交设
计来对炒制温度、炒制时间、加麸量、滚筒转速进行优选。
参考文献的基础上,选用麦麸与蜂蜜比例为 5 ∶ 1(炼蜜工艺
116 ~ 118 ℃,拌润炒干) ,以温度(A)、时间(B)、蜜麸量
(C)和转速(D)为考察因素,每个因素取 3 个水平,以多糖
得率、性状为指标综合进行参薯麸炒工艺的考察。因素水
平见表 2。
表 2 因素水平表
水平
温度(℃)
A
时间(min)
B
蜜麸量(%)
C
转速(r /min)
D
1 125 8 10 20
2 155 11 15 25
3 185 14 20 30
3. 2 试验及结果
按表 3 的试验制备样品,取蜜麸皮,撒入热锅内,待冒
烟时加入 10 kg参薯饮片,炒至焦黄色,取出筛去多余的麦
8951
第 32 卷 第 7 期
2 0 1 4 年 7 月
中 华 中 医 药 学 刊
CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol. 32 No. 7
Jul. 2 0 1 4





1599


麸,放凉后即得。
多糖得率为取样样品中多糖的含量;性状评分从麸炒
参薯饮片表面、断面、气味 3 个方面评定,分 5 个等级,最高
5 分,最低 1 分。综合得分 =(多糖含量 /多糖含量最大值)
× 100 × 50% +(颜色得分 /颜色得分最大值)× 100 × 20%
+(气味得分 /气味得分最大值)× 100 × 10% + (断面得
分 /断面得分最大值)× 100 × 20%,结果见表 3。
表 3 正交试验结果
试验
因素
A B C D
试验结果
多糖得
率(%)
颜色 气味 断面
综合
评分
1 1 1 1 1 3. 32 1 1 1 35. 04
2 1 2 2 2 2. 54 1 1 1 29. 16
3 1 3 3 3 2. 95 2 2 2 42. 25
4 2 1 2 3 5. 84 4 3 2 74. 04
5 2 2 3 1 4. 39 4 4 3 69. 11
6 2 3 1 2 6. 63 3 5 4 88. 00
7 3 1 3 2 3. 03 5 4 3 62. 85
8 3 2 1 3 4. 69 3 3 5 73. 37
9 3 3 2 1 6. 48 2 2 2 68. 87
Ⅰj 106. 44 171. 93 196. 41 173. 01 SUM 542. 68
Ⅱj 231. 15 171. 63 172. 07 180. 01 CT 32722. 25
Ⅲj 205. 09 199. 12 174. 21 189. 66
Rj 124. 71 27. 48 24. 34 16. 65
直观分析:由极差(R)可以看出:对综合评分影响的因
素,大小依次为 A > B > C > D;对 A 因素ⅡA >ⅢA >ⅠA,B
因素有ⅢB >ⅠB >ⅡB,C 因素有ⅠC >ⅢC >ⅡC,D 因素有
ⅢD >ⅡD >ⅠD直观分析最佳工艺为 A2B3C1D3。
方差分析:由表 4 可以看出,以 D 因素为误差项,A 因
素的 P < 0. 05,B因素的 P > 0. 05,C 因素的 P > 0. 05,表明
A因素因麸炒工艺有显著影响,其他因素无显著影响。综
合直观分析,结合生产实际,确定最佳工艺 A2B2C1D1,即温
度 155 ℃,炒 11 min,蜜麸量为 10%,转速为 20 r /min。
表 4 方差分析表
方差来源
离均差
平方和
自由

均方 F值
F临
界值
P值
A 2884. 78 2 1442. 39 61. 94 19. 00 P < 0. 05
B 166. 06 2 83. 03 3. 57 19. 00 P > 0. 05
C 121. 11 2 60. 55 2. 60 19. 00 P > 0. 05
D(误差列) 46. 57 2 23. 29
3. 3 验证试验
取参薯生品适量,采用优选出的工艺条件炮制 3 批,结
果性状均为 5 分,多糖含量分别为 6. 80%、6. 79%、6. 78%,
加权评分均在 90 分以上,说明优选工艺稳定,可靠。
4 讨 论
山药作为常用药材及食疗用料,其炮制方法不同,对其
功用的影响也不同,蜜麸制的山药在一定程度上已保证了
较高的多糖含量,也保证了炮制品的功效作用大小[9 - 11]。
通过以上研究,总结在实际操作中的要点和意义。
考虑到参薯中含有较多的粘液质和大量淀粉,实验考
察了不同的粗多糖制备工艺:①粉末状,不同温度(40 ℃、
60 ℃、80 ℃、100 ℃)条件下浸提;②粉末状,纱布包煎;③
小块状,不同温度(同上)条件下浸提。结果,方法①出现
稠胶状,难以过滤;方法②容易糊底,损失较大;方法③100
℃条件下浸提率高,提取液不成胶状,确定采用方法③。然
后用淀粉酶除去淀粉,便于过滤。
结合生产实际,炒制温度的设置在 125 ~ 185 ℃范围。
温度太低,则炒制时间过长;太高,则麸皮易燃烧,导致饮片
炭化,饮片性状均不能达到最佳。
本实验是在生产车间按中试规模进行研究的,摒弃在实
验室优化工艺的不足,优选出的工艺可以直接应用于生产当
中。炮制过程中,所选用的炮制设备也很重要,本实验选用了
由杭州春江自动化研究所研制开发的智能化控制炒药机,可
以设定所需考察参数,便于优化,为炮制规范化提供了示范。
参考文献
[1] 姜程曦.温州地区山药资源的调查研究[J].农技服务,2009,
26(9) :109 - 110.
[2] 中国科学院植物研究所.中国高等植物图鉴(第 5 册) [M].
北京:科学出版社,1987:568.
[3] 张贵君.常用中药鉴定大全[M].哈尔滨:黑龙江科学技术出
版社,1993:56.
[4] 浙江省食品药品监督管理局. 浙江省中药炮制规范[S]. 杭
州:浙江科学技术出版,2006:25.
[5] 国家药典委员会.中华人民共和国药典:1 部[S].北京:化学
工业出版社,2005.
[6] 蔡宝昌,麸炒山药的制备工艺[P]. 中国:200410014914. X,
2005. 11. 23.
[7] 段启,马兴田,李彩萍,等. 麸炒白术炮制工艺优选[J]. 中草
药,2008,39(10) :1504 - 1505.
[8] Zhang Y - W,Shen Z - X,Liu C - L,et al. A new chiral cata-
lyst for the enantioselective reduction of prochiral ketones with
borane[J]. Synth Commun,1995,25 (21) :3407 - 3411.
[9] 王海波.山药炮制历史沿革的研究[J]. 中医研究,2008,21
(6) :22.
[10] 杨武德.山药及不同炮制品多糖含量分析[J]. 贵阳中医学
院学报,2004,26(3) :61.
[11] Naoto Hashimoto. Yam Contributes to Improvement of Glucose Me-
tabolism in Rats[J]. Plant Foods Hum Nutr,2009,64:
檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪
193 -198.
剖宫产孩子肥胖危险大增
美国一项新研究发现,剖宫产的孩子日后发生体重超
标或肥胖的危险比自然分娩的孩子高出近一倍。
纽约大学医学院对 1. 4 万多名英国儿童的病历进行了
分析。结果发现,剖宫产的孩子刚出生时平均体重比自然
分娩的轻 2 盎司(约合 57 克) ,但之后,即便考虑到母亲体
重和母乳喂养等因素,剖宫产的孩子在 6 周内,体重会一直
大于自然分娩的孩子。到 3 岁时,1 /3 参试孩子体重超标,
7 岁和 15 岁时,这些孩子肥胖症发病率达到 17%。与自然
分娩的孩子相比,剖宫产出生的孩子到 1l 岁时发生体重超
标的危险高出 83%。这项新研究进一步证实剖宫产与儿
童肥胖密切关联。
研究人员分析指出,自然分娩的孩子接触产道细菌有
助于日后调节其新陈代谢状况,而剖宫产的孩子需要更长
的时间才能获得必要的有益菌,以增强其身体新陈代谢功
能。为此,研究人员强调,为了母婴健康,通常情况下,产妇
最好选择自然分娩。
9951