全 文 ：西北林学院学报 ２０１６，３１（１）：２４３～２４９
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－７４６１．２０１６．０１．４２
青扦针叶总黄酮超声提取及抗氧化活性
收稿日期：２０１５－０３－１９ 修回日期：２０１５－０５－２０
作者简介：王 飞，女，硕士研究生，研究方向：植物资源利用。Ｅ－ｍａｉｌ：ｍｉｌａｎｆｅｉ２０１０＠１２６．ｃｏｍ
＊通信作者：樊金拴，男，教授，研究方向：植物资源利用。Ｅ－ｍａｉｌ：ｆａｎｊｉｎｓｈｕａｎ＠１６３．ｃｏｍ
王 飞，樊金拴＊，冯慧英，刘 滨，高智辉
（西北农林科技大学 林学院，陕西 杨陵７１２１００）
摘 要：对青扦针叶总黄酮超声提取工艺和抗氧化性进行了研究，在单因素试验基础上，采用响应
面法优化青扦针叶总黄酮的提取工艺，并通过对ＤＰＰＨ·、ＡＢＴＳ·的清除试验以及与Ｖｃ、槲皮素
和芦丁的总还原力进行比较，来研究青扦总黄酮的抗氧化活性。结果表明，在料液比为１∶２０的条
件下，得到黄酮的最佳提取工艺为：乙醇体积分数５０．６３％、超声功率３１９．６３Ｗ、超声时间４９．４６
ｍｉｎ、超声温度为６４．８８℃，此时青扦黄酮的提取率可达４．１１８ ６９％。青扦针叶总黄酮对ＤＰＰＨ·
清除率可达９０．２１％，清除ＡＢＴＳ·的Ｔｒｏｌｏｘ当量为２９ ６３３．３μｍｏｌ·ｇ
－１，其还原能力优于芦丁，
但不及Ｖｃ和槲皮素。表明青扦针叶总黄酮具有较强的抗氧化能力，可为青扦针叶黄酮资源的开
发利用提供依据。
关键词：青扦针叶；总黄酮；超声提取；响应面法
中图分类号：Ｓ７８９．４ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００１－７４６１（２０１６）０１－０２４３－０７
Ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ Ａｓｓｉｓｔｅｄ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ Ｔｏｔａｌ Ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ
ｉｎ ｔｈｅ Ｎｅｅｄｌｅｓ ｏｆ Ｐｉｃｅａ ｗｉｌｓｏｎｉｉ
ＷＡＮＧ Ｆｅｉ，ＦＡＮ Ｊｉｎ－ｓｈｕａｎ＊，ＦＥＮＧ Ｈｕｉ－ｙｉｎｇ，ＬＩＵ Ｂｉｎ，ＧＡＯ Ｚｈｉ－ｈｕｉ
（Ｃｏｌｌｇｅ ｏｆ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ，Ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ Ａ＆Ｆ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａｎｇｌｉｎｇ，Ｓｈａａｎｘｉ ７１２１００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ ａｓｓｉｓｔｅｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｆ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｆｒｏｍＰｉｃｅａ ｗｉｌｓｏｎｉｉ ｎｅｅ－
ｄｌｅｓ ｗｅｒｅ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ，ｉｎ ｗｈｉｃｈ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｔｈｅ ｓｉｎｇｌｅ－ｆａｃｔｏｒ ｔｅｓｔｓ，ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｖａｌｕｅｓ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ｒｅ－
ｓｐｏｎｓｅ ｓｕｒｆａｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ．Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔ ｗａｓ ｍｅａｓｕｒｅｄ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｗｉｔｈ ｔｈｅ
ｒａｔｉｏ ｏｆ ｍａｔｅｒｉａｌ ｔｏ ｓｏｌｖｅｎｔ １∶２０，ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ｅｔｈａｎｏｌ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ：５０．６３％
（Ｖ／Ｖ），ｐｏｗｅｒ ｏｆ ｔｈｅ ｇｅｎｅｒａｔｏｒ ｏｆ ｔｈｅ ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ ｏｆ：３１９．６３Ｗ，ｔｉｍｅ ｏｆ ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ ａｓｓｉｓｔｅｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ４９．４６
ｍｉｎ，ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ６４．８８℃，ｔｈｅ ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ ｐｏｗｅｒ ３１９．６３Ｗ，ａｎｄ ｅｔｈａｎｏｌ ｖｏｌｕｍｅ ｆｒａｃｔｉｏｎ ５０．６３％，ｂｙ ｗｈｉｃｈ
ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｗａｓ ４．１１８ ６９％．Ｔｈｅ ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ ｒａｔｅ ｏｆ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔ ｏｎ ＤＰＰＨ· ｗａｓ
９０．２１％ａｎｄ ｔｈｅ ｅｑｕｉｖａｌｅｎｔ ＡＢＴＳ ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ ｒａｔｅ ｗａｓ ２９ ６３３．３μｍｏｌ·ｇ
－１，ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｄｕｃｉｎｇ ｐｏｗｅｒ ｗａｓ
ｂｅｔｔｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ｒｕｔｉｎ，ｂｕｔ ｎｏｔ ａｓ ｇｏｏｄ ａｓ Ｖｃ ａｎｄ ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ，ｉｎｄｉｃａｔｉｎｇ ｔｈａｔ ｔｈｅ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｔｈｅ
ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｉｎ ｔｈｅ ｎｅｅｄｌｅｓ ｏｆ Ｐ．ｗｉｌｓｏｎｉｉ ｗａｓ ｇｏｏｄ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｐｒｏｖｉｄｅ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅ－
ｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｎｅｅｄｌｅｓ ｏｆ Ｐ．ｗｉｌｓｏｎｉｉ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｐｉｃｅａ ｗｉｌｓｏｎｉｉ；ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄ；ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｓｕｒｆａｃｅ ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ
黄酮类化合物广泛存在于自然界，具有抗氧
化［１－２］、抗衰老、抗炎［３－４］、抗病毒和抗肿瘤［５］等多种
药理活性［６］，除此之外，黄酮类化合物还具保护肝
脏［７－８］和雌性激素样作用［９］，对糖尿病和心脑血管疾
病也有很好的疗效［１０－１２］，在食品、药品中应用非常
广。青扦（Ｐｉｃｅａ ｗｉｌｓｏｎｉｉ）为松科（Ｐｉｎａｃｅａｅ）云杉属
（Ｐｉｃｅａ）的常绿植物，是我国的特有树种，是分布较
为广泛的针叶树种之一［１３］，已有研究表明，青扦富
含黄酮并具有较高的抗氧化性［１４］。超声波辅助提
取技术，因具有提取时间短、提取效率高、节约成本
等优点［１５］，已经广泛应用于很多植物黄酮的提取。
但目前鲜有对青扦针叶中黄酮类物质超声提取的有
关报道。本试验以青扦针叶为材料，利用响应面分
析技术，优化青扦针叶总黄酮的超声提取工艺，并测
定了青扦的抗氧化能力，为青扦针叶黄酮的进一步
开发，以及青扦针叶资源的综合利用提供参考依据。
１ 材料与方法
１．１ 材料及预处理
供试青扦材料采自陕西省杨陵区西北农林科技
大学校园；采样树高３ｍ左右，胸径约２０ｃｍ，平均
冠幅约２．５ｍ。采后经阴干、粉碎、过筛后冷藏
备用。
１．２ 方法
１．２．１ 青扦针叶黄酮的提取及含量测定 精确称
取０．５００ ０ｇ青扦针叶粉末，置于具塞锥形瓶中，加
入乙醇溶液，一定条件下经超声提取，完成后进行抽
滤，最后将滤液转于５０ｍＬ容量瓶中定容，待测。
用芦丁标准品，通过亚硝酸钠－硝酸铝法［１６－１８］制备标
准曲线，得到回归方程为：ｙ＝１５．３３３ｘ－０．００８ ０，
Ｒ２＝０．９９９ ３，（ｘ为芦丁质量浓度，ｍｇ·ｍＬ－１；ｙ为
吸光度），在０～０．０４２ ０ｍｇ·ｍＬ－１范围内线性关系
良好。同法测定黄酮样液吸光度，并计算黄酮含量
及提取率。
１．２．２ 青扦针叶黄酮超声提取的单因素试验及其
工艺优化 根据试验设计（表１），得出每一组试验
的黄酮提取率，分析各因素对青扦针叶黄酮提取率
的影响。依据单因素试验的结果，可确定１∶２０ｇ·
ｍＬ－１为最佳料液比，选择乙醇体积分数、超声功率、
超声时间、超声温度４个影响因素，根据Ｂｏｘ－Ｂｅ－
ｈｎｋｅｎ原理设计试验的因素与水平（表２），优化青
扦针叶黄酮的超声提取工艺。
１．２．３ 青扦针叶总黄酮抗氧化能力测定
１．２．３．１ ＤＰＰＨ·清除能力的测定 以Ｔｒｏｌｏｘ标
准液作阳性对照，参照Ｙｅｎ、Ｃｈｅｎ、董海丽［１９－２０］的方
法，测定青扦针叶总黄酮的ＤＰＰＨ·清除能力。
１．２．３．２ ＡＢＴＳ·清除能力的测定 参照 Ｒｉｃｅ－
Ｅｖａｎｓ［２１］的方法，制备 Ｔｒｏｌｏｘ的标准曲线，标准曲
线回归方程为：ｙ＝０．０００ ９ｘ＋０．０５３ ３，Ｒ２＝０．９９９
１，（ｘ为 Ｔｒｏｌｏｘ质量浓度，μｍｏｌ·Ｌ
－１；ｙ 为吸光
度）。根据Ｔｒｏｌｏｘ的标准曲线，计算１ｇ青扦黄酮的
Ｔｒｏｌｏｘ当量。
１．２．３．３ 还原力的测定 采用普鲁士蓝法，参照
Ｂｅｒｋｅｒ Ｋ Ｉ［２２］的方法，以 Ｖｃ、芦丁、槲皮素作为对照
物，配梯度浓度，测定其在７００ｎｍ处的吸光值；同
法测得黄酮样液的吸光度，确定其还原力。
表１ 超声提取单因素试验设计
Ｔａｂｌｅ １ Ｓｉｎｇｌｅ ｆａｃｔｏｒ ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
因素 水平 其他因素
料 液 比／（ｍＬ ·
ｇ－１）
１∶１０、１∶２０、１∶３０、
１∶４０、１∶５０
５０％、３００Ｗ、
３０ｍｉｍ、４５℃
乙醇体积分数／％
２０、３０、４０、５０、６０、７０、
８０、９０
１∶２０、３００Ｗ、
３０ｍｉｍ、４５℃
超声功率／Ｗ ２００、３００、４００、５００
１∶２０、５０％、
３０ｍｉｍ、４５℃
超声时间／ｍｉｎ ２０、３０、４０、５０、６０、７０
１∶２０、５０％、３００Ｗ、
４５℃
超声温度／℃ ３５、４５、５５、６５、７５
１∶２０、５０％、３００Ｗ、
３０ｍｉｍ
表２ 响应面试验因素与水平设计
Ｔａｂｌｅ ２ Ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｓｕｒｆａｃｅ ｆａｃｔｏｒｓ ａｎｄ ｌｅｖｅｌｓ ｄｅｓｉｇｎ
水平
因素
Ａ乙醇体积
分数／％
Ｂ超声
功率／Ｗ
Ｃ超声
时间／ｍｉｎ
Ｄ超声
温度／℃
－１ ４０ ２００ ４０ ５５
０ ５０ ３００ ５０ ６５
１ ６０ ４００ ６０ ７５
２ 结果与分析
２．１ 单因素试验
影响青扦针叶总黄酮超声提取的主要因素有料
液比（图１ａ）、乙醇体积分数（图１ｂ）、超声功率（图
１ｃ）、超声时间（图１ｄ）和超声温度（图１ｅ）。
由图１可知，加大料液比，黄酮提取率提高，当
料液比增至１∶２０时，提取率基本趋于稳定，继续加
大料液比，黄酮的提取率不再有大的变化。所以下
一步试验均选取１∶２０的料液比。乙醇体积分数在
２０％～５０％的范围内，黄酮提取率会随着提高，并在
乙醇体积分数５０％ 时达到最高；乙醇体积分数超过
５０％，提取率下降较明显，故选５０％为最佳乙醇体
积分数。随着超声功率的增大，黄酮提取率呈现先
上升后下降的趋势，在超声功率达３００Ｗ 时最大。
黄酮提取率在超声时间２０～５０ｍｉｎ范围内，随超声
提取时间的延长而逐渐提高，在提取５０ｍｉｎ后的提
取率最大；超过５０ｍｉｎ，随着超声时间的延长，黄酮
提取率迅速下降，故最佳超声时间选择５０ｍｉｎ。随
着温度的升高，黄酮提取率也迅速提高，当温度升到
４５℃时，黄酮提取率增加缓慢，在６５℃提取率达到
最大；继续升高温度，提取率下降，所以超声温度选
择６５℃。
４４２ 西北林学院学报 ３１卷
图１ 各因素对青扦针叶总黄酮提取率的影响
Ｆｉｇ．１ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｖａｒｉｏｕｓ ｆａｃｔｏｒｓ ｏｎ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｎｅｅｄｌｅｓ ｏｆ Ｐ．ｗｉｌｓｏｎｉｉ
２．２ 响应面法优化青扦针叶总黄酮提取工艺条件
２．２．１ 模拟方程建立 利用响应面考察乙醇体积
分数、超声功率、超声时间、超声温度４因素对青扦
针叶总黄酮提取率的影响（表３）。采用 Ｄｅｓｉｇｎ－Ｅｘ－
ｐｅｒｔ软件经回归拟合后，得到模型方程：
Ｙ＝４．１１＋０．０１４Ａ＋０．０６０Ｂ－０．０２９Ｃ－
０．００２ ５８３Ｄ＋０．０９４ＡＢ－０．００９ ５ＡＣ＋０．１１ＡＤ＋
０．０５２ＢＣ－０．０６３ＢＤ－０．０４４ ＣＤ－０．２５Ａ２ －
０．１６Ｂ２－０．１７Ｃ２－０．２４Ｄ２
表４为该模型的显著性差异检验及方差分析的
结果。表中所示，模型ｐ＜０．０００ １，表明此模型为
极显著，其分析结果是可信的；模型的失拟项ｐ＞
０．０５，表明模型误差小。模型的Ｒ２ 为０．９９２ ２，说
明影响因素与黄酮提取率之间关系显著。预测Ｒ２
为０．９８４ ４，与校正Ｒ２（０．９６８ ６）很接近，说明模型
的拟合度好，可以利用此回归方程分析和预测青扦
针叶黄酮的超声提取工艺。
由方差分析的结果可知，超声功率（ｐ＜０．０１）
和超声时间（ｐ＜０．０１）是影响黄酮提取率的２个极
显著因素。各因素Ｆ值可反映出对提取率的重要
性，Ｆ值越大，则影响越大［２３］。可判断４个因素对
黄酮提取率的影响顺序为：超声功率＞超声时间＞
乙醇体积分数＞超声温度。模型方程中的不显著
项，经删除简化后，得到的新模型结果可信，其ｐ＜
０．０００ １，Ｒ２（０．９９１ ８）的降幅很小。简化后的方程为：
Ｙ＝４．１１＋０．０１４Ａ＋０．０６０Ｂ－０．０２９Ｃ－
０．００２ ５８３Ｄ＋０．０９４ＡＢ＋０．１１ＡＤ＋０．０５２ＢＣ－
０．０６３ＢＤ－０．０４４ＣＤ－０．２５Ａ２－０．１６Ｂ２－０．１７Ｃ２
－０．２４Ｄ２
表３ 响应面试验设计和结果
Ｔａｂｌｅ ３ Ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｓｕｒｆａｃｅ ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ ｒｅｓｕｌｔｓ
试验
号码
Ａ 乙醇
体积分数
／％
Ｂ 超声
功率
／Ｗ
Ｃ超声
时间
／ｍｉｎ
Ｄ超声
温度
／℃
Ｙ 黄酮
提取率
／％
１ ０ ０ ０ ０ ４．０６６
２ ０ ０ －１ １ ３．７７８
３ １ ０ －１ ０ ３．７３８
４ ０ １ １ ０ ３．８６２
５ ０ －１ １ ０ ３．６５２
６ １ －１ ０ ０ ３．５６１
７ －１ －１ ０ ０ ３．７１２
８ １ ０ １ ０ ３．６４１
９ －１ １ ０ ０ ３．６６９
１０ ０ －１ ０ －１ ３．５８９
１１ ０ ０ －１ －１ ３．６９９
１２ ０ １ ０ －１ ３．８２３
１３ ０ １ －１ ０ ３．７９８
１４ ０ ０ １ －１ ３．７３４
１５ ０ １ ０ １ ３．６８１
１６ ０ ０ １ １ ３．６３７
１７ １ １ ０ ０ ３．８９５
１８ １ ０ ０ －１ ３．５１６
１９ １ ０ ０ １ ３．７４２
２０ －１ ０ －１ ０ ３．６９８
２１ ０ ０ ０ ０ ４．１２６
２２ －１ ０ ０ －１ ３．７０８
２３ －１ ０ ０ １ ３．５０３
２４ ０ －１ －１ ０ ３．７９８
２５ ０ ０ ０ ０ ４．１３２
２６ ０ －１ ０ １ ３．６９７
２７ ０ ０ ０ ０ ４．１２８
２８ －１ ０ １ ０ ３．６３９
２９ ０ ０ ０ ０ ４．１０６
５４２第１期 王 飞 等：青扦针叶总黄酮超声提取及抗氧化活性
表４ 方差分析结果
Ｔａｂｌｅ ４ Ｖａｒｉａｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｒｅｓｕｌｔｓ
方差来源 平方和 自由度 均方 Ｆ值 ｐ值
模型 ０．９３ １４ ０．０６６ １２７．３８ ＜０．０００ １
Ａ ２．２４１×１０－３ １ ２．２４１×１０－３ ４．３０ ０．０５７ ０
Ｂ ０．０４３ １ ０．０４３ ８２．６７ ＜０．０００ １
Ｃ ９．８６１×１０－３ １ ９．８６１×１０－３ １８．９２ ０．０００ ７
Ｄ ８．００８×１０－５ １ ８．００８×１０－５ ０．１５ ０．７００ ９
ＡＢ ０．０３６ １ ０．０３６ ６８．１８ ＜０．０００ １
ＡＣ ３．６１０×１０－４ １ ３．６１０×１０－４ ０．６９ ０．４１９ ２
ＡＤ ０．０４６ １ ０．０４６ ８９．１２ ＜０．０００ １
ＢＣ ０．０１１ １ ０．０１１ ２１．１６ ０．０００ ４
ＢＤ ０．０１６ １ ０．０１６ ２９．９８ ＜０．０００ １
ＣＤ ７．７４４×１０－３ １ ７．７４４×１０－３ １４．８６ ０．００１ ８
Ａ２ ０．４１ １ ０．４１ ７８９．２０ ＜０．０００ １
Ｂ２ ０．１７ １ ０．１７ ３２８．３８ ＜０．０００ １
Ｃ２ ０．１９ １ ０．１９ ３６１．００ ＜０．０００ １
Ｄ２ ０．３８ １ ０．３８ ７２４．００ ＜０．０００ １
残差 ７．２９６×１０－３ １４ ５．２１１×１０－４
失拟项 ４．２９２×１０－３ １０ ４．２９２×１０－４ ０．５７ ０．７８４ ４
误差项 ３．００３×１０－３ ４ ７．５０８×１０－４
总和 ０．９４ ２８
２．２．２ 响应面图分析 各因素间交互作用的曲线
走势越陡，说明影响越显著；而曲线越平滑，则其影
响越小［２４］。图２所示，超声功率（Ｂ）与各因素间的
交互作用最为复杂。图中当超声功率（Ｂ）的值一定
时，随着各因素的升高，黄酮提取率会达到一个高
峰，继续升高各因素值，提取率会缓慢下降。超声时
间（Ｃ）与各因素之间交互作用也同样复杂。图中乙
醇体积分数（Ａ）和超声时间（Ｃ）之间的等高线近圆
形，说明其交互作用（ｐ＞０．０５）对黄酮提取率的影
响不显著；其余各因素间交互作用的等高线呈椭圆
形，说明这些因素间的交互作用（ｐ＜０．０１）对黄酮
的提取具极显著影响。
２．２．３ 验证试验 依据试验条件，经软件分析得到
最佳工艺条件为：超声温度６４．８８℃、乙醇体积分数
５０．６３％、超声时间４９．４６ｍｉｎ、超声功率３１９．６３
Ｗ，提取率可达４．１１８ ６９％。结合实际应用，将工艺
的各条件调整为超声温度６５℃、乙醇体积分数
５１％、超声时间５０ｍｉｎ和超声功率３２０Ｗ，此时的
提取率为４．０９５ １２％，与理论值接近。表明该模型
优化得到的工艺条件参数准确可靠。
２．３ 青扦针叶总黄酮抗氧化性
２．３．１ ＤＰＰＨ·清除能力 图３所示，ＤＰＰＨ·清
除率都随着Ｔｒｏｌｏｘ和青扦黄酮浓度的增加而增加，
Ｔｒｏｌｏｘ和青扦黄酮对ＤＰＰＨ·的清除率分别达到
９５．５％和９０．２１％，说明青扦针叶总黄酮具有较强
的ＤＰＰＨ·清除能力。
２．３．２ ＡＢＴＳ·清除能力 图４可以看出，青扦黄
酮浓度与ＡＢＴＳ·清除率之间有良好的线性关系。
根据Ｔｒｏｌｏｘ的标准曲线，计算出黄酮的 Ｔｒｏｌｏｘ当
量为２９ ６３３．３μｍｏｌ·ｇ
－１。表明超声提取青扦黄酮
具有较好的抗氧化活性。
２．３．３ 总黄酮还原能力 由图５可以看出Ｖｃ、芦
丁、槲皮素这３种抗氧化剂的还原力不同，还原力由
大到小为 Ｖｃ、槲皮素、芦丁。Ｖｃ、芦丁、槲皮素其线
性方程分别为：ｙ＝１９．５７８ｘ＋０．０３０ ５（Ｒ２＝０．９９６ ７）、
ｙ＝１４．９６１ｘ＋０．０２３ ８（Ｒ２＝０．９９５ ６）、ｙ＝５．３３２ ２ｘ
－０．００９ ８（Ｒ２＝０．９９２ ３）；在选取范围内均具有良
好的线性关系。青扦黄酮的线性方程为：ｙ＝６．６６１ ３ｘ
＋０．００８（Ｒ２＝０．９９６ ８），说明其还原能力比芦丁
强，但不如Ｖｃ和槲皮素。
３ 结论与讨论
目前自然界的青扦大部分是天然林，但是其针
叶很少被有效利用。本试验以青扦针叶作为材料，
超声提取其黄酮类化合物，各因素对黄酮提取率的
影响顺序为：超声功率＞超声时间＞乙醇体积分数
＞超声温度。优化后得到料液比为１∶２０时的最佳
工艺条件为：超声温度６４．８８℃、乙醇体积分数
５０．６３％、超声时间４９．４６ｍｉｎ和超声功率３１９．６３Ｗ，
得到青扦针叶黄酮的提取率为４．１１８ ６９％。超声提
取能够使植物细胞破裂，黄酮成分更易溶出，有效地
提高了黄酮的提取效率，结果表明，超声提取法适用
于青扦针叶的黄酮提取，可为青扦针叶总黄酮的开
发提供参考依据。
６４２ 西北林学院学报 ３１卷
７４２第１期 王 飞 等：青扦针叶总黄酮超声提取及抗氧化活性
图３ 黄酮清除ＤＰＰＨ·的曲线
Ｆｉｇ．３ Ｔｈｅ ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ ｅｆｆｅｃｔ ｏｎ ＤＰＰＨ·ｆｏｒ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ
图４ 青扦黄酮清除ＡＢＴＳ·的曲线
Ｆｉｇ．４ Ｔｈｅ ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ ｅｆｆｅｃｔ ｏｎ ＡＢＴＳ·ｆｏｒ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ
图５ 不同抗氧化剂的还原力示意
Ｆｉｇ．５ Ｒｅｄｕｃｉｎｇ ｐｏｗｅｒ ｇｒａｐｈ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓ
黄酮类化合物除作为药品用于临床［７］，还可作
为食品、化妆品等的天然添加剂，已有研究以黄酮为
功能指标，研制和开发了松针黄酮的保健类产
品［２５］，具有很好的发展前景。超声提取的青扦针叶
总黄酮对ＤＰＰＨ·清除率可达９０．２１％，这与李小
燕等［１４］研究表明的青扦具有较强的抗氧化性的结
果相一致；青扦针叶总黄酮清除 ＡＢＴＳ·的Ｔｒｏｌｏｘ
当量为２９ ６３３．３μｍｏｌ·ｇ
－１，其还原力优于芦丁，但
不及Ｖｃ和槲皮素。说明超声提取的青扦黄酮具有
较好的抗氧化活性，可用作天然的抗氧化剂原料。
该研究也为青扦针叶黄酮资源的进一步综合利用提
供了重要依据。
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