全 文 ：华中农业大学学报 0 1 (2 ) :5 1 1一 15 4, 1 9 9 1
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拮抗芽抱细菌对玉蜀黍赤霉的拮抗作用
施志新 王道本
(华中农业大学植保系 , 武汉 4 3 0 0 7 0)
摘要 自小麦叶 、 穗分离得到 18 0个 a “蔽以 s P . 分离物 , 其中有 2 个使玉蜀黍赤霉 `么
加矛锚二~ ( S c h w
.
) eP ct h 产生大量厚垣抱子 。 分离物一 2 等使 G . ~ 产生扇形过度分枝 , 91 一 2
可使顶端菌丝溶解 , 5 一 1 、 一 2 等可使菌丝细胞原生质浓缩成颗粒状 。 离体叶针刺接种及离体穗
人工接种的试验结果表明 : 一 2 等能显著减轻叶片或穗部人工接种的发病程度 ,表现出较强的
防病潜力 。
关键词 芽抱细菌 ; 玉蜀黍赤霉 ;拮抗作用 ,小麦
中图法分类号 94^ 32 . 42
自小麦叶面及穗部分离得到的 184 个分离物 ,经平板拮抗测定后 ,得到 2 个对玉蜀
黍赤霉 `奴柳曲 ~ ( sc h w , ) eP tch 有一定拮抗作用的芽饱杆菌 B改蔽` , s P . 分离物 。 本文报道这 2 个分离物与 G . ez ae 的相互作用及其对小麦赤霉病的防治潜能的结果 。
1 材料和方法
1
.
1 供试芽抱细菌和玉蜀黍赤霉的来源 、 保存与培养
所有分离物均 自小麦叶面及穗部分离得到 ,保存于 4℃ 、 牛肉膏蛋白脏洋菜培养基斜
面上 。 供试前三次转管活化 。 供平板拮抗性测定用的细菌培养于牛肉膏蛋白陈洋菜培养
基斜面上 ;供离体穗 、 叶人工接种测定用的细菌 , 接种于牛肉膏蛋 白炼培养液中 , 25 ` C下
1 8 0 r p m 振荡培养 2 天 , 加少时吐温 ( T w e e n 一 2 0 )备用 。
玉蜀黍赤霉自小麦病穗部分离得到 ,保存于 4℃ 、 P D A 斜面上 。 供试前二次转管活化 ,
然后在 25 ~ 28 ℃条件下培养 4一 5 天备用 。
.1 2 平板拮抗性测定
用打孔器从培养好的 G . ~ 菌落边缘取菌丝块 , 移至 P D A 平板边缘
, 培养 2 天后 ,
在距 G . ~ 菌丝块 sc m 的平板另一侧接种供试细菌
, 培养 4 天后 , 测定抑菌带宽度 , 显
微镜下观察 G . ~ 的变化
。
L 3 离体叶针刺接种测定
取生长一致的拔节前后 、 抽穗前的小麦株 (襄麦 8号 ) ,剪去根 、 下部老叶及上部未展
本文 19 9 0一 0 6一 2 5 收到
华中农业大学学报 1 0卷
开 叶 , 留中部 2一 3 叶片 。 将麦株插入 I l on gl an d 培养液中 , 将振荡培养的芽抱菌菌液喷施
于叶片表面 , 2 小时后 , 用打孔器在培养好的 G . ~ 菌落边缘取菌丝块
, 将长有菌丝的
一面贴于 已喷菌液的叶片正面 ,并用针在中央刺一伤 口 。 接种的叶片放在 23 ` C 、 湿度为
85 一 9 0环的光照培养箱中 。 另外设喷清水 (加少许吐温 2 0) 、 接种菌丝 G . ~ 菌丝块及喷芽抱菌菌液不接菌丝块两组对照 。 每处理接种 10 个菌丝块 。 试验重复三次 。 接种后 3 天
按下列标准调查发病情况 : 1级 : 仅在针眼处出现水渍状病斑 ; 2 级 :病斑比针眼大但小于
菌丝块 ; 3级 : 病班与菌丝块同大或稍大 ; 4级 : 病斑明显大于菌丝块 。
1
.
4 离体穗人工接种测定
将抽穗尚未扬花的小麦穗 (襄麦 8 号 ) 自穗颈处剪下 ,插入盛有 H on gl an d 培养液的三
角瓶中 ,将振荡培养的 石妙疏故绍 菌液喷于小麦穗部 , 2 小时后用加样器将 0 . 02 耐 G . ~ 分生抱子液 ( 10 x 10 显微镜下每视野 1 0一 20 个抱子 )注入穗中下部的一个小花中 。 试验没
喷清水 (加少许吐温 20 )接种 G 、 ~ 饱子液 ;喷分离物菌液不接种 G
.
~ 抱子液并喷多菌灵 (4 O% w p ) 8 0 0 倍液 2 组对照 。 每处理 6 穗 , 试验重复 3 次 。 接种 的麦穗 2 ℃下保湿 2
天 ,然后放在 2 ℃ 、 湿度 80 一 90 写的光照培养箱中 。 接种后 10 天按 5 级分级标准记载病
情 [`〕。
2 结果与分析
2
.
1 平板拮抗性测定结果
平板拮抗性测定表明 , 2
力 , 其抑菌带宽度为 7 . 0一 1乐
表 1
个芽抱细菌分离物对 G . ~ 菌落的生长具有不同的抑制能
om m (表 l )
2 个芽抱细菌分离物对 G . ~ 的抑菌带宽度
菌株代号 抑菌带宽度 (二 ) …菌株代· 抑菌带宽度 ( m m ’
12一 1 1 5 . 0
1
` - · 1。一
10一 1 1 4 . 0 … 吕勺一“ 。` 3一 2 1 3 . 3 ! ” 9一 2 10 ` ”2一 B 1 3 . 3 { “ 6一 , ” ’ 71 8一 2 1 3 . 3 { ` 。一 2 ” ` 719一 1 1 2 . 0 } 2 9一 2 “ “8 0一 2 1 2 . 0 1 ” `一 2 “ ` 7
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3 1一 1 10 . 4
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’ 5一 2
显微观察结果表 明 ,拮抗芽抱细菌使 G . ~ 产生大量串生或间生的厚垣抱子
。 分离
物一 2 , 1一 A , 2一 B 等能使 G . ~ 产生扇形过度分枝
,
91 一 2 可使顶端菌丝溶解 , 5一 1 ,
一 2 等可使菌丝细胞的原生质浓缩成颗粒状 。 所有拮抗芽抱细菌均使 G . ~ 在拮抗圈附
2期 施志新等 :拮抗芽抱细菌对玉蜀黍赤霉的拮抗作用
近产生较多红色素 。
2
.
2 叶片针刺接种测定结果
叶片针刺接种测定 31 株分离物 ,结果 (表 2) 表明 : 它们对 G . ~ 均有一定防治效
表 2 拮抗芽抱细菌接种离体叶对 G . z ea 。 的防病效果
处理 平均病级 处理 平均病级
清水 ( e k ) 3 . 8 0 a A
!
3`一 ` 2 · “ 7 · 罗
3 9一 2 3 . 3 7 a b A B
)
“ 6一 ` 2 ’ 。3 “ 现
8 0一 2 3 . 2 7 a b A B
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` 2 , ` ’ ` “ 7 C 现
2 5一 1 3 2 0 a b A B
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` 。一“ ’ ” 0 c C1 8一 2 3 . 17 a b A B i ` 。一 2 ` ’ ” 7 “ C2一 B 2 . 9 7 b A B { 一 2一 1 2 . 53 bC B } ”一 ”
果 ,通过方差分析得知 , 其中 2一 B 等 9 株芽抱细菌接种的小麦病级与对照存在显著性差
异 , 5一 1等 8 株芽抱细菌与对照处理存在极显著差异 。
2
.
3 离体穗人工接种测定结果
用离体穗人工接种测定 9 株芽抱细菌的防病效果 (表 3) 表明 : 其中经 10 一 1 等 6 株
分离物处理后的离体穗的病情级数与清水对照间存在极显著差异 a( 一 0 . 0 1 ) ; 分离物一 2
处理后的病情级数与多菌灵的药剂处理效果无显著性差异 , 说明一 2 对小麦赤霉病有很
好防治效果 。
表 3 拮抗芽抱细菌接种小麦离体穗对 ` . ~ 的防病效果 ,
处理 病情级数 …处” “ 情级”清水 ( e k ) 3 . 8 9 a A …1 2 - 1 2 6 4 比 二1 0一 2 3 . 4 2 a b A B … 肌一1 2 ’ ` s c 成
2 6一 1 3 . 4 1 a b A B … 卜 2 “ ’ ` 7 c ” c
2 2一 B 3 . 2 8 a b A B … 二_ 2 ’ ` 7 cd C
10一 1 3 . 1 3 b B 一多 , 灵 “ “ 了 ` C5一 1 2 . 9 1 b e B
* 病情级是 3 个重复的平均 ,故 出现非整枝
3 讨 论
在显微镜观察 2 个拮抗芽抱细菌与 G . ~ 作用的结果时发现
, 它们均使 G . ~ 产生大量串生或间生厚垣抱子 ;产生厚垣抱子的多少与抑菌强度无明显关系 。分离物一 2 、 91
一 2 、 5一 l 等能使 G . ~ 产 生扇形过度分枝
,顶端菌丝溶解 ,菌丝细胞原生质浓缩成颗粒
状等特殊变化 ,这些特殊变化的机理及与抑菌能力的关系尚不明了 。
目前 , 国内外进行室 内抗玉蜀黍赤霉的品种选育或 G . ~ 致病力测定时
, 都采用离
体穗人工接种的方法 〔` 一 3〕。 这种方法 已被证明与自然条件下的试验结果相吻合〔 ,一 `〕。 本项
1 5 4 华中农业大学学报 10 卷
研究在离沐穗人工接种试验 中 ,有 6 株分离物表现出较好的防病能力 ,特别是分离物一 2 ,
其防病效果与目前防赤霉病常用药多菌灵困的防效无 明显差别 ,说明其具有很大的应用
潜力 。
参考文献
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) P E T C H
S h i Z ih x i n W a n g D a o be n
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