全 文 ：学成分的研究较多，而氨基酸方面的报道较少。本
文建立了柱前衍生化 RP-HPLC 法检测灵芝中 6 种
主要氨基酸的含量，平均回收率 99. 4%，RSD 值为
0. 99% -3. 22%，并且依据此方法测定了不同产地灵
芝中 6 种氨基酸含量，为灵芝中氨基酸含量的研究
提供了一定的实验依据。
参 考 文 献
［1］国家药典委员会 . 中华人民共和国药典［S］. 一部 . 北
京:中国医药科技出版社，2010:174-175.
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收稿日期:2011-05-26
基金项目:贵州省科学技术厅中药现代化项目(黔科合社字［2009］5001 号) ;国家十一五科技支撑项目(2007BAI48B08-1)
作者简介:王建科(1966-) ，男，高级实验师，主要从事中药炮制研究;Tel:0851-5652239，E-mail:wjk-66@ 163． com。
·加工炮制与养护·
汗渍法炮制了哥王饮片的质量标准研究
王建科，李 玮，郭建民，林 昶，赵晓兰，刘 艳，杨 艳
(贵阳中医学院，贵州 贵阳 550002)
摘要 目的:通过对 10 批次汗渍法炮制了哥王饮片质量标准的研究，建立其质量标准。方法:对 10 批次汗渍
法炮制了哥王饮片进行了薄层鉴别、水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物、含量测定等研究，进行分析评价。结果:
建议汗渍法炮制了哥王饮片质量标准中的水分不得过 14. 5%，总灰分不得过 3. 5%，酸不溶性灰分不得过 1. 0%，
醇溶性浸出物不得少于 9. 0%，西瑞香素(C19H12O7)含量不得少于 0. 2%。结论:初步建立汗渍法炮制了哥王饮片
量化质控标准评价体系。
关键词 了哥王;汗渍法;饮片质量标准;西瑞香素
中图分类号:R283 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2011)12-1848-03
Study on Quality Standards of Decoction Pieces of Indian Stringbush Root with Sweat
WANG Jian-ke，LI Wei，GUO Jian-min，LIN Chang，ZHAO Xiao-lan，LIU Yan，YANG Yan
(Guiyang Traditional Chinese Medical College，Guiyang 550002，China)
Abstract Objective :To study quality standards of 10 batches of Indian of stringbush root decoction pieces with sweat processing
and build up the quality standard. Methods:10 batches of indian stringbush root decoction pieces with sweat were investigated with
TLC. Moisture content，total ash，acid-insoluble ash and extractum were explored. The content of daphnoretin was determined by HPLC.
Results:Indian stringbush root decoction pieces with sweat，the moisture content should not pass 14. 5%，total ash should not pass
3. 5%，acid-insoluble ash should not pass 1. 0%，alcohol-soluble extractive should not lower than 9. 0%，the content of daphnoretin
should not lower than 0. 2% . Conclusion:Quality control quantization evaluation system of Indian stringbush root decoction pieces with
sweat is establishment initial.
key words Indian stringbush root;Sweat;Decoction Pieces quality standards;Daphnoretin
了哥王为瑞香科荛花属植物南岭荛花(Wikstro-
emia indica C. A. Mey. )的干燥根或根皮。具有消
炎解毒，散瘀逐水的功效。用于治疗支气管炎、肺
炎、腮腺炎、淋巴结炎、风湿痛、晚期血吸虫病腹水、
疮疖痈疽等症〔1〕。了哥王中含有香豆素类等成分，
其中西瑞香素为了哥王的主要成分之一，具有抗炎、
抗肿瘤等多种药理作用〔2〕。以西瑞香素为指标成
分制定质量标准，有利于了哥王饮片质量的控制。
了哥王为有毒药物，苗族采用“汗渍法”(又称“身背
汗湿法”)进行炮制，以降低药物毒性。其方法为将
药物捆扎于人体的腰部，利用人体产生的汗液和人
体的温度进行加工。本研究在民族炮制方法研究的
·8481· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 34 卷第 12 期 2011 年 12 月
DOI:10.13863/j.issn1001-4454.2011.12.024
基础上，改以人工汗液为辅料炮制了哥王，并通过对
10 批次了哥王饮片质量标准的研究，建立其饮片质
量标准，为了哥王饮片的规范化生产及质量控制提
供科学依据。
1 仪器与材料
LC-20AT 高效液相色谱仪 (日本岛津)、
AUW200D分析天平(日本岛津)、预制硅胶 GF254板
(青岛海洋化工厂) ;西瑞香素对照品(自制，经归一
化处理，含量大于 98 %) ;甲醇为色谱纯，水为重蒸
水，其他试剂均为分析纯;了哥王药材来源见表 1，
经我院生药教研室周汉华教授鉴定为瑞香科荛花属
植物南岭荛花(Wikstroemia indica C. A. Mey. )的根。
表 1 10 批了哥王样品药材来源表
序号 编号 产地 序号 编号 产地
1 样品 1 湖南廉桥 6 样品 6 广西灵山
2 样品 2 湖南廉桥 7 样品 7 广西灵山
3 样品 3 安徽亳州 8 样品 8 广西灵山
4 样品 4 安徽亳州 9 样品 9 广西灵山
5 样品 5 贵州贵阳 10 样品 10 广西灵山
2 样品制备
取净了哥王片，每天喷入定量的人工汗液，拌
匀，待吸尽后，置36. 5 ℃ ～ 37 ℃的烘箱内烘 30 d，
取出，放凉。了哥王每 100 kg，用人工汗液 30 kg。
人工汗液配方见表 2。
表 2 人工汗液配方表
序号 组成 用量
1 L-组氨酸盐酸盐 0. 5 g /L
2 氯化钠 5 g /L
3 二水合磷酸二氢钠用 0. 1 N烧碱调节 pH值至 5. 5 2. 2 g /L
3 方法与结果
3. 1 性状 本品为不规则薄片或块，表面黄棕色
或暗棕色。质坚韧，断面皮部类白色，强纤维性，与
木部分离，撕裂后纤维呈棉毛状。木部淡黄色，木射
线甚密。气微，味微苦而甘，而后有持久的灼热不适
感。
3. 2 薄层鉴别 取本品去除栓皮的根皮 1 g，切
碎，用氯仿-甲醇(18∶ 2)20 mL，回流提取 30 min，滤
过，滤液作为供试品溶液。另取西瑞香素对照品适
量，加甲醇配制成 0. 34 mg /mL 的溶液，作为对照品
溶液。照薄层色谱法(中国药典 2010 版一部附录Ⅵ
B)试验，吸取上述 2种溶液各 4 μL，分别点样于同一
块硅胶 GF254板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5∶ 4∶ 1)为
展开剂，展开，取出，晾干，置 365 nm 紫外灯光下检
视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，
显相同蓝色荧光斑点，氨熏后日光下变黄，紫外光下
显灰绿色荧光。了哥王饮片薄层色谱图见图 1。
图 1 了哥王饮片薄层色谱图
A. 紫外灯观察 B. 氨熏紫外灯观察 对 . 西瑞香素对照品 1 ～ 10. 10 批了哥王样品
3. 3 检查
3. 3. 1 水分:按中国药典 2010 版一部附录ⅨH
“水分测定法中第一法”测定，结果见表 4。
3. 3. 2 灰分:按中国药典 2010 版一部附录ⅨK
“总灰分、酸不溶性灰分测定法”测定，结果见表 4。
3. 3. 3 浸出物:按中国药典 2010 版一部附录ⅩA
测定 90%乙醇浸出物，结果见表 4。
3. 4 含量测定
3. 4. 1 色谱条件:色谱柱为 Alltima C18柱(250 mm
× 4. 6 mm，5 μm) ，柱温:30 ℃，流动相:甲醇 ∶
0. 1%磷酸溶液(52 ∶ 48) ，流速:1 mL /min，检测波
长:345 nm。色谱图见图 2。
3. 4. 2 对照品溶液的制备:精密称取减压干燥至
恒重的西瑞香素对照品 3. 90 mg，置 25 mL 容量瓶
中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得每 1 mL含
0. 156 mg的西瑞香素对照品溶液。
3. 4. 3 供试品溶液的制备:取了哥王粉末 0. 2 g，
精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇 25 ml，称
定重量，85 ℃水浴回流 30 min，放冷至室温，再称定
重量，用甲醇补足减失的重量，滤过，取续滤液以
0. 45 μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。
3. 4. 4 线性关系考察:精密吸取西瑞香素对照品
溶液 0. 5、1. 0、2. 0、3. 0、4. 0 mL 置 10 mL 的容量瓶
中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，分别进样10μL，测定
·9481·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 34 卷第 12 期 2011 年 12 月
图 2 西瑞香素对照品(A)与了哥王样品(B)HPLC图谱
其峰面积，以峰面积(Y)和西瑞香素质量(X)进行
线性回归，得回归方程:y = 3 × 106x + 7177. 2，r =
0. 99995，线性范围 0. 078 ～ 0. 624 μg /mL。
3. 4. 5 重现性试验:取同一样品粉末 6 份，每份
0. 2 g，精密称定，按供试品溶液的制备项下方法操
作，测定峰面积积分值，得西瑞香素 RSD为 1. 25%。
结果表明，测定方法重现性良好。
3. 4. 6 精密度试验:精密吸取同一对照品溶液，连
续进样 5 次，每次 10 μL，得西瑞香素 RSD 为
2. 44%。结果表明，精密度良好。
3. 4. 7 稳定性试验:取同一样品溶液，分别在 0、
0. 5、1. 0、1. 5、2. 0、2. 5、3 h 各进样 10 μL，测定峰面
积积分值，得西瑞香素在 0 ～ 3 h内峰面积的 RSD为
2. 85%。结果表明，样品在 3 h内稳定。
3. 4. 8 加样回收率试验:取已知含量的样品粉末
6 份，每份 0. 1 g，精密称定，分别加入西瑞香素对照
品适量，按供试品溶液的制备项下方法操作，并进行
测定，计算回收率，得平均回收率为 98. 04%，RSD
为 2. 72%。结果见表 3。
表 3 西瑞香素加样回收率测定结果
称样量
/g
样品
含量
/mg
加入量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均
回率
/%
RSD
/%
0. 101 0. 340 0. 340 0. 678 99. 41
0. 101 0. 340 0. 340 0. 675 98. 53
0. 100 0. 337 0. 340 0. 663 95. 88
0. 103 0. 347 0. 340 0. 670 95. 00
0. 104 0. 350 0. 340 0. 680 97. 06
0. 101 0. 340 0. 340 0. 688 102. 35
98. 04 2. 72
3. 4. 9 样品测定:分别取 10 批次了哥王中试样
品，按供试品溶液的制备项下方法操作，分别精密吸
取各供试品溶液 10 μL，按上述色谱条件测定，计算
西瑞香素的含量，结果见表 4。
表 4 了哥王饮片各项质量指标测定结果
样品编号 水分/%
总灰分
/%
酸不溶
性灰分
/%
醇溶性
浸出物
/%
西瑞
香素
/%
样品 1 6. 00 2. 70 0. 46 12. 33 0. 34
样品 2 14. 35 2. 93 0. 50 13. 16 0. 37
样品 3 14. 42 2. 87 0. 53 14. 15 0. 42
样品 4 14. 08 2. 96 0. 60 12. 66 0. 41
样品 5 14. 68 3. 30 0. 65 13. 39 0. 53
样品 6 7. 91 3. 07 0. 69 13. 04 0. 30
样品 7 7. 56 2. 68 0. 71 12. 03 0. 34
样品 8 6. 77 3. 02 0. 67 13. 26 0. 35
样品 9 7. 93 2. 95 0. 66 9. 57 0. 30
样品 10 7. 90 3. 15 0. 88 15. 49 0. 36
4 讨论
4. 1 根据实验结果及参考饮片标准制定原则，建
议了哥王饮片的质量标准定为:水分不得过
14. 5%，总灰分不得过 3. 5%，酸不溶性灰分不得过
1. 0%，醇溶性浸出物不得少于 9. 0%，西瑞香素
(C19H12 O7)含量不得少于 0. 2%;了哥王饮片中有
害元素及有机氯、有机磷农药残留都低于国家标准，
而且目前市场上供应的了哥王基本为野生品，因此，
该检查项目可暂不列入其质量标准中。
4. 2 通过对不同浓度的乙醇热浸出物以及水溶性
浸出物的考察，结果了哥王醇溶性浸出物含量高于
水溶性浸出物的含量，且以 90%乙醇的浸出物的含
量最高，故本实验了哥王饮片醇溶性浸出物即以
90%乙醇作为提取溶剂，采用热浸法进行。
4. 3 本课题组的人员对了哥王急性毒性研究结果
表明，汗渍法中所使用的人体汗液和人工汗液均能
大幅降低了哥王的毒性，且其抗炎、抗菌作用无显著
性差异。因此，本研究用人工汗液炮制了哥王饮片
来制定其质量标准具有实际意义，有利于规范化、规
模化生产。
4. 4 通过对 10 批次了哥王饮片进行了薄层鉴别、
水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物、含量测定等指
标进行研究及分析评价，初步建立汗渍法炮制了哥
王饮片量化质控标准评价体系。
参 考 文 献
［1］卫生部药典委员会 . 中华人民共和国药典［S］. 一部 .
北京:人民卫生出版社，1977:16.
［2］熊友香，王显武，尤志勉，等，HPLC测定不同产地了哥王
药材中西瑞香素含量［J］.中成药，2009，31(8) :附 18.
·0581· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 34 卷第 12 期 2011 年 12 月