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淡竹叶中总黄酮的提取与含量测定



全 文 :世界中西医结合杂志 2009年第 4卷第 3期 WorldJournalofIntegratedTraditionalandWesternMedicine 2009, Vol.4, No.3          
·药物研究 ·
作者单位:山西省太原市万柏林区疾病预防控制中心 ,山西太原 030024
通讯作者:岳秀梅 , Email:liuhongjie123@sina.com
淡竹叶中总黄酮的提取与含量测定
岳秀梅
【摘要】 目的 探讨淡竹叶中总黄酮的提取方法及其含量测定的方法。方法 采用纯物理的
工艺流程过程和分光光度法从淡竹叶中提取黄酮类物质 ,对所提取的黄酮类物质进行验证。结果 
测得样品中总黄酮的含量浓度 C=1.385, 平均回收率为 100.6%, RSD为 1.99%, 其纯度和产率均较
高。结论 该方法采用全物理过程 ,无任何化学变化及污染 , 是提取淡竹叶中总黄酮类物质的有效
途径。
【关键词】 淡竹叶;总黄酮;含量测定
ExtractionofFlavonesandContentDeterminationinLophatheriGracilis
YUEXiu-mei
(ShanxiTaiyuanWanbolinDiseasePreventionandControlCenter, TaiyuanShanxi030024)
【Abstract】 Objective Toexplorethemethodofextractionandcontentdeterminationofflavonesin
LophatheriGracilis.Methods Purephysicalprocessflowandspectrophotometrywereusedtoextractfla-
vonesfromLophatheriGracilisandvalidatetheextractedflavones.Results Theconcentrationofflavonesin
thesampleC=1.385, averagerecoverywas100.6%, RSDwas1.99%.Thepurityandproductionratewere
allquitehigh.Conclusion Completephysicalprocessisusedinthismethod, withoutanychemicalchanges
andpollutions.ItistakenastheefectiveaccesstoextractflavonesfromLophatheriGracilis.
【Keywords】 LophatheriGracilis;Flavones;ContentDetermination
  淡竹叶首载于明代《本草纲目》,李时珍曰:“处
处原野有之 ,春生苗 ,高数寸 ,细茎绿叶 ,俨如竹米 ,
落地所生细竹之茎 ,其根一窠数十须 ,须上结子 ,与
门冬一样 ,但坚硬尔 ,随时采之 ,八九月抽茎结小花
穗 。”该药味甘 、淡 、寒 ,归心 、胃 、小肠经 ,具有清热
除烦 、利尿的功效 ,多用于热病烦渴 、口舌生疮 、小
便赤色 、淋痛等症[ 1] 。淡竹叶中含有的黄酮类化合
物具有降脂 、抗血栓 、抗氧化 、降糖等多种生理活
性 [ 2] ,因而有效地开发和利用淡竹叶中黄酮类化学
成分具有重要意义 。为了充分利用 ,笔者对竹叶中
黄酮类成分进行提取与鉴别。
实验材料
新鲜淡竹叶 、95%乙醇 、甲醇 、三氯化铝 、盐酸 、
正丁醇 、芦丁标准品均为中国药品生物制品检定所
药品。 UV2755B紫外可见光分光光度计为上海分
析仪器总厂产品 , DZF2150小型真空恒温干燥箱由
郑州长城科工贸易有限公司生产 , 8022离心沉淀器
为上海分析器械厂产品 , ZF2I型三用紫外线分析仪
为上海顾村电光仪器厂产品。
方法与结果
1.操作方法:取新鲜淡竹叶 50g,洗净 、烘干 、切
碎 ,置于烧杯中 ,加蒸馏水煮沸 3 h。冷却后进行粗
滤 ,对滤渣再浸取 2次 ,将 3次滤液合并 ,滤液用高
速离心机分离 15 min, 2 500 r/min。然后进行加热
浓缩(加热温度在 80℃左右),浓缩冷却后加入等体
积 95%乙醇 ,放入冰箱内 2 h。用高速离心机进行
分离 15 min, 2 500r/min。过滤得滤液滤渣 ,弃去滤
渣。对滤液进行蒸发浓缩(加热温度在 80℃左右),
待乙醇蒸发完后 ,将浓液置于真空干燥箱中干燥成
疏松固体 ,粉碎得终产物 。
2.标准溶液的制备:精密称取芦丁对照品 200
mg,置于 100 mL容量瓶中 ,加入 95%乙醇溶液并稀
释至刻度 ,摇匀。精密量取 10mL置于 100mL容量
瓶中 ,加入 95%乙醇使成 100mL,摇匀即得(每毫升
含有无水芦丁 0.2mg)。
3.标准曲线的制备:精密吸取对照溶液 0、2.0、
4.0、6.0、8.0、10.0、12.0 mL,分置于 50 mL容量瓶
中 ,各加 95%乙醇 12 mL,加 5%亚硝酸钠溶液 2.0
mL,混匀 , 放置 6 min, 再加 10%硝酸铝溶液 2.0
mL,混匀 ,放置 6 min,加 5%氢氧化钠溶液 20 mL,
最后用 95%乙醇稀释至刻度 ,摇匀。以第 1瓶为空
·177·DOI :10.13935/j.cnki.sjzx.2009.03.017
          世界中西医结合杂志 2009年第 4卷第 3期 WorldJournalofIntegratedTraditionalandWesternMedicine 2009, Vol.4, No.3
白溶液 ,用 UV2755B紫外可见分光光度计 ,在 510
nm上测定吸光度 。根据吸光度 A对浓度 C回归 ,得
回归方程:A=11.235C+0.002 3, r=0.999 16,在 8 ~
40μg/mL范围内浓度与吸光度有良好的线性关系。
4.提取物含量的测定:精密称定提取物 1.5 g,
置索氏提取器中 ,加 95%乙醇回流至无色 6 ~ 8 h,将
提取液置于烧杯中 ,水浴加热浓缩至干 ,再用热水洗
涤 3次 ,将洗液移至分液漏斗中 ,并加入正丁醇液萃
取 3 ~ 5次 , 10 mL/次 ,合并萃取液于烧杯中 ,水浴蒸
干 ,再加 95%乙醇使其溶解 ,并移于 50mL容量瓶中 ,
再加 95%乙醇至刻度 ,摇匀。精密量取 10mL于 50
mL容量瓶中 ,加 95%乙醇至刻度 ,摇匀 ,按标准曲线
的制备操作测定吸光度 , A=0.225。由回归方程求出
稀释液中总黄酮浓度 C,取平均值 ,结果为 C=1.385。
5.回收率实验:精密称取粉碎过的淡竹叶供试
品 ,测定含量 ,然后加入适量的芦丁 ,按 “标准曲线
制备项 ”测定含量 ,计算回收率 。结果见表 1。平均
回收率为 100.6%, RSD=1.99%。
表 1 回收率实验结果
编号 芦丁对照品(mg) 测得黄酮量(mg) 回收率(%)
1 0.200 0.203 100.3
2 0.200 0.209 102.9
3 0.200 0.192 99.3
4 0.400 0.410 101.6
讨  论
实验结果表明 ,本实验方法工艺简单 ,回收率
为 100.6%,利用本文所提供的提取 、纯化方法而得
到的黄酮类物质其纯度较高 。此方法采用全物理
过程 ,无任何化学变化及污染 , 且该方法操作简单
方便 ,是一条理想的提取黄酮类物质的途径 。
黄酮类化合物是一大类天然产物 ,广泛存在于
植物界 ,是许多中草药的有效成分 。在自然界中最
常见的是黄酮和黄酮醇 ,其他包括双氢黄(醇)、异
黄酮 、双黄酮 、黄烷醇 、查尔酮 、橙酮 、花色苷及新黄
酮类等。天然来源的生物黄酮分子量小 ,能被人体
迅速吸收 ,能通过血脑屏障 ,能进入脂肪组织 ,进而
体现出消除疲劳 、保护血管 、预防动脉硬化 、扩张毛
细血管 、疏通微循环 、抗脂肪氧化 、抗衰老 、活化大
脑及其他脏器细胞的功能。黄酮保健功效更显著
独特 ,对人体健康有诸多好处 ,如抗炎症 、抗过敏 、
抑制细菌 、寄生虫 、病毒 ,防治肝病 、血管疾病 、血管
栓塞等。黄酮类化合物具有抗癌 、抗肿瘤 、抗心脑
血管疾病 、抗炎镇痛等作用[ 3-4] 。本实验结果表明 ,
淡竹叶中含有较为丰富的黄酮 ,具有广泛开发和利
用价值 ,值得综合利用 ,应该加强资源开发。
参 考 文 献
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(收稿日期:2009-02-27)
(上接第 174页)
-0.05 mol· L-1磷酸二氢钾的流动相比优点是可
避免无机盐对液相传输管道的影响 。但由于芍药
苷是苷类成分 ,而苷类成分在多数中药材中广泛存
在 ,又属于亲水性成分 ,故对含药味较多的中药复
方制剂来说 ,选择苷类成分作为含量测定的指标常
常导致走样时间过长 [ 5] 。
用高效液相色谱法测定芍药苷的含量时 ,流动
相中常常加入磷酸或磷酸二氢钾 ,主要原因是因为
芍药苷在酸性条件下稳定 。
参 考 文 献
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