全 文 ：紫外可见分光光度法测定深裂竹根七多糖的含量
＊
张 珏，覃容贵，安东琴，范菊娣*
(贵阳医学院 药学院，贵州 贵阳 550004)
［摘 要］目的:建立深裂竹根七多糖含量测定的方法。方法:选用 D-葡萄糖为对照品，4%的蒽酮浓硫酸为
显色剂，用分光光度法在 626 nm处进行深裂竹根七多糖含量测定。结果:D-葡萄糖回归方程为 y = 9. 101 9x +
0. 044 1，在 0. 010 8 ～ 0. 097 2 g /L浓度范围内线性关系良好(r2 = 0. 999 3)，深裂竹根七中多糖的平均回收率为
97. 65%(ＲSD = 2. 360%，n = 6)，重现性好(ＲSD = 2. 2%，n = 5)，精密度高(ＲSD = 0. 02%，n = 5)。结论:紫外分
光光度法可简便、灵敏和准确检测深裂竹根七多糖的含量，可以作为该药材的质量控制方法。
［关键词］多糖类;分光光度法，紫外线;深裂竹根七;蒽酮 －浓硫酸
［中图分类号］Ｒ284. 1 ［文献标识码］A ［文章编号］1000-2707(2014)03-0369-03
Determination of Polysaccharide Content in Disporopsis pernyi
by UV Spectrophotometry
ZHANG Jue，QIN Ｒonggui，AN Dongqin，FAN Judi
(School of Pharmacology，Guiyang Medical College，Guiyang 550004，Guizhou，China)
［Abstract］Objective:To establish a method for the determination of polysaccharide in Disporopsis
pernyi． Methods:Polysaccharide content in Disporopsis pernyi was determined with UV-visible spectro-
photomety at 626 nm used D-glucose as control sample，4% of anthrone-sulfuric acid as chromogenic
agent． Ｒesults:The regression equation of D-glucose was y = 9． 101 9x + 0． 044 1，． the linear rang
of the method was 0． 010 8 ～ 0． 097 2 g /L (r2 = 0. 999 3)，The average recovery was 97． 65%(ＲSD
=2． 360%，n = 6)，with good repeatability (ＲSD = 2． 2%，n = 5)and high precision (ＲSD =
0. 02%，n = 5)． Conclusions:This method is simple，sensitive and accurate and can be used to de-
termine the polysaccharide content and control the quality of Disporopsis pernyi．
［Key words］polysaccharides;spectrophotometry，UV;Disporopsis pernyi;anthrone-sulfuric acid
深裂竹根七属百合科竹根七属植物，异名黄
脚鸡、十样错、竹节参等，是民间常用中药，有很
好药用价值［1］，在我国贵州、云南、四川、广西、湖
南等大多数地区均有分布，在部分少数民族地区
作为玉竹代用品在市场流通。其性温，味甘，可
润肺止咳。其根茎用于咳嗽、病后体弱、腰腿酸
软［2］。深裂竹根七含中的多糖具有广泛的药理活
性，具有调节机体功能、提高免疫、抑制肿瘤、抗
衰老、降血糖等作用。植物多糖含量测定方法较
多，但深裂竹根七多糖含量的测定未见文献报
道［3 － 10］。为进一步开发深裂竹根七的资源，本研
究采用蒽酮 －硫酸法及紫外分光光度法测定深
裂竹根七多糖的含量［11］。
1 仪器、试剂与药材
UV-2401 紫外分光光度计(日本岛津)，HH-2
数恒温水浴锅(金坛市富华仪器有限公司)，101 －
963
第 39 卷 第 3 期
2014 年 6 月
贵 阳 医 学 院 学 报
JOUＲNAL OF GUIYANG MEDICAL COLLEGE
Vol． 39 No． 3
2014． 6
* * 通信作者 E-mail:lfanjudi@ 163. com
网络出版时间:2014 － 06 － 23 网络出版地址:http:/ /www． cnki． net /kcms /detail /52． 5012． Ｒ． 20140623． 0010． 022． html
1 型电热恒温鼓风干燥箱(上海路达实验仪器有限
公司)，D-葡萄糖(中国食品药品检定研究院，批号
110833 － 200904)，蒽酮(天津市科密欧化学试剂
有限公司)，蒸馏水(自制);乙醇、浓硫酸等试剂均
为分析纯。深裂竹根七采自贵州省境内，由贵阳医
学院生药教研室龙庆德副教授鉴定为百合科竹根
七属植物深裂竹根七的根茎，保存于贵阳医学院药
学院生药标本室。
2 方法与结果
2. 1 葡萄糖标准溶液的制备 精密称取干燥至恒
重的 D-葡萄糖对照品 10. 80 mg，加蒸馏水溶解并
定容至 100 mL得浓度为 0. 108 g /L 的葡萄糖标准
溶液(对照品溶液)备用。
2. 2 多糖供试液的制备 取深裂竹根七粉碎，过
筛，精密称取 2. 00 g 置于 100 mL 圆底烧瓶中，加
60 mL蒸馏水，水浴回流提取两次，每次 2 h，过滤，
合并两次滤液，浓缩至 10 mL ，加 95%乙醇，使其
终浓度为 80%进行沉淀，静止过夜，离心，35 ℃干
燥，得深裂竹根七粗多糖样品。精密称取 26 mg 于
25 mL容量瓶中，蒸馏水定容即得多糖供试液。
2. 3 显色溶液的配制 吸取标准溶液或供试液适
量于 10 mL带塞试管中，加蒸馏水至 2 mL，在冰浴
中准确加入 4 mL 显色剂(4%蒽酮浓硫酸溶液)，
摇匀，在水浴 60 ℃中准确加热 10 min，取出冷却至
室温，放置 20 min 即得对照品或供试品的显色溶
液。
2. 4 显色剂用量的确定 吸取对照品、供试品溶
液适量于 10 mL带塞试管中，加蒸馏水至 2 mL，分
别加不同用量(3 mL、4 mL、5 mL、6 mL)的显色剂
按“2. 3”项方法制得显色溶液，取各显色溶液在
626 nm处测定吸光值。结果表明，当显色剂的用
量小于 3 mL时，溶液有沉淀;当大于 4 mL后，吸光
度值呈下降趋势，故本实验选择 4 mL 作为显色剂
的用量。
2. 5 显色时间的确定 吸取对照品、供试品溶液
适量于 10 mL带塞试管中，加蒸馏水至 2 mL，准确
加入 4 mL 显色剂，摇匀，在水浴 60 ℃中准确加热
10 min，取出冷却至室温，放置不同时间(0 min、
10 min、20 min、30 min)后，取各显色溶液在 626 nm
处测定吸光值。结果表明，放置 20 min 以后，吸光
度值基本稳定，故本实验选择在 20 min 作为显色
时间。
2. 6 检测波长的选择 取 4%蒽酮浓硫酸溶液在
520 ～ 700 nm 波长范围扫描，结果表明 4%蒽酮浓
硫酸溶液在 520 ～ 700 nm 几乎无吸收。吸取标准
品溶液适量按“2. 3 项下”显色，在 520 ～ 700 nm
波长范围内扫描。对照品和供试品分别加显色剂
后，在 626 nm 处都有最大吸收，故选择 626nm 为
测定波长。
2. 7 线性关系考察 分别精密吸取 D-葡萄糖对
照品溶液 0 mL、0. 1mL、0. 3mL、0. 5mL、0. 7mL 和
0. 9 mL置于10 mL带塞试管中，并准确补蒸馏水至
2 mL，分别按“2. 3”项方法制得显色溶液。取各显
色溶液在波长为 626 nm处紫外测定其吸光值。结
果表明，葡萄糖浓度在 0. 010 8 ～ 0. 097 2 g /L范围
呈良好线性关系。以 D-葡萄糖标准液浓度(x)为
横坐标，吸光值(y)为纵坐标，得 D-葡萄糖标准曲
线方程:y = 9. 101 9x + 0. 044 1，r2 = 0. 999 3。见图
1。
图 1 D-葡萄糖测定标准曲线
Fig． 1 D-glucose determination
standard curve
2. 8 深裂竹根七多糖测定的重现性 取深裂竹根
七供试品 5 份，按供试品测定方法操作，结果测得
多糖平均含量为 11. 4%，相对标准偏差(ＲSD)为
2. 2%，表明其重现性良好。
2. 9 深裂竹根七多糖测定的精密度 精密吸取
葡萄糖对照品溶液 0. 5 mL，按“2. 3”项方法制得
显色溶液，连续平行测定 5 次，以吸光度值计算
相对标准偏差(ＲSD)为 0. 02%，表明仪器精密度
良好。
2. 10 深裂竹根七供试品加样回收试验 精密吸
取 0. 5 mL已知多糖含量为 10. 21%的深裂竹根七
供试品 6 份，每份精密加入如下对照品，依照
“2. 3”项制得显色溶液，在波长为 626 nm 处紫外
测定其吸光值。计算得平均回收率为 97. 65%，相
对标准偏差(ＲSD)为 2. 360%，表明试验方法回收
率高，符合分析要求。见表 1。
073
贵 阳 医 学 院 学 报 39 卷
表 1 深裂竹根七供试品加样回收试验
Tab． 1 Ｒesults of recovery test of
Disporopsis pernyi samples
样品
样品含
量(mg)
加入量
(mg)
实测值
回收率
(%)
平均回收
率(%)
ＲSD
(%)
1
2
3
4
5
6
55. 74
55. 74
55. 74
55. 74
55. 74
55. 74
44. 01
44. 03
55. 10
55. 08
66. 03
66. 10
98. 10
97. 67
105. 1
105. 7
123. 2
119. 7
98. 35
97. 90
94. 80
95. 41
101. 2
98. 25
97. 65 2. 360
2. 11 深裂竹根七多糖含量测定 取贵州不同产
地深裂竹根七供试品，按“2. 2”项操作制备供试品
溶液，再按“2. 3”项方法制得显色溶液。取各显色
溶液在 626 nm处测定吸光值，并计算样品中多糖
的含量。见表 2。
表 2 深裂竹根七溶液多糖含量测定
Tab． 2 Test results of polysaccharide contents in
Disporopsis pernyi
产地 多糖含量(%) 产地 多糖含量(%)
贵州扎佐 16. 12 贵州金沙 8. 69
贵州安顺 11. 33 贵州都匀 10. 21
贵州锦屏 12. 78 贵州龙里 8. 03
贵州贵阳 7. 83 贵州水田 8. 33
3 讨论
深裂竹根七属于百合科植物，其多糖丰富。多
糖具有抗肿瘤、抗衰老、抗氧化、降血糖、降血脂，促
进骨髓造血功能和改善细胞对物质代谢等作用，以
其制药可促进人体健康。前期实验发现采用硫酸
苯酚法稳定性较差，线性关系不理想，重现性差。
本实验最终采用传统经典的蒽酮-浓硫酸法，对深
裂竹根七中的多糖含量进行测定，结果显示该方法
线性关系理想，重现性、稳定性良好，检测结果准
确可信，且简便可行，适用于深裂竹根七多糖的定
量分析，这为深裂竹根七的质量控制和深度开发提
供了一定的实验基础。在反复的实验过程中，发现
该实验所用显色剂蒽酮 －硫酸试剂要现配现用，同
时显色时一定要准确控制好加热时间，如果时间过
短，则反应不完全，吸光度偏小。
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(2014－01－24 收稿，2014－02－28 修回)
中文编辑:文箐颖;英文编辑:周 凌
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3 期 张 珏等 紫外可见分光光度法测定深裂竹根七多糖的含量