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龙珠果不同入药部位中牡荆素的含量测定



全 文 :食品与药品 Food and Drug 2014年第 16卷第6期 425
统的内科治疗相结合,只有这样才能真正获得较好的
疗效[16]。
本研究对关节镜手术、痛风定胶囊治疗踝关节痛
风性关节炎进行了初步的临床观察,但由于观察样本
量偏少,观察周期短,无法预估其长远期的疗效和副
作用,仅为大家的临床治疗提供一定的参考,希望我
们在今后的工作中能进一步的深入研究。
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龙珠果不同入药部位中牡荆素的含量测定
王 东,卢慧娟,宋洪东,姬生国*
(广东药学院,广东 广州 510006)
摘 要:目的 测定龙珠果植物的茎、叶中牡荆素的含量,以确定其最佳入药部位。 方法 采用HPLC法,依利特 BDS C-18
色谱柱,流动相为甲醇:0.1 %磷酸(33:67),流速1.0 mL/min,柱温30 ℃,检测波长340 nm。结果 在0.002~0.08 g/L范
围内,牡荆素呈现良好线性关系,r=0.9998,平均加样回收率为99.79 %,RSD为1.14 %。结论 此法简便,快速,准确,
可用于龙珠果药材中牡荆素的含量测定。
关键词:龙珠果;牡荆素;高效液相色谱法;含量测定
中图分类号: R284.2 文献标识码:A 文章编号:1672-979X(2014)06-0425-03
Determination of Vitexin from Different Medicinal Parts of Passifl ora foetida Linn.
WANG Dong, LU Hui-juan, SONG Hong-dong, JI Sheng-guo
(Guangdong Pharmaceutical University, Guangzhou 510006, China)
Abstract: Objective To determine the content of vitexin from the stem and leaf of Passifl ora foetida Linn., to confi rm
收稿日期:2014-07-02
基金项目:广东省科技计划项目: 2009B030801044
作者简介:王东(1968-),女,副教授,硕士研究生导师,从事中药质量分析研究 Tel:020-39352180
E-mail:jsgwdxy@126.com
*通讯作者:姬生国(1967-),男,教授,博士,从事中药资源、中药质量标准及中药新药研究 Tel:020-39352327
E-mail:shengguo_ji@163.com
426 食品与药品 Food and Drug 2014年第 16卷第6期
the best medicinal part. Methods HPLC was adopted with Hypersil BDS C18 column (4.6 mm×250 mm, 5 μm). The
mobile phase was the mixture of methanol and 0.1% phosphate (volume ratio of 33:67). The fl ow rate was 1.0 mL/min
and the column temperature was 30 ℃. The UV detective wavelength was 340 nm. Results There was a good linear
relationship within 0.002-0.08 g/L of the content of vitexin (r=0.9998). The average recovery was 99.79 %, with RSD
of 1.14 %. Conclusion The method is simple, rapid and accurate, and can be used for the determination of vitexin in
Passifl ora foetida Linn..
Key Words: Passifl ora foetida Linn.; vitexin; HPLC; determination
龙珠果为西番莲科西番莲属多年生草质藤本植
物,主要分布于我国的福建、台湾、广东、海南等
地,生长于荒山草坡或灌丛中。果实甘甜可食,以地
上部分可入药,具有清热解毒、清肺止咳之功效,临
床多用于治疗肺热咳嗽、小便混浊、痈疮肿毒、外伤
性眼角膜炎、淋巴结炎等症[1-2]。龙珠果中主要含有
黄酮类化合物,其中主要成分有牡荆素、异牡荆素、
荭草素,异荭草素等[3]。牡荆素具活血化瘀、理气通
脉等药理作用,可用于瘀血阻脉所致的胸痹症,还有
抗肿瘤作用[4-5]。研究表明,龙珠果提取物在治疗酒
精、尼古丁、吗啡及大麻酚的药物成瘾性方面疗效较
好[6-7]。为进一步开拓中药药用资源,规范并制订其
质量控制标准,本研究测定龙珠果不同入药部位中牡
荆素的含量,旨在探寻其最佳入药部位,并为对其质
量控制指标提供依据。
1 仪器与试剂
1.1 仪器
LC-10AT高效液相色谱仪(日本岛津公司),
SK8200H超声波清洗器(上海科导超声仪器公司,功
率100 W,频率59 kHz),UV-1800紫外可见分光光
度计(北京六一仪器厂)。
1.2 试药
龙珠果,采集于广州市番禺区大镇岗和
广东药学院药用植物园,经广东药学院中药
学院姬生国教授鉴定为西番莲科植物龙珠果
Passiflora foetida Linn.的干燥全草。将茎、叶分开
后阴干,分别粉碎过60目筛,测定水分,含水量均
小于11 %,保存于密封袋中,置干燥器中备用。
牡荆素对照品(成都曼斯特,生产批号:MUST-
13062001,含量>99 %);甲醇(色谱纯);其他
试剂均为分析纯,水为二次重蒸馏水。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
依利特 BDS C-18色谱柱( 5 μm,250 mm×4.6
mm),流动相为甲醇-0.1 %磷酸 (33∶67),流速1.0
mL/min ,检测波长340 nm,柱温30 ℃,进样量10
L。理论塔板数以牡荆素峰计算不低于4000,保留时
间11.78 min。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取牡荆素对照品10.0 mg,加甲醇溶解定
容于50 mL量瓶,制成每1 mL溶液含0.2 mg的对照品
贮备液。
2.3 供试品溶液的制备
分别精密称取叶、茎粗粉各0.3 g,分别加甲醇15 mL,
超声提取30 min,过滤,滤液15 mL石油醚提取两次
洗脱,收集下层溶液,加2 %硫酸10 mL,水浴加热
1 h后迅速冷却至室温,用乙酸乙酯提取3次,每次20
mL,合并乙酸乙酯溶液,回收至干,甲醇溶解并定
容至5 mL量瓶,0.45 μm微孔滤膜过滤。
2.4 标准曲线的测定
精密吸取对照品贮备液0.5,1,5,10,15,20
mL,加甲醇定溶于50 mL量瓶。0.45 μm微孔滤膜过
滤,取续滤液,按上述色谱条件测定峰面积。以对照
品浓度为横坐标,峰面积积分值为纵坐标,计算得回
归方程为Y=21081564.64X-42025.83(r=0.9998)。结
果表明,牡荆素质量浓度在0.002~0.08 g/L范围内呈
良好线性关系。
2.5 方法学考察
2.5.1 精密度试验 精密吸取对照品溶液,连续进样6
次,按照2.1项下色谱条件测定,牡荆素峰面积积分
值RSD为1.64 %。结果表明,仪器精密度良好。
2.5.2 重复性试验 取同一批次同种样品6份,按2.3项
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下制备,按2.1项下测定,记录牡荆素的峰面积值,
得牡荆素含量,RSD为1.89 %,结果表明,此法重复
性良好。
2.5.3 稳定性试验 取同一供试品溶液,按照2.1项下
测定,分别于0,2,4,8,12,24 h进样测定牡荆素
含量,RSD为1.73%。结果表明,供试品溶液在24 h
内稳定。
2.5.4 加样回收率试验 精密称取已知含量龙珠果叶的粉
末6份,分别精密加入牡荆素对照品0.1 mg,按2.3项下
制备成供试品溶液,按照上述色谱条件测定,结果牡荆
素的平均回收率为99.79 %,RSD为1.14 %。见表1。
表1 加样回收率实验结果
含量/mg加入量/mg 测得量/mg 回收率/% 平均回收
率/%
RSD/%
0.1018 0.1000 0.2010 99.6
99.79 1.14
0.1018 0.1000 0.2011 99.67
0.1018 0.1000 0.1988 98.5
0.1018 0.1000 0.2049 101.55
0.1018 0.1000 0.2030 100.61
0.1018 0.1000 0.1993 98.8
1
1
1
A
B
C
t/min
A. 牡荆素对照品;B. 叶;C. 茎;1. 牡荆素
图1 牡荆素对照品及龙珠果样品HPLC图 2.6 样品含量测定
分别龙珠果叶、茎按照2.3项下制备成供试品溶
液,按2.1项下方法分别测定。得牡荆素在干燥叶中
的平均含量为0.073 %,RSD为1.36 %;在干燥茎中平
均含量为0.0041 %,RSD为1.61 %。对照品、供试品
及阴性对照品溶液HPLC图谱见图1。
3 讨论
3.1 由结果可见,龙珠果干燥叶中牡荆素的含量
(0.073 %)是干燥茎中含量(0.0041 %)的17.8倍,
若以牡荆素为该药材的质量评价指标,建议入药应以
干燥叶为主。
3.2 龙珠果多生长于我国南方地区,生长周期较长,
全年均可采集,不同的月份其牡荆素的含量可能不
同,具体一年中最佳的采收时间,尚需进一步研究。
3.3 由于样品中叶绿素的含量较多,样品颜色较深,
经大量尝试后最终以石油醚除去脂溶性色素,再经过
酸解,乙酸乙酯提取,效果较好。
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