全 文 ：— 65 —现代中药研究与实践2009年第23卷第4期Research and Practice of Chinese Medicines
北重楼 Paris verticilla M.-Bieb. 是百合科重楼
属植物，药用部位为根茎，多用于治疗高热抽搐，
热病烦躁，咽喉肿痛等 ；外用治疗痈疖肿毒，毒蛇
咬伤 [1]。其含多种甾体皂苷，其中薯蓣皂苷元的糖
苷是重楼的主要活性成分 [2]。北重楼主要分布在黄
河以北地区，资源比较丰富，但是北重楼的根茎细
小且生长速度极其缓慢，而地上部分生长较快，目
前尚未很好地开发利用。因此本实验采用反高效液
相色谱法 [3] 分别测定了北重楼不同部位的薯蓣皂苷
元含量，旨在为开发利用北重楼的地上部分，为扩
大药用部位提供依据。
1 仪器与材料
Agilent1100 高效液相色谱仪，乙腈为色谱纯，
水为重蒸水，其它试剂均为分析纯。薯蓣皂苷元对
照品（中国生物制品检定所，含量测定用，批号 ：
1539-200001）；北重楼经本校刘娟教授鉴定为百合
科植物北重楼 Paris verticilla M.-Bieb。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱 ：Zorbax-Extend-C18 (4.6
mm×250 mm,5 μm) ；柱温 ：40 ℃ ；流动相 ：乙腈 :
RP-HPLC 法测定北重楼中薯蓣皂苷元的含量
毛淑敏 1，刘 娟 2
(1. 莱芜职业技术学院，山东 莱芜 271100 ；2. 佳木斯大学化学与药学院，黑龙江 佳木斯 154007)
摘要：目的 建立反相高效液相色谱法测定北重楼中薯蓣皂苷元的含量,以能充分开发利用该药材资
源。方法 采用反相高效液相色谱法，以Zorbax-Extend-C18柱为固定相，乙腈-水（86：14）溶液为流动
相，检测波长203 nm。结果 薯蓣皂苷元在0.164 8~1.812 μg范围内线性关系良好（r=0.999 8），加样回收
率为102.8%（RSD=3.33%）。结论 该法操作简便、准确、可靠，可为北重楼的质量控制提供依据。
关键词：北重楼；薯蓣皂苷元；反相高效液相色谱法；含量
中图分类号：R927.2 文献标识码：A 文章编号：1673-6427(2009)04-0065-02
收稿日期：2008-11-26
Determination of Diosgenin from Paris vertilla by RP-HPLC
MAO Shu-min, LIU Juan
(1. Laiwu Vocational and Technical College,Laiwu 271100;2.Chemistry and Pharmacy College in Jiamusi
Univerity,Jiamusi 154007 )
Abstract: Objective To determine the contents of diosgenin in Paris vertilla by RP-HPLC, in order
to exploit and use this medical resource. Methods Zorbax-Extend-C18 column was used in RP-HPLC with
mobile phase of acetonitrile-water(86:14),detector wavelength was 203nm. Results The linear range was 0.164
8~1.812μg(r=0.999 8).The average recovery and RSD were 102.8% and 3.33%, respectively. Conclusion This
method is simple, accurate and reliable , and can be used for the quality control of diosgenin in Paris verticilla.
Key words ：Paris vertililla; diosgenin; RP-HPLC; quality
水 =86：14 ；流速 ：1.0 mL/min ；检测波长 ：203
nm；进样量 ：20 μL。选定条件下，薯蓣皂苷元能
与其它组分的色谱峰达到基线分离，与其相邻色谱
峰的分离度大于 1.5，按照薯蓣皂苷元的色谱峰计
算，理论塔板数 4 000 以上。
2.2 对照品溶液制备 精密称取薯蓣皂苷元对照
品，加甲醇制成 0.16 mg/mL 对照品溶液。
2.3 供试品溶液制备
2.3.1 供试品的处理 取北重楼根茎、茎、花叶等
部分，分别粉碎，过 50 目筛后用于分别提取。提取
方法为 ：加石油醚（60~90 ℃），超声振荡 2 h，弃
石油醚，得到的提取物经挥干溶剂后 60 ℃干燥，分
别编号，密封备用。
2.3.2 供试品溶液制备 取干燥后的提取物约 1 g，
精密称定，加甲醇 50 mL，加热回流提取两次，每
次 3 h，回收甲醇至干，加 2 mol/LHCL 20 mL，置
沸水浴中水解 2 h，冷却后石油醚（60~90 ℃）萃取
3 次，每次 20 mL，合并萃取液，水洗至中性，回
收石油醚至干，残渣用甲醇溶解，定容于 10 mL 容
量瓶中，作为供试品溶液。
2.4 线性关系考察 精密吸取对照品溶液 1、
3、5、7、9、11 μL 按上述色谱条件测定，以峰
DOI:10.13728/j.1673-6427.2009.04.016
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面积为纵坐标，进样量为横坐标绘制标准曲线，
Y=624.65X － 6.931，r=0.999 8，结果表明进样量
在 0.164 8~1.812 μg 范围内呈良好线性关系。
2.5 精密度试验 精密吸取对照品溶液各 5 μL，重
复进样 5 次，记录峰面积，结果薯蓣皂苷元峰面积
的 RSD=0.71%。
2.6 重复性试验 取同一批样品，按 “2.3” 项下平
行制备 5 份，进样，测定含量，薯蓣皂苷元含量的
RSD=2.10%。
2.7 稳定性试验 取同一供试品溶液，分别在 0、4、
8、12 和 24 h 进样，RSD=2.15%，表明样品的稳定
性良好。
2.8 加样回收率试验 精称已知含量的样品 1 g，
共 6 份，分别加入薯蓣皂苷元对照品溶液 1 mL，按
上述方法进行提取、进样、测定，结果薯蓣皂苷元
平均回收率为 102.8%，RSD=3.33%。
2.9 样品的测定 分别精密吸取供试品溶液 20 μL
测定，计算含量，结果见表 1 和图 1。
3 小结与讨论
3.1 北重楼的各个部位均含有薯蓣皂苷元，由于北
重楼的传统药用部位根茎比较细小，采挖时也比较
困难，可以考虑开发利用其地上部分。
3.2 提取时先用石油醚除掉脂溶性杂质，以减少对
样品色谱峰的干扰，同时也降低对色谱柱的污染。
3.3 柱温的高低影响分离效果及出峰时间，最后选
用了 40℃。
3.4 在色谱条件的优化过程中，乙腈与水的配比分
别试用了 90：10，80：20，85：15，83：17，86：
14，87：13 的比例，结果表明，86：14 时，色谱
峰保留时间比较适合，峰形也较好，因此选用该配
比作为流动相。
参考文献
[1] 朱有昌主编.东北药用植物[M].哈尔滨：黑龙江科学技术出版社.1989，
15-159.
[2] 汤海峰，赵越平，蒋永培．重楼属植物的研究概况 [J]．中草药，
1998，29（12）：839-842.
[3] 韦建荣,董 汛.重楼中薯蓣皂甙元的反相高效液相色谱测定[J].色谱，
1999，17（5）：498-499.
表1 样品薯蓣皂苷元含量测定结果（n=3）
Tab.1 Results of diosgenin determined
编号
1
2
3
4
部位
根茎
茎
叶
花
薯蓣皂苷元含量（mg/g）
0.097
0.199
0.176
0.322
图1 色谱图
Fig.1 HPLC chromatogram of Paris vertililla
感愈胶囊微生物限度检查方法验证
王荭晖，徐庆辉
（安徽省黄山市药品检验所，安徽 黄山 245000）
摘要：目的 建立感愈胶囊微生物限度检查法。方法 按《中国药典》现行版规定的方法试验，以回
收率对方法的有效性进行评价。结果 采用直接接种法和培养基稀释法（0.5 mL/ 皿），5 种阳性菌回收率均
＜ 70% ；采用培养基稀释法（0.1 mL/ 皿），黑曲霉菌和白色念珠菌回收率＞ 70% ；采用薄膜过滤法，3 种
阳性菌回收率均＞ 70%。结论 本品微生物限度检查法中细菌检查应采用薄膜过滤法，霉菌（酵母菌）检
查和控制菌检查应采用直接接种法。
关键词：感愈胶囊；微生物限度检查；方法验证
中图分类号：R927.1 文献标识码：A 文章编号：1673-6427(2009)04-0066-04
收稿日期：2009-02-17