全 文 ：28 2福 建 农 学 院 学 报 , 4 ( “ ) 2 28一 2 3 2 , 1自应肠
J o u r n a l o f F u ii
a n A g r ie u l t u r a l C
o
lle罗
马唐根瘤内生菌接种马唐的生物学效应 `
王 元贞 郭 坚
( 福建农学院土壤农化系 )
要
从马唐根瘤 中分离、 纯化 了若干细菌性菌株 , 其 中马 7 6 菌株性状稳足 , 且易
于 培 养和保存 。 盆栽和 田间小区试验表明 , 用马 了了6 菌株接种马 唐 , 可 提高 出 苗
率 , 淀进马唐提早分巢和增加分莫数 , 增加 植株高度和茎径 。 叶绿素含量比对 照增
加 3了. 1 % , 地上部产 量比对 照增加 3 0 、 6 0 % 。
引 言
俯仰马 巴根系与含刀沂螺菌的联合共生固氮现 象已有过报道 , 但未提及马唐有根瘤 〔 ’ “〕 。
马店在我国南方习惯上视为田间杂草 〔`勺 , 但其长势旺盛 , 生活力强 , 植株 含氮量较高 , 且
是优良的枚草 〔 ” 〕 。 因此 , 这方而的探索具有重要的意义 。
十年来我们进 行了马 ! ,`犷根姗 内生菌的分离工作 。 1 9了9 年将所分离的菌株回接马唐 , 作
无菌盆栽 试验 , 不施拭吧 。 当年末得到回接结瘤 , 但观察到接菌处理的马唐长势旺盛 , 叶色
浓绿 , 明显优于 对照 , 可能是 作结瘤途径沉进其生 长。 为此 , 1 9 8 0 、 1 9 8 4 年继续进行了一
系列盆栽和 「f }〔: j l小区试验 , 现 洛全古果报 j亘如下 。
材 料 与 方 法
( 一 ) 菌株来源 马 竹 恨粉 经常规 丧面灭 菌 ( 肠 %乙配 5 分钟 , 。 . 1 %升求 5 、 10 分
钟 , 无菌水冲洗 多次 ) , 侮个根扁单独放入盛有根瘤 菌液体 ,L音冷圣的试管中 ( 液层高 1 c m )
培 井 。 并将最后 一次洗涤根姗 的无 菌水 1 m l 单独按 入上 i上:倒嘴: 培弃基试汀中 , 作为对照 。
吸复二次 。 在 28 ~ 30 ℃下培养 3 ~ 10 天后 , 选浪层浦沏 的试管中的很瘸 , 一个灭 菌 墙 介
撇中放 置一个牛即留 , 加无菌水 1 m l , 将根瘤压碎 , 倒入根姗 菌固休培弃基 , 混菌培介 。 选
取培养皿 中生 民出的菌株 , 用于接种 试验 。
( 二 ) 供试植株 供试 马否 D i娜 at ir a : a n g翻 n al 沁 ( L . ) s co p . 采 自本省沙县 和 本
}丈牧草研究室 。
( 三 ) 试验方法 马瞥的播种管理 、 土壤处理及菌株按种方法列 于表 l 、 2 、 3 。
1 0 5 5年 1 月 1 4 日收到。
, 本 院梁 天千 副教授帮助进行马唐植株形态鉴定 ; 福 州市工 业科学技术研究所 电镜室陈辉同志协助马唐根 瘤 切 片 及镜
检 ; 牧草试验得 到本院还振举 教授 、 钱育仁 副教授的支持 , 谨此一 并致谢 .
DOI : 10. 13323 /j . cnki . j . f af u( nat . sci . ) . 1985. 03. 007
3期 王 无贞等 :马唐根瘤 内生菌接种马唐的生物学效应2 2 9
表 , 供 试 马 唐 的 播 种 管 理
T a b
.
1 S
o w i n g a n a g e m e n t o f D i g i t a r i a s a n g u in a l i s f
o r i n v e s t i g a t i o n
试验次数
T e s t n o
播种 日期
D a t e o f
s o w i n g
种子用量或苗数
Am
o u n t o f
s e e d s
u s e d /
s e e
d li
n g s n o
接菌 日期 (月 /日 )
D a t o o f in o e u飞a t王o n
19 7 9
。
1 。 18
19 80 。 1
。
2 8
1
.` 克 /钵
4 苗 /钵
1 /一8 , 3 / 2 0
l / 25
, 3 / x o
,
3 / 17
, 3 / 2礴 ,
4 / 7
, 盛/ 一4
,
4 / 2 1
, 4 / 2 8
,
5八 2 , 5 / 2 6 , 6 / g , 6 / 24 ,
2 / 2 5
, 人/ 3 , 4 / 一3
,
4 / 2 4
,
4 / 7
水 肥 管 理
W
a t e r a n d f
e r t i li z e r
m a n a g e m e n t
不施肥 , 每钵浇等量冷 开水
5 月 2 0 日每钵施 K C 1 2克
及 C a s ( P O 一 ) 2 4 克 , 每
7 / 7 {钵浇等量 自来水
19 8 1 。 2 。 2 5
19 8 4 。 4 , 7
5 苗 /钵
2 5克 / 田 问小区
不施肥 , 每钵浇等量 自来水
不施肥 , 不浇水。
表 2 供 试 土 壤 的 处
T
a b
.
2 T r e a t m e n t o f 5 0 115 f o r in v e s t i g a t io n
理
试脸次数
T e s n o
栽 培 方 式
C
a lt u : e m e t h
o d s R
e p l i e a t io n
土 城 灭 菌 处 理
5 0 11 s t e r n气z a t io n
盆栽 , 16 斤土 /钵
盆栽 , 20 斤土 / 钵
盆栽 , 20 斤土/ 钵
田 问小 区 , 条播
结瘤马唐生长地
结瘤马唐生长地
结瘤马唐生长地
未长过马唐的田 地
12 6℃ , 1 小时涅热灭菌 。
10 5℃ , 10 分钟湿热灭 菌 。
10 5℃, To分钟湿热灭菌 。
不灭菌 。
表 3 马 唐 内 生 菌 接 种 方 法
T
a b
。
3 I n o e u l
a t i o n m e t卜o d s o f e n d o g e n o u s D i g it a r i a s a n g u in a l i s b a e t e r ia
试验次数 接 苗 方 式 茵龄 (小时 )
L i f
e o
f
T e s t n o
马唐种子表面灭菌
S
u r f a e e s t e r i l iZ a t io n o f
D ig i t
a r ia s e e d s
菌株代号
D e s i g n a t io n 班 e t h o d s o f in o e u l a t i o n
n o 。 o
f i
s o l a t e
菌液用量
D
o s a g e o f
in o e u lu m 5 0 1
b a e t e r i a in
h r s
.
9 5 %乙 醇 5 分钟 , 。 . 喘升汞 5
分钟 , 无菌水冲洗 5次以上
同 上
同 上
同 上
马了了6 , 马 7了3 拌种 , 追施 ( 1 次 ) 6o m l /钵
马 7 7 6 , 马 77 3
马7 7 6 ,
马7 7 6 ,
弓平种 , 追施 ( 2 2次 ) 60 m l/ 钵
浸种 12小时
浸种 16 小
, 。 种 , 追施 ( 3 次 )
{
6。。 1/ 钵 …7 2时 , 拌种 ! ’ 。 。m l/ 田 间 } 72
.
_
1
_
:
_ _ … , . 坐区 r . “ . _ … … 「 _ ,
结 果 与 讨 论
( 一 ) 接菌处理对马唐出苗率的影晌
198 4 年田间小区试验表明 , 接菌处理的马唐出苗率比对照区的高 ( 图 l ) 。
福 建 农 黔 院 学 报1 4卷
一一
ǎ曰U 一
图1 接菌处理对马唐出苗率的影响
F1 9
.
1 T h
eo f fe e to sf i
n o cu 飞a t气n o 至r e鼠m on t
n o t h
e emr e go e e er a te
.
图 2接菌处理对马唐分菜 、 株 高的 影有 )
F1 9
.
2T he e至至 e t co s至 i公 o ou 飞a tion tr ea m tn e t
o1 : t he ti飞 l er in gn a dP lan t he ig ht.
(二 )接菌处理对马唐分集的影响
盆栽 试验表明 , 接菌处理的马唐分桑期早 , 分粟数量多 ( 表 4 、 图 2 ) 。 从表 4 可以看
出 , 4 月 2 3 日对照组才开始出现分桑 , 接菌组的每钵平均 为 10 . 8 个 。 若要达到相近 的分孽
数 ( 如 10 个 /钵 ) , 接种处理的比对照的提前约半个月 。 接菌处理的马唐在开始分孽后一个
多月 , 分孽渐趋缓慢 , 但分孽数仍显著多于对照组 。
表 4 接 菌 处 理 对 马 唐 分 莫 的 影 响
T
a
b
。
4 E f f e e t s o f in o e u l a t io n t r e a t尔 e n t o n th e t i ll e r i n g o f D ig i t a r i a s a n g u in a l i s
’
_ 。 …” 二 ’ 芬 ’ , `妥一 ’斌 ,o’i 一 i1t讯 g伙 以 }It e m s A p r . 2 3 Ap r . 3o M a y 7 M a y 14 M a y 2 1 M a y Zs Ju n e 4 Ju n e l o
接菌 [n o e u, a t lo n 10 。 仑 18 2 4 4 1 。 5 4 2 。 8 5 0 。 8 5 2 。 3 5 3 。 8
对 照 C l e c k 0 。 8 4 。 3 9 15 。 5 2 3 。 8 3 1 。 3 3 1 。 3
3
。
22 3
显 著
3 2 。 5
t 值 t v a lu e
显 著 性
5 i g n i f i
e a n e e
1 1 。 2 3 6 。 6 6 3 4 。 18 7 3
。
8 13 2
。
7 14 3
。
4 20 2 。 8 2 1
极显著 极显著 极显著 极显著 显 著 显 著 显 著
( 三 ) 接菌处理对马唐株高的影晌
接菌处理对马唐的株高增长有促进作用 , 在苗期尤其明显 , 其幼苗株高极显著高于对照
( 表 5 、 图 2 ) 。
3期 王 元贞等 :马唐恨瘤内生菌接种马唐的生物学效应 2 3 1
表 5接 菌 处 理 对 马 唐 株 高
T a b
.
5 E f f
e e tso fi no eu l atio nte r atm e nto n
的 影 响
D i g l t ari s a a ng l ti a nli s
项 目
Ite 血 s
接 菌 Iu o e nl atio n
对 照h Ce ek
t值 tv alu e
显著性 Si g ns fi eo e ae
l P、 nth ei gh t(em )
Ap r
.
2 3
株
M a y7
th eh ei gh t
(厘米 )
M
a yM
a y2 1
4
。
6 5
3
。
0 2
2
,
13 5
不 显著
O 。 3 3
4
。
7 5
70 4
极显著
1 2
。
3 1
卜 . 飞3
9
。
2 2
权显著
l 尸 。 厂
1 1
。
7 牛
8
。
3 G
极显著
M a :J 2 8
I n
。 勺 1
1 5
。 `玉了
1
。
G g C
不 显著
( 四 ) 接菌处理对马唐茎径 生长的影响
盆栽试验表明 , 接菌处理泥进马唐植株茎径加大 , 比对照姐增加 18 . 5 % , 径 t 测 验 ,
差异达极显著水平 ( 表 6 ) 。
( 五 ) 接菌处理对马唐植株叶绿素含且的影响
盆栽和 田间小区试验 表明 , 接菌处理 的马 唐生 一长旺盛 , 叶绿 浓绿 , }了卜绿 素含 髦比对照增
加 3了. 1 % , 经 t 汉l验 , 差异达极显著水平 ( 表 6 ) 。
表 6 接菌处理对马唐生育 、 叶绿素含量 以及产最的影响
T a b
.
6 E f fe e亡5 o f i n o e 。飞a t i o n t r e a tm o n t o n 亡h e d e v o lo p m e n t , e h }o r o p b y ll e o n t e n 士 a n d y 王e ld o f
D 19让a r i a s a o g u in a飞15
茎叶干重
( 克 ) 。
分 奠 数
( 个 / 钵 ) .
茎 径 小区产量
I上e m s D r y w *
.
o f s t e m T i l l
e r in g
a n d le a f ( g )
n o
.
/ p
o t S t o m 〔1二a . Y i o a d P e r P lo t
( rn m ) ( k g )
叶 绿素含量
( m g / 克鲜叶重 )
C o n t e n t s o f e h !
o r o
.
m g / g
f r e s h w t
。
接 菌 处 理
I
n o e u l a t io n
对 照 C b e e k
差 数
接菌 比对 照增减 %
t 值 t v a l u e
显著性 S i g n if f ie a n e e
13 G
。
3 2 8
。
7 1 1
。
0 6 3 0
。
3 9 0
8 3
。
O
5 3
。
3
+ 6 4
。
2
2
。 勺 0 3 1
显 著
1 9
。
8
8
。
9
+ 4 4
。
9
6 4 9
十 3 7
3 。 13 3
显 著
十 1 8 。 5
3
。
2 74
极 显 著
6
。
q 7
4
。
O分3
+ 5 8
。
7
4
。
3 15 8
显 著
5 。 1 0 4
极显著
. . . . . . . . . . . . . . . . . , . 卜. . . . . 曰. 口 . . . . r , . . . . . . . . ` . . . . . . 口 . ` . . ` . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ` . ` . . . . . . . . . . 目` . “ 一~一一 ~ _ _一 _ _ 一 ~一 _一, 每钵 4 株的 总量 。( 六 ) 接菌处理对马唐产且的影响
马庚经接菌处理后 , 地 上部产量大大增加 。 盆 栽试验的茎叶干重比对照 .僧加 6 4 . 2% , 经
t 测验 。 羞 异显著 。 川间小区产量 比对照增加 58 . 7 % , 经 t 测验 , 差 异 也达 显著水平 (表 6 ) 。
参 考 文 献
( l ) 王 元贞等 , 19 了6 . 新找到两种野生禾本科植物具有根瘤 . 福建省微生物学术讨论会材料 , 1 一 4 。
( 2 ) 王 元贞等 , 19 了8 . 新找到两 种具有根瘤的 野生禾本科植物束尾草与马唐 . 福建省土 壤肥料微生物学术讨论会资料选
编 ( 第三 集 ) , 农用微生物 , 1 5一 17 .
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23 2福 建 农 学 院 学 报 4 1卷
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J
o u r n a l
14 ( 3 )
o f F
u
i又a n
2 2 e一2 3 2 .
A g r 玉e u l t u : a l C o l le g e
19 3 5
T H E B I O L O G I C A L E F F E C T S O F T H E N O D U L E
B A C T E R IA L I N O C U L U M T H A T IS O L A T E D F R O M
D I G I T A R IA S A N G U I N A L IS ( L
.
) S C O P
.
W
a n g Y u a n z h e n a n d G u o J i a n
( D e p十 . o f 5 0 11 S e ie n e e a n d A g r o e h e m i , t r y , F A C )
A b s t r a e t
R o o t n o d u l e b a e t e r i a w o r : i s o l a t e d a n d p u r i f i : d f r o m D f夕f t a r f a s a n夕u f -
九 a l f s ( L
.
) S e o p
.
T h i s i s o l a t e u s e d f o r i n o e u l u m w a s d e s i g n a t e d a s M
a 7了6
w h i e h w a s v e r y s t a b l e a n d e a s y t o p r e o e r v e
.
A s e r i e s o f p o t e x p : r i m e n t s a n d f i e l d p l o t e x p e r i m e n t s w e r e p e r f o r m e d
.
P o t e x p e r i m Z n t s w e r e p e r f o r m e d e i t h e r s t e r i l i z e d t h e 0 0 11 o f t h e w h o l e p o t
12 6 ℃ f o r o n e h o u r i rt t r n a u t o e l a v e , o r p a r t i a l 一 s t e r i l i z a t i o n o f t h e p o t
5 0 11 1 0 5 oC f o r t e n m i n u t o s
.
B o t h t r e a t m e n t s s h o w e d g o o d r e s u l t
s o f f
o r a g e
g r o w t h w h e n s o w n w i t h g r a s s s e e d s a n d w i t h o u t n i t r o g e n f e r t i l i z a t i o n
.
S m a l l
p l o t f i o l比 e x p e r i m e n t s w i t h o u t 5 0 11 f e r t i l i z a t i o n w e r e a l s o p o r f o r m e d a t
t h e s a m e t i m e
.
R e s u l t o o f t h e p o t e x p e r i m e n t s f r o m 1 9 7 9
,
1 9 s r
, a n d z 9 8 4 a l l a p p e a r e d
: o o d s e e d g e r m i n a t i o n
,
g o o d g r o w t h
, g o o d t i l l e r i n g
,
h i g h e h l o r o p h y l l
e o n t e n t s o f t h e l e a v e s
, a n d i n e r e a s e d h e i g h t s o f t h e p l a n t s
.
F i e ld p l o t
e x p : r i m e n 亡5 s h o w e d t h e s a m e r e s u l t s .
D i g f t a r i a 15 a g r a m i n a e e o u s f o r a g e e o m m o n ly g r o w n w i l d i n s o u t h e r n
C h i n a
.
T h i s f o r a g e 15 p a l a t a b l e a n d e s p o e i a l ly r i e h i n p r o t e i n
.
B y i n o e u l a
-
t i o n , t r o a t e d D `g ` t a r f a i n e r e a s e d t h e a b o v e g r o u n d y i e l d b y 3 0% t o 6 0% i n
e o m p a r i s o n w i t h t h e e h e e k e x p e r i m e n t
.
5 0
,
i t 15 s p e e u l a t e d t h a t i n o e u l a t i o n
0 f r o o t n o d u l e b a e t e r i a t h a t p r o m o t e t h e g r o w t h o f t h i s g r a s s m a 了 b e o f
i n t e r e s t t o m a i n t a i n f i n e p a s t u r e g r a s s lo n d f o r
一
g r a : i n g
.