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蛇尾草醇提取物镇痛及凝血作用的实验研究



全 文 :总有效率均优于西药组,差异具有统计学意义(P < 0. 05),见
表 1。
表 1 2 组临床疗效变化情况对比 [例(%) ]
组别 治疗时间 例数 显效 有效 无效 总有效率(%)
西药组 6 个月 82 9(10. 98 ) 23(28. 05) 60(73. 17) 39. 02
12 个月 82 21(25. 61 ) 39(47. 56 ) 22(26. 83) 73. 17
联合组 6 个月 58 9(15. 52 )* 31(53. 45 ) 18(31. 03)* 68. 97*
12 个月 58 28(48. 28 )* 20(34. 48 ) 10(17. 24)* 82. 76*
注:与西药组相比,* P < 0. 05
2. 2 不良反应 2 组患者治疗持续 1 周后各自出现 1 例呕吐
者,经行肝肾功能、相关生化检查后,未见异常,继续治疗后未
见异常。联合组于治疗持续 2 个月时,出现 1 例头晕且伴有腹
痛者,综合考虑后减少服用汤剂频次,数日后症状消失,继续服
用未见异常。所有患者均坚持持续治疗 12 个月,依从性较好,
联合组汤剂治疗依从性达到 90%以上。
3 讨 论
阿德福韦酯是治疗 CHB 一线药物,于拉米夫定耐药性
CHB治疗中具有巨大的价值,疗效较显著,据统计连续服用 1、
2、3 年,HBV NDA 阴性率(< 1 × 103copies /ml)分别为 28%、
45%、56%,HBeAg 血清转阴率分别为 12%、29%、43%,本次
研究结果略高,可能与筛选病例标准有关,西药组 12 个月显效
(HBV DNA阴性率)率达到 25. 61%[3]。
中医从辩证论治的角度探讨 CHB证型并给予针对性的治
疗,目前有关 CHB证型研究结果较多,证型可分为四五十种之
多,可见 CHB病情之复杂,牵连甚广。CHB中医病因学论点主
要包括杂气说、伏邪说、内外相召说,明确 CHB乃外因致病、潜
伏传染、体质主导 3 种特征,据病机变化之规律,CHB 各阶段
可表现为不同证型,主要包括肝郁脾虚型、湿热中阻型、肝气郁
结型、肝肾阴虚型等[4]。本次研究中应用的龙虎蛇丹汤据
CHB病机而设,中虎杖、蛇舌草、叶下珠等具有清热去杂气之
效,地龙、丹参等可活血祛瘀调理脏腑以抑邪毒。而其它加减
组方各具效用,如车前子、泽泻、制大黄具有清热解毒、祛痰祛
湿之功效。龙虎蛇丹汤联合阿德福韦酯疗效较单纯应用西药
治疗更显著,但值得注意的是持续治疗 12 个月后仍有 10 例患
者相关指标、症状均无明显改善,相关特征有待进一步深入
研究。
参考文献
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(收稿日期:2014 - 07 - 15)
·疗效分析与评价·
蛇尾草醇提取物镇痛及凝血作用的实验研究
廖昌能
作者单位:533000 广西百色市人民医院药剂科
【摘 要】 目的 探讨蛇尾草醇提取液镇痛及凝血作用。方法 采用热板法测定小鼠痛阈值,醋酸扭体法测定
小鼠的扭体次数。采用毛细管法测定小鼠凝血时间(CT),剪尾法测定小鼠出血时间(BT)。结果 蛇尾草醇提取物
可明显延长热板引起小鼠疼痛反应的痛阀值,同时明显抑制醋酸致小鼠扭体反应,可明显的缩短小鼠的凝血时间和出
血时间。结论 蛇尾草醇提取液有一定镇痛、促凝血作用。
【关键词】 蛇尾草,醇提取物;镇痛;凝血
【中图分类号】 R 45 【文献标识码】 A 【文章编号】 1674 - 3296(2014)10B - 0053 - 02
蛇尾草又名唇角盘兰、蛇含草、鸡心贝母、人头七、土贝母
等,分布于东北至云南、西藏、广西、台湾等地,主要以根茎及全
草入药,性甘、平,归肾、肝、肺三经。具有补肾强筋、润肺抗痨、
养血止血之功效,用于跌打损伤、筋骨劳伤、肺结核、虚劳、刀伤
出血、贫血、两眼昏花等疾病治疗[1],但现代药效学研究报道
较少。本文旨在研究蛇尾草醇提取物的镇痛及凝血作用,为该
植物资源的开发及临床上刀伤出血治疗提供实验依据。
1 材料与方法
1. 1 材料 试剂:吲哚美辛肠溶片(广东华南药业集团有限
公司,国药准字 H44020701);云南白药粉(云南白药集团股份
有限公司,国药准字 Z53020798)。仪器:AR224CN型电子分析
天平(奥豪斯);RE-301 型旋转蒸发仪(北京瑞成设备有限公
司);YLS-6B型热板测痛仪(山东医学科学院设备厂)。动物:
清洁级昆明小白鼠,体质量(20 ± 2)g,由右江民族医学院动物
实验中心提供。
药物的制备:蛇尾草采购于百色药市,经右江民族医学院附属
医院中药房副主任药师鉴定为兰科植物蛇尾草。蛇尾草醇提
取物的制备:取蛇尾草全草 500g,加适量无水乙醇浸润 1h,加
入 1000ml无水乙醇,80℃进行回流提取 2h,分别回流提取 2
次,滤液过滤,合并滤液。旋转蒸发仪浓缩至无乙醇味,得到乙
醇提取物浸膏,备用。
1. 2 实验方法
1. 2. 1 小鼠热板法[2]:选用雌性健康昆明种小鼠,放置于温度
为(55 ± 0. 5)℃热板测痛仪热板上,以小鼠出现舔足为潜伏
期,作为痛阈值。筛选出合格小鼠 50 只(潜伏期 10 ~ 30s),根
据药前痛阈和体重随机分成 5 组,分别为:(1)空白对照组
(NS,等容积);(2)阳性对照组(吲哚美辛 0. 2g /kg);(3)蛇尾
草大、中、小剂量组(10、5、2. 5g /kg)各 10 只。灌胃给药容积为
·35·临床合理用药 2014 年 10 月第 7 卷第 10 期中 Chin J of Clinical Rational Drug Use,October 2014,Vol. 7 No. 10B
1 次 0. 1ml /10g,各鼠测 3 次痛阈值,取平均值作为基础痛阈。
然后灌胃蛇尾草或吲哚美辛 1 次,于灌药后 30、60、120min 分
别测定各鼠的痛阈值 1 次,痛阈值超过 60s 按 60s 计算。比较
各组灌药后不同时间痛阈值差异,判断是否有镇痛作用。
1. 2. 2 小鼠醋酸致痛扭体法[3]:将健康昆明种小鼠随机分为
5 组,每组 10 只,分别为:(1)空白对照组(NS,等容积); (2)
阳性对照组(吲哚美辛 0. 01g /kg);(3)蛇尾草大、中、小剂量组
(10、5、2. 5g /kg)。灌胃给药 1 次 0. 1ml /10g,给药 60min 后,
腹腔注射 0. 6%醋酸溶液 0. 2ml /10g,记录 15min 内小鼠扭体
反应(腹部内凹、伸展后肢、臀部抬高、蠕行)次数,求得扭体反
应抑制率。抑制率(%)=[1 -(给药组扭体反应次数 /空白组
扭体反应次数)]× 100%。
1. 2. 3 毛细管法测定小鼠凝血时间(CT)[4]:将健康昆明种小
鼠随机分为 5 组,每组 10 只,分别为:(1)空白对照组(NS,等
容积);(2)阳性对照组(云南白药组,0. 6g /kg); (3)蛇尾草
大、中、小剂量组(10、5、2. 5g /kg)。每天灌胃 1 次,连续 7d,于
末次给药 45min后将毛细管(内径 1 mm,长 10cm)插入小鼠眼
内眦球后静脉丛,自血液流入管内开始计时,注满后取出,平放
于桌面上,每 30s折断毛细管两端约 0. 5cm,并缓慢向左右拉
开,直至血凝丝出现为止,所经历的时间即为凝血时间。
1. 2. 4 剪尾法测定小鼠出血时间(BT)[4、5]:动物分组与给药
方式同毛细管法,于末次给药 45min 后,分别将小鼠尾尖
0. 5cm处横断,待血液自然流出后计时,每隔 15s 用滤纸吸去
血滴 1 次,直至血液自然停止,秒表记录出血时间。
1. 3 统计学方法 应用 SPSS 17. 0 软件进行处理,计量资料
以 珋x ± s表示,采用 t检验。以 P < 0. 05 为差异有统计学意义。
2 结 果
2. 1 蛇尾草醇提液对热板致小鼠痛阈的影响 在给药 60min
时蛇尾草醇提液高、中剂量(10、5g /kg)组,阳性对照组与空白
对照组比较,不同时间出现舔足的潜伏期差异均有统计学意义
(P < 0. 05 或 P < 0. 01),蛇尾草醇提液低剂量组在给药前和
给药后 30min与阳性对照组比较出现舔足的潜伏期差异均无
统计学意义(P > 0. 05)。蛇尾草醇提液高剂量对热板致小鼠
痛阈值在药后 30min、60min、120min 均有明显提高,表明蛇尾
草对热板致痛有一定的镇痛作用。见表 1。
表 1 蛇尾草醇提液对热板致小鼠疼痛反应的
影响 (珋x ± s,n = 10)
组别
剂量
(g·kg -1)
痛阈值
基础
痛阈值
给药
30min后
给药
60min后
给药
120min后
空白对照组
(NS)
- 14. 30 ±2. 71 15. 00 ±2. 79 15. 40 ±3. 13 15. 50 ±2. 76
阳性对照组
(吲哚美辛)
0. 01 14. 70 ±3. 16 20. 10 ±3. 11# 29. 2 ±3. 94# 34. 3 ±4. 57#
蛇尾草醇提液 10 14. 60 ±2. 76 18. 90 ±3. 21# 26. 40 ±3. 60# 32. 40 ±4. 55#
5 14. 50 ±2. 95 16. 50 ±3. 41 18. 50 ±2. 92* 20. 10 ±3. 21#
2. 5 14. 30 ±2. 9 16. 00 ±2. 83 17. 60 ±3. 95 18. 40 ±3. 81
注:与空白对照组比较,* P < 0. 05,#P < 0. 01
2. 2 蛇尾草醇提液对醋酸致小鼠扭体反应的影响 蛇尾草醇
提液高、中剂量(10、5g /kg )组、阳性对照组与空白对照组比
较,在醋酸刺激后 15min 内扭体次数差异均具有统计学意义
(P < 0. 01),同时能减少醋酸刺激之后的扭体次数,高剂量组
疼痛抑制率为 60. 54%。结果表明高剂量蛇尾草醇提液对醋
酸刺激具有一定的镇痛作用。见表 2。
2. 3 蛇尾草醇提液对小鼠 CT 的影响 蛇尾草醇提液高、中
剂量(10、5g /kg )组、阳性对照组与空白对照组比较,出血时间
差异均具有统计学意义(P < 0. 01),表明蛇尾草醇提液能缩短
血液凝固的时间,具有促进血液凝固的作用。见表 3。
表 2 蛇尾草醇提液对醋酸致小鼠扭体反应的
影响 (珋x ± s,n = 10)
组别
剂量剂量
(g·kg -1)
扭体次数
(次)
抑制率
(%)
空白对照组(NS) - 40. 80 ± 10. 35 -
阳性对照组(吲哚美辛) 0. 01 10. 80 ± 3. 29* 73. 53
蛇尾草醇提液 10 16. 10 ± 4. 18* 60. 54
5 25. 70 ± 8. 04* 32. 01
2. 5 35. 60 ± 10. 19 12. 75
注:与空白对照组比较,* P < 0. 01
表 3 蛇尾草醇提液对小鼠 CT的影响 (珋x ± s,n = 10)
组别 剂量(g·kg -1) CT(s)
空白对照组(NS) - 246. 50 ± 26. 47
阳性对照组(云南白药) 0. 6 158. 70 ± 20. 01*
蛇尾草醇提液 10 170. 10 ± 23. 77*
5 189. 60 ± 15. 51*
2. 5 238. 80 ± 23. 90
注:与空白对照组比较,* P < 0. 01
2. 4 蛇尾草醇提液对小鼠 BT 的影响 蛇尾草醇提液高、中
剂量(10、5g /kg )组、阳性对照组与空白对照组比较,出血时间
差异均具有统计学意义(P < 0. 01),说明蛇尾草醇提液能缩短
出血时间,具有一定的抗凝血作用。见表 4。
表 4 蛇尾草醇提液对小鼠 BT的影响 (珋x ± s,n = 10)
组别 剂量(g·kg -1) BT(min)
空白对照组(NS) - 18. 71 ± 2. 18
阳性对照组(云南白药) 0. 6 9. 61 ± 2. 61*
蛇尾草醇提液 10 12. 70 ± 2. 54*
5 14. 60 ± 3. 31*
2. 5 17. 20 ± 3. 55
注:与空白对照组比较,* P < 0. 01
3 讨 论
蛇尾草在广西少数民族地区民间应用于刀伤出血比较广
泛,而实验研究相对欠缺。在实验研究中分别采用物理刺激的
热板法和化学物质刺激的醋酸扭体法评价蛇尾草醇提取物的
镇痛药效,通过实验结果表明高剂量组在药后 30min、60min、
120min均大幅度提高痛阈值,扭体次数减少,判断蛇尾草醇提
取物具有镇痛作用。凝血实验采用毛细管法和剪尾法,结果表
明蛇尾草醇提取液具有缩短凝血时间和出血时间的作用。
虽然蛇尾草醇提取物具有镇痛和凝血作用,但是在镇痛和
凝血方面其通过何种机制发挥作用仍需进一步探讨。由于蛇
尾草成分比较复杂,化学成分的研究和其他药理活性均未有相
关报道,仍需进一步对其化学成分和药理活性进行系统研究。
参考文献
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(收稿日期:2014 - 06 - 06)
·45· 临床合理用药 2014 年 10 月第 7 卷第 10 期中 Chin J of Clinical Rational Drug Use,October 2014,Vol. 7 No. 10B