全 文 ：　　　　民 族 医 药
EthnomedicineandEthnopharmacy
西藏绿萝花中黄酮和还原糖含量测定研究
陈家鹏
广东省广州万正药业有限公司, 广东　广州　 510663
【摘　要】　绿萝花作为一种降血压民间藏药已有很长的历史。本文采用光谱法对绿萝花中还原糖类和黄酮类成分进行定量测定 , 并
利用正交设计优选总黄酮的提取条件。总黄酮提取的最佳条件是:用 70%乙醇在 50℃下超声波提取 1.5h, 1次 , 提取体积 80mL。所得总
黄酮的测定含量为 0.994%, RSD=0.14% (n=4)。采取超声波提取法提取还原糖 , 并对其含量进行测定。 所得还原糖的测定含量为
1.486%, RSD=2.21% (n=4)。
【关键词】　绿萝花;总黄酮;还原糖;分光光度法
【中图分类号】R927.2　　　 【文献标识码】A　　　　 【文章编号】 1007-8517 (2010) 13-0002-02
　　绿萝花作为一种民间藏药 , 虽然在我国已经有了很长
的历史 , 但在医学领域并未被广泛应用 , 绿萝花所含成份
不明 , 各种成份的作用研究不具体。本论文本着发扬祖国
医学 , 使藏药植物得到更好的发展与利用 , 对它进行成份
的含量测定研究。 采取超声波提取法提取黄酮类化合物与
还原糖物质 , 在得到纯度较高的黄酮类化合物和还原糖后 ,
对其含量进行测定。目的是为了绿萝花的深加工提供理论
依据 , 实现商品的应有价值。本项研究将对发展西藏经济 、
改善人民对藏药了解起着良好的推动作用。
1　材料与方法
1.1　绿萝花　所采用绿落花原产于西藏 , 经自然风干。
1.2　主要试剂与仪器　芦丁 , sigma公司。 DNS, 自行配
置。葡萄糖 , 亚硝酸钠 , 硝酸铝 , 氢氧化钠 (片), 无水乙
醇 (分析纯), 天津大茂化学试剂厂。 超声波清洗器
(KQ3200DE), 昆山市超声仪器有限公司。紫外可见分光光
度计 (T6新世纪), 石英比色皿 , 北京普析通用仪器有限
责任公司。电子天平 (FA2104), 北京赛多利斯仪器系统
有限公司。 旋转蒸发器 (RE-52A), 上海亚荣生化仪
器厂。
1.3　绿萝花总黄酮及还原糖的提取及标准曲线的建立
1.3.1　芦丁标准曲线的绘制
精确称取 22mg芦丁标准品 , 配制一系列不同浓度的标
准溶液 [ 1] , 试剂为空白作参照 , 在波长为 510nm处分别测
定其吸光度 。以浓度为横坐标 , 吸光度为纵坐标 , 作芦丁
标准曲线。
1.3.2　葡萄糖标准曲线的绘制
用葡萄糖配制不同含量的标准溶液 [ 2] , 在 540nm波长
处测定光吸收值。以 1.0mL蒸馏水代替葡萄糖标准液按同
样显色操作为空白调零点。以葡萄糖浓度为横坐标 , 光吸
收值为纵坐标。
1.3.3　总黄酮最佳提取条件的选择
准确称取 5.0g绿萝花 , 先加 l00mL石油醚 , 回流 lh进
行脱色脱脂处理 , 过滤 , 将滤渣中石油醚挥发干 。然后 ,
按照乙醇采用 60%, 70%两个浓度 , 提取时间为 1h和
1.5h, 提取溶剂量采用 80mL, 100mL, 对提取的 3个因素
和 2个水平进行正交实验。
1.4　样品中总黄酮及还原糖含量测定
1.4.1　样品中总黄酮含量测定
准确称取 5.0g样品 , 先加 100mL石油醚 , 回流 1h进
行脱色脱脂处理 , 过滤 , 将滤渣中石油醚挥发干。根据
1.3.3的结果采用最佳提取条件进行样品总黄酮的提取 , 用
70%乙醇在 50℃下超声波提取 1.5h, 提取体积 80mL。过
滤 , 减压蒸馏至近干 , 用 70%乙醇定容至 l00mL容量瓶中 ,
备用。准确量取提取液 1.0mL, 按 1.3.1项操作 , 配制溶
液。以试样空白作参比 , 在 510nm处测定各吸收值 , 并计
算含量。
1.4.2　样品中还原糖含量测定
准确称取 1.0g绿萝花 , 放在 100mL烧杯中 , 先以约
5mL蒸馏水调成糊状 , 然后加入 80mL蒸馏水 , 混匀 , 于
50℃恒温水浴中保温 20min, 不时搅拌 , 使还原糖浸出。过
滤 , 将滤液全部收集在 100mL的容量瓶中 , 用蒸馏水定容
至刻度 , 即为还原糖提取液。准确量取提取液 1.0mL, 按
1.3.2项操作 , 配置溶液。以试样空白作参比 , 在 540nm
处测定其吸光值 , 并计算含量。
2　结果
2.1　芦丁标准曲线及绿萝花总黄酮含量
据 1.3.1, 以浓度为横坐标 , 吸光度为纵坐标制备芦丁
标准曲线。得出芦丁标准溶液浓度 C与吸光度 A的标准曲
线回归方程 C=5.5768x-0.011 , 其中 r2 =0.9978.
2.2　总黄酮最佳提取条件
分析结果表明 , 影响超声波提取绿萝花中总黄酮的主
次因素为溶剂量 , 提取时间 , 乙醇浓度。最佳的提取条件
组合为 70%乙醇在 50℃下超声波提取 1.5h、 提取体
积 80mL。
2.3　葡萄糖标准曲线及绿萝花还原糖含量
据 1.3.2以葡萄糖含量为横坐标 , 光吸收值为纵坐标 ,
绘制标准曲线。得葡萄糖标准溶液浓度 C与吸光度 A的标
准曲线回归方程 C=2.5536x-0.0084 , 其中 R2=0.9991。
按下式计算出样品中还原糖和总糖的百分含量:
还原糖 (以葡萄糖计)%= C×Vm×1000×100
式中:C———还原糖提取液的浓度 mg/mL;
V———还原糖提取液的总体积 mL;
m———样品重量 g;
1000———mg换算成 g的系数。
3　讨论
黄酮类化合物是植物中非常重要的一类次生代谢产物 ,
是植物中广泛存在的一种有效成分 , 具有活血化淤 、 保肝
抗炎 、 抗菌 、 抗病毒及泻下 、 解痉等药理作用。因此 , 绿
萝花中总黄酮成分分析 , 是了解其药理作用和合理开发的
基础工作。总黄酮提取的最佳条件是用 70%乙醇在 50℃下
超声波提取 1.5h, 提取体积 80mL。绿萝花中总黄酮的
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　　　中国民族民间医药
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民 族 医 药
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蒙西医结合诊治心内膜下心梗 1例
陈　艳　王　丽　包桂芝
辽宁省阜新市蒙医药研究所, 辽宁　阜新　 123100
【关键词】　蒙西医;结合诊治;心内膜下心梗
【中图分类号】R542.2　　　 【文献标识码】A　　　　 【文章编号】 1007-8517 (2010) 13-0003-01
　　病例:患者张某 , 男 , 65岁。主因阵发性心前区闷痛
半个月加重 2天入院。曾于半个月前诊断为冠心病 , 心绞
痛 , 心律失常。口服及静点扩血管药物后症状减轻 (具体
用药不祥)。 2天前突发心前区剧烈闷痛达 20分钟 , 频繁
发作。既往高血压病史 20年。四年前患脑梗塞已愈。查 T:
36℃, P:98次 /分 , BP:160/100毫米汞柱 , 心界向左下
扩大 , 最远点达胸骨左缘第 5肋间锁骨中线外 0.5厘米。
心音响亮 A2 >P2 , 可闻早搏。脉象滑而数 , 舌质红 , 黄色
薄苔 , 尿黄气味大。 查心电图窦性心律 , 98次 /分 , Ⅱ Ⅲ
aVFqR型 , q波 <0.03秒 , 电压 <0.15毫伏∨ 4- ∨ 6ST
下移 , T波倒置。 给予抗凝营养心肌治疗及检查心肌酶 ,
第 2天再次做心电图 , ∨ 2— ∨ 4T波倒置加深 , 呈冠状 T
波 , 且 R波逐渐减低 , 并且检查心肌酶 LDH逐渐上升
CPK, CPK—MB逐渐下降。可初步诊断冠心病—心内膜下
心梗 (无 Q波性心梗)。蒙医诊断为心刺痛症 , 属血性刺
痛。不益溶栓 , 给予西药扩冠 , 抗凝 , 营养心肌治疗。静
点硝酸甘油 , 肝素钙及能量合剂及阿司匹林口服。蒙药以
清心 , 活血 , 镇痛为原则 , 用清心红花七味丸加白檀香 ,
冰片早晚饭后以三旦苏木汤送服 , 午饭后给与镇痛六味丸
以广枣 , 苦参 , 柯子三味汤送服。入院后第 7天再次出现
心前区疼痛伴大汗 , 复查心电图∨ 1 -∨ 5T波倒置 , ∨ 3-
∨ 4冠状 T波变浅 , 自服硝酸甘油 2粒约 6, 7分钟缓解。
于一个半小时后再次发作疼痛较剧烈 , 查心电图 ∨ 1 -∨ 5T
波正向 , ∨ 4, ∨ 5ST压低 0.5毫伏 , 考虑心梗再发超急性
期 , 出现伪正常心电图 , 立即予尿激酶 25万单位静推 , 50
万单位静点 , 溶栓治疗后无胸闷 , 胸痛。继续给与蒙药骚
血普清散 , 镇痛六味丸以黑云香独味汤送服。如此治疗 20
天后症状好转出院 , 嘱其继续服药并注意休息 , 避免劳累
及情绪激动。随访半年无复发 。
讨论:心肌梗塞病人中决大多数病例的心电图上都出
现病理性 Q波 , 仅有一小部分患者的心电图上不出现病理
性 Q波 , 仅表现为 ST-T改变 。过去把他叫心内膜下心梗 ,
而现在多用 Q波型心梗和无 Q波型心梗来命名。无 Q波型
心梗的心电图表现为不出现异常Q波 , 且R波进行性减低 ,
ST段抬高;ST段下移伴或不伴 T波改变;T波倒置常呈冠
状 T波。如再梗发生在陈旧区 , 原陈旧区 ST段抬高 , T波
直立。
无异常 Q波的心梗还见于下列几种情况:(1)局灶性
心梗 ST不抬高 , 以 ST下移 , T波倒置为主要表现。 (2)
梗塞部位心肌表面导联 ST压低 , T波倒置 , 有心梗的临床
表现和心肌酶的升高 , 是心肌内的损害 , 心电图上表现不
出来。 (3)多发的梗塞 , 位置相对 , 范围相近 , 心电向量
互相抵消 , 心电图表现正常。 (4)特殊部位的心梗常规导
联记录不下来。 (5)超急期心梗 , 典型 Q波未出现时。
(6)心梗和并束支阻滞 , 预激综合症等时掩盖了心梗典型
的心电图改变。所以心内膜下心梗诊断特别困难 , 需密切
观察患者的心电图的动态变化及根据临床上患者的疼痛的
性质 , 部位 , 时间及心肌酶学检查来综合分析 , 正确诊断。
体会 蒙医理论冠心病心肌梗塞属心刺痛病的血性刺
痛 , 是由于体内三根 , 七素功能失调 , 特别是普行赫依受
损 , 精华与糟粕之分解紊乱引起心脉内淤积混浊之血液 ,
气血相搏所致。凡饮食不节 , 长期烟酒及肥甘厚重之品或
心情过于激动均为诱发本病的因素。治疗以理赫依 , 清心 ,
活血 , 强心 , 止痛为原则。清心红花七味丸中红花 , 牛黄 ,
清心热 , 活血 , 加上白檀香 , 冰片均有抑赫依 , 止痛 , 强
心作用。镇痛六味丸中炙马钱子有止痛 , 抑赫依作用 , 广
木香等均有抑赫依 , 止痛作用。同时合用西药扩冠 , 抗凝 ,
营养心肌 , 进一步提高了疗效。心肌梗塞是急性心肌缺血
性疾病 , 发病急骤 , 有生命危险 , 必须用现代医学给予救
治 , 这样才能更好的挽救病人的生命。
(收稿日期:2010.04.09)
含量为 0.994%。此结果为绿萝花总黄酮的提取方法 、 药效
功能的进一步研究提供科学依据。绿萝花的黄酮成分与其
抗病毒的关系有待进一步研究。通过正交实验发现提取液
浓度和提取时间对黄酮的提取影响较大 , 随着数值的增大
而增大 , 但有最高值 , 乙醇浓度过高或时间过长都会引致
部分提取液挥发或者产物变质 , 影响提取率。还原糖是植
物中起重要作用的一类代谢物 , 是植物中大量存在的一种
有效成分 , 能做成抗生素以及发酵原料和培养基等多方面
应用。所以 , 绿萝花中还原糖成分分析 , 是了解其药理作
用和合理的开发的重要工作。由于实验室操作要求 , 未能
达到最高的提取条件 , 本实验采取了方便可行的一种方法 ,
测定绿萝花中还原糖的含量为 1.486%, 此结果亦符合要
求 , 证明本次提取方法可行 , 为将来同类的检测提供了
资料。
参考文献
[ 1] 朱笃 , 陈飞彪等.金鸡菊总黄酮的提取及含量测定 [ J] .食品科学 ,
2005, 26.
[ 2] 马稳 , 袁红霞.微波辅助提取芦荟中芦荟多糖的研究 [ J] .食品科
技 , 2008.
(收稿日期:2010.04.12)
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