全 文 ：[ 收稿日期] 　2007-09-03
[ 通讯作者] 　＊甄汉深 , Tel:(0771)2219867;E-mail:zhenhsh@
yahoo.com.cn
了哥王片总黄酮含量测定方法的研究
张美玲1 ,甄汉深2＊
(1.湛江博康海洋生物有限公司 ,广东 湛江　524094;2.广西中医学院 ,广西南宁　530001)
　　[ 摘要] 　目的:为制定了哥王片的含量测定方法提供科学的依据。方法:采用可见分光光度法对了哥王片中的总黄酮进
行含量测定。结果:本方法具有准确 、重复性好 、稳定可靠 ,其平均回收率 100.8%(RSD=1.2%)。结论:该法可作为制定了哥
王片含量测定的方法。
[ 关键词] 　了哥王片;总黄酮;芦丁;含量测定
[ 中图分类号] 　R284.1　　[文献标识码] 　B　　[ 文章编号] 　1005-9903(2008)07-0003-02
Determination of Total Flavonoids in Liaogewang Tablet
ZHANG Mei-ling1 , ZHEN Han-shen2＊
(1.Zhanjiang Bokang Marine Biological CO.,LTD .Zhanjiang 524094 , China;
2.Guangxi University Traditional Chinese Medicine , Nanning 530001 , China)
[ Abstract] 　Objective:To provide scientific basis for Liaogewang Tablet quality control.Methods:The ultraviolet
and visible spectros photometry was used to determine the total flavonoid in Liaogewang Tablet.Results:The method is
simple , accurate , and reliable , The average recovery was 100.8%(RSD=1.2%).Conclusion:This method can be
applied to the quality control of the preparations.
[ Key words] 　Liaogewang Tablet;total flavones;rutin;determination
　　了哥王片为中成药 ,具有消炎 ,解毒之功效。主
要用于支气管炎 ,肺炎 ,扁桃体炎 ,腮腺炎 ,乳腺炎 ,
蜂窝组织炎等症。其收载于 1977年版《中国药典》
中 ,质量标准中原无含量测定项 ,了哥王药材中含有
小麦黄素 、羟基芫花素 、挥发油 、黄酮类等[ 1] ,本文采
用可见分光光度法对其总黄酮进行含量测定 ,报道
如下:
1　仪器与试药
　　UV-1601型紫外-可见分光光度计(日本岛津公
司);GR202电子分析天平(日本 A&D)。
　　试药　了哥王片(广东罗浮山药业有限公司生
产):了哥王片阴性制剂(广东罗浮山药业有限公司
提供):芦丁对照品(供 UV 法含量测定用 , 批号:
100080-200306 ,中国药品生物制品检定所):其余所
用的试剂均为分析纯 。
2　试验方法与结果
2.1　检测波长的选择　经过对芦丁的紫外-可见吸
收光谱的测定 ,芦丁的紫外最大吸收峰分别为 208 ,
260 ,360 nm ,但干扰因素多 。而在可见光区 500 nm
处吸收峰干扰因素少 ,故选 500 nm为检测波长 。
2.2　提取溶剂的选择　取本品适量 ,研细 ,分成 5
份 ,每份约 0.6 g ,精密称定 ,分别精密加入 40%乙
醇 、50%乙醇 、60%乙醇 、70%乙醇 、50%甲醇提取 ,
在 500 nm 波长处测定吸光度 , 试验结果表明:以
50%乙醇作为提取溶剂 ,吸光度值最大。故采用
50%乙醇作为本品的提取溶剂 。
2.3　提取方法的选择　取本品适量 ,除去糖衣 ,研
细 ,分成 2份 ,每份约 0.6g ,精密称定 ,置 100 mL 量
瓶中 ,分别精密加入 50%乙醇 70 mL ,置水浴上微热
并时时振摇 30 min或超声提取(40 KHz , 250 W)30
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第 14卷第 7 期
2008年 7 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol.14 , No.7
Jul., 2008
DOI :10.13422/j.cnki.syf jx.2008.07.006
min进行对比;试验结果表明:两种方法的提取效果
基本一致 ,但在试验过程中发现 ,供试验品溶液超声
后静至 4 h仍不能澄清 ,故选择置水浴上微热并时
时振摇作为本品的提取方法。
2.4　提取时间的选择　取供试品分别提取 15 ,30 ,
45 min;结果表明提取 30 min已提取完全 ,故选择提
取30 min作为本品的提取时间 。
2.5　线性关系考察　取对照品溶液(浓度为 0.5 mg
·mL-1)1.0 ,2.0 , 3.0 , 4.0 , 5.0 ,6.0 mL ,分别置 25 mL
量瓶中 ,加水至 6 mL ,加 5%亚硝酸钠溶液 1 mL ,混
匀 ,放置 6 min ,加 10%硝酸铝溶液 1 mL ,摇匀 ,放置
6 min ,加氢氧化钠试液 10 mL ,再加水至刻度 ,摇匀 ,
放置 15 min;以相应的溶液为空白 。照紫外-分光光
度法 ,在 500 nm 波长处测定吸光度 ,平行测定 2次 ,
以平均吸光度为纵坐标 、浓度为横坐标。在(0.020
～ 0.120)mg·mL-1范围内 ,得回归方程:Y =12.069
5X-0.022 6(R=0.999 9),试验结果表明:芦丁浓度
在(0.020 ～ 0.120)mg·mL-1范围内吸光度有良好的
线性关系 。
2.6　重复性试验　取同一批样品(批号:L06E224)6
份 ,每份约 0.6 g ,精密称定 ,按含量测定方法制备供
试品溶液 ,依样品测定项下方法测定其含量 , 结果
RSD=0.60%, n=6。
2.7　中间精密度　取同一批样品(批号:L06E224)6
份 ,每份约 0.6 g ,分别由 A 、B 、C 3 人 ,在不同的时
间 ,用同一台设备 ,按含量测定方法制备供试品溶
液 ,依法测定吸光度 ,计算 RSD。试验结果 RSD=
0.94%。
2.8　专属性　了哥王阴性供试品溶液的制备 按处
方及制法 ,制成缺了哥王药材的阴性样品。取了哥
王阴性制剂0.288 8 g ,依法制备 ,即得。按拟定的方
法进行试验 ,结果了哥王阴性样品溶液在 500 nm 处
的吸光度为 0.006 1 , 为供试品溶液吸光度的
1.20%。表明此法阴性无干扰 ,专属性强。
2.9　稳定性试验　取同一批样品的供试品溶液 ,分
别于 0 ,2 ,4 ,6 , 8 h ,按含量测定方法测定吸光度 ,计
算RSD。试验结果表明进样在 8 h 内稳定(RSD=
0.97%, n=5)
2.10　加样回收测定 　取已知含量的(批号:
L06E224 ,含量 26.00 mg·g-1)供试品 6 份 ,每份约
0.3 g ,研细 ,精密称定 ,置 100 mL 量瓶中 ,分别精密
加入芦丁对照品溶液(1.584 7 mg·mL-1)5 mL , 加
50%乙醇65 mL ,置水浴上微热并时时振摇 30 min ,
放冷 ,加 50%乙醇至刻度 ,摇匀 ,放置 4 h ,精密量取
上清液 6 mL ,置 25mL量瓶中 ,照标准曲线的制备项
下方法 ,自“加 5%亚硝酸钠溶液 1 mL”起 ,依法测定
吸光度 ,从标准曲线上读出供试品溶液中无水芦丁
的重量。计算得平均回收率为 100.8%,RSD=1.2%,
回收率试验符合规定 ,表明本方法准确性良好。
2.11　样品的含量测定 　取供试品 10批 ,除去糖
衣 ,研细 ,取约0.6 g ,精密称定 ,置100mL量瓶中 ,分
别精密加入 50%乙醇甲醇 70 mL ,置水浴上微热并
时时振摇 30 min ,放冷 ,加相应溶媒至刻度 ,摇匀 ,放
置 4 h ,精密量取上清液 6 mL ,置 25 mL 量瓶中 ,加
5%亚硝酸钠溶液 1 mL ,混匀 ,放置 6 min加 10%硝
酸铝溶液1 mL ,摇匀 ,放置6 min ,加氢氧化钠试液10
mL ,再加水至刻度 ,摇匀 ,放置 15 min;以相应的溶液
为空白 ,在 500 nm 波长处测定吸光度依法测定吸光
度 ,计算含量 ,结果见表1 。
表 1　了哥王片中总黄酮(以芦丁计)含测结果
批号 含量(mg 片)
0401271 9.57
0408302 10.96
0411041 9.42
0503041 12.34
0505251 13.53
0606102 13.38
0508102 8.75
0601093 7.62
0602093 9.89
0604014 7.18
3　讨论
　　了哥王片超声波处理方法虽然方便 ,但需静置
的时间长 ,静置 4 h尚不能达到澄清的效果 ,对试验
结果的重现性有一定的影响 ,故选择置水浴上微热
并时时振摇作为本品的提取方法。
　　本方法合理 、准确 、可靠 ,可作为了哥王片的质
量控制方法 。
[参考文献]
[ 1] 　陈　爽 , 邵曼莉 ,杨振宇 , 等.正交试验优选了哥王的提
取工艺[ J] .中草药 , 2007 , 38(2):208-210.
[ 2] 　耿立冬 , 张 村 , 肖永庆.了哥王化学成分研究[ J] .中国
中药杂志 , 2005 , 31(10):817-819.
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第 14卷第 7 期
2008年 7 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol.14 , No.7
Jul., 2008