全 文 :达的亚细胞系 ,研究 EGCG诱导的 p57 /KIP2与半胱
天冬酶 14表达之间的相互关系 ,同时检测半胱天冬
酶 14在正常人和牛皮癣患者皮肤中的表达。
以免疫组化方法确定半胱天冬酶 14在 N HEK
中的表达 ;用半定量 RT-PCR检测 EGCG对 p57 /
KIP2和半胱天冬酶 14 m RNA表达的调节作用 ;以
蛋白质印迹法测定 EGCG改变的 p57 /KIP2和半胱
天冬酶 14蛋白水平 ; M T T法测定 p57 /KIP2的表达
与细胞对 EGCG应答之间的相关性 ;以血细胞计数
仪和台盼蓝排除法评价细胞生长。结果显示 , N HEK
与 EGCG培养 24 h,半胱天冬酶 14在胞质液和细胞
核中大量表达 ,而无 EGCG存在 ,半胱天冬酶 14几
乎测不到。在牛皮癣患者皮肤样品中半胱天冬酶 14
表达下降 ,而对正常皮肤半胱天冬酶 14表达影响甚
微。NHEK与 EGCG培养 2 h,诱导 NHEK p57 /KIP2
表达 , 6 h时出现大量p57 /KIP2 mRNA(为对照组的
5倍 ) , 24 h时降至对照组的 3倍 ;相比之下 , EGCG
对半胱天冬酶 14 m RNA的诱导快速且持久 , 0. 5~ 8
h时为对照组的 14~ 17倍 , 12 h升至 25倍 , 24 h时
降到 18倍。 NHEK与 EGCG培养 4 h,使 p57 /KIP2
蛋白水平升高 , 8 h时达峰值 (是对照组的 14倍 ) ,此
后保持相对稳定 , 24 h时下降至对照组的 7倍 ;而半
胱天冬酶 14的蛋白水平在 4~ 24 h逐渐升高至 5倍。
EGCG 100μmol /L时对表达 p57 /KIP2的 OSC2细
胞亚克隆系的 S1、 S2和 S3均无细胞毒性 ,在 200
μmo l /L时对 S1~ S4显示的细胞毒性低于对 OSC2
和 G6的细胞毒性。与经 EGCG处理的 NHEK类似 ,
经 100μmol /L EGCG处理的 S1、 S3和 S4细胞的生
存能力增强 ,对 S5细胞的影响则较小。 p57 /KIP2在
O SC2和 G6细胞中的表达减弱 ,而在 S1、 S2、 S3和 S5
中的表达增强 ;且半胱天冬酶 14 mRNA的水平在 S
亚细胞系中表达增强 ,表明半胱天冬酶 14基因表达
被激活。以上结果表明 , EGCG在诱导表皮角质细胞
的分化中不但涉及 p57 /KIP2,而且包括对半胱天冬
酶 14的上调。 EGCG是否对细胞分化有调节 ,进而
开发为可临床应用的绿茶制剂值得进一步研究。
(仲 浩摘 姚庆强校 )
200 玉蜀黍提取物可调节清醒大鼠肾小球功能和
钾离子经肾排泄 〔英〕 /V ela zque z D V O…∥ Phy-
tomedicine. -2005, 12( 5) . -363~ 369
玉蜀黍 Zea mays L. 的穗丝、柱头或花柱在传统
上用于利尿和促尿酸排除。然而它们对肾功能和溶
质分泌的影响还缺乏研究。作者研究了玉米穗丝水
提取物对水、 Na+ 、 K+ 和尿酸经泌尿道排泄的影响 ,
还研究了对肾小球功能、近端肾小管功能和管内
Na
+潴留的影响。
将 94只雄性 Wista r大鼠单独饲养于代谢笼中。
在试验 1中 ,对照组和各试验组大鼠 ig水 2. 5 mL /
100 g , 2 d后各试验组动物饮水中分别加入玉米穗
丝水提取物 25、 50、 200、 350、 500 mg /kg ,以后每 5 h
测定排尿量和 Na+ 、 K+的分泌。 在试验 2, ig给水 ( 5
m L /100 g )的大鼠服用 500 mg /kg (加至水中 )的玉
蜀黍水提取物 ,每隔 3 h收集尿液 ,通过肌酸酐清除
率 ( Clcr )、 Li清除率 ( ClLi )和管内 Na+ 潴留等参数 ,测
定玉蜀黍水提取物对动物尿量、 Na+ 、 K+ 和尿酸的
排泄、肾小球和近端小管功能的影响。结果显示 ,在
试验 1,玉蜀黍 25、 50和 200 mg /kg剂量组及相应对
照组间的尿量、 Na+ 和 K+ 的排泄无明显差别 ; 500
mg /kg剂量组与其对照组相比 ,尿量增加 , Na+ 排泄
无变化 ; 350和 500mg /kg剂量组尿钾排泄无明显变
化。在试验 2,玉蜀黍水提取物 500 mg /kg使尿钾排
泄增加 ,但尿量、 pH值、 Na+ 、 Li+ 、尿酸、肌酸酐排泄
未发生改变 ;肾小球功能和过滤器负荷减弱 ;近端小
管功能和 Na+排泄未发现明显变化 ;小管荷载、近端
小管部分 Na+ 重吸收减弱 ,远端小管 Na+ 重吸收增
加。总之 ,玉米穗丝水提取物在 500 mg /kg时对清醒
大鼠 (灌水 2. 5 mL /100 g )有利尿作用 ,在 350和 500
mg /kg时有钾尿作用 ;在 500 mg /kg时对清醒大鼠
(灌水 5. 0 mL /100 g )有排 K+ 作用 ,但肾小球过滤率
和过滤负荷减少 ,而不影响近端小管功能和对 Na+ 、
尿酸的排泄。
(潘小海摘 潘家祜校 )
201 绞股蓝水提取物及绞股蓝皂苷Ⅲ和Ⅷ 对麻醉
豚鼠的支气管扩张作用 〔英〕 /Circo sta C… ∥ J
Pha rm Pha rmaco l. -2005, 57( 8) . -1053~ 1057
作者将绞股蓝Gynostemma pentaphyl lum Maki-
no叶粉末水煎 ,提取液过滤、冻干得水提取物。 T LC
及 HPLC检测显示 ,该提取物中绞股蓝皂苷Ⅲ ( Gy
Ⅲ )和Ⅷ ( GyⅧ )的质量分数分别为 0. 9%和0. 4%。通
过组胺和抗原诱导的支气管收缩豚鼠模型 ,比较研究
了绞股蓝水提取物、 GyⅢ 和 GyⅧ 对豚鼠肺换气压
( PV P)的影响 ,以确证绞股蓝的抗哮喘活性。
1)对基础条件下支气管阻力的影响: 雄性豚鼠
分为生理盐水对照组、水提取物 ( 2. 5、 5和 10 mg /
kg ) 3个组、 GyⅢ ( 0. 7mg /kg )组、 GyⅧ ( 0. 3 mg /kg )
组。结果显示 ,所有剂量的水提取物轻微降低 PV P,
174 国外医药·植物药分册 2006年第 21卷第 4期