全 文 ：表 6　不同组合的药效预测( x±s)
配伍组 预测值 t/min 实测值 t/min
ADE 25.08(Emax) 24.56±4.62a
ACDE 24.04 23.36±2.23b
AE 23.64 22.81±1.35a
ABDE 23.28 22.62±1.91b
DE 22.92 28.26±4.20b
ACE 22.60
ABCDE 22.24
CDE 21.88
ABE 21.84
E 21.48
BDE 21.12
ABCE 20.79
AD 20.64
CE 20.43
BCDE 20.07
BE 19.67
ACD 19.60
A 19.20
ABD 18.84
BCE 18.63
D 18.48
AC 18.16
ABCD 17.80
CD 17.44
AB 17.40
BD 16.68
ABC 16.35
C 15.99
BCD 15.63
B 15.23
BC 14.19(Emin)
　　a训练集包含该部位;b训练集不含该部位
4　结论
本文基于正交设计建立了香丹注射液的复方药效预测模型 ,
结合两种散点图对模型准确性进行了评价 ,探讨了组分间的相互
作用 ,并对复方不同组合进行了药效预测 , 获得了最佳组合部位。
此研究可为中药复方制剂中组分相互作用 、有效组分的确定及中
药复方二次开发提供有意义的参考。由于中药复方具有多药物
(部位 、组分)、多药效指标(靶点)、非线性的特征, 所以有效部位
的确定需要结合多个药效学实验 、部位指纹图谱和统计学等综合
分析和实验验证才能进行最后的确定 ,其它药效学实验正在进行
中。
致谢:感谢上海中医药大学郑青山教授在本文正交实验中给
予的大力帮助!
参考文献:
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一个方法学研究 [ J].中国药理学通报 , 2007, 23(8):1106.
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[ J] .时珍国医国药 , 2008, 19(5):1130.
收稿日期:2008-08-08;　修订日期:2008-12-08
基金项目:广西科学研究与技术开发计划项目(No.0718002-4-3)
作者简介:覃　葆(1956-),男(汉族),广西象州人 ,现任广西中医学院副
教授 ,学士学位 ,主要从事中药炮制教学及研究工作.
不同炮制方法对广西莪术质量影响的研究
覃　葆 , 曾春晖 , 荣玲芝 , 谢旭玲
(广西中医学院·药学院 ,广西 南宁　530001)
摘要:目的 研究不同炮制方法对广西莪术的质量影响。方法 比较生品 、鲜药醋煮品 、醋煮品 、醋炙品挥发油含量;急性
毒性实验(MTD);抑菌实验测定对金黄色葡萄球菌 、大肠杆菌 、乙型溶血性链球菌最低抑菌浓度(MIC)。结果 挥发油含
量高低为醋煮品 >鲜药醋煮品 >生品 >醋炙品;MTD结果显示炮制前后的毒性均较低 , 相当于 60 kg人临床日用量
1 000倍;炮制前后均有较强的抑菌作用。结论 不同炮制方法及原产地加工均对广西莪术的质量有一定影响。
关键词:广西莪术;　炮制;　挥发油;　急性毒性实验;　最低抑菌浓度
中图分类号:R283.1　　文献标识码:B　　文章编号:1008-0805(2009)09-2247-02
　　莪术为姜科植物蓬莪术 CrcumaphaeocaulisVal.、广西莪术
CurumakwangsiensisS.G.LeeetC.F.Liang或者温郁金 Curcuma
wenyujinY.H.ChenetC.Ling的干燥块茎。广西莪术主产于广
西 、云南 , 是广西的地道药材。 近年来国内外药理学研究及临床
研究发现莪术挥发油具有调节免疫 、抗菌 、抗炎 、抗肿瘤 、抗病毒
等多种作用 , 因而备受关注。 《本草纲目》云:“今人多以醋炒或
煮熟入药 , 取其引入血分也。”莪术的现代炮制方法主要以醋煮 、
醋炙为主。本文通过比较不同炮制方法对广西莪术挥发油等化
学成分的影响及急性毒性实验(MTD)、体外抑菌实验等研究 ,为
进一步探讨炮制原理 、选择最佳炮制工艺及饮片质量标准的制定
提供参考。
1　材料
1.1　药材与试剂 药品采自广西灵山县 , 经广西中医学院韦松基
教授鉴定 ,为姜科植物广西莪术 CurcumakwangsiensisS.G.Leeet
C.F.Liang的根茎鲜品。营养琼脂(国药集团化学试剂有限公
司 , 批号 20080129)。
1.2　仪器 挥发油提取器(上海申立玻璃仪器有限公司);无菌
净化工作台(苏净集团苏州安泰空气技术有限公司);电热恒温
培养箱(上海医疗器械七厂);压力蒸气灭菌器(上海医用核子仪
器厂);电热蒸馏水器(北京市医疗设备厂);电热恒温鼓风干燥
箱(上海跃进医疗器械厂)。
1.3　动物 清洁级体重 18～ 22 g小鼠 , 雌雄各半 , 购于广西中医
学院动物实验中心。
1.4　菌种及培养基 金黄色葡萄球菌 (26001)、大肠杆菌
(ATCC25922)、乙型溶血性链球菌(32210)均购自中国药品生物
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2009VOL.20NO.9 时珍国医国药 2009年第 20卷第 9期
制品检定所。实验菌种经血平板培养分离 16 ～ 24 h后 , 挑选数
个菌落置于生理盐水管中 ,校正浓度至 0.5麦氏标准。
2　方法与结果
2.1　挥发油的含量测定
2.1.1　样品的制备
生品:取干净的鲜品莪术 ,置煮制容器内 , 加水浸没药面 ,煮
至内无白芯时取出 , 干燥(此为原产地加工常用方法)。分成两
部分 , 一部分为生品原药材 ,另一部分大小分档 ,洗净 , 水浸润透 ,
切薄片 , 干燥 ,筛去碎屑作为生品(饮片)。
鲜药醋煮品:取干净的鲜品莪术 ,置煮制容器内 ,加入定量的
米醋与适量水浸没药面 , 煮至醋液被吸尽 , 内无白芯时 ,取出 ,稍
晾 , 切薄片 ,干燥 , 筛去碎屑。每 100kg莪术用米醋 20 kg。
醋煮品:取生品原药材置煮制容器内 , 加米醋及适量水浸没 ,
用文火煮至醋汁被吸尽 , 内无白芯时 , 取出 , 稍晾 , 切薄片 , 干燥。
每 100 kg莪术用米醋 20kg。
醋炙品:取生品(饮片),加定量米醋拌匀 , 稍闷润 ,待醋被吸
尽后 , 置炒制容器内 , 用文火加热 , 炒至微黄色 ,略带焦斑时 , 取
出 , 放凉。每 100 kg莪术用米醋 20 kg。
2.1.2　测定方法 分别取上述样品粉碎 , 过 2号筛;称取各 100
g, 按《中国药典》 2005年版Ⅰ部附录挥发油测定法操作。
2.1.3　各样品挥发油含量测定结果 结果见表 1。
表 1　广西莪术不同炮制方法挥发油含量
炮制品 出油量 /ml RSD(%)
　　　生品 0.86 2.47
　　　鲜药醋煮品 1.03 5.43
　　　醋煮品 1.10 4.55
　　　醋炙品 0.69 5.89
　　n=3
2.2　急性毒性实验
2.2.1　药液的制备 分别取生品 、醋煮品 、醋炙品加水 10倍 ,浸
泡 30min,煮沸 1h, 过滤 ,再加水 10倍煮沸 1h, 过滤 , 合并滤液 ,
水浴浓缩至 4 g/ml,入冰箱保鲜备用。
2.2.2　预实验 取清洁级体重 18 ～ 22g小鼠 30只 , 雌雄各半 ,禁
食不禁水 12h,分为 3组 , 用生品 、醋煮品 、醋炙品水煎浓缩液(4
g/ml), 最大剂量(0.4 ml/ 10g)1次灌胃 , 连续观察 7 d, 记录期
间小鼠死亡数和一般情况 , 若死亡数≥30 % , 则测定半数致死
量(LD50),结果各组小鼠无一死亡 , 故测不出 LD50。改为测定最
大耐受量(MTD)。
2.2.3　MTD测定 取清洁级体重 18 ～ 22 g小鼠 60只 , 禁食不禁
水 12 h,根据性别 、体重分层随机分成 3组 ,雌雄各半。同上灌胃 ,
1次给药 ,连续观察 14d,详细记录动物反应情况和死亡情况。
2.2.4　实验结果 各组给药后均出现自主活动减少 、静卧不动 、
尾部静脉渐发黑 , 15min后开始活动 ,进食。 2h后生品和醋煮品
多数小鼠活动恢复正常 , 整个过程中没有出现惊厥 、抽搐。醋炙
品个别发生惊厥 、抽搐 、扭体反应等 , 显示毒性稍大迹象 , 但由于
已经是最大浓度 , 所以测不出 LD50。 14 d内小鼠全部存活 ,在 7
d和 14 d称量小鼠体重 , 都有明显的增加 ,生长情况良好 。 14 d
后处死动物并解剖 , 肉眼观察心 、肝 、脾 、肺 、肾等主要脏器 , 外观
未见异常改变。
实验表明 , 小鼠生品 、醋煮品 、醋炙品最大耐受量分别为
1 000 g/(kg· d)。莪术临床用量为 10 g/d, 按小鼠平均体质量
22 g计算 ,相当于体重为 60 kg的人临床日用量的 1 000倍。
2.3　抗菌实验
2.3.1　挥发油药液的配制 分别取生品 、醋煮品 、醋炙品挥发油
0.5 ml加吐温 -80 0.5 ml搅拌溶解使其成乳状 ,然后加蒸馏水
配成 10ml溶液。按倍比稀释法用蒸馏水稀释成 1∶1, 1∶2, 1∶
4, 1∶8, 1∶16, 1∶32, 1∶64, 1∶128, 1∶256, 1∶512等 10组(实
验前配制)
2.3.2　大肠杆菌和金黄色葡萄球菌抗菌实验方法 取 1.5 ml的
稀释药液放入到 13.5ml的琼脂中 ,混匀, 倒入 9 cm的无菌平板中 ,
凝固后接种大肠杆菌和金黄色葡萄球菌 , 37℃培养 24h,观察结果。
2.3.3　乙型溶血性链球菌实验方法 取 1.5ml的稀释药液放入
到 13.5ml的血琼脂中 ,混匀 , 倒入 9 cm的无菌平板中 , 凝固后接
种乙型溶血性链球菌 , 37℃培养 24 h, 观察结果。
2.3.4　实验结果 各样品抗菌结果见表 2。
3　讨论
广西莪术主产于广西 、云南 , 是广西的地道药材。广西钦州
市灵山县为主产地 , 据灵山县农业招商项目介绍 , 全县莪术种植
面积达 2 000ha,年产量 3 800 t, 已成为广西最大的莪术种植基
地。本实验表明不同的炮制方法对广西莪术挥发油含量有影响 ,
含量高低依次为醋煮品 >鲜药醋煮品 >生品 >醋炙品。这与刘
洋等 [ 1]报道生品挥发油含量高于几种炮制品的结果不一致 。另
有报道 , 莪术原产地加工传统上用煮或蒸透心后干燥 , 与直接干
燥品比较挥发油含量无显著变化 ,但直接干燥时间较长且易发霉
变质 [ 2] 。实验表明鲜药醋煮品挥发油含量较高 , 方法简便易行 ,
故建议在原产地加工时直接用醋煮或醋蒸 ,避免以后再次加热炮
制挥发油受损失。
表 2　广西莪术不同炮制方法挥发油的抗菌结果(MIC)
mg· ml-1
炮制品 金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 乙型溶血性链球菌
　生品 36.48 72.96 145.93　醋煮品 28.41 113.63 56.81
　醋炙品 40.07 90.15 90.15
本实验表明广西莪术炮制前后毒性均很小 , MTD相当于体
重为 60kg的人临床日用量的 1 000倍。醋炙品显示毒性稍大迹
象 , 其原因有待进一步探讨。
辛德莉等 [ 3]报道莪术油对肺炎支原体地方珠有抑制作用 ,
也有报道 [ 4]莪术油在体外对临床常见 6种念珠菌有不同程度的
抑制作用。本研究显示 ,广西莪术炮制前后对金黄色葡萄球菌 、
大肠杆菌和乙型溶血性链球菌均有较强的抗菌作用。其中 ,生品
对大肠杆菌的抑制作用稍强于两种炮制品 ,醋煮品对乙型溶血性
链球菌作用较醋炙品强 ,更显著强于生品。
参考文献:
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