全 文 ：第４９卷　第２期
２０１３年４月
青 岛 大 学 医 学 院 学 报
ＡＣＴＡ　ＡＣＡＤＥＭＩＡＥ　ＭＥＤＩＣＩＮＡＥ　ＱＩＮＧＤＡＯ　ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＡＴＩＳ
Ｖｏｌ．４９，Ｎｏ．２
Ａｐｒｉｌ　２０１３
ｄｏｉ：１０．１１７１２／ｑｄｙｘｙ２０１３０２０１０
［收稿日期］２０１２－１１－２７；　［修订日期］２０１３－０１－３０
［作者简介］郝丽萍（１９８７－），女，在读硕士研究生。
［通讯作者］孙伟（１９５４－），女，主任药师，硕士生导师。
高效液相色谱法对绵萆薢质量控制的研究
郝丽萍１，曹玉２，肖忠伟２，杨智威２，隋鑫２，孙伟２
（青岛大学医学院，山东 青岛　２６６０２１　１　药学系；　２　附属医院药剂科）
［摘要］　目的　优化测定绵萆薢中薯蓣皂苷元含量的高效液相色谱法，为评价绵萆薢药材质量提供可行的方
法。方法　色谱柱为ｓｙｍｍｅｔｒｙｓｈｉｅｌｄ　ＴＭＲＰ１８（１５０．０ｍｍ×３．９ｍｍ，５μｍ），以乙腈－水（８０∶２０）为流动相，流量
１．２ｍＬ／ｍｉｎ，检测波长２０３ｎｍ，柱温为常温。结果　薯蓣皂苷元进样量在０．０１９　８～０．５０５　０ｇ／Ｌ范围内线性关系
良好（ｒ＝０．９９９　５），平均回收率为９８．２３％。结论　本方法操作简便、准确，可用于绵萆薢的质量控制。
［关键词］　绵萆薢；薯蓣皂苷元；色谱法，高压液相；质量控制
［中图分类号］　Ｒ２８４．１　　［文献标志码］　Ａ　　［文章编号］　１６７２－４４８８（２０１３）０２－０１２４－０３
ＱＵＡＬＩＴＹ　ＣＯＮＴＲＯＬ　ＯＦ　ＤＩＡＳＣＯＲＥＡ　ＳＥＰＴＥＭＬＯＢＡ　ＴＨＵＮＢ　ＢＹ　ＨＰＬＣ 　ＨＡＯ　Ｌｉｐｉｎｇ，ＣＡＯ　Ｙｕ，ＸＩＡＯ　Ｚｈｏｎｇｗｅｉ，ＹＡＮＧ
Ｚｈｉｗｅｉ，ＳＵＩ　Ｘｉｎ，ＳＵＮ　Ｗｅｉ　（Ｐｈａｒｍａｃｙ　Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ，Ｑｉｎｇｄａｏ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｃｏｌｅｇｅ，Ｑｉｎｇｄａｏ　２６６０２１，Ｃｈｉｎａ）
［ＡＢＳＴＲＡＣＴ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｏｐｔｉｍｉｚｅ　ａｎ　ＨＰＬＣ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｄｉｏｓｇｅｎｉｎ　ｉｎ　Ｄｉｏｓｃｏｒｅａ　ｓｅｐｔｅｍｌｏｂａ　Ｔｈｕｎｂ　ａｎｄ
ｐｒｏｖｉｄｅ　ａ　ｂａｓｉｓ　ｆｏｒ　ａｓｓｅｓｓｉｎｇ　ｔｈｅ　ｑｕａｌｉｔｙ　ｏｆ　ｔｈｉｓ　ｄｒｕｇ．　Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｔｈｅ　ｃｏｌｕｍｎ　ｗａｓ　ｓｙｍｍｅｔｒｙｓｈｉｅｌｄ　ＴＭＲＰ１８（１５０．０ｍｍ×３
．９ｍｍ，５μｍ）；Ｔｈｅ　ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ　ｃｏｎｓｉｓｔｅｄ　ｏｆ　ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ－ｗａｔｅｒ（８０∶２０）ａｔ　ａ　ｆｌｏｗ　ｒａｔｅ　ｏｆ　１．２ｍＬ／ｍｉｎ；Ｔｈｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｗａｖｅ
ｌｅｎｇｔｈ　ｗａｓ　ｓｅｔ　ａｔ　２０３ｎｍ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｃｏｌｕｍｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｗａｓ　ｒｏｏｍ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ．　Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｌｉｎｅａｒ　ｒａｎｇｅ　ｏｆ　Ｄｉｏｓｇｅｎｉｎ　ｗａｓ　０．０１９
８－０．５０５　０ｇ／Ｌ（ｒ＝０．９９９　５），ｔｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｗａｓ　９８．２３％．　Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓ　ｓｉｍｐｌｅ，ｃｏｎｖｅｎｉｅｎｔ
ａｎｄ　ａｃｃｕｒａｔｅ，ｗｈｉｃｈ　ｃａｎ　ｂｅ　ｕｔｉｌｉｚｅｄ　ｆｏｒ　ｑｕａｌｉｔｙ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｆ　Ｄｉｏｓｃｏｒｅａ　ｓｅｐｔｅｍｌｏｂａ　Ｔｈｕｎｂ．
［ＫＥＹ　ＷＯＲＤＳ］　ｄｉａｓｃｏｒｅａ　ｓｅｐｔｅｍｌｏｂａ　ｔｈｕｎｂ；Ｄｉｏｓｇｅｎｉｎ；ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ｈｉｇｈ　ｐｒｅｓｓｕｒｅ　ｌｉｑｕｉｄ；ｑｕａｌｉｔｙ　ｃｏｎｔｒｏｌ
　　绵萆薢为薯蓣科植物绵萆薢或福州薯蓣的块
茎，为２００５年版《中华人民共和国药典》收载品
种［１］。绵萆薢具有抗心肌缺血、降血脂、抗肿瘤、抗
骨质疏松等作用。绵萆薢中主要成分为甾体皂苷
类，性微温、味苦、平，具有利湿去浊、祛风通痹作用。
文献资料中多采用高效液相色谱法测定薯蓣皂苷元
的含量［２－１０］。为了更加精确地控制该药材的质量、
保证疗效，本研究对薯蓣皂苷元的提取方法和色谱
条件进行了优化，建立了更加简便、准确、重复性好
的测定薯蓣皂苷元的方法，现报告如下。
１　材料与方法
１．１　材料
绵萆薢药材购于青岛善大天源中药饮片有限公
司，经我院刘洪玲教授鉴定后使用。薯蓣皂苷元对
照品由中国药品生物制品检定所提供，批号１５３９－
２００００１。仪器与试剂：美国 Ｗａｔｅｒｓ公司 Ｗａｔｅｒｓ
９９６高效液相色谱及其工作站（二极管阵列检测器、
高压四元梯度泵、标准自动进样器）；ＪＡ　５００３型电
子天平（上海天平仪器厂）；Ｍｉｌｉ－Ｑ　Ａ１０（美国密里
博公司）；乙腈（色谱纯），其他试剂均为分析纯。
１．２　色谱条件
色谱柱为ｓｙｍｍｅｔｒｙｓｈｉｅｌｄ　ＴＭＲＰ１８（１５０．０ｍｍ×
３．９ｍｍ，５μｍ），以乙腈－水（８０∶２０）为流动相，流量
１．２ｍＬ／ｍｉｎ，检测波长２０３ｎｍ，柱温为常温。此色
谱条件下的色谱图见图１。
Ａ：对照品；Ｂ：绵萆薢；ａ：薯蓣皂苷元。
图１　高效液相色谱图
１．３　对照品溶液制备
精密称取薯蓣皂苷元对照品适量，加乙腈配制
成不同浓度的对照品溶液。
１．４　供试品溶液制备
取绵萆薢１０．０ｇ，精密称定，置圆底烧瓶中，加
　
２期 郝丽萍，等．高效液相色谱法对绵萆薢质量控制的研究 １２５
入２ｍｏｌ／Ｌ的盐酸５０ｍＬ，加热回流４ｈ，放冷，滤
过，药渣用水洗至中性。置８０℃干燥箱中至水分挥
干，置干燥的索氏提取器中，用氯仿２００ｍＬ水浴加
热３ｈ，将氯仿挥干，残渣加乙腈溶解，定量转移到
５０ｍＬ容量瓶中，加乙腈稀释至刻度，用０．２２μｍ
微滤膜过滤，取续滤液即得。
１．５　线性关系考察
分别配制０．０２、０．０５、０．１０、０．２０、０．３０、０．４０、
０．５０ｇ／Ｌ的对照品溶液，分别进样２０μＬ，以峰面积
为纵坐标、浓度为横坐标，绘制标准曲线。
１．６　精密度试验
精密移取０．０６ｇ／Ｌ对照品溶液２０μＬ，按上述
色谱条件连续进样６次。
１．７　稳定性试验
取供试品溶液，按上述条件分别在０、１、２、４、８、
１２、２４ｈ内进样，进样量２０μＬ。
１．８　重复性试验
取同一批样品，按供试品溶液制备方法制备６
份，分别进样测定。
１．９　加样回收率试验
取预先已测知薯蓣皂苷元含量的绵萆薢药材约
５．０ｇ，精密测定，分别精密加入薯蓣皂苷元对照品
溶液。按供试品溶液制备方法制备待测溶液，按上
述色谱条件测定，计算加样回收率。
１．１０　样品测定
分别取３批绵萆薢药材约１０ｇ，精密称定，按供
试品溶液制备方法制备，在上述条件下进样２０μＬ，
依次进样，按外标法以峰面积计算薯蓣皂苷元含量。
２　结　　果
２．１　线性关系考察
绘制标准曲线为Ｙ＝１１　０８１　Ｘ－２４　７６６，ｒ＝
０．９９９　５。表明薯蓣皂苷元对照品进样量为０．０１９　８～
０．５０５　０ｇ／Ｌ时，呈良好的线性关系。
２．２　精密度试验
ＲＳＤ＝０．６８％，表明精密度良好。
２．３　稳定性试验
其峰面积的 ＲＳＤ 为１．３９％，表明供试品在
２４ｈ内保持稳定。
２．４　重复性试验
计算得到ＲＳＤ＝１．１２％。
２．５　加样回收率试验
平均回收率＝９８．２３％，ＲＳＤ＝１．２０％。见表１。
２．６　样品测定
３批样品薯蓣皂苷元含量分别为１．５８、１．６０、
１．５４ｍｇ／ｇ。
表１　加样回收率试验结果
序号
取样量
（ｍ／ｇ）
样品含量
（ｍ／ｍｇ）
加入量
（ｍ／ｍｇ）
测得量
（ｍ／ｍｇ）
回收率
（χ／％）
１　 ５．０９３　 ７．５３８　０　 ５．０２７　４　 １２．５２０　１　 ９９．４
２　 ５．０４８　 ７．４７１　０　 ５．０６３　６　 １２．３５５　３　 ９７．６
３　 ５．０３７　 ７．４５４　８　 ５．１１０　７　 １２．２８９　７　 ９６．３
４　 ５．０８１　 ７．５１９　９　 ５．０８６　３　 １２．４９３　４　 ９８．５
５　 ５．０７１　 ７．５０５　１　 ５．０４３　２　 １２．５２５　８　 ９９．７
６　 ５．０７６　 ７．５１２　５　 ５．０３２　４　 １２．４９２　３　 ９９．３
７　 ５．１０３　 ７．５５２　４　 ５．１０５　８　 １２．４１６　５　 ９６．８
８　 ５．０５８　 ７．４８５　９　 ５．０７６　５　 １２．４７２　６　 ９８．８
９　 ５．０６８　 ７．５００　６　 ５．０６７　３　 １２．３９５　４　 ９７．７
３　讨　　论
以往我们采取的供试品溶液制备方法如下：取
绵萆薢药材１０ｇ，精密称定，置索氏提取器中，加入
乙醇溶液适量，加热回流至提取液近无色，回收溶剂
至约１００ｍＬ，加盐酸２０ｍＬ，加热回流水解２ｈ，冷
却，用氯仿萃取４次，每次４０ｍＬ，合并萃取液，回收
溶剂至干，残渣加乙腈溶解并转移至５０ｍＬ容量瓶
中，加乙腈至刻度，摇匀，滤过，取续滤液即得。上述
方法经过优化，在相同的检测条件下，所测定的样品
含量要比以往高２倍，这可能与本文供试品溶液制
备方法步骤简便，减少了萃取、水解次数有关。本实
验还对用石油醚（６０～９０℃）、乙酸乙酯萃取制备供
试品溶液进行了分析，结果显示，用石油醚、乙酸乙
酯作萃取剂所测得的薯蓣皂苷元的含量分别为
１．４６、１．２８ｍｇ／ｇ，均不如以氯仿作萃取剂的效果。
在色谱条件的选择中，我们分别对不同比例的甲醇－
水、乙腈－水进行考察，结果显示以乙腈－水（８０∶２０）
作流动相时，色谱峰保留时间适中，色谱峰及分离度
较好。总之，经优化后的高效液相色谱法操作简便、
准确，可用于绵萆薢的质量控制。
［参考文献］
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含量［Ｊ］．药物分析杂志，２００５，２５（１）：４４．（下转第１２８页）
　
１２８ 青　岛　大　学　医　学　院　学　报 ４９卷
表３　影响吸烟行为多因素非条件Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归分析
　因素 Ｂ　 ＳＥ　 Ｗａｌｄ　 Ｐ　 ＯＲ　 ＯＲ９５％ＣＩ
性别
　男性 　３．０４３　 ０．１１０　 ７６８．２１２　 ０．０００　 ２０．９６５　 １６．９０６～２５．９９８
文化程度
　小学 －１．１９３　 ０．２６０　 ２１．１００　 ０．０００　 ０．３０３　 ０．１８２～ ０．５０５
　中学 －０．８８６　 ０．２３２　 １４．５５０　 ０．０００　 ０．４１２　 ０．２６２～ ０．６５０
　大学及以上 －０．５８４　 ０．２０８ 　７．８６５　 ０．００５　 ０．５５８　 ０．３７１～ ０．８３９
经济收入
　３００～９９９元 －０．６６４　 ０．２４７ 　７．１９３　 ０．００７　 ０．５１５　 ０．３１７～ ０．８３６
职业
　行政干部或办公室职员 －０．２８７　 ０．１０４ 　７．５５９　 ０．００６　 ０．７５１　 ０．６１２～ ０．９２１
对吸烟认识
　吸烟对健康有害 －１．４４１　 ０．１３５　 １１３．６５５　 ０．０００　 ０．２３７　 ０．１８２～ ０．３０８
饮酒状况
　饮酒 　１．２８１　 ０．０９６　 １７７．０８２　 ０．０００　 ３．６０２　 ２．９８２～ ４．３５０
群加大健康教育的力度，帮助其下定戒烟的决心和
提高戒烟的技能。
２００２年吸烟和被动吸烟的现况调查显示，中国
人群的被动吸烟率为５１．９％［４］。青岛市２００５年的
调查结果显示，５１．１％的吸烟者经常在公共场所吸
烟［８］。本次调查结果显示，４５．５％的非吸烟者遭受
到被动吸烟的危害，因此，应加强公共场所的禁烟措
施，减少被动吸烟带来的危害。
影响吸烟的因素比较复杂，本文多因素分析结
果显示，男性和饮酒是吸烟的危险因素，在吸烟认识
方面，认为吸烟有害健康的人群的吸烟率远远低于
认为吸烟不会影响健康人群，认为吸烟有害健康是
减少吸烟率的保护因素，不同文化程度、经济收入和
职业的人群吸烟率不同。因此，要针对不同性别、文
化程度、经济收入、职业和饮酒状况的人群，采取不
同的控烟健康教育方法和策略，使越来越多的人了
解到吸烟对健康的危害。
控烟工作是一项十分复杂的社会系统工程，需
要全社会的共同参与。首先，各单位及社区应建立
控烟领导小组，对控烟工作进行监督及考核，在公共
场所应加大控烟宣传教育活动的力度，提高对烟草
危害的认识，减少吸烟及被动吸烟带来的危害。其
次，针对男性应加强吸烟有害健康的教育，降低男性
的吸烟率。第三，应强化新闻媒体宣传作用，阻止青
少年加入吸烟队伍，同时，学校应制定相应的控烟制
度，让青少年学会拒吸第一支烟。加强健康教育的
同时应加强立法，对吸烟者及在公共场所吸烟者，制
定处罚措施，减少吸烟及被动吸烟对健康的危害。
［参考文献］
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（本文编辑　马伟平

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（上接第１２５页）
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（本文编辑　马伟平）