全 文 ：〔收稿日期〕2009－03－25
〔作者简介〕邹婉婷(1984-)，女，湖南长沙人，硕士研究生，主要从事中药新制备工艺与质量标准研究。
〔通讯作者〕* 夏新华，男，教授，博士研究生导师，E-mail:xiaxinhua001@163.com。
了哥王醇提工艺的研究
〔摘要〕 目的 优选了哥王醇提工艺条件。 方法 分别以浸膏得率、西瑞香素浸出量与两者的综合评分为评价
指标，采用单因素试验及正交试验对影响浸出的主要因素进行优化。结果 最佳提取工艺条件为：以 55%乙醇为提
取溶剂，加乙醇浸泡 1 h，回流提取 2 次、加醇量分别为 10 倍、8 倍量，提取时间分别为 1.5、1.0 h。 结论 优选的提
取工艺可为了哥王制剂的工业化生产提供实验依据。
〔关键词〕 了哥王；醇提工艺；西瑞香素；正交设计；综合评分法
〔中图分类号〕R284.2 〔文献标识码〕B 〔文章编号〕1674－070X（2009）06－0046－02
Study on alcohol extraction process
of Radix Wikstroemiae indicae
ZOU Wan-ting, XIA Xin-hua
(School of Pharmacy, TCM University of Hunan, Changsha, Hunan 410208, China)
〔Key words〕 Radix Wikstroemiae Indicae； alcohol extraction process； Daphnoretin；
orthogonal design； comprehensive scoring method
邹婉婷，夏新华 *
（湖南中医药大学药学院，湖南 长沙 410208）
了哥王 （Wikstroemia indica C.A.Meyer）为瑞香科荛
花属植物南岭荛花的根茎，苦辛，性寒，有毒，具有清热解
毒、散结逐瘀、消肿止痛之功效，在临床上常用于治疗呼
吸道疾病和各种炎症，以及癌症和乙肝的辅助治疗 [1-3]。 西
瑞香素是了哥王中的一种高活性有效成分 [4]，为使其在
提取过程中充分浸出 ，保证制剂的疗效，采用单因素试
验及正交试验法考察了乙醇浓度、提取次数、浸泡时间、
加醇量、提取时间对浸出效果的影响 ，以确定了哥王制
剂合理的生产工艺。
1 实验材料
1.1 仪器
高效液相色谱仪 （美国 Waters 公司），Breeze 工作站
（美国 Waters 公司）； 电子分析天平 （美国奥豪斯公司）；
RE 52-99旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）；DZF-6050
真空干燥箱（上海精宏实验设备有限公司）；DK-S22 电热
恒温水浴锅（上海精宏实验设备有限公司）。
1.2 试药
了哥王药材 （购自湖南三湘中药饮片有限公司）；西
瑞香素对照品（自制，纯度 99.6%）；95%工业乙醇、色谱级
甲醇、重蒸馏水、其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 提取液中西瑞香素的测定
2.1.1 色谱条件 色谱柱为 Kromasil C18 柱 (200 mm×
4．6 mm，5 μm)；流动相为甲醇-0.2％磷酸水溶液 (42∶58)；
检测波长 346 nm；流速 1 mL/min；柱温 35 ℃。 理论板数
按西瑞香素峰计算应不少于 5 000。
2.1.2 对照品溶液的制备 精密称取 120 ℃干燥至恒重的
西瑞香素 8.6 mg，置 50 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇
匀，即得（每 1 mL 含西瑞香素 0.172 mg）。
2.1.3 标准曲线的制备 精密量取上述对照品溶液 1.0、
2.0、3.0、4.0、5.0 mL，分别置于 25 mL 量瓶中，加甲醇至刻
度，摇匀。 分别精密吸取 15 μL，注入高效液相色谱仪，测
2009 年 12 月第 29 卷第 6 期
Dec． 2009 Vol． 29 No． 6
湖 南 中 医 药 大 学 学 报
Journal of TCM Univ． of Hunan46
表 5 方差分析表
误差来源 离差平方和(Sj) 自由度 方差 F 值 P 值
A 131.34 2 65.66 12.18 >0.05
B 270.68 2 135.34 25.12 <0.05
C 4.52 2 2.26 0.419 >0.05
误差 E 10.78 2 5.39
表 4 醇提工艺正交试验设计及结果
注：浸膏得率评分=（浸膏得率/最大浸膏得率）×0.3×100；西瑞香素浸
出量评分=（西瑞香素浸出量/最大西瑞香素浸出量）×0.7×100； 综合评
分=浸膏得率评分+西瑞香素浸出量评分。
表 3 因素水平表
定峰面积积分值，以峰面积积分值为纵坐标，进样量为横
坐标，绘制标准曲线，其回归方程为
A=2 668.6C+16 106，r=0.999 9
西瑞香素在 103.2~516.0 ng 范围内具有良好的线性
关系。
2.1.4 供试品溶液的制备与测定 精密量取了哥王提取
液 10 mL，置 25 mL 量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用 0.45
μm 微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。 分别精密
吸取对照品溶液与供试品溶液适量， 注入高效液相色谱
仪，测定峰面积，计算，即得。
2.2 乙醇浓度的考察
称取了哥王最粗粉 25 g，共 4 份，分别以 30%、55%、
75%和 95%乙醇为溶剂，回流提取 2 次，每次加 8 倍量溶
剂，提取 2 h，趁热滤过，合并 2 次提取液，用相应的溶剂
定容至 500 mL。 精密量取 10 mL 至 25 mL 容量瓶中，加
甲醇稀释至刻度， 按上述方法测定提取液中西瑞香素含
量。另取提取液适量，测定浸膏得率。结果表明，提取溶剂
以 55%乙醇为佳，见表 1。
2.3 提取次数的考察
称取了哥王最粗粉 25 g，以 55%乙醇为溶剂，回流提
取 3 次，每次加 8 倍溶剂，提取 2 h，趁热滤过，分别收集
3次提取液，定容至 500 mL。 以下操作同“2.2”项下方法。
结果表明，提取次数为 2次时即提取充分，见表 2。
2.4 正交试验优选醇提工艺
2.4.1 试验设计 在上述乙醇浓度与提取次数考察的基
础上，采用正交设计，以浸膏得率与西瑞香素浸出量的综
合评分为评价指标，优选提取工艺条件。 选择浸泡时间、
加醇量、提取时间作为考察因素（见表 3），以浸膏得率及
西瑞香素浸出量为考察指标，用 L9(34)正交表安排实验，基
本操作同“2.2”项下方法，结果见表 4。 综合评分直观分析
显示各因素的影响大小依次为 B>A>C(见表 4)；其方差分
析表明，因素 B（乙醇用量）对提取效果的影响有统计学意
义（P<0.05），因素 A（浸泡时间）、C（提取时间）对提取效果
的影响则无显著意义（见表 5）。 综合上述结果，并考虑降
低生产成本等因素 ， 可确定醇提工艺的最佳条件为
A3B2C1，即以加乙醇浸泡 1 h，回流提取 2 次，加醇量分别
10倍量、8倍量，提取时间分别为 1.5、1.0 h。
2.4.2 验证试验 按处方比例称取了哥王药材最粗粉，
共 3 份， 按上述选定的最佳提取方案 A3B2C1安排验证实
验，测定浸膏得率和西瑞香素浸出量。 测得其浸膏得率平
均值为 8.2%，西瑞香素浸出量平均值为 25.6 mg，结果显
示优选方案 A3B2C1具有较好的重现性， 表明此工艺条件
稳定可行。
3 结论
西瑞香素在 95%、75%乙醇中的提取效果与 55％乙醇
相近，跟 30％乙醇的提取效果相比，差异
表 1 提取溶剂的考察
提取溶媒（%） 浸膏得率（%） 西瑞香素浸出量（mg）
30 6.1 14.5
55 8.9 25.1
75 7.2 22.2
95 5.8 22.1
表 2 提取次数的考察
提取顺次 浸膏得率（%） 西瑞香素浸出量（mg）
1 5.8 17.5
2 5.0 9.5
3 1.1 2.7
浸泡时间（min）A 乙醇用量（倍）B 提取时间（h）C
1 0 8，6 1.5，1.0
2 30 10，8 2.0，1.5
3 60 12，10 2.5，2.0
实验 A B C D 浸膏得 西瑞香素
号 1 2 3 4 率(%) 浸出量(mg)
1 1 1 1 1 7.9 19.4 74.3
2 1 2 2 2 8.8 22.2 84.0
3 1 3 3 3 9.1 23.2 87.4
4 2 1 2 3 9.0 21.0 81.6
5 2 2 3 1 9.3 24.7 91.9
6 2 3 1 2 8.9 25.5 92.6
7 3 1 3 2 8.1 22.4 82.3
8 3 2 1 3 8.5 27.8 97.1
9 3 3 2 1 9.4 25.1 93.2
K1 245.7 238.2 264.0 259.4 C =(∑Y)2 ／N
K2 266.1 273.0 258.8 258.9 Qj=(K1)2+(K2)2+(K3)2
K3 272.6 272.2 261.6 266.1 Sj=Qj/3-C
R 26.9 35.0 5.2 7.2
综合评分
因 素
水平
注：F0.05(2.2)=19.00，F0.01（2.2）=99.00。
邹婉婷，等 了哥王醇提工艺的研究第 6 期
（下转第 53页）
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较大，这与香豆素脂溶性、极性较小的性
质相符。 由正交试验结果的分析可知，乙醇用量对西瑞香
素提取影响最大， 在一定范围内乙醇用量增加可提高西
瑞香素的浸出，但用量过多浸出效果并不明显，且会增加
乙醇的消耗。
本实验采用单因素试验及正交试验对了哥王的醇提
工艺条件进行了优选，确定最佳醇提工艺条件为：以 55%
乙醇为提取溶剂，加乙醇浸泡 1 h，回流提取 2 次、加醇量
分别为 10 倍、8 倍量，提取时间分别为 1.5、1.0 h。 该醇提
工艺操作简单，重复性好，可用于了哥王制剂的生产。
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（本文编辑 徐爱良）
主。 主要用于肾阴虚引起的腰膝酸软、头晕耳鸣、手足心
热、遗精盗汗等症状，是滋阴补肾的经典方。
另一方面， 针对慢性疲劳综合征常兼有肝郁这一因
素，运用逍遥散以疏肝解郁，健脾和营。 肝藏血，主疏泄，
性喜条达而恶抑郁，体阴而用阳。 并通过调畅周身气机，
使气的运行有序，从而维持各脏腑器官的功能活动正常。
若肝失疏泄之职，气血运行不畅，导致气滞血瘀，筋脉失
养，则筋疲乏力、头晕目眩，从而引起慢性疲劳。 另一方
面，思虑过度也会导致脾失健运，气机郁结。 《医述·卷七》
“思则气结，结于心而伤于脾也。 ”由此可见，七情内伤首
先影响气机和易致郁证，研究表明慢性疲劳综合征患者
普遍存在不同程度的心理问题，且疲劳程度越重，躯体
化及抑郁症状越明显 [7]。 有人认为肝郁是慢性疲劳综合
征演变的关键环节 [8]。 也有人提出其病位涉及五脏，尤以
肝为要 [9]。 故治疗情志伤之始，应以调气为先，理气开郁
为主 [10]。 逍遥散出自《太平惠民和剂局方》，治肝郁血虚，
脾失健运，方中以柴胡疏肝解郁，当归、白芍养血柔肝，白
术、茯苓健脾去湿，使运化得健，气血有源，炙甘草益气补
中，生姜温胃和中，薄荷少许助柴胡散肝郁。 如此配伍，既
补肝体，又助肝用，全方益气养血，肝脾并治，为疏肝解
郁，调和肝脾之名方。
慢性疲劳综合征凡属肾虚肝郁者以上述二方合用，既
针对病因和症状进行治疗，又可互为补充，使逍遥散疏肝
解郁而不伤阴，六味地黄丸滋阴补肾而不过于滋腻。 因慢
性疲劳综合征大多与七情致病有关，而其他因素所致的长
期疲劳又反过来影响患者的工作效率和生活质量， 从而
引起情绪变化，可以说两者互为因果，因而在治疗上调肝
显得尤为关键。 临床实践也表明，几乎各种证型的慢性疲
劳综合征都或多或少地存在肝郁的病理变化， 因而在治
疗上疏肝解郁是非常重要的手段。 如有报道以逍遥丸合
归脾丸治疗肝郁兼心脾气虚型慢性疲劳综合征 [11]，补中益
气汤合小柴胡汤加减治疗慢性疲劳综合征肝郁脾虚证能
明显改善慢性疲劳综合征肝郁脾虚证患者的临床症状，
提高机体的免疫力[12]。 由此可见，采用经方合用治疗虚实
夹杂、复合型慢性疲劳综合征，做到虚实共调，诸脏同治，
能显著提高疗效。
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（本文编辑 马 薇）
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李 虹，等 六味地黄丸合逍遥丸治疗慢性疲劳综合征的临床观察第 6 期 53