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滇姜花中滇姜花素A的含量测定



全 文 :提示红细胞自氧氧化溶血度与黄 瓜香的浓度呈一定的关系。
表 1 黄瓜香各剂量对红细胞氧化溶血的抑制结果
组别 剂量 /g· ml-1 540nm处吸光度 A 溶血度 抑制率
黄瓜香大 1.00 0.725±0.248 86.6% 15.3%±3.5
黄瓜香中 0.75 0.184±0.320 22.0% 89.0%±4.2
黄瓜香小 0.5 0.357±0.303 44.8% 62.9%±3.7
PBS - 0.734±0.342 87.7% -
蒸馏水 - 0.837±0.169 - -
  与空白对照组比较 , P<0.05
3 讨论
黄瓜香学名蔓茎堇 、 葡伏
堇 , 属堇菜科堇菜属 (Violadif-
fusaGing)多年生草本植物 , 其
化学成分主要为黄酮 、糖类 、 粘
液质 , 作为蔓茎堇菜的主要有效
化学成分的黄酮 , 黄瓜香是一种
很有发展前途的中草药[ 2] , 具
有极大的药用价值 , 但药理作用
研究较少。
生物类黄酮是植物次级代谢
产物 , 广泛地存在于植物中 , 具
有抗氧化保护心脑血管 、 利胆保
肝 、抗癌 、 抗衰老等多种生物活
性 [ 3] 。红细胞处在充足的氧环
境中 , 无细胞器 , 含有引发并启
动催化脂质过氧化作用的金属络
合物血红蛋白 , 膜上又含有丰富
的多价不饱和脂肪酸 , 因此 , 红
细胞膜易受到氧自由基攻击发生
脂质过氧化反应[ 4] 。红细胞在
体外自氧氧化后 , 可产生丙二醛
(MDA), 它是脂质过氧化的主
要产物 , 可交联磷脂及蛋白质 ,
也可使蛋白质的巯基氧化 , 从而
损伤红细胞膜 , 引起溶血。
黄瓜香提取物体外抗溶血作
用实验表明:黄瓜香水提物浓度
为 0.75g/l时能够显著减少红细
胞溶血 (P<0.05), 表明黄瓜
香提取物是良好的抗氧化剂 。
黄瓜香水提物抗氧化作用机
制可能在于:黄瓜香提取物成分
中含有黄酮结构 , 能提供大量的
酮羟基还原自由基 , 从而起到抗
自由基作用。
(土家族药物黄瓜香的鉴别
由吉首大学医学院民族医药研究
室提供)
参考文献
1 李宝山 , 金玉等.珍珠丸 1号 2号
水提液对红细胞氧化溶血及血红蛋白的影
响.内蒙古医学杂志 , 1997, (01)
2 朱天倬 , 王红兵等.黄瓜香的毒
性试验.湖南农业大学学报 (自然科学
版), 1993, (03)
3 李先辉 , 李春艳 , 吕江明等.黄
瓜香水提物体外抗氧化活性实验.吉首大
学学报 , 2006, (05)
4 阳冠明 , 叶司原 , 利基林.山莨
菪碱对红细胞自氧化的影响.中国药理学
通报 , 1999, (05)
(收稿日期:2007年 5月 20日)
滇姜花中滇姜花素 A的含量测定
张韶湘 1 孙 科 1 赵 庆1, 2 邹 澄 1 王继良 1
(1.昆明医学院药学院 云南 昆明 650031;2.云南中医学院 , 云南 昆明 650200)
摘 要 建立滇姜花 (Hedychiumyunanense)中呋喃二萜类成分滇姜花素 A的含量分析方法。方法:C18柱 ,
流动相为水:甲醇 (2∶8), 流速 1.0ml/min, 检测波长 233nm。结果:滇姜花素 A的线性范围 Y=1.4672X-
2.8651 (r=0.999), 平均加样回收率 98.7%, 精密度 RSD=2.88% (n=5)。结论:本方法简单 、 有效 、 可行 ,
可用于滇姜花素 A的含量测定。
关键词 滇姜花 滇姜花素 A HPLC
  滇姜花 (Hedychium yun-
nanense)为姜科姜花属植物 ,
民间药用以根为主 , 本品辛 、
温 , 具有驱风除湿 、舒筋活络 、
调经止痛的功效。主要用于风湿
痹痛 , 慢性腰腿痛 , 跌打损伤 ,
月经不调 , 虚寒不孕等症 。主要
分布于云南 [ 1] 。目前对该民族
药的质量研究有限 ,严启新等[ 2]
234 中国民族民间医药杂志 2007年总第 87期
表 1 滇姜花中滇姜花素 A的回收率
样品量
(mg)
样品中含量
(mg)
测定量
(mg)
回收率
(%)
平均值
(%) RSD(%)
100.5 0.4151 0.8031 97.0
99.8 0.4122 0.8215 102.3
100.0 0.4130 0.8032 97.5
99.8 0.4122 0.7974 96.3
100.6 0.4155 0.8103 98.7
100.9 0.4167 0.8223 101.4
100.1 0.4134 0.8034 97.6
98.7 2.15
首次报道了滇姜花的主成分姜花
酮 (hedychenone)的含量测定
方法。基于前人的研究 , 作者对
滇姜花中的呋喃二萜类成分滇姜
花素 A的含量进行测定 , 建立
了该成分的含量分析方法 , 为该
药材的进一步研究开发提供了依
据 。
1 仪器和材料
对照品为自提 , 经检测纯度
达 99%以上 (归一法), 实验用
水为纯净水 (杭州娃哈哈集
团), 甲醇为色谱纯 (江苏汉邦
科技有限公司)。
所有药材样品均采自昆明市
西山区 、官渡区 , 经昆明植物研
究所童绍全研究员鉴定为滇姜花
(Hedychiumyunnanense)。
高效液相色谱仪 DIONEX系
列 (德国产)包括 P680二元泵 、
Rheodyne7725i手 动 进 样 器 、
UVD170U检测器 、 TCC-100柱
温箱 、 25μl微量进样器 , 万分
之一电子天平 (BOSCHSAE200
日本产)。
2 方法和结果
2.1 色谱条件:色谱柱 Dimen-
sionC18柱 (DIKMA公司 150mm
×4.6mm), 柱温 25℃, 流动相
水:甲醇 (2∶8), 流速 1.0ml/
min, 检测波长 233nm, 保留时
间 19.0min。
2.2 标准曲线的绘制:精密称
取对照品滇姜花素 A5.0mg定
容于 25ml容量瓶中 , 摇匀 , 作
为储备液 , 分别吸取该储备液
0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.0ml定
容于 10ml容量瓶中 , 按上述色
谱条件进行 HPLC分析 。以对照
品溶液浓度为横坐标 , 峰面积为
纵坐标 , 进行回归计算 , Y=
1.4672 -2.8651 (r=0.999),
表 明滇 姜 花素 A在 4.0 ~
20.0μg/ml有良好的线性关系 。
2.3 检测波长测定:精密称取
对照 品 1.0mg, 用 水:甲 醇
(2∶8)溶解 , 并定容于 10ml容
量瓶 中 , 摇匀 , 以 水:甲醇
(2∶8)作空白对照 , 在 200 ~
400nm进行扫描 , 可见在 233nm
处有最大吸收 , 故检测波长选定
为 233nm。
2.4 样品溶液的制备:精密称
定滇姜花药材粉末 (过 40目
筛) 100mg, 以 30ml甲醇回流
提取 2小时 , 提取液过滤 , 滤液
加甲醇定容至 50ml, 摇匀 , 吸
取 8ml, 定容至 10ml, 作为样品
测定液。
2.5 精密度考察:精密吸取对
照品溶液 25μl(μg/ml), 重复
进样 5次 , 测定吸收峰面积 ,
RSD=2.88%, 结果表明精密度
良好 。
2.6 重复性实验:取同一滇姜
花药材末 5份 , 精密称定 , 按
“样品含量测定” 项下操作 , 以
2.1项的色谱条件测定 , 计算含
量 , RSD=3.6%。
2.7 稳定性考察:精密吸取同
一样品溶液 , 分别在 0, 2, 4,
6, 8, 10, 12, 20, 24小时测
定 , 峰面积积分计算 RSD=
2.2%。
2.8 加样回收实验:精密称取
已知含量的药材粉末 100mg, 共
7份 , 分别加入对照品溶液
0.8ml(0.5mg/ml), 结果见表
1。对照 品平均 加样回 收率
98.7%, 表明分析方法准确。
2.9 样品含量测定:吸取 2.4
项下样品测定溶 25μL, 进行
HPLC测定 , 记录峰面积 , 外标
法计算含量 , 滇姜花素 A的含
量为 0.413%。
3 讨论
滇姜花素 A为呋喃二萜类
成分 , 初步药理研究表明具有抗
肿瘤活性[ 3, 4] , 通过药材中滇姜
花素 A的含量研究 , 建立了该
组分的含量分析方法 , 且方法简
单 、 有效 、可行 , 该分析方法的
建立 , 在今后的滇姜花药物资源
开发利用方面具有重要的参考价
值 , 为滇姜花的系统研究打下了
基础 。
参考文献
1 中国科学院昆明植物研究所.云
南植物志.北京:教育科学出版社 , 1997.
11
2 严启新, 叶晓雯 , 赵庆, 等.滇
姜花中姜花酮的含量测定.中国中药杂
志 , 2005, 30 (20):1593.
3 赵庆 , 郝小江 , 陈耀祖, 等.滇
姜花中新二萜成分研究.高等学校化学学
报 , 1995, 16 (1): 64.
4 赵庆 , 郝小江 , 陈耀祖, 等.滇
姜花抗肿瘤活性二萜及其光敏氧化反应的
研究.植物学报 , 1999, 41 (5:) 528.
(收稿日期:2007年 1月 14日)
235中国民族民间医药杂志 2007年总第 87期