全 文 ：收稿日期：２０１１－０２－１５；修回日期：２０１１－０５－１６
基金项目：浙江省自然科学基金项目（Ｙ４０７３０８）和浙江省科技厅钱江人才项目（２０１０Ｒ１００４４）资助
作者简介：李长于（１９８３～），男，江西婺源人，硕士研究生，从事分析化学研究工作。Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｃｙ０６１０ｍａｉｌ＠１２６．ｃｏｍ
通信作者：李祖光（１９７１～），男，江西上饶人，博士，教授，博士生导师，从事分析化学等教学和科研工作。Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｚｇ＠ｚｊｕｔ．ｅｄｕ．ｃｎ
第３２卷 第５期
２０１１年９月
质 谱 学 报
Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍａｓｓ　Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ　Ｓｏｃｉｅｔｙ
Ｖｏｌ．３２　Ｎｏ．５
Ｓｅｐ．２０１１
气相色谱－串联质谱法测定香精香料中的香豆素和黄樟素
李长于１，２，李祖光１，周示玉１，叶丹凤１，刘文涵１
（１．浙江工业大学化学工程与材料学院，浙江 杭州　３１００１４；
２．浙江省质量技术监督检测研究院，浙江 杭州　３１００１３）
摘要：采用乙醇超声提取，丙酸苯乙酯为内标进行定量，气相色谱－离子阱串联质谱法测定香精香料中香豆素
和黄樟素的含量。选取香豆素的母离子和子离子分别为ｍ／ｚ　１４６和ｍ／ｚ　１１８，黄樟素的母离子和子离子分
别为ｍ／ｚ１６２和ｍ／ｚ１３１，内标丙酸苯乙酯选择ｍ／ｚ１０４为定量离子。结果表明，香豆素和黄樟素在０．０５～
５ｍｇ／Ｌ范围内呈良好线性关系（ｒ＞０．９９５），方法的检测限（Ｓ／Ｎ＝３）香豆素为０．００４ｍｇ／Ｌ、黄樟素为０．００２
ｍｇ／Ｌ，加标回收率为９０．０％～１３１．２％。该方法操作简单、快速、灵敏度高，适用于香精香料中香豆素和黄
樟素的快速检测。
关键词：香豆素；黄樟素；香精香料；气相色谱－串联质谱（ＧＣ－ＭＳ／ＭＳ）
中图分类号：Ｏ　６５７．６３　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００４－２９９７（２０１１）０５－０２６５－０６
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｃｏｕｍａｒｉｎ　ａｎｄ　Ｓａｆｒｏｌｅ　ｉｎ　Ｆｌａｖｏｒ
ｂｙ　Ｇａｓ　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　Ｃｏｕｐｌｅｄ　ｔｏ　Ｉｏｎ　Ｔｒａｐ　Ｔａｎｄｅｍ　Ｍａｓｓ　Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ
ＬＩ　Ｃｈａｎｇ－ｙｕ１，２，ＬＩ　Ｚｕ－ｇｕａｎｇ１，ＺＨＯＵ　Ｓｈｉ－ｙｕ１，ＹＥ　Ｄａｎ－ｆｅｎｇ１，ＬＩＵ　Ｗｅｎ－ｈａｎ１
（１．Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　ａｎｄ　Ｍａｔｅｒｉａｌｓ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，
Ｚｈｅｊｉａｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ３１００１４，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｚｈｅｊｉａｎ　Ｔｅｓｔ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ｑｕａｌｉｔｙ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ　Ｓｕｐｅｒｖｉｓｉｏｎ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ３１００１３，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｏｕｍａｒｉｎ　ａｎｄ　ｓａｆｒｏｌｅ　ｉｎ　ｆｌａｖｏｒ　ｗａｓ　ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ　ｂｙ
ｇａｓ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　ｃｏｕｐｌｅｄ　ｔｏ　ｉｏｎ　ｔｒａｐ　ｔａｎｄｅｍ　ｍａｓｓ　ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ（ＧＣ－ＭＳ／ＭＳ）．Ｓａｍｐｌｅ
ｗａｓ　ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃａｌｙ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｅｔｈａｎｏｌ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｆｌａｖｏｒ．Ｔｈｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｗａｓ　ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ　ｂｙ
ＧＣ－ＭＳ／ＭＳ　ｕｓｉｎｇ　ｐｒｏｐａｎｏｉｃ　ａｃｉｄ，２－ｐｈｅｎｙｌｅｔｈｙｌ　ｅｓｔｅｒ　ａｓ　ａｎ　ｉｎｔｅｒｎａｌ　ｓｔａｎｄａｒｄ．Ｔｈｅ　ｍ／ｚ１４６
ａｎｄ　ｍ／ｚ１１８ｗｅｒｅ　ｓｅｌｅｃｔｅｄ　ａｓ　ｔｈｅ　ｐａｒｅｎｔ　ｉｏｎ　ａｎｄ　ｄａｕｇｈｔｅｒ　ｉｏｎ　ｆｏｒ　ｃｏｕｍａｒｉｎ，ｔｈｅ　ｍ／ｚ１６２ａｎｄ
ｍ／ｚ１３１ａｓ　ｔｈｅ　ｐａｒｅｎｔ　ｉｏｎ　ａｎｄ　ｄａｕｇｈｔｅｒ　ｉｏｎ　ｆｏｒ　ｓａｆｒｏｌｅ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ　ｍ／ｚ１０４ｗａｓ　ｓｅ－
ｌｅｃｔｅｄ　ａｓ　ｔｈｅ　ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎ　ｉｏｎ　ｆｏｒ　ｐｒｏｐａｎｏｉｃ　ａｃｉｄ，２－ｐｈｅｎｙｌｅｔｈｙｌ　ｅｓｔｅｒ　ａｓ　ａｎ　ｉｎｔｅｒｎａｌ　ｓｔａｎｄａｒｄ．
Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗ　ｔｈａｔ，ｗｈｅｎ　ｔｈｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｏｕｍａｒｉｎ　ａｎｄ　ｓａｆｒｏｌｅ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｒａｎｇｅｄ　ｏｆ
０．０５－５ｍｇ／Ｌ，ｔｈｅ　ｃｕｒｖｅｓ　ｓｈｏｗ　ｇｏｏｄ　ｌｉｎｅａｒ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ（ｒ＞０．９９５）．Ｔｈｅ　ｌｏｗｅｓｔ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ
ｌｉｍｉｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ（Ｓ／Ｎ＝３）ａｒｅ　０．００４ｍｇ／Ｌ，０．００２ｍｇ／Ｌ　ｆｏｒ　ｃｏｕｍａｒｉｎ　ａｎｄ　ｓａｆｒｏｌｅ，ｒｅ－
ｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ　ｒａｎｇｅｄ　ｆｒｏｍ　９０．０％ｔｏ　１３１．２％．Ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓ　ｓｉｍｐｌｅ，ｒａｐｉｄ，
ｈｉｇｈ　ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ，ａｎｄ　ｓｕｉｔａｂｌｅ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｏｕｍａｒｉｎ　ａｎｄ　ｓａｆｒｏｌｅ　ｉｎ　ｆｌａｖｏｒ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｃｏｕｍａｒｉｎ；ｓａｆｒｏｌｅ；ｆｌａｖｏｒ；ｇａｓ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ－ｔａｎｄｅｍ　ｍａｓｓ　ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ（ＧＣ－
ＭＳ／ＭＳ）
　　香豆素（ｃｏｕｍａｒｉｎ）又名邻羟基桂酸内酯和
１，２－苯并吡喃酮，是广泛存在于自然界中的一种
内酯类化合物，在芸香科和伞形科植物中存在最
多，其次存在于豆科、兰科、木樨科、茄科和菊科
植物，少数来自微生物［１］。毒理实验发现，香豆
素对小鼠胚胎有毒性，能引起痛觉消失，使中性
胆碱醋酶发生变化，对大鼠为可疑致肿瘤物。欧
盟规定，对于洗去型化妆品，香豆素含量不得超
过３０μｇ／ｇ，对于非洗去型化妆品，香豆素含量
不得高于１０μｇ／ｇ
［２］。黄樟素（ｓａｆｒｏｌｅ）又称黄樟
油素、黄樟脑，它主要存在于沉水樟、坚叶樟等樟
属植物的精油中［３］。黄樟素是合成洋茉莉醛、香
兰素、胡椒基丙酮及胡椒基丁醚等香料化学品的
一种重要原料，同时黄樟油中含黄樟素，是一种
天然香精，曾用于食品添加剂和化妆品中。但近
年来有研究表明，黄樟素能在肝组织中形成黄
樟素－脱氧核糖核酸（ＤＮＡ）加合物，对人体有一
定的毒副作用，易诱发基因突变和肝损伤，甚至
肝癌，是消化系统、血液系统、泌尿系统的强致癌
物［４］。因此，目前世界各国均禁止将黄樟素作为
香料和食品添加剂直接使用。在香精香料生产
过程中有可能由天然植物精油带入香豆素和黄
樟素成分，因此对香精香料进行质量控制是非常
必要的。
目前，关于香豆素和黄樟素的测定方法有液
相色谱［５－１０］、气相色谱和气相色谱－质谱联用
法［１１－１７］。串联质谱能够提供足够的化合物结构
信息，可用于定性分析及推测化合物结构［１８］，准
确可靠，特征母离子和子离子的一一对应性使之
排除干扰能力强，定量时本底值低，检测灵敏度
高，特别适用于分析背景干扰严重、定性困难、被
测化合物含量很低的样品，该技术在食品有机污
染物检测方面［１９－２３］已得到应用。对于香精香料
中的香豆素和黄樟素，国内外还未见利用气相色
谱－离子阱串联质谱（ＧＣ－ＭＳ／ＭＳ）法进行检测的
报道。本研究采用气相色谱－离子阱串联质谱法
检测香精香料中的香豆素和黄樟素，并对目前市
场上使用的各种香精香料样品进行分析检测。
１　试验部分
１．１　主要仪器与装置
ＣＰ　３８００－Ｓａｔｕｒｎ　２０００气相色谱－质谱联用
仪：美国Ｖａｒｉａｎ公司产品，配有液体化学源（ＣＩ，
色谱级乙腈为化学电离反应试剂）。
１．２　主要材料与试剂
香豆素、黄樟素和丙酸苯乙酯标准品（纯度
大于９９．９％）：迪马公司产品；乙醇（分析纯）：杭
州化学试剂有限公司产品；市售的各种香精香料
样品。
１．３　标准溶液配制
香豆素和黄樟素混合标准溶液的配制：准确
称取０．０１ｇ香豆素和０．０１ｇ黄樟素于１００ｍＬ
容量瓶中，用乙醇稀释定容至刻度，配制成１００
ｍｇ／Ｌ混合标准溶液，然后用乙醇溶液分别稀释
至１０ｍｇ／Ｌ，摇匀，置于４℃冰箱储存，备用。
丙酸苯乙酯内标溶液的配制：准确称取
０．０１ｇ丙酸苯乙酯于１００ｍＬ容量瓶中，用乙醇
稀释定容至刻度，配制成１００ｍｇ／Ｌ丙酸苯乙酯
内标溶液，然后用乙醇分别稀释至１０ｍｇ／Ｌ和１
ｍｇ／Ｌ，摇匀，置于４℃冰箱储存，备用。
不同浓度的香豆素和黄樟素混合标准溶液
的配制：用乙醇溶液将１０ｍｇ／Ｌ混合标准溶液
逐级稀释成以下浓度：５．０、２．０、１．０、０．５、０．１、
０．０５ｍｇ／Ｌ，每级标液中内标丙酸苯乙酯浓度均
为１ｍｇ／Ｌ。
１．４　样品前处理方法
准确称取０．２ｇ香精香料样品于５０ｍＬ锥
形瓶中，加入３ｇ无水 Ｎａ２ＳＯ４ 除水，然后加入
１０ｍＬ含内标（丙酸苯乙酯内标浓度为１ｍｇ／Ｌ）
的乙醇溶液，超声２０ｍｉｎ，静置；然后将锥形瓶
中的提取液全部转入１０ｍＬ容量瓶中，并用乙
醇清洗锥形瓶３次，清洗液也转入容量瓶中，定
容至刻度，超声均匀后静置过夜。取１μＬ上层
清液进行ＧＣ－ＭＳ／ＭＳ分析。
１．５　试验条件
１．５．１　色谱条件　毛细管色谱柱：ＤＢ－５ｌｏｗ
ｂｌｅｅｄ／ＭＳ，３０ｍ×０．２５ｍｍ×０．２５μｍ（Ｊ＆Ｗ
Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，ＣＡ，ＵＳＡ）；进样口温度：２５０ ℃；载
６６２ 质 谱 学 报　　　　　　　　　　　　　　　　　第３２卷　
气：Ｈｅ，纯度９９．９９９％，流速１．０ｍＬ／ｍｉｎ；程序
升温：柱温１００℃，保持１ｍｉｎ，以３℃／ｍｉｎ升至
１６０℃，然后以２０℃／ｍｉｎ升至２８０℃，保持５
ｍｉｎ；进样量１．０μＬ；不分流进样。
１．５．２　质谱条件　采用电子轰击方式进行离子
化，ＥＩ电离能量７０ｅＶ，离子阱温度１５０℃，歧管
温度４０℃，传输线温度２５０℃，溶剂延迟时间８
ｍｉｎ。香豆素母离子为ｍ／ｚ　１４６，子离子为ｍ／ｚ
１１８，碰撞电压（ＣＩＤ）０．５０Ｖ；黄樟素母离子为
ｍ／ｚ１６２，子离子为ｍ／ｚ１３１，碰撞电压０．７８Ｖ；
ＣＩＤ模式均采用共振模式；内标物丙酸苯乙酯选
择ｍ／ｚ１０４为定量离子。
２　结果与讨论
２．１　串联质谱条件的优化
吸取１μＬ浓度为５．０ｍｇ／Ｌ香豆素和黄樟
素混合标准溶液进样，在电子轰击电离方式下进
行全扫描，对二级质谱条件进行优化，得到香豆
素和黄樟素的ＥＩ－ＭＳ质谱图，分别示于图１和
图２。
图１　香豆素的ＥＩ－ＭＳ质谱图
Ｆｉｇ．１　ＥＩ－ＭＳ　ｓｐｅｃｔｒａ　ｏｆ　ｃｏｕｍａｒｉｎ
图２　黄樟素的ＥＩ－ＭＳ质谱图
Ｆｉｇ．２　ＥＩ－ＭＳ　ｓｐｅｃｔｒａ　ｏｆ　ｓａｆｒｏｌｅ
　　ＭＳ／ＭＳ分析中对子离子谱影响最大的是
碰撞电压，如果碰撞电压太高，母离子完全碎裂；
如果碰撞电压太低，母离子没有碎裂或子离子碎
片过少，化合物的结构信息不足。试验对选定的
母离子逐渐加大碰撞电压，比较不同碰撞电压的
ＭＳ／ＭＳ图谱，选择最佳的碰撞电压和其他分析
条件，以便得到尽可能丰富的结构信息。选择合
适的母离子和子离子是保证目标化合物获得最
佳灵敏度的重要因素，通常从目标化合物的一级
质谱中选择响应较大的特征离子作为母离子，可
得到更高的灵敏度，所以本研究以香豆素分子离
子ｍ／ｚ１４６和黄樟素分子离子ｍ／ｚ　１６２作为母
离子进行ＡＭＤ（Ａｕｔｏｍａｔｅｄ　Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｄｅｖｅｌｏｐ－
ｍｅｎｔ），确定合适的碰撞电压，实验结果列于表１
和表２。
表１　碰撞电压对香豆素 ＭＳ／ＭＳ谱图的影响
Ｔａｂｌｅ　１　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｖａｌｕｅ　ｏｆ　ＣＩＤ
ｏｎ　ＭＳ／ＭＳ　ｓｐｅｃｔｒａ　ｏｆ　ｃｏｕｍａｒｉｎ
碰撞电压／Ｖ
母离子／（ｍ／ｚ）和
相对丰度／％
子离子／（ｍ／ｚ）和
相对丰度／％
０．２０　 １４６（１００） １１８（２３）
０．３０　 １４６（１００） １１８（２７）
０．４０　 １４６（２５） １１８（１００）
０．４６　 １４６（１０） １１８（１００）
０．５０　 １４６（４） １１８（１００）
０．６０　 １４６（０） １１８（１００）
０．８０　 １４６（０） １１８（１００）
１．００　 １４６（０） １１８（１００）
　　注：带下划线为定量子离子
表２　碰撞电压对黄樟素 ＭＳ／ＭＳ谱图的影响
Ｔａｂｌｅ　２　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｖａｌｕｅ　ｏｆ　ＣＩＤ
ｏｎ　ＭＳ／ＭＳ　ｓｐｅｃｔｒａ　ｏｆ　ｓａｆｒｏｌｅ
碰撞电压／Ｖ
母离子／（ｍ／ｚ）和
相对丰度／％
子离子／（ｍ／ｚ）和
相对丰度／％
０．２０　 １６２（１００） １３１（４），１６１（２７）
０．４０　 １６２（１００）
１３１（９１），１３２（９７），
１６１（７０），１０４（３６）
０．６０　 １６２（３４） １３１（１００），１３２（６２），１０４（５２）
０．７２　 １６２（１０） １３１（１００），１３２（４７），１０４（５３）
０．７８　 １６２（８） １３１（１００），１３２（３５），１０４（５４）
０．８０　 １６２（０） １３１（１００），１３２（３２），１０４（６０）
１．００　 １６２（０） １３１（１００），１３２（２５），１０４（５８）
　　注：带下划线为定量子离子
７６２　第５期　　　　　　李长于等：气相色谱－串联质谱法测定香精香料中的香豆素和黄樟素
　　由表１可知，当碰撞电压小于０．４０Ｖ时，香
豆素母离子有少量碎裂；当碰撞电压逐渐上升，
母离子的丰度逐渐下降，子离子的丰度上升；当
碰撞电压为０．４６～０．５０Ｖ时，母离子已大部分
碎裂；直到碰撞电压为０．６０Ｖ时，母离子完全碎
裂，ｍ／ｚ１４６母离子消失。因此本试验选择香豆
素最佳碰撞电压为０．５０Ｖ，香豆素的 ＥＩ－ＭＳ／
ＭＳ分析结果示于图３。同理，由表２可知，当碰
撞电压小于０．６０Ｖ时，黄樟素母离子有少量碎
裂；当碰撞电压逐渐上升，母离子的丰度逐渐下
降，子离子的丰度上升；当碰撞电压为０．７２～
０．７８Ｖ时，母离子已大部分碎裂；直到碰撞电压
为０．８０Ｖ时，母离子完全碎裂，ｍ／ｚ１６２母离子
消失。因此本试验选择黄樟素最佳的碰撞电压
为０．７８Ｖ，黄樟素的ＥＩ－ＭＳ／ＭＳ分析结果示于
图４。
图３　香豆素的ＥＩ－ＭＳ／ＭＳ质谱图
Ｆｉｇ．３　ＥＩ－ＭＳ／ＭＳ　ｓｐｅｃｔｒａ　ｏｆ　ｃｏｕｍａｒｉｎ
图４　黄樟素的ＥＩ－ＭＳ／ＭＳ质谱图
Ｆｉｇ．４　ＥＩ－ＭＳ／ＭＳ　ｓｐｅｃｔｒａ　ｏｆ　ｓａｆｒｏｌｅ
２．２　标准曲线的绘制
根据香豆素和黄樟素的二级质谱图，选取香
豆素最高峰强度子离子ｍ／ｚ　１１８、黄樟素最高峰
强度子离子ｍ／ｚ１３１作为定量离子；内标丙酸苯
乙酯ｍ／ｚ１０４为定量离子。根据标准溶液中香
豆素、黄樟素分别与丙酸苯乙酯内标峰面积的比
值（ｙ）和浓度的比值（ｘ）作图，示于图５和图６。
结果显示，香豆素和黄樟素的标准溶液在０．０５～
５ｍｇ／Ｌ范围内，所得峰面积比与浓度比的线性
关系均较良好，线性回归方程和相关系数分别
为：ｙ＝０．４９２　１ｘ＋０．０４０　１，ｒ＝０．９９８和ｙ＝
０．３８７　７ｘ＋０．０１１　５，ｒ＝０．９９９。
图５　香豆素的标准曲线
Ｆｉｇ．５　Ｓｔａｎｄａｒｄ　ｃｕｒｖｅ　ｏｆ　ｃｏｕｍａｒｉｎ
图６　黄樟素的标准曲线
Ｆｉｇ．６　Ｓｔａｎｄａｒｄ　ｃｕｒｖｅ　ｏｆ　ｓａｆｒｏｌｅ
２．３　精密度试验及检测限
将浓度为０．１ｍｇ／Ｌ香豆素和黄樟素混合
标准溶液重复进样７次，经测定计算得到香豆素
和黄樟素的 ＲＳＤ值分别为３．１８％和２．８４％。
检测限（ＬＯＤ）的计算是根据进样０．０５ｍｇ／Ｌ混
合标准溶液，在信噪比（Ｓ／Ｎ）为３的条件下，计
算得到香豆素和黄樟素的检测限分别为０．００４、
０．００２ｍｇ／Ｌ。
２．４　回收率试验结果
采用标准加入法进行回收率试验，对方法的
８６２ 质 谱 学 报　　　　　　　　　　　　　　　　　第３２卷　
准确度进行考察。在空白香精香料样品中，按
高、中、低３个水平分别加入１．０，０．５，０．２ｍＬ　１０
ｍｇ／Ｌ香豆素和黄樟素的混合标准溶液，每个浓
度水平进行５次平行试验，结果列于表３。
表３　回收率试验结果（ｎ＝５）
Ｔａｂｌｅ　３　Ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｃｏｕｍａｒｉｎ　ａｎｄ　ｓａｆｒｏｌｅ　ａｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｓｐｉｋｅｄ　ａｍｏｕｎｔｓ（ｎ＝５）
待测物 标准加入量／μｇ 测定值／μｇ 平均值／μｇ 平均回收率／％ ＲＳＤ／％
２．０　 １．９５　 ２．０４　 ２．４１　 ２．２０　 ２．３４　 ２．１９　 １０９．５　 ８．８８
香豆素 ５．０　 ５．８４　 ６．３９　 ６．４２　 ６．６５　 ７．０２　 ６．４６　 １２９．２　 ６．６６
１０．０　 １３．８１　 １３．１４　 １２．３１　 １１．８１　 １４．５３　 １３．１２　 １３１．２　 ８．３８
２．０　 １．７６　 １．７９　 ２．０１　 １．６３　 １．７９　 １．８０　 ９０．０　 ７．６１
黄樟素 ５．０　 ４．４３　 ４．３９　 ４．８５　 ４．９６　 ４．３４　 ４．５９　 ９１．８　 ６．２８
１０．０　 ９．７９　 ９．４０　 ９．３７　 ９．４７　 ９．８８　 ９．５８　 ９５．８　 ２．４６
　　计算结果显示，香豆素和黄樟素在不同添加
量样品中的平均回收率分别为 １０９．５％ ～
１３１．２％和９０．０％～９５．８％。
２．５　实际样品检测
按试验方法对市售的１００多个香精香料样
品进行分析，大部分样品中均未检出香豆素和黄
樟素，只有极少数样品中检出香豆素或黄樟素，
其中５种市售香精香料样品的检测结果列于表
４。根据香豆素和黄樟素的色谱保留时间以及其
特征质谱图，对检出香豆素或黄樟素的样品进行
了定性确认，选择香豆素特征离子 ｍ／ｚ　１１８、
ｍ／ｚ１４６，黄樟素特征离子ｍ／ｚ　１３１、ｍ／ｚ　１０４为
定性离子，样品的色谱保留时间和质谱碎片离子
必须与标准品完全吻合。
表４　采用本方法测得的香精香料
中香豆素和黄樟素的含量
Ｔａｂｌｅ　４　Ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ｃｏｕｍａｒｉｎ
ａｎｄ　ｓａｆｒｏｌｅ　ｉｎ　ｆｌａｖｏｒ　ａｎａｌｙｚｅｄ　ｂｙ　ｔｈｉｓ　ｍｅｔｈｏｄ
样品 香豆素含量／（μｇ／ｇ） 黄樟素含量／（μｇ／ｇ）
样品１ ＮＤ　 ＮＤ
样品２　 ０．０５ ＮＤ
样品３　 ４．２０ ＮＤ
样品４ ＮＤ　 ０．１６
样品５　 ５．３３ ＮＤ
　　注：ＮＤ表示未检出
３　结论
本研究建立了香精香料样品中香豆素和黄
樟素的气相色谱－离子阱串联质谱分析方法。样
品只需乙醇超声处理，就可以直接进样，前处理
步骤简单，结合串联质谱排除干扰能力强，定量
时本底值低的特性，该方法具有快速简便、检测
灵敏度高，准确可靠，重现好，适合于香精香料或
食品添加剂等复杂样品中的香豆素和黄樟素的
检测，同时也为其他复杂样品中香豆素和黄樟素
含量的测定提供了可借鉴的方法。
参考文献：
［１］　王　华，鲁小梅，姚　虎，等．香豆素及其衍生物的
应用研究进展［Ｊ］．化工时刊，２００９，２３（８）：４０－４３．
［２］　李　洁，王　超，武　婷，等．高效液相色谱法测定
化妆品中三种香豆素的含量［Ｊ］．日用化学工业，
２００６，３６（４）：２５７－２５９．
［３］　梅家庆，孙凌峰．中国的黄樟素植物资源［Ｊ］．香
料香精化妆品，２００８，（５）：３５－３９．
［４］　章　瑜，陈跃进．黄樟油的毒性研究［Ｊ］．苏州医
学院学报，１９９５，１５（２）：２４１－２４２．
［５］　陈　捷，胡国昌．高效液相色谱法测定食品中的香
豆素［Ｊ］．色谱，１９９９，１７（２）：２０４－２０５．
［６］　蒋小华，谢运昌，黄永林．ＲＰ－ＨＰＬＣ测定红丝线
中香豆素的含量［Ｊ］．广西植物，２００６，２６（４）：
４５１－４５２．
［７］　ＭＡＲＴＩＮＯ　Ｅ，ＲＡＭＡＩＯＬＡ　Ｅ，ＵＲＢＡＮＯ　Ｍ，ｅｔ　ａｌ．
Ｍｉｃｒｏｗａｖｅ－ａｓｓｉｓｔｅｄ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｏｕｍａｒｉｎ　ａｎｄ　ｒｅ－
ｌａｔｅｄ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｆｒｏｍ　Ｍｅｌｉｌｏｔｕｓ　ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ（Ｌ．）
Ｐａｌａｓ　ａｓ　ａｎ　ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ　ｔｏ　Ｓｏｘｈｌｅｔ　ａｎｄ　ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ－
ａｓｓｉｓｔｅｄ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ
Ａ，２００６，１　１２５（２）：１４７－１５１．
［８］　ＤＥ　ＪＡＧＥＲ　Ｌ　Ｓ，ＰＥＲＦＥＴＴＩ　Ｇ　Ａ，ＤＩＡＣＨＥＮＫＯ
Ｇ　Ｗ．Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｏｕｍａｒｉｎ，ｖａｎｉｌｉｎ，ａｎｄ
ｅｔｈｙｌ　ｖａｎｉｌｉｎ　ｉｎ　ｖａｎｉｌａ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｐｒｏｄｕｃｔｓ：ｌｉｑｕｉｄ
ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　ｍａｓｓ　ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ　ｍｅｔｈｏｄ　ｄｅｖｅｌ－
ｏｐｍｅｎｔ　ａｎｄ　ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ　ｓｔｕｄｉｅｓ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｈｒｏ－
９６２　第５期　　　　　　李长于等：气相色谱－串联质谱法测定香精香料中的香豆素和黄樟素
ｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　Ａ，２００７，１　１４５（１／２）：８３－８８．
［９］　ＲＡＴＥＲＳ　Ｍ，ＭＡＴＩＳＳＥＫ　Ｒ．Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｃｏｕｍａ－
ｒｉｎ　ｉｎ　ｖａｒｉｏｕｓ　ｆｏｏｄｓ　ｕｓｉｎｇ　ｌｉｑｕｉｄ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ
ｗｉｔｈ　ｔａｎｄｅｍ　ｍａｓｓ　ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｉｃ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｅｕｒ
Ｆｏｏｄ　Ｒｅｓ　Ｔｅｃｈｎｏｌ，２００８，２２７（２）：６３７－６４２．
［１０］　ＳＩＡＮＯ　Ｆ，ＧＨＩＺＺＯＮＩ　Ｃ，ＧＩＯＮＦＲＩＤＤＯ　Ｆ，ｅｔ　ａｌ．
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｅｓｔｒａｇｏｌｅ，ｓａｆｒｏｌｅ　ａｎｄ　ｅｕｇｅｎｏｌ
ｍｅｔｈｙｌ　ｅｔｈｅｒ　ｉｎ　ｆｏｏｄ　ｐｒｏｄｕｃｔｓ［Ｊ］．Ｆｏｏｄ　Ｃｈｅｍｉｓ－
ｔｒｙ，２００３，８１（３）：４６９－４７５．
［１１］　ＳＴＡＮＦＩＬＬ　Ｓ　Ｂ，ＡＳＨＬＥＹ　Ｄ　Ｌ．Ｓｏｌｉｄ　ｐｈａｓｅ　ｍｉ－
ｃｒｏｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｌｋｅｎｙｌｂｅｎｚｅｎｅｓ　ａｎｄ　ｏｔｈｅｒ　ｆｌａｖｏｒ－
ｒｅｌａｔｅｄ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｆｒｏｍ　ｔｏｂａｃｃｏ　ｆｏｒ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｂｙ
ｓｅｌｅｃｔｅｄ　ｉｏｎ　ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ　ｇａｓ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ－ｍａｓｓ
ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　Ａ，
１９９９，８５８（１）：７９－８９．
［１２］　ＰＯＬＺＩＮ　Ｇ　Ｍ，ＳＴＡＮＦＩＬＬ　Ｓ　Ｂ，ＢＲＯＷＮ　Ｃ　Ｒ，
ｅｔ　ａｌ．Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｅｕｇｅｎｏｌ，ａｎｅｔｈｏｌｅ，ａｎｄ
ｃｏｕｍａｒｉｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｍａｉｎｓｔｒｅａｍ　ｃｉｇａｒｅｔｔｅ　ｓｍｏｋｅ　ｏｆ
Ｉｎｄｏｎｅｓｉａｎ　ｃｌｏｖｅ　ｃｉｇａｒｅｔｔｅｓ［Ｊ］．Ｆｏｏｄ　ａｎｄ　Ｃｈｅｍｉ－
ｃａｌ　Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ，２００７，４５：１　９４８－１　９５３．
［１３］　ＤＥ　ＪＡＧＥＲ　Ｌ　Ｓ，ＰＥＲＦＥＴＴＩ　Ｇ　Ａ，ＤＩＡＣＨＥＮ－
ＫＯ　Ｇ　Ｗ．Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｏｆ　ｈｅａｄｓｐａｃｅ－ＳＰＭＥ－ＧＣ－
ＭＳ　ａｎｄ　ＬＣ－ＭＳ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｑｕａｎｔｉｆｉｃａ－
ｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｏｕｍａｒｉｎ，ｖａｎｉｌｉｎ，ａｎｄ　ｅｔｈｙｌ　ｖａｎｉｌｉｎ　ｉｎ
ｖａｎｉｌａ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｐｒｏｄｕｃｔｓ［Ｊ］．Ｆｏｏｄ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，
２００８，１０７（４）：１　７０１－１　７０９．
［１４］　王　星，蔡天培，王　超，等．化妆品中黄樟素和
６－甲基香豆素的气相色谱－质谱测定法［Ｊ］．环境
与健康杂志，２００７，２４（５）：３５８－３５９．
［１５］　吴惠勤，朱志鑫，黄晓兰，等．气相色谱－质谱联用
法测定烟用香精中黄樟素及香豆素［Ｊ］．理化检
验－化学分册，２０１０，４６（６）：６０７－６０９．
［１６］　吴　婷，金其璋．不同食品中侧柏酮、龙蒿脑、黄
樟素和甲基丁香酚的含量测定［Ｊ］．中国食品添
加剂，２０１０，（１）：２２３－２２８．
［１７］　赵晓亚，林雁飞，胡小钟，等．气相色谱－质谱法同
时测定化妆品中５种香豆素类化合物［Ｊ］．分析
试验室，２０１０，２９（３）：７６－７９．
［１８］　李祖光，高志祥．２－氨基－３－硝基吡啶和２－氨基－５－
硝基吡啶的ＥＩ／ＭＳ／ＭＳ分析［Ｊ］．分析试验室，
２００４，２３（４）：１２－１５．
［１９］　佟　玲，李重九．含硫蔬菜中５０种农药多残留的
气相色谱－串联质谱检测技术研究［Ｊ］．分析测试
学报，２００８，２７（９）：９３０－９３５．
［２０］　薛　平，杜利君，陈　勇，等．菌类食品中多种有
机磷农药的气相色谱－离子阱二级质谱联用法测
定［Ｊ］．分析测试学报，２００９，２８（１０）：１　１２１－
１　１２６．
［２１］　邓晓军，郭德华，李　波，等．葡萄酒中痕量木塞
污染物的顶空固相微萃取－气相色谱串联质谱法
检测［Ｊ］．分析测试学报，２００８，２７（１２）：１　３７５－
１　３７８．
［２２］　张朋杰，张宪臣，张　静，等．超高效液相色谱－串
联质谱法测定食用油中的叔丁基对苯二酚［Ｊ］．
食品科学，２００９，３０（６）：１４３－１４５．
［２３］　高文惠，艾连峰．高效液相色谱－串联质谱法测定
进出口食品中十三吗啉残留［Ｊ］．食品科学，
２００９，３０（２２）：
檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭
３３１－３３４．
（上接第２６４页）
［１１］　ＢＥＡＲＤＳＬＥＹ　Ｒ　Ｌ，ＲＥＩＬＬＹ　Ｊ　Ｐ．Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ
ｇｕａｎｉｄｉｎａｔｉｏｎ　ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ　ｆｏｒ　ＭＡＬＤＩ　ｍａｓｓ　ｍａｐ－
ｐｉｎｇ［Ｊ］．Ａｎａｌ　Ｃｈｅｍ，２００２，７４（８）：１　８８４－１　８９０．
［１２］　ＫＥＯＵＧＨ　Ｔ，ＬＡＣＥＹ　Ｍ　Ｐ，ＹＯＵＮＧＱＵＩＳＴ　Ｒ　Ｓ．
Ｄｅｒｉｖａｔｉｚａｔｉｏｎ　ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ　ｔｏ　ｆａｃｉｌｉｔａｔｅ　ｄｅ　ｎｏｖｏ　ｓｅ－
ｑｕｅｎｃｉｎｇ　ｏｆ　ｌｙｓｉｎｅ－ｔｅｒｍｉｎａｔｅｄ　ｔｒｙｐｔｉｃ　ｐｅｐｔｉｄｅｓ　ｕ－
ｓｉｎｇ　ｐｏｓｔｓｏｕｒｃｅ　ｄｅｃａｙ　ｍａｔｒｉｘ－ａｓｓｉｓｔｅｄ　ｌａｓｅｒ　ｄｅ－
ｓｏｒｐｔｉｏｎ／ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ　ｍａｓｓ　ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ［Ｊ］．Ｒａｐｉｄ
Ｃｏｍｍｕｎ　Ｍａｓｓ　Ｓｐｅｃｔｒｏｍ，２０００，１４（２４）：２　３４８－
２　３５６．
［１３］　ＣＯＣＫＲＩＬＬ　Ｓ　Ｌ，ＦＯＳＴＥＲ　Ｋ　Ｌ，ＷＩＬＤＳＭＩＴＨ　Ｊ，
ｅｔ　ａｌ．Ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ　ｍｉｃｒｏ－ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ａｎｄ　ｇｕａｎｉｄｉｎａｔｉｏｎ
ｏｆ　ｐｅｐｔｉｄｅｓ　ｄｉｒｅｃｔｌｙ　ｆｒｏｍ　ＭＡＬＤＩ　ｔａｒｇｅｔ　ｓｐｏｔｓ
［Ｊ］．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，２００５，３８（２）：３０１－３０４．
［１４］　ＲＯＤＲＩＧＵＥＺ　Ｆ，ＲＯＺＡＳ　Ｉ，ＯＲＴＥＧＡ　Ｊ　Ｅ，ｅｔ　ａｌ．
Ｇｕａｎｉｄｉｎｅ　ａｎｄ　２－Ａｍｉｎｏｉｍｉｄａｚｏｌｉｎｅ　Ａｒｏｍａｔｉｃ　Ｄｅ－
ｒｉｖａｔｉｖｅｓα２－ａｄｒｅｎｏｃｅｐｔｏｒ　ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ，１：ｔｏｗａｒｄ
ｎｅｗ　ａｎｔｉｄｅｐｒｅｓｓａｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｈｅｔｅｒｏａｔｏｍｉｃ　ｌｉｎｋｅｒｓ
［Ｊ］．Ｊ　Ｍｅｄ　Ｃｈｅｍ，２００７，５０（１８）：４　５１６－４　５２７．
０７２ 质 谱 学 报　　　　　　　　　　　　　　　　　第３２卷