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年 第卷 第期
紫参薯(Dioscorea alata L.)又名紫山药、紫淮
山，为薯蓣科(Dioscoreaceae)薯蓣属(Dioscrea L.)草
收稿日期：2012-12-25
基金项目：陕西省教育厅自然科学专项(2010JK460)；陕西省薯蓣皂素加工工程技术研究中心子项目(2010ZDGC-23-18)。
作者简介：徐皓(1972—)，女，副教授，研究方向为植物资源开发与利用。
本曼生性植物，因其块茎表皮紫褐色(富含花青素
)而得名[1-2]，而且还是集美味和保健作用于一体的
徐 皓
(陕西理工学院生物科学与工程学院，汉中 723001)
摘要：建立高效液相色谱(HPLC)法测定紫参薯中薯蓣皂苷元的含量，采用Inertsil ODS-3 C18(150
mm×4.6 mm，5 μm)色谱柱，流动相为纯甲醇，柱温25 ℃，流速1.0 mL/min；UV检测波长210
nm，对薯蓣皂元含量进行测定。结果表明：薯蓣皂苷元在9.0～72.0 μg/mL范围内峰面积与
其质量浓度具有很好的线性关系(R2=0.9995)，精密度RSD为1.41%，薯蓣皂苷元的平均含量为
0.064%。该法测定样品准确，重复性好，能快速检测紫参薯中薯蓣皂元的含量。
关键词：紫参薯；高效液相色谱；薯蓣皂苷元
中图分类号：TS 207.3 文献标志码：A 文章编号：1005-9989(2013)06-0307-03
HPLC method to determine the content of diosgenin in Dioscorea
alata L.
XU Hao
(School of Biological Science and Engineering, Shaanxi University of Technology,
Hanzhong 723001)
Abstract: The establishment of high performance liquid chromatography (HPLC) method for the
determination Dioscorea alata diosgenin content using Inertsil ODS-3 C18(150 mm×4.6 mm, 5 μm)
column, mobile phase is pure methanol, column temperature is 25 ℃, flow rate of 1.0 mL/min, UV
detection wavelength is 210 nm, measured results show that diosgenin-containing glycoside content
of diosgenin 9.0~72.0 μg/mL range within the peak area and concentration a good linear relationship
(R2=0.9995), the RSD was 1.41%. The determination of the sample is accurate, reproducible, can the
rapid detection of Dioscorea alata diosgenin content.
Key words: Dioscorea alata L; high performance liquid chromatography method; diosgenin
HPLC法测定紫参薯中薯蓣皂苷元的
含量
DOI:10.13684/j.cnki.spkj.2013.06.023
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绿色蔬菜兼珍贵药材[3]。
紫参薯主要活性成分为薯蓣皂苷，脱糖基反
应后得到薯蓣皂苷元，而薯蓣皂苷元是合成数千
种甾体激素药物的重要原材料 [4-5]。因此测定薯蓣
皂苷元的含量可以间接反映其薯蓣皂苷的含量，
从而实现对紫参薯药材的质量控制。研究表明，
薯蓣皂苷元还具有镇咳平喘、降血脂、抗肿瘤、
抗血小板聚集、防动脉硬化疾病等多种药理作
用，在医药领域用途广泛[6-9]。
本研究充分提取紫参薯中薯蓣皂苷元，利用
高效液相色谱法对浙江紫参薯中薯蓣皂苷元含量
进行检测，以期充分开发利用紫参薯资源，提高
其产品价值，为今后科学地开发利用紫参薯资源
提供理论依据。
1 实验材料与方法
1.1 实验材料
实验材料为浙江黄岩产紫参薯。
1.2 实验方法
1.2.1 样品预处理 将紫参薯清洗干净，晾干，切
片，置烘箱烘烤(80 ℃)至干燥，粉碎。
1.2.2 色谱条件 色谱柱为Inertsil ODS-3 C18(150
mm×4.6 mm，5 μm)；流动相为纯甲醇；流速1.0
mL/min；柱温为25 ℃，UV检测波长为210 nm。
1.2.3 样品溶液制备 称取紫参薯样品粗粉约5
g，置于200 mL圆底烧杯中，加90%甲醇150 mL，
80 ℃下回流10 h，提取过滤，滤液减压浓缩至10
mL。再加入5%盐酸-甲醇(1:1)200 mL回流5 h，回
流后冷却，用12 mol/L NaOH溶液调至pH=8，然后
依次用200、100、100 mL氯仿萃取3次，合并氯仿
层，浓缩至干，最后用甲醇溶解并定容于10 mL量
瓶，待测。
1.2.4 标准品母液制备 精密称取薯蓣皂苷元标准
品4.5 mg，置于25 mL的容量瓶中，加甲醇超声溶
解并稀释至刻度，摇匀，制成0.18 mg/mL的标准品
储备液，经0.45 μm微孔滤膜过滤，冰箱内保存，
备用。
2 实验结果与分析
2.1 标准曲线制备与线性关系考查
精密称取标准品4.5 mg，置25 mL容量瓶中，
加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。分别精密吸取
标准品溶液0.5、1、2、3、4 mL，加甲醇定容至
10 mL，摇匀，得到9.00、18.00、36.00、54.00、
72.00 μg/mL 5个不同浓度梯度的溶液。按1.2.2
色谱条件分别进样10 μL，进样时间20 min，测
定峰面积。以峰面积为纵坐标，以进样量浓度
为横坐标，绘制标准曲线，求得回归方程为：
y=6.3346x+3.9713，相关系数R2=0.9995。结果表
明：薯蓣皂苷元质量浓度在9.0~72.0 μg/mL范围
内线性关系良好，薯蓣皂苷元标品浓度与峰面积
的关系见图1，标准品与样品色谱图见图2、图3。
图3 薯蓣皂苷元样品色谱图
Z Y
3
≿Ꮢ ®HN-
ሜ
䲎
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CT
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CT
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图1 薯蓣皂苷元标准曲线
图2 薯蓣皂苷元标准品色谱图
2.2 精密度、稳定性实验
精密吸取已配制的9.00 μg/mL标准品溶液
10 μL，重复进样5次，测定峰面积，得RSD为
1.41%，表明精密度良好。取36.00 μg/mL标准
品溶液，每隔2 h测定1次，每次10 μL，共测定6
次，得RSD=1.25%，表明标准品溶液在室温、避
光条件下12 h内稳定。
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2.3 重复性实验
精密称取紫参薯粉末5份，每份0.5 g，按1.2.3
方法制备样品溶液，分析测定，计算薯蓣皂苷的
含量。结果表明，薯蓣皂苷元平均含量为387.4
μg/g，RSD=2.11%(n=5)，表明该方法的重复性良
好。
2.4 加样回收率实验
称取已知含量的紫参薯药材6份，按1.2.3方法
提取得到薯蓣皂苷元，分别精密加入0.18 mg/mL
标准品溶液0.50、1.00、1.50、2.00、2.50、3.00
mL，进样10 μL，测峰面积，样品平均加标回收
率为103.2%，RSD=1.61%(见表1)。
表1 薯蓣皂苷元回收率实验
样品质
量/g
薯蓣皂
苷元/mg
加入标准
品/mg
实测值/
mg
回收率
/%
均值
/% RSD/%
5.14 15.57 5.11 20.93 104.9
5.31 16.09 5.20 21.44 102.9
4.96 15.03 5.04 20.16 101.8 103.2 1.61
5.07 15.36 5.16 20.66 102.7
4.86 14.73 5.08 19.89 101.6
5.25 15.91 5.17 21.36 105.4
2.5 样品含量的测定
取同一样品6份于样品瓶中，按1.2.2色谱条件
进行测定，得到样品色谱图见图3，出峰时间与标
准品吻合，与其他物质能有效分离。按外标法以
峰面积计算，测得薯蓣皂苷元含量，结果见表2。
表2 样品中薯蓣皂苷元的含量
样品 样品质量/g
皂苷元含量/
mg
质量分数含量
/% 平均含量/%
1 5 15.746393 0.32
2 5 15.942745 0.31
3 5 15.977492 0.32 0.32
4 5 15.801529 0.31
5 5 15.925463 0.35
6 5 15.793752 0.31
3 讨论
3.1 检测波长的选择
取适量薯蓣皂苷元标准品，用甲醇溶解，在
190~400 nm范围内对标准品进行扫描，测得其
最大吸收峰在210 nm。为确定最佳检测波长，用
高效液相色谱仪光电二极管阵列检测器(DAD检
测器)进一步选择。将测定波长分别设定为206、
207、208、209、210、211、212、213、214、215
nm，在相同条件下进样分析，观察出峰情况。结
果表明：波长在210 nm处薯蓣皂苷元的峰高和峰
面积最大，故确定最佳检测波长为210 nm。
3.2 流动相配比的选择
为获得最佳分离效果，对流动相配比进行了
选择。先设定v(甲醇):v(水)分别为75:25、80:20、
85:15、90:10、95:5，流速为1.0 mL/min，柱温为25
℃。发现v(甲醇):v(水)=90:10和95:5时，薯蓣皂苷
元的保留时间在8 min，而其他配比条件下，保留
时间均在10 min以上。可见应提高流动相中甲醇的
比例，再将v(甲醇):v(水)分别设定为86:4、88:12、
90:10、92:8、94:6、95:5、96:4、98:2、100:0进行
测定，结果表明：当v(甲醇):v(水)=100:0时，薯蓣
皂苷元的保留时间最短，且基线平稳，出峰时间
快且峰型很好。故采用纯甲醇作为流动相。
3.3 实验结果
采用高效液相色谱法测定薯蓣皂苷元在
9.0~72.0 μg/mL范围内峰面积与其质量浓度具有很
好的线性关系(R2=0.9995)，精密度RSD为1.41%，
薯蓣皂苷元的平均含量为0.064%。该法测定样品
准确，重复性好，能快速检测紫参薯中薯蓣皂元
的含量。
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