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薏苡茎水提取物对H22荷瘤小鼠的抗肿瘤作用研究



全 文 :Chin J Clin Pharmacol 855
Vol. 31 No. 10 May 2015(Serial No. 192)
薏苡茎水提取物对 H22荷瘤小鼠的抗肿瘤作用研究
Anti - tumor effect of water extract from stem of Coix Lachryma - jobi L. in mice
收稿日期:2014 - 12 - 27
修回日期:2015 - 03 - 03
基金项目:国家自然科学基金资助项目
(81360684);广西自然科学基金资
助项目(2011GXNSFA018046);广
西中医药科技专项基金资助项目
(GZKZ10 - 128);广西教育厅基金
资助项目(201106LX425);广西中
医 药 管 理 局 基 金 资 助 项 目
(gzzc1047);广西医学科学实验中
心 开 放 专 项 基 金 资 助 项 目
(KFJJ2011 - 04)
作者简介:郭圣奇(1992 - ),男,本院 2011 届本
科生,主要从事天然产物化学和药物
化学研究
通信作者:黄锁义,教授,硕士生导师
Tel:(0776)2850590
E - mail:huangsuoyi@ 163. com
郭圣奇1a,黄挺章1a,李远辉1a,
黄 莹1a,李兆叠1a,覃茜柠1b,
朱晓莹1c,黄锁义1d
(1. 右江民族医学院,a. 临床学院;b. 公共卫
生管理学院;c. 科学实验中心;d. 药学院,广西
百色 533000)
GUO Sheng - qi1a,
HUANG Ting - zhang1a,
LI Yuan - hui1a,HUANG Ying1a,
LI Zhao - die1a,QIN Xi - ning1b,
ZHU Xiao - ying1c,HUANG Suo - yi1d
(1. a. School of Clinical Medicine;b.
Public Health Management School;c.
Science Experiment Center;d. School of
Pharmacy,Youjiang Medical University
for Nationalities, Baise 533000,
Guangxi Province,China)
摘要:目的 研究薏苡茎水提取物对荷瘤小鼠的抑瘤作用及对免疫器官的影响。
方法 以肝癌 H22 荷瘤小鼠作为实验动物模型,将实验小鼠随机分成 7 组,模
型组、环磷酰胺组、5 个剂量实验组,分别给予 0. 9%氯化钠、环磷酰胺(0. 02
g·kg -1)、薏苡茎水提取物(2,4,6,8,10 g·kg -1)灌胃给药。连续 9 d 后,颈椎
脱臼处死,称重并剖离肿瘤、肝、胸腺、脾,计算体质量、抑瘤率及肝、胸腺、脾指
数。结果 与模型组比较,薏苡茎水提取物对肝癌 H22 具有明显的抑制作用
(P < 0. 05),其对肝指数、体重增长也有明显的影响(P < 0. 05)。但其对荷瘤小
鼠的胸腺、脾指数无明显影响。结论 薏苡茎水提取物具有抗肿瘤作用。
关键词:薏苡茎水提取物;肝癌 H22;抗肿瘤
DOI:10. 13699 / j. cnki. 1001 - 6821. 2015. 10. 027
中图分类号:R285. 5;R979. 1 文献标志码:A
文章编号:1001 - 6821(2015)10 - 0855 - 03
Abstract:Objective To study the tumor inhibitory effects and an in-
fluence on immune organs of the water extract from stem of Coix Lachry-
ma - jobi L. (WESCLL)in mice with liver cancer H22. Methods The
experimental subjects were using mice with liver cancer H22. The mice
are randomly divided into 7 groups and were fed 0. 9% sodium chloride,
cyclophosphamide (0. 02 g·kg -1),WESCLL(2,4,6,8,10 g·kg -1)
by oral gavages. After 9 days administration,the mice were killed.
Their subcutaneous sarcoma,liver,thymus and spleen were separated and
weighted. Then the tumor inhibiting rates and liver,thymus and spleen
index were calculated. Results The WESCLL has obvious effects on re-
straining the liver cancer H22. There was significant difference compared
with model group (P < 0. 05). The effect of WESCLL is more noticeable
on liver index and weighs increase of the mice(P < 0. 05). There was
not significant difference on thymus and spleen indexes compared with
model group (P < 0. 05). Conclusion WESCLL have distinct effect on
anti - tumor.
Key words:water extract from stem of Coix Lachryma - jobi L.;liver
cancer H22;anti - tumor
薏苡(Coix lachryma - jobi L. )为禾本科(Gramineae)薏苡属
(Coix L. )草本植物,其干燥成熟种仁称为薏苡仁,为我国传统常用
中药材之一[1],味甘、淡,性微寒。具有健脾、补肺、清热及利湿之功
效,素有“滋补保健之王”的美誉。《本草纲目》[2]称其乃上品养心
药。2010 年版《中国药典》[3]记载,薏苡仁可健脾渗湿,除痹止泻,清
热排脓。目前,已出现了对薏苡叶总碱的抗氧化性、薏苡叶多糖的抗
856 中 国 临 床 药 理 学 杂 志
第 31 卷 第 10 期 2015 年 5 月(总第 192 期)
氧化活性等研究,但对薏苡提取物的抗肿瘤作用研究
尚少见报道。为此本实验研究薏苡茎水提取物的抗
肿瘤作用。
材料与方法
1 材料
动物 SPF级小白鼠,雌雄兼用,体重 18 ~ 22 g,
购自广西右江民族医学院实验动物中心(生产许可
证:SCXK桂 2012 - 0003)。
细胞株 腹水型 H22 肝癌细胞株,由广西医科大
学基础医学院微生物教研室提供。
药品 环磷酰胺,规格:每支 0. 2 g,批号:
04131203,山西普德药业股份有限公司生产。
仪器 EL -204 万电子天平,梅特勒 -托利多仪
器(上海)有限公司产品;BCW - 1000 生物净化工作
台,苏州智净净化设备有限公司产品;BW - CJ - 1K
空气净化器,苏州华宏净化技术有限公司产品。
2 实验方法
2. 1 薏苡茎水提取物制备[4]
取薏苡茎干燥粉末 200 g,与水 2 L浸泡 1 h,提取
3 次,滤液减压浓缩至 200 mL,得到 1. 0 g·mL -1的薏
苡茎水提取物备用,实验时配成所需剂量。
2. 2 肝癌 H22 荷瘤小鼠模型制备[5]
取腹腔接种 9 ~ 10 d的、生长良好的肝癌 H22 小
鼠,颈椎脱臼处死后,腹部消毒,在无菌条件下,抽取
小鼠腹水。细胞计数后,加入无菌 0. 9%氯化钠,调整
浓度至 1 × 107 /L。用台盼蓝计数法,显微镜下观察并
计数活细胞数大于 95%,于小鼠左前肢皮下,接种
H22 瘤细胞悬液 0. 2 mL。
2. 3 分组给药[6]及抑瘤率计算[7 -9]
小鼠接种 24 h后,按小鼠体重随机分为 7 组,分
别为模型组、环磷酰胺组及 5 个剂量实验组。模型
组,灌喂 0. 9%氯化钠;环磷酰胺组,按 0. 02 g·kg -1
的药量进行灌喂;实验组给药剂量分别为 2,4,6,8,10
g·kg -1,连续灌喂 9 d。
末次给药 24 h后,颈椎脱臼处死小鼠,称重后剥
离肉瘤,取肝、胸腺及脾,称重,计算体重增加值、抑瘤
率、肝、胸腺与脾指数。
3 统计数据处理
用 SPSS 19. 0 软件进行统计学处理,多组间比较
用单因素方差分析。
结 果
1 对肝癌 H22 荷瘤小鼠体重的影响
与模型组比较,环磷酰胺组与各浓度实验组差异
均有统计学意义。各组小鼠体重的变化,见表 1。
表 1 薏苡茎水提取物(WESCLL)对肝癌 H22 荷瘤小鼠体重
的影响
Table 1 Effects of water extract from stem of Coix Lachryma -
jobi L.(WESCLL)by oral gavage once daily for 9 days on the
weigh change of the tumor mice
Group
Dose
(g·kg -1)
Weight of the
first day(g)
Weight of the
tenth day(g)
Model 18. 20 ± 1. 23 30. 83 ± 3. 53
Cyclophosphamide 0. 02 18. 70 ± 1. 34 27. 58 ± 1. 80*
WESCLL - A 2 18. 50 ± 2. 12 28. 87 ± 1. 95*
WESCLL - B 4 18. 50 ± 1. 43 28. 39 ± 2. 53*
WESCLL - C 6 18. 40 ± 1. 43 28. 14 ± 1. 20*
WESCLL - D 8 18. 40 ± 1. 51 27. 88 ± 2. 09*
WESCLL - E 10 18. 00 ± 1. 76 27. 45 ± 2. 73*
Compared with model group,* P < 0. 05
由表 1 可知,实验组小鼠体重增长值均大于环磷
酰胺组小鼠,但实验组小鼠体重增长值随浓度升高而
降低,因此薏苡茎水提取物随浓度升高,可能具有一
定毒性。
2 对肝癌 H22 荷瘤小鼠抑瘤率的影响
与模型组比较,薏苡茎水提取物各剂量实验组抑
瘤率差异有统计学意义(P < 0. 05),其中,2,4,6
g·kg -1实验组抑瘤率差异有极显著性统计学意义
(P < 0. 01),见表 2。
表 2 WESCLL对肝癌 H22 荷瘤小鼠的体内抑瘤作用
Table 2 Effect of WESCLL by oral gavage once daily for 9 days
on the tumor suppression in vivo of the tumor mice
Group
Dose
(g·kg -1)
Weight of tumour
(g)
Rate of tumor
suppression(%)
Model 0. 56 + 0. 11
Cyclophosphamide 0. 02 0. 17 ± 0. 09 69. 65**
WESCLL - A 2 0. 31 ± 0. 18 45. 00**
WESCLL - B 4 0. 23 ± 0. 18 59. 77**
WESCLL - C 6 0. 33 ± 0. 23 41. 80**
WESCLL - D 8 0. 37 ± 0. 13 34. 78*
WESCLL - E 10 0. 38 ± 0. 28 32. 82*
Compared with model group,* P < 0. 05,**P < 0. 01
由表 2 可知,薏苡茎水提取物对肝癌 H22 荷瘤小
鼠具有抗肿瘤作用,与模型组比较,薏苡茎水提取物
各剂量实验组抑瘤率差异有统计学意义(P < 0. 05),
其中 2,4,6 g·kg -1实验组差异有极显著统计学意义
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Vol. 31 No. 10 May 2015(Serial No. 192)
(P < 0. 01)。
3 对肝癌 H22 荷瘤小鼠肝、胸腺、脾指数的影响
各剂量实验组的胸腺、脾指数,与模型组比较差
异无统计学意义(P > 0. 05)。环磷酰胺组及实验组的
肝指数,与模型组比较差异均有统计学意义
(P < 0. 05),见表 3。
由表 3 可知,各剂量实验组的抑瘤率虽不及环磷
酰胺组,但其荷瘤小鼠的肝、胸腺、脾等指标均优于环
磷酰胺组,表明薏苡茎水提取物对肝以及胸腺、脾免
疫器官的不良反应较小。
表 3 WESCLL对肝癌 H22 荷瘤小鼠肝、胸腺、脾指数的影响
Table 3 Effect of WESCLL by oral gavage once daily for 9 days on the index of liver,thymus and spleen of the tumor mice
Group
Dose
(g·kg -1)
Index of liver
(mg·g - 1)
Index of thymus
(mg·g - 1)
Index of spleen
(mg·g - 1)
Model 55. 04 ± 5. 72 3. 07 ± 0. 68 6. 27 ± 1. 72
Cyclophosphamide 0. 02 48. 73 ± 3. 77* 2. 21 ± 0. 87* 4. 25 ± 0. 99*
WESCLL - A 2 48. 22 ± 4. 20* 3. 63 ± 1. 14 5. 39 ± 1. 17
WESCLL - B 4 45. 53 ± 3. 01* 3. 12 ± 0. 74 5. 80 ± 1. 13
WESCLL - C 6 44. 49 ± 3. 41* 3. 00 ± 1. 10 5. 18 ± 0. 91
WESCLL - D 8 43. 96 ± 3. 20* 3. 26 ± 0. 74 5. 28 ± 1. 34
WESCLL - E 10 44. 67 ± 4. 48* 3. 77 ± 1. 00 5. 23 ± 1. 16
Compared with model group,* P < 0. 05
讨 论
由于原发性肝癌早期缺乏典型症状,而从症状出
现到明确诊断,多数患者已到中晚期,失去了手术治
疗的机会,所能采用的现代综合治疗方法常限制在
放、化疗和免疫治疗上,而放、化疗对本病的治疗不良
反应极大,适应证则减少,疗效也差。目前临床肝癌
诊疗中,还存在着复发转移率高、治疗缺乏针对性、源
头创新药物和治疗手段较少等问题,因此,对肝癌分
子发病机制及肝癌诊治新技术、新疗法的研究尤为重
要和迫切[10]。中药治疗肝癌具有很大的潜力,发挥
中药在治疗肝癌中的优势是一个非常有意义的探索。
目前采用的中医药治疗,适用于各型肝癌,能缓解临
床症状,包括退黄、止痛、增进食欲及消退腹水,配合
手术治疗,减轻放疗、化疗的不良反应,改善生存质
量,提高治疗有效率。因此,积极做好中医药对本病
的防治研究在当今有重要意义[11]。
本实验结果表明,虽然薏苡茎水提取物随浓度升
高时可能具有一定毒性,但其对荷瘤小鼠体重的影响
仍小于环磷酰胺。同时,抑瘤率在剂量为 2,4,6
g·kg -1时,相比于模型组,抑瘤效果显著。脾、胸腺
为机体的免疫器官,环磷酰胺对其脾、胸腺具有一定
的损伤,而薏苡茎水提取物的抑瘤率虽不及环磷酰
胺,但通过对荷瘤小鼠肝、脾、胸腺指数的计算,发现
其对脾、胸腺免疫器官的损伤程度小于环磷酰胺,说
明薏苡茎水提取物不仅有抗肿瘤作用,对肝及其脾、
胸腺免疫器官的不良反应也较小,为抗肿瘤的较理想
药物。同时本实验的开展也对今后进一步深层次开
发和利用薏苡这一传统中药提供了理论依据。
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(本文编辑 权菊香)