全 文 ：药物分析杂志 C ih n J Ph ~ A n d Z (X”
,
24 ( 5)
酚醋用含水的溶剂 (水和甲醇 )进行处理 , 主成分水
解很快 ,而用无水乙醇作为溶剂 ,效果较好 。
1.0 2 在建立液相色谱测定方法的过程中 , 曾选用
1 : ( 甲醇 一 水 ) 、 2 : ( 甲醇 一 磷酸盐缓冲液 ) 、 3 : [甲
醇 一 0 . 0 2 m d · L 一 ’ 庚烷磺酸钠溶液 (用磷酸调 p H
至 2 . 0 ) 〕为流动相 ,其中系统 l 、 2 的流动相也控制
在酸性条件 , 经试验表明 : 系统 1 、 2 出峰很快 , 保
留时间大约为 2 m in ,且色谱峰拖尾 ,而系统 3 出峰
时间在 7 m in 左右 , 且峰形很好 ,故选择系统 3 作
为流动相 。
1.0 3 HPL C 测定法改变了原方法烦琐的前处理步
骤 ,具有样品预处理简单 、 测定快速 (约 10 m in 即可
完成分析 ) , 方法重复性好 、 专属性强等特点 , 可以
作为控制盐酸甲氯芬醋胶囊质量的有效方法 。
(本文于 2X() 3 年 1 月 20 日收到 )
反相高效液相色谱法测定山药及其
同属植物参薯中薯孩皂昔元的含量 ’
史会齐 李明静 宋爱新 刘绣华*
(河南大学化学化工学院 河南大学功能材料省级重点实验室 开封 4 75 0 1)
摘要 目的 :建立反相高效液相色谱法测定山药中薯孩皂昔元含量 ,考察不同产地山药及其同属植物中薯茨皂昔元的含量。
方法 :采用 A igl e nt o DS 色谱柱 (5 卿 , 4 . 6 ~ x 2 50 ~ ) , 以甲醇 一 水 ( 95 : 5) 为流动相 ,流速 1 . o mL · 而 n 一 ’ ,柱温 30 ℃ ,检测
波长为 2 15 n m 。 结果 :在此色谱条件下 ,各样品中待测组分均得到 良好分离。 此法测定的线性范围为 5 . 0 一 巧 . 0 此 , r 二
0
.
9 9
,平均回收率为 98 . 3% 。 结论 :本方法灵敏、 准确 、 回收率高 ,适用于生药样品检测和质量控制。
关健词 高效液相色谱法 薯菠皂昔元 山药
R P 一 B r L C D et e们旧 ian 柱on of iD o s g e n l n in
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脚如 hT u nb 二 M het o d ` : hT e A ig le n t O D S e o l u mn ( 5 林m , 4 . 6 m x 2 5 0 m m )~ u s e d at 3 0 ℃ 初 ht m e ht an ol -
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K e y WO 川 5 H P LC , d i o s罗 n i n , Ch in e s e y a m
山药为薯菠科 ( iD os co er ac ea e )植物薯菠 ( iD 一 法 〔’ 〕 。 但对于其中薯菠皂昔元的研究报道甚少 ,
os co ear oP
s沥 hT un .b )的干燥根茎 , 有补脾养 胃· 仅 A da m L . E dw adr s [ ’ 〕证实了山药中薯孩皂昔元的黑戳盒慧履叠瓮盆算老鳖蔚霆 “ “ , 徐礼 , 〔” 用薄” 层 “ ” “ 、 库” 定法测定项 ” 。 我们曾报道了山药中尿囊素的含量测定方 了山药中薯孩皂昔元的含量 , 黄泰康 t 4) 也对其含
国家科技部九五重点科技攻关及河南省科技厅科技攻关资助项目 (编号分别为 :望珍 29() 106 和 0 12 30 31 仪幻 )
通讯联系人 (加爪烟即 .山 9 au bt or )
DOI : 10. 16155 /j . 0254 -1793. 2004. 05. 005
药物分析杂志 h C in J Ph ~ An l aZ以”
,
24 ( 5)
量进行了报道 , 但结果差别较大 。 故建立简单 、 准
确的山药中薯菠皂昔元的含量测定方法具有重要
意义 。 在文献【5 一 7 ] 的基础上 , 运用本文所建立
的方法测定了山药及其同属植物中薯菠皂昔元的
含量 。 结果表明 , 该法简单易行 , 结果准确度高 ,
重复性好 , 为山药质量标准研究提供了一种可靠
的参考方法 。
1 仪器与试药
高效液相色谱仪系统由 ZP o n 高压恒流泵 、
U V20 0 n 紫外检测器 、 cE h or m 98 数据处理装置等
组成 。
甲醇为色谱纯 ,其它试剂均为分析纯 。
山药 ( D动s co er a 呷0 5而 hT u n b . ) , 2X() l 年分别采 自河南武涉 (样品 l , 饮片 ) 、 山东单县 (样品 2 ,
饮片 ) 、 山西 闻喜 (样品 3 , 由鲜药去皮切片后 , 自
然风干自制而成 ) ; 山药的同属植物参薯 ( D . a la at
L
.
)
,
2 0 01 年分别采 自广东汕头 (样品 4 ,饮片 ) 、 广
西 (样品 5 ,饮片 ;) 盾叶薯菠 ( D油co er a iz 鳍汤e er -n
后 c . H . w ir hg itn ) , 20 01 年采 自河南洛宁 。 样品均
由河南省中药研究所崔援军研究员鉴定 。
对照 品薯菠皂昔元为 自制 , 由薯茨皂昔元的
药源植物之一 - 一 盾叶薯莎的根粉中提取 , 为 白
色细针状晶体 。 其 I R 、 ` H N M R 及 , , e NM R 谱图与
标准图谱比较 ,确证为薯菠皂昔元 〔 ` ;] 通过熔点测
定及薄层色谱 、高效液相色谱分析 ,均显示出对照
品为单一成分 ,纯度以高效液相色谱峰面积 (峰面
积归一化法 )计算大于 9 . 9 % 。
2 色谱条件
色谱 柱 : A g ile n t O D S ( 5 林m , 4 . 6 m m x 2 5 0
m m ) ;流动相 : 甲醇 一 水 ( 9 5 : 5 ) ; 流速 : 1 . 0 m L ·
m in
一 ` ;检测波长 : 2 15 n m ;柱温 : 30 ℃ , 进样量 : 20
卜L 。
在该液相色谱条件下 ,色谱图见图 1 。
3 样品溶液的制备川
取干燥样品粉末约 2 . 0 9 ,精密称定 ,置索氏提
取器中 ,加 90 % 甲醇 15 O mL 提取 or h( 温度维持 so
℃ ) ,提取液过滤 , 滤液减压浓缩至 10 mL ,加人 5%
盐酸 一 甲醇 ( 1 : l) 20() mL , 回流 s h , 冷却 ,用 12 m ol
·
L
一 `氢氧化钠溶液调至 p H 二 8, 再用 20 m L抓仿
萃取 3次 ,合并氯仿层 , 浓缩至干 , 用甲醇溶解并定
容于 10 mL 量瓶中 ,待测 。
4 线性关系
精密称取对照品 18 . Z mg ,用甲醇定容于 10 m L
量瓶中 , 配制成 1 . 82 m g · rnL 一 ’ 的对照 品储备液 。
2 4 6 8 10 t ./ i n
图 1 对照品 ( A )及样品 1 ( B )的高效液相色谱图
iF g 1 H P LC e腼m at o gr 也sn Of er fe er n e e s u bs atn e e ( A )
an d saID
p le l ( B )
1
. 薯孩皂昔元 ( id 以唱e m n , 10 . 32 面 n )
精密量取储备液 5 . 5 m L ,加甲醇稀释成 1 . 0 m g ·
mL
一 ’ 的对照 品溶液 。 精密吸取对照 品溶液 5 . 0 ,
7
.
5
,
10
.
0
,
12
.
5
, 巧 . 0 泌 进样 ,按上述色谱条件测
定 , 以薯菠皂昔元峰面积 (均为纵坐标 ,进样量 ( X )
为横坐标 ,绘制标准曲线 , 回归方程为 :
Y = 13 7
.
1 + 8 4 7
.
g X r = 0
.
9 9 9 9
线性范围 5 . 0 一 15 · 0 此 。
5 精密度试验
精密量取同一样品 (样品 l) 溶液 , 连续进样 5
次 ,峰面积平均值为 7 . 950 x 10 , , SR D = 2 . 0% 。
6 重复性试验
精密称取同一批样品 (样品 1 ) 5 份 , 按样品溶
液制备方法操作 , 依法测定 。 其含量的 R SD 为
3
.
5%
。
7 稳定性试验
取样品 (样品 l) 溶液 ,室温放置 ,在上述色谱条
件下于 0 , 1 , 3 d 分别进样 。 测得峰面积平均值为
8
,
05 6
x lo ,
,
R s D = 2
,
4 %
。 结果表明稳定性良好 。
8 回收率试验
取样品 (样品 l) 粉末约 I J x x 〕 g ,精密称定 ,共 7
份 ,分别加人对照品 2 . 6 , 2 . 6 , 2 . 6 , 2 . 7 , 2 . 7 , 3 . 0 , 3 . 0
mg
,按照样品溶液制备方法操作 , 测定 ,求得其回收
率 (% ) 分 别 为 10 1 . 7 , 9 7 . 0 , 9 6 . 2 , 9 4 . 8 , 10 1 . 6 ,
9 8
.
1
,
9 8
.
6
,平均回收率为 9 8 . 3% 。
, 样品测定
在选定的色谱条件下 ,测定不同产地的山药及
其同属植物参薯中薯菠皂昔元的含量 (外标法 ) ,测
药物分析杂志 Ch in JP h ~ An l aZ以只
,
24 ( 5)
定结果见表 1 ,色谱图见图 1 一 B 。
衰 1 不同产地样品中. 孩皂普元的测定结果 ( n 二 3)
T a b 1 1]地et r 苗皿七o n 州留ul is of 山佣留创巨 恤 ~ p les
n ” m d i日触r e n t gl 旧 , , a泊 . 明 ( n 二 3 )
样品号
物 p le N .o
产地
( ,
闻 . 习
~ )
含量 RS D
(
亡加忱以 ) /% /%
58011.0 5众么21山药( D如邵。 、 )
哪护山如 几四 b .
参署 ( .D 公山 L )
1 河南武涉 ( W山灿 , H e n an )
2 山东单县( Sh ar 面 aD , ShaD do叱 )
3 山西闻喜( W e nx l , S巨丽 )
4 广东汕头 ( S坛川 t o u ,伽叫咖 .名)
5 广西(公困夕 j )
0
.肠
0
.
29
0
.
20
0
.
23
.0 19
10 讨论
10
.
1 实验结果的统计处理 用 t 检验法对不同样
品的含量测定结果进行统计处理 ,发现除样品 3 外 ,
其余各样品间薯莎皂昔元含量均无显著性差异 (置 6
信度 o % ) 。 这可能与样品 3 的制备有关 。
10
.
2 文献【3 〕测定山药中薯莎皂昔元含量时 , 样
品需先进行薄层层析制备 ,操作繁杂 , 对于薯菠皂 7
昔元含量低的山药样品来说 ,精密度 、 准确度均不
够高 。 而本实验所建立的方法 , 操作简单 , 灵敏 、
准确 , 适用于生药样品中薯预皂昔元的检测 , 为山
药质量标准的研究提供了参考方法 ;并为薯莎皂
昔元作为薯孩科植物化学分类标志性物质提供可 8
靠依据 。
参考文献
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(本文于 2X() 3 年 10 月 14 日收到 )
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