全 文 ：天然产物研究与开发 Nat Prod Ｒes Dev 2016，28:416-419
文章编号:1001-6880(2016)3-0416-04
收稿日期:2015-11-12 接受日期:2016-01-20
基金项目:贵州省科技厅、毕节市科技局、毕节学院科技联合基金
项目(黔科合 J字 LKB［2012］06 号)
* 通讯作者 Tel:86-013985893260;E-mail:28719861@ qq． com
红托竹荪多糖抗疲劳和耐缺氧作用研究
叶 敏1，2，3* ，文 竹1，3，黄家振1，谢阳刚1
1毕节学院化学化工实验教学中心;2 贵州工程应用技术学院化学工程天然产物中心;
3贵州省应用化学特色重点实验室，毕节 551700
摘 要:考察红托竹荪多糖(Dictyophora rubrovalvata polysaccharide，DＲP)抗疲劳和耐缺氧活性。采用水提醇沉
法提取 DＲP，建立小鼠负重游泳模型和耐缺氧模型，同时灌胃不同剂量的 DＲP 溶液，15 d 后测定小鼠力竭游泳
时间、耐缺氧时间以及小鼠力竭游泳后血乳酸(BLA)、血尿素氮(BUN)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)
和肝糖原、肌糖原含量。实验结果表明 DＲP能延长负重小鼠的游泳时间，降低疲劳小鼠 BLA、BUN、MDA含量，
升高 SOD、肝糖原和肌糖原含量，延长小鼠常压耐缺氧存活时间。
关键词:红托竹荪多糖;抗疲劳;耐缺氧;小鼠
中图分类号:Ｒ284． 2 文献标识码:A DOI:10． 16333 / j． 1001-6880． 2016． 3． 017
Effects of Dictyophora rubrovalvata Polysaccharide
on Anti-fatigue and Hypoxia Endurance in Mice
YE Min1，2，3* ，WEN Zhu1，3，HUANG Jia-zhen1，XIE Yang-gang1
1Experiment Teaching Center for Chemistry and Chemical Engineering;2 Natural Products Center of
Chemical Engineering，Guizhou University of Engineering Science;3 Key Laboratory on Applied Chemistry，Bijie 551700，China
Abstract:The aim of this study was to evaluate anti-fatigue and hypoxia endurance effect of Dictyophora rubrovalvata
polysaccharide (DＲP)in mice． DＲP was extracted by water extraction and alcohol precipitation． A weight loaded swim-
ming model and a hypoxia model of mice were established． Meanwhile，the mice were given different doses of DＲP by o-
ral gavage． After 15 days，their loaded swimming time and hypoxia resistance time were determined，and then blood lactic
acid (BLA) ，blood urea nitrogen (BUN) ，blood SOD，blood MDA and the contents of hepatic glycogen and muscle gly-
cogen were measured． The experimental results showed that DＲP can prolong the loaded swimming time，decrease the
contents of BLA，BUN and MDA，increase the contents of SOD，hepatic glycogen and muscle glycogen，prolong hypoxia
endurance time．
Key words:Dictyophora rubrovalvata polysaccharide;anti-fatigue;hypoxia endurance;mice
红托竹荪(Dictyophora rubrovalvata Zang，Ji et
Liou)是一种担子菌，隶属真菌门(Eumycota)、担子
菌亚门(Basidiomycotina)、腹菌纲(Gasteromycetes)、
鬼笔目(Phallales)、鬼笔科(Phallaceae)、竹荪属(Di-
ctyophora) ，是世界上名贵的大型食用菌之一，野生
红托竹荪主要分布在我国贵州中(西)部、云南、四
川和浙江等省，多生长于竹林下的腐殖土上［1］。近
年来的研究发现，红托竹荪含有丰富的氨基酸、维生
素、无机盐和多糖。其中多糖是红托竹荪子实体中
重要组成成分之一，其单糖组成为半乳糖、葡萄糖、
甘露糖和木糖［2］。而食用菌生物多糖是一种非特
异性免疫增强剂和免疫激活剂，广泛用于医药和保
健食品，被称为“生物应答调节剂”［3］。本课题组前
期研究发现，红托竹荪多糖具有体外抗氧化活性。
本实验就红托竹荪多糖(Dictyophora rubrovalvata
polysaccharide，DＲP)抗疲劳和耐缺氧作用进行初步
研究，旨在为开发利用红托竹荪资源提供理论依据。
1 材料与方法
1． 1 材料、试剂与仪器
红托竹荪子实体，购自贵州省织金县，经遵义医
学院刘云副教授鉴定为红托竹荪(Dictyophora rubro-
valvata Zang，Ji et Liou)。
SPF级 KM种雄性小鼠［许可证号:SCXK(军)
2012-0011］，体质量 24 ± 3 g，购于重庆腾鑫比尔动
物实验销售有限公司。
超氧化物歧化酶(SOD)测定试剂盒(生产批号
20141203) ，丙二醛(MDA)测定试剂盒(生产批号
20141204) ，糖原测定试剂盒 (生产批号 20141126
) ，尿 素 氮 (BUN)测 定 试 剂 盒 (生 产 批 号
20141203) ，乳酸(BLA)测定试剂盒(生产批号
20141204)均购于南京建成生物研究所;其他试剂均
为国产分析纯试剂。
GL-20G-C台式高速离心机(长沙迈佳森仪器设
备有限公司) ，TG16 台式高速离心机(长沙迈佳森
仪器设备有限公司) ，TDZ4-WS 台式低速自动平衡
离心机(长沙迈佳森仪器设备有限公司) ，V-5800 可
见分光光度计(上海元析仪器有限公司) ，SZ-97A自
动三重纯水蒸馏器(上海亚荣生化仪器厂)。
1． 2 方法
1． 2． 1 DＲP的提取
红托竹荪，乙醇(75%)浸泡 48 h 脱脂，置于 60
℃烘箱中烘干、粉碎、过 60 目筛。用热水提取，离
心，上清液减压浓缩，用 95%乙醇沉淀，使醇的终浓
度达 80%，4 ℃静置过夜，收集沉淀复溶，酶法脱蛋
白，透析除去小分子杂质，加无水乙醇沉淀多糖，离
心，取沉淀于 50 ℃烘干，即为 DＲP［4］。
1． 2． 2 实验动物分组［5］
将 18 只小鼠随机分为 3 组，分别为空白对照
组，DＲP低剂量组，DＲP高剂量组，每组 6 只。在实
验条件下适应喂养 1 周后开始灌胃。DＲP 低、高剂
量组分别按每天 100 mg /kg·d、300 mg /kg·d 的溶
液灌胃给药，空白对照组灌服相同体积生理盐水。
1． 2． 3 小鼠负重游泳实验［6］
各组小鼠连续灌胃 15 d，末次灌胃 30 min 后，
给小鼠尾部负重 5%体重的铅丝，放入水温(25 ±
2)℃，水深 30 cm的玻璃缸内游泳，记录小鼠自游泳
开始至头部沉入水中 8 s 不能浮出水面的时间，此
时间即为小鼠力竭游泳时间。
1． 2． 4 常压耐缺氧实验［7］
实验动物分组及给药同“1． 2． 2”。末次给药 30
min后，将各组小鼠分别放入盛有 10 g 钠石灰的
250 mL磨口瓶中，每瓶 1 只，瓶口用凡士林密封，确
保其密封性良好。自小鼠放入瓶中开始计时，以呼
吸停止(小鼠胸部不起伏)为指标，作为小鼠常压耐
缺氧存活时间。
1． 2． 5 检测指标
1． 2． 5． 1 小鼠血清 BUN、BLA、MDA和 SOD含量的
测定［8］
小鼠负重游泳至力竭，休息 15 min 之后，摘眼
球取血，用南京建成试剂盒测定小鼠血清尿素氮
(BUN)、血乳酸(BLA)、丙二醛(MDA)和超氧化物
歧化酶(SOD)含量。
1． 2． 5． 2 小鼠肝糖原和肌糖原的测定［9］
小鼠采血后立即脱颈椎处死，解剖取出肝脏和
后腿肌肉，按照糖原测定试剂盒的要求对肝脏和肌
肉进行处理，测定肝糖原和肌糖原的含量。
1． 2． 6 统计分析
数据采用 SPSS 19． 0 统计软件进行分析，组间
比较采用 t 检验进行比较，数据用 珋x ± s 表示，P ＜
0. 05 为有统计学意义。
2 实验结果
2． 1 DＲP对小鼠负重游泳时间和耐缺氧时间的影
响
由表 1 可看出，与空白对照组比较，灌服 DＲP
的低、高剂量组小鼠负重游泳时间均高于空白对照
组小鼠，分别是空白对照组小鼠的 1． 87 倍(P ＜
0. 05)、3． 23 倍(P ＜ 0． 01)。DＲP 低、高剂量组均能
延长小鼠常压耐缺氧存活时间，与对照组比较有极
显著性差异(P ＜ 0． 01)。实验结果显示，DＲP 能延
长小鼠力竭游泳时间和常压耐缺氧存活时间。
表 1 DＲP对小鼠负重游泳时间和耐缺氧时间的影响(珋x ± s，n = 6)
Table 1 The effect of DＲP on weight loaded-swimming time of mice (珋x ± s，n = 6)
组别
Group
剂量
Dose (mg /kg)
力竭游泳时间
Loaded swimming
time (min)
耐缺氧时间
Hypoxia resistance
time (min)
空白对照组 Blank control － 8． 25 ± 2． 54 16． 68 ± 1． 47
DＲP低剂量组 DＲP-L 100 15． 42 ± 3． 62* 22． 67 ± 3． 28＊＊
DＲP高剂量组 DＲP-H 300 26． 62 ± 5． 30＊＊ 28． 69 ± 2． 81＊＊
注:与空白对照组比较，* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01。
Note:Compared with blank control，* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01．
714Vol. 28 叶 敏等:红托竹荪多糖抗疲劳和耐缺氧作用研究
2． 2 DＲP 对小鼠血清尿素氮、乳酸、MDA 和 SOD
的影响
由表 2 可知，与空白对照组比较，DＲP 低、高剂
量组小鼠血清 BUN含量显著降低，差异具有极显著
性(P ＜ 0． 01) ;与空白对照组比较，DＲP 低、高剂量
组小鼠血清 BLA含量有所降低，低剂量组与对照组
比较，无统计学意义，高剂量组和对照组比较，具有
极显著性差异(P ＜ 0． 01)。与空白对照组比较，
DＲP低、高剂量组小鼠血清 MDA 含量也显著降低，
差异具有极显著性(P ＜ 0． 01) ;DＲP低、高剂量组小
鼠血清 SOD活力和对照组比较，有显著性差异(P ＜
0． 05)。
表 2 DＲP对小鼠血清尿素氮、乳酸、MDA和 SOD的影响(珋x ± s，n = 6)
Table 2 Effect of DＲP on BUN，BLA，SOD and MDA of mice (珋x ± s，n = 6)
组别
Group
剂量
Dose
(mg /kg)
尿素氮
BUN
(mmol /L)
乳酸
BLA
(mmol /L)
丙二醛
MDA
(nmol /mL)
超氧化物歧化酶
SOD
(U /mL)
空白对照组 Blank control － 12． 64 ± 1． 33 20． 70 ± 1． 50 6． 06 ± 0． 87 97． 92 ± 12． 26
DＲP低剂量组 DＲP-L 100 9． 19 ± 1． 25＊＊ 18． 60 ± 1． 35 4． 25 ± 0． 55＊＊ 114． 43 ± 9． 51*
DＲP高剂量组 DＲP-H 300 6． 36 ± 2． 90＊＊ 15． 23 ± 1． 70＊＊ 3． 23 ± 0． 68＊＊ 127． 92 ± 9． 71*
注:与空白对照组比较，* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01。
Note:Compared with blank control，* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01．
2． 3 DＲP对小鼠肌糖原和肝糖原的影响
由表 3 可知，DＲP 低、高剂量组均能提高小鼠
肝糖原和肌糖原含量，且低、高剂量组和对照组比
较，具有极显著性差异(P ＜ 0． 01)。实验结果表明，
DＲP可提高运动后小鼠肝糖原和肌糖原含量，具有
延缓运动导致的肌糖原降低的作用。
表 3 DＲP对小鼠肌糖原和肝糖原的影响(珋x ± s，n = 6)
Table 3 Effect of DＲP on hepatic glycogen and muscle glycogen of mice (珋x ± s，n = 6)
组别
Group
剂量
Dose (mg /kg)
肌糖原
Muscle glycogen (mg /g)
肝糖原
Liver glycogen (mg /g)
空白对照组 Blank control － 0． 44 ± 0． 05 1． 54 ± 0． 21
DＲP低剂量组 DＲP-L 100 0． 84 ± 0． 07＊＊ 2． 70 ± 0． 38＊＊
DＲP高剂量组 DＲP-H 300 1． 24 ± 0． 16＊＊ 4． 30 ± 0． 53＊＊
注:与空白对照组比较，＊＊P ＜ 0． 01。
Note:Compared with blank control，＊＊P ＜ 0． 01．
3 讨论与结论
疲劳是机体复杂的生理生化过程，一般指运动
引起身体与精神状态的下降，伴随着力量下降及生
化指标的改变［7］。小鼠负重游泳实验是测定小鼠
疲劳状况和运动耐力的常用实验方法［10］。实验结
果表明，红托竹荪多糖能延长小鼠力竭游泳时间。
BLA是无氧酵解的产物，长时间剧烈运动使体内乳
酸的累积过多就会影响机体内环境的相对稳定和体
内的正常，这是运动性疲劳的一个重要原因，BLA
水平能比较准确的反映机体的疲劳程度［9］。BUN
反映蛋白质参与代谢的程度，也是检测运动性疲劳
的另一个理想指标［11］。实验结果表明，红托竹荪多
糖能降低力竭运动后小鼠 BLA和 BUN含量。
运动可以引起脂质过氧化反应从而产生自由
基，自由基对肌肉细胞造成损害，从而产生疲劳;
SOD是机体清除氧自由基的重要酶，直接反映机体
抗氧化水平;MDA是自由基引起的脂质过氧化的主
要产物之一，MDA含量可间接表现机体抗氧化能力
及清除氧化产物的能力［12］。灌胃 DＲP 小鼠血清
SOD活性增强，有助于减少自由基的堆积，从而延
缓疲劳;灌胃 DＲP小鼠血清 MDA含量显著降低，表
明 DＲP有助于降低自由基的氧化过程，抵抗机体的
疲劳。
研究结果表明运动导致的体力衰竭和肌糖原的
耗竭同时发生，随着肌糖原消耗的增加，机体为维持
血糖水平，将动用肝糖原而导致肝糖原减少，因此，
肌糖原和肝糖原含量是反映疲劳程度的敏感指
标［13］。实验结果显示，DＲP 低、高剂量组小鼠力竭
运动后肌糖原和肝糖原显著高于空白对照组。
缺氧是一种紧张性刺激，可引起机体产生各种
应激性反应，如脑组织在缺氧缺血时会导致脑组织
能量代谢障碍，出现脑组织病理形态和脑机能失调，
最终导致机体的脑、心等重要器官缺氧供能不足而
814 天然产物研究与开发 Vol. 28
死亡［14］。实验结果表明，DＲP能延长小鼠常压耐缺
氧存活时间。
综上，DＲP能延长小鼠力竭游泳时间和常压耐
缺氧存活时间，提高肝糖原和肌糖原含量，降低力竭
运动后血清 BLA、BUN和 MDA水平，增强小鼠血清
SOD活力，具有抗疲劳作用。
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