全 文 ：343
红托竹荪多糖抗衰老和降血糖作用研究
叶 敏1，2，文 竹1，2，彭源芳1，张达贵1
(1.毕节学院化学化工实验教学中心，贵州毕节 551700;
2.贵州省应用化学特色重点实验室，贵州毕节 551700)
收稿日期:2015－10－16
作者简介:叶敏(1979－)，女，硕士，副教授，从事天然产物生物活性研究，E－mail:28719861@ qq.com。
基金项目:贵州省科技厅、毕节市科技局、毕节学院科技联合基金项目黔科合 J字 LKB［2012］06 号。
摘 要:目的:考察红托竹荪多糖(Dictyophora rubrovalvata polysaccharide，DＲP)的抗衰老和降血糖作用。方法:采用水
提醇沉法提取 DＲP。采用皮下注射 D－半乳糖的方法构建衰老模型小鼠，同时 DＲP按低剂量(100 mg /kg·d)和高剂量
(300 mg /kg·d)灌胃，35 d后测定各组小鼠血清和肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽－过氧化物酶(GSH－PX)活
性和丙二醛(MDA)含量;给正常小鼠测血糖后皮下注射四氧嘧啶造高血糖模型小鼠，DＲP按低剂量(100 mg /kg·d)和
高剂量(300 mg /kg·d)灌胃，连续 4 周，每周测一次空腹血糖值;两组实验均设空白对照组和模型组。结果:给药
300 mg /kg·d DＲP可以显著增加 D－半乳糖所致衰老小鼠血清和肝脏中 SOD和 GSH－PX活性，显著降低小鼠血清和肝
脏中 MDA水平;DＲP能降低高血糖模型小鼠的空腹血糖，但效果不明显。结论:DＲP具有延缓衰老的作用，但降血糖
作用不明显。
关键词:红托竹荪，多糖，抗衰老，降血糖，小鼠
Effects of Dictyophora rubrovalvata polysaccharide
on anti－aging and hypoglycemic in mice
YE Min1，2，WEN Zhu1，2，PENG Yuan－fang1，ZHANG Da－gui1
(1.Experiment Teaching Center for Chemistry and Chemical Engineering，Bijie University，Bijie 551700，China;
2.Key Laboratory on Applied Chemistry，Bijie 551700，China)
Abstract:Objective:To study anti－ aging and hypoglycemic effects of Dictyophora rubrovalvata polysaccharide
(DＲP)in mice.Methods:DＲP was extracted by using the method of water extraction and subsequent alcohol
precipitation.The aging model was induced by subcutaneous injection of D－galactose，meanwhile，the mice were
given different dose of DＲP(100 mg /kg·d，300 mg /kg·d)by oral gavage.After 35 days，activity of SOD，GSH－PX
and concentration of MDA in the serum and liver were determined.Hyperglycemic mice models were established
by subcutaneous injection of alloxan.The mice were given different dose of DＲP(100 mg /kg·d，300 mg /kg·d)by
oral gavage.Fasting blood glucose was determined once a week.The two tests included blank control group and
model group.Ｒesults:The activity of SOD and GSH－PX in the serum and liver increased significantly，MDA content
decreased significantly.DＲP could reduce the fasting blood glucose level of hyperglycemic mice，but the effect
was limited.Conclusion:DＲP had anti－aging effects on aging model mice but no hypoglycemic effect in mice.
Key words:Dictyophora rubrovalvata;polysaccharide;anti－aging;hypoglycemic;mice
中图分类号:TS255.1 文献标识码:A 文 章 编 号:1002－0306(2016)07－0343－03
doi:10． 13386 / j． issn1002 － 0306． 2016． 07． 057
红托竹荪(Dictyophora rubrovalvata)，发现于云
南，由臧穆等 3 人联合命名并于 1976 年发表的新种，
是中国特产的竹荪种类，主要分布于云南、贵州等高
山地区的慈竹、刚竹及金竹等林下［1］。红托竹荪是竹
荪家族的珍品，含有丰富的氨基酸、维生素、无机盐
和多糖，其中多糖是红托竹荪子实体中重要组成成
分之一，连宾等研究发现红托竹荪多糖的单糖组成
为半乳糖、葡萄糖、甘露糖和木糖［2］。食用菌生物多
糖是一种非特异性免疫增强剂和免疫激活剂，广泛
用于医药和保健食品，被称为“生物应答调节剂”［3］。
本课题组前期研究发现，红托竹荪多糖具有体外抗
氧化活性［4］。本研究对红托竹荪多糖抗衰老和降血
糖作用进行初步探索，旨在为开发利用红托竹荪资
源提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
红托竹荪子实体 贵州省织金县;SPF级 KM种
雄性小鼠 60 只，体重(22 ± 3)g，重庆腾鑫比尔动物
实验销售有限公司，许可证号:SCXK(军)2012 －
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表 1 DＲP对小鼠血清和肝组织中 SOD、MDA和 GSH－PX的影响(珋x ± s，n = 6)
Table 1 Effect of DＲP on SOD，GSH－PX and MDA of mice in the serum and liver(珋x ± s，n = 6)
组别
SOD MDA GSH－PX
血清
(U/mL)
肝脏
(U/mgprot)
血清
(U/mL)
肝脏
(U/mgprot)
血清
(U/mL)
肝脏
(U/mgprot)
空白对照组 189.92 ± 25.58 263.36 ± 25.39 11.87 ± 2.45 3.78 ± 1.09 671.94 ± 20.05 325.35 ± 30.37
衰老模型组 134.46 ± 15.56＊＊ 193.82 ± 25.49＊＊ 16.90 ± 2.13＊＊ 7.50 ± 0.63＊＊ 392.56 ± 40.23＊＊ 216.75 ± 36.95＊＊
DＲP低剂量组 145.80 ± 20.23 202.76 ± 28.09 14.03 ± 1.87 6.51 ± 0.63 431.47 ± 18.29 239.84 ± 25.09
DＲP高剂量组 180.08 ± 25.20Δ 242.98 ± 30.37Δ 12.03 ± 1.82ΔΔ 5.73 ± 1.31Δ 641.55 ± 31.34ΔΔ 319.23 ± 31.90ΔΔ
注:＊＊表示与空白对照组相比，p ＜ 0.01;Δ 表示与模型组相比，p ＜ 0.05;ΔΔ表示与模型组相比，p ＜ 0.01;(表 2 同)。
0011;超氧化物歧化酶(SOD)测定试剂盒(生产批号
20141203)、丙二醛(MDA)测定试剂盒(生产批号
20141204)、谷胱甘肽－过氧化物酶(GSH－PX)(生产
批号 20141202) 南京建成生物研究所;D－半乳
糖 Sigma G － 0625;四氧嘧啶(Alloxan) Sigma
A6316;其他试剂 国产分析纯，市售。
GL－20G－C台式高速离心机、TG16 台式高速离
心机、TDZ4－WS台式低速自动平衡离心机 长沙迈
佳森仪器设备有限公司;V － 5800 可见分光光度
计 上海元析仪器有限公司;SZ－97A 自动三重纯水
蒸馏器 上海亚荣生化仪器厂;悦准 II 型鱼跃血糖
仪 江苏鱼跃医疗设备股份有限公司。
1.2 实验方法
1.2.1 多糖的提取 DＲP 参照文献［5］方法并作适
当修改，红托竹荪用 75%乙醇浸泡 48 h 脱脂，置于
烘箱中于 60 ℃烘干、粉碎、过 60 目筛。采用热水浸
提，离心，取上清液减压浓缩后加 95%乙醇进行醇
沉，并置于 4 ℃静置过夜，收集沉淀复溶，经过酶法
脱蛋白，透析除去小分子杂质，再加无水乙醇沉淀多
糖，离心，取沉淀于 50 ℃烘干，即为 DＲP。
1.2.2 抗衰老实验
1.2.2.1 动物分组 SPF级 KM小鼠 24 只，在实验条
件下适应喂养 1 周后随机分成 4 组，即正常对照组、
衰老模型组，DＲP低剂量组和 DＲP高剂量组，每组 6
只。除正常对照组每天皮下注射等体积生理盐水
外，其余各组每天皮下注射 200 mg /kg D－半乳糖，连
续 5 周。同时开始灌胃给药，DＲP 低、高剂量组分别
按 100、300 mg /kg·d的溶液灌胃给药，正常对照组和
衰老模型组小鼠分别灌胃等体积的生理盐水［6］。
1.2.2.2 生化指标及脾脏、胸腺指数测定 小鼠连续
灌胃 35 d，在末次给药 24 h 后称体重，摘眼球取血，
立即分离血清，采血后脱颈椎处死，解剖取出肝脏并
按南京建成试剂盒说明书制备肝组织匀浆。小鼠血
清和肝组织匀浆中 SOD、GSH－PX 活性和 MDA 含量
按试剂盒中说明书进行操作测定，用考马斯亮蓝法
测定组织蛋白质含量。同时取出小鼠的胸腺和脾
脏，生理盐水冲洗 2 次，滤纸吸干水分立即称重，测
定脏器指数，胸腺(脾脏)指数以每 10 g 小鼠体质量
含有的胸腺(脾脏)质量(mg)表示［7－8］。
1.2.3 降血糖实验 SPF 级 KM 小鼠在实验条件下
适应性喂养 1 周后，将 36 只小鼠随机分为 2 组，第 1
组 6 只为空白对照组，第 2 组 30 只为造模组。造模
时小鼠禁食不禁水 12 h，腹腔注射四氧嘧啶(现配现
用，以生理盐水配成 2%溶液)，每日 1 次，连续 2 d，
每次剂量为 200 mg /kg。注射后自由进食。末次注
射四氧嘧啶 24 h后，用试纸测空腹血糖，取血糖值 ＞
11.1 mmol /L 者为造模成功的小鼠。取造模成功的
18 只小鼠随机分为 3 组。即 DＲP低剂量组、DＲP 高
剂量组和模型组。低剂量和高剂量组分别按每天
100、300 mg /kg·d 灌胃 DＲP 溶液，正常对照组和模
型组小鼠分别灌胃等体积的生理盐水，每天 1 次，连
续 4 周，自由进食，饮水。小鼠连续灌胃给药 4 周，每
周末小鼠剪尾取血，用血糖试纸测其空腹血糖，取血
后用棉球压迫止血并用云南白药止血药涂在伤口处
止血［9－10］。
1.3 数据处理
数据采用 SPSS 19.0 统计软件进行分析，组间比
较采用 t 检验进行比较，数据用 珋x ± s 表示，p ＜ 0.05
为有统计学意义。
2 结果与分析
2.1 抗衰老实验
2.1.1 DＲP 对小鼠血清和肝组织中 SOD、MDA 和
GSH－PX的影响 由表 1 可知，给予 D－半乳糖的衰
老模型组小鼠血清和肝脏中 SOD、GSH－PX 活性明
显低于空白对照组(p ＜ 0.01)，而MDA含量明显高于
空白对照组(p ＜ 0.01)。与衰老模型组比较，DＲP 高
剂量组小鼠血清和肝脏中 SOD、GSH－PX 活性显著
升高，均具有统计学意义(p ＜ 0.05 或 p ＜ 0.01)，DＲP
低剂量组小鼠血清和肝脏中 SOD、GSH－PX 活性有
所升高，但无统计学意义;DＲP 高剂量组小鼠血清和
肝脏中 MDA含量均低于衰老模型组，具有统计学意
义(p ＜ 0.05 或 p ＜ 0.01)，DＲP 低剂量组小鼠血清和
肝脏中 MDA含量有所下降，但无统计学意义。
2.1.2 DＲP对小鼠脾脏和胸腺指数的影响 由表 2
可知，和空白对照组小鼠相比，衰老模型组小鼠胸腺
指数和脾脏指数明显下降(p ＜ 0.01)，而给予 DＲP 多
糖能抑制小鼠胸腺指数和脾脏指数的下降，DＲP 低、
高剂量组对小鼠胸腺指数和脾脏指数的影响和衰老
模型组相比具有极显著差异(p ＜ 0.01)。
2.2 DＲP对实验小鼠血糖浓度的影响
由表 3 可知，高血糖模型组、DＲP 低、高剂量组
与空白对照组小鼠的空腹血糖值比较，差异显著
(p ＜ 0.05)，说明造模成功。给药 4 周后，DＲP 低、高
345
表 3 DＲP对小鼠空腹血糖的影响(珋x ± s，n = 6)
Table 3 Effect of DＲP on fasting blood glucose of mice(珋x ± s，n = 6)
组别 造模后 给药 1 周 给药 2 周 给药 3 周 给药 4 周
空白对照组 5.38 ± 0.41 5.48 ± 0.51 5.47 ± 0.23 5.32 ± 0.26 5.13 ± 0.28
高血糖模型组 14.13 ± 1.73* 14.71 ± 2.44 14.02 ± 1.90 14.37 ± 1.63 13.45 ± 1.91
DＲP低剂量组 14.30 ± 1.74* 13.98 ± 1.96 13.53 ± 1.82 13.23 ± 1.80 12.42 ± 1.32
DＲP高剂量组 13.53 ± 1.82* 13.01 ± 1.75 12.45 ± 1.70 11.80 ± 1.50 11.73 ± 1.57
注:* 表示与空白对照组相比，p ＜ 0.05。
剂量组小鼠血糖均有降低，但没有达到空白对照组
小鼠空腹血糖，且不具有统计学意义，说明 DＲP对小
鼠降血糖作用不明显。
表 2 DＲP对小鼠脾脏和胸腺指数的影响(珋x ± s，n = 6)
Table 2 Effect of DＲP on spleen index
and thymus index of mice(珋x ± s，n = 6)
组别
胸腺指数
(mg /10 g)
脾脏指数
(mg /10 g)
空白对照组 14.11 ± 1.73 51.18 ± 4.08
衰老模型组 9.27 ± 1.64＊＊ 36.65 ± 3.21＊＊
DＲP低剂量组 12.12 ± 0.88ΔΔ 44.05 ± 2.72Δ
DＲP高剂量组 13.91 ± 0.84ΔΔ 48.11 ± 6.31ΔΔ
3 结论与讨论
衰老机制之一的自由基学说认为体内物质代谢
中产生的自由基易与细胞内的脂质、蛋白质和 DNA
等组成物质发生反应，从而改变这些物质的结果和
功能，使细胞的结构和功能受到损伤、甚至发现细胞
凋亡，最终导致生物体衰老［11］。D－半乳糖所致的亚
急性衰老模型因其变化明显，模型稳定，在天然产物
抗衰老研究中被广泛应用，血清与组织中 SOD、GSH
－PX 的活性及 MDA 的含量都是反映机体氧化应激
水平即清除自由基能力的指标［12］。本实验结果显
示，衰老模型组与空白对照组相比，小鼠血清和肝脏
SOD和 GSH－PX活性极显著下降(p ＜ 0.01)，而MDA
含量极显著升高(p ＜ 0.01) ，说明造模成功。而 DＲP
高剂量组与衰老模型组相比，小鼠血清和肝脏 SOD
显著上升(p ＜ 0.05)，GSH－PX 活性极显著上升(p ＜
0.01) ，血清 MDA 含量极显著降低(p ＜ 0.01)，肝脏
MDA 含量显著下降(p ＜ 0.05)，说明 DＲP 能增强小
鼠在衰老状态下内源性抗氧化酶的活性，减少脂质
过氧化，从而减轻机体组织的损伤得以延缓衰老［12］。
胸腺与脾脏是机体重要的免疫器官，其结构的正常
与否直接影响机体的免疫功能，胸腺指数与脾脏指
数是反映机体胸腺和脾脏免疫功能的重要指征之
一，其数值高低的变化可以反映机体免疫功能的状
态［13］。实验结果表明，与衰老模型组比较，DＲP 低、
高剂量组小鼠的胸腺、脾脏指数显著增加，说明 DＲP
具有提高机体免疫能力的作用。关于植物多糖对于
小鼠降血糖的作用已有研究证明其效果显著［14－16］，但
本实验结果表明，DＲP降血糖效果不明显。
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