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碎米花杜鹃原花青素A-1对小鼠免疫细胞的影响



全 文 :drocytes were isolated from articular cartilage and cultured in medium containing α-MEM. The stock solution of Ica was added into the neutral
collagen (Col)solution and the final concentrations of Ica was 1 × 10-5M. The second passage of chondrocytes was mixed gently with the pre-
pared neutral Ica /Col solution,and then the cells-Ica /Col mixture was then injected into the sealed boxes and formed hydrogel constructs.
These sealed boxes were cultured in vitro for 1 week,implanted into subcutaneous tissue of rabbit's back and taken out at predetermined time
intervals. The effect of Ica on chondrocyte morphology and viability in vivo was observed by confocal laser scanning microscope. The secretion
of Col II and glycosaminoglycans (GAG)were analyzed by biomedical assay and enzyme-linked immunosorbent (ELISA)assay,respective-
ly. The expressions of cartilage-specified genes were also investigated by real time polymerase chain reaction (Real time PCR). Results:The
results found that the cell-Ica /Col hydrogel constructs were more similar in appearance to cartilage tissue compared with cell-Col hydrogel con-
structs. The presence of Ica in Ica /Col hydrogel constructs could better maintain chondrocyte phenotype and viability. Moreover,the Ica
might promote the secretion of ECM (GAG and Col II)and enhance the expressions of cartilage-specified genes (Aggrecan,ColⅡ and Sox9)
of chondrocytes. Conclusion:Ica could maintain the phenotype of tissue engineered chondrocytes in vivo and promote the secretion of ECM
and the expressions of cartilage-specified genes of chondrocytes in vivo. Thus,Ica could be a potential promoting compound for cartilage tis-
sue engineering.
Key words icariin;collagen;hydrogel;cartilage tissue engineering
碎米花杜鹃原花青素 A-1 对小鼠免疫细胞的影响*
刘英姿1,罗有梁2,周铁忠1
(1 辽宁医学院畜牧兽医学院,锦州 121001;2沈阳市合众饲料生产有限公司,沈阳 110000)
摘 要 目的:研究碎米花杜鹃提取物乙酸乙酯部分分离得到的化合物原花青素 A-1(Proanthocyanidin A-1,简称 PAA-1)的免
疫调节活性。方法:采用 MTT法,通过 PAA-1 体外刺激,研究了其对小鼠脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞的增殖、NK 细胞杀伤活性及
对巨噬细胞吞噬活性和释放效应分子 NO的影响。结果:PAA-1 在浓度为 5 ~ 100 mg /L时能刺激脾细胞增殖,增加腹腔巨噬细胞能
量代谢能力,增强巨噬细胞对中性红的吞噬能力及 NO的分泌量,激活自然杀伤细胞(NK细胞)对 YAC-1 细胞的杀伤能力。结论:
PAA-1 能增强小鼠的免疫功能。
关键词 原花青素 A-1;脾淋巴细胞;巨噬细胞;NK细胞;Balb /c小鼠
本实验对从碎米花杜鹃对提取物乙酸乙酯部分分离得到
的化合物原花青素 A-1(Proanthocyanidin A-1)的免疫调节活性
进行了测定。免疫活性细胞通常包括 T淋巴细胞、B淋巴细胞、
NK细胞和巨噬细胞,T、B淋巴细胞在分别介导细胞免疫和体液
免疫,在机体的特异性免疫反应中发挥着重要作用;NK 细胞和
巨噬细胞在机体抵抗感染和防御中担任重要角色,发挥非特异
性免疫作用。本实验采用 MTT法,通过研究 PAA-1 体外刺激对
Balb /c小鼠三种主要免疫细胞脾淋巴细胞、巨噬细胞增殖及吞
噬能力、分泌一氧化氮(NO)和 NK 细胞杀伤活性的影响,来检
测其调节免疫功能的活性。
1 材料与方法
1. 1 试验药物 干燥的碎米花杜鹃 Rhododendron spiciferum叶
10kg经粉碎后,用 70%的丙酮水泡样 3 次,减压回收,水相依次
用石油醚,乙酸乙酯,正丁醇萃取,减压蒸馏(40°)回收乙酸乙
酯萃取部分(600g)。乙酸乙酯部分用 90%甲醇水经 MCI 脱除
色素,得浸膏 500g。取 500g浸膏,80:100 目硅胶 2000g上样,以
氯仿:丙酮(1:0,9:1,8:2,7:3,6:4)梯度洗脱,在氯仿:丙酮 7:3
段反复运用各种色谱技术(硅胶柱色谱,凝胶柱色谱,ods 反相
硅胶)分离出化合物 Proanthocyanidin A-1,纯度 98%以上,其化
学结构见图 1。
图 1 原花青素 A-1(PAA-1)的结构
1. 2 动物 Balb /c小鼠,购于吉林大学基础医学院实验动物
中心,SPF级,雄性♂,体重(20 ± 2)g,6-8 周龄,合格证号:SCXK
(吉 2003-0001)。
1. 3 试剂 Con A(Type IV)、LPS 、MTT、抗 CD3 单克隆抗体
(anti-CD3 monoclonal antibody)、台盼蓝(Trypan Blue)、L-G、
Hepes:Sigma产品,RPMI-1640 培养基:Gibco 产品,0. 1%中性
红,格里斯氏试剂(Griess reagent) ,2-ME,犊牛血清,Tris-NH4Cl。
54中药药理与临床 2012;28(2)
* 课题来源:2010 年辽宁省教育厅科研项目《碎米花杜鹃提取物花青素 A-1 免疫活性及其机制的研究》项目编号 L2010257
DOI:10.13412/j.cnki.zyyl.2012.02.023
1. 4 仪器 酶标仪:奥地利 TECAN-GENious;CO2 培养箱:美
国 Revcopo3 及德国 HERA D-63450;倒置显微镜:日本 OLYM-
PUS-CK2;单量程十万分之一电子天秤:上海 AB204-N;超净工
作台:上海 SB-JB-1B型;低速离心机:北京 LD2-A;96 孔细胞培
养板:美国 Costar;细胞培养瓶:丹麦 Nunc。
1. 5 方法
1. 5. 1 MTT法检测 PAA-1 对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响方法
无菌取 Balb /c小鼠脾于无血清的 RPMI-1640 培养液中吹出
细胞。收集细胞悬液用 Tris-NH4Cl 去除红细胞,用 RPMI-1640
完全培养液重悬细胞沉淀,Trypan Blue染色计数活细胞 95%以
上,调整细胞密度为 5 × 109 个 /升,制成脾细胞悬液。取 96 孔
细胞培养板,选 4 个孔分别加入 anti-CD3mAb( (5mg /L)100μl,
4℃冰箱内过夜,取出将 4 个孔均用无菌的 PBS冲洗 3 次即包被
好,备用。实验共分为 6 个组,分别为空白对照组、阴性对照组、
单药组、混合给药组 1、2、3。将按上述方法制备的脾淋巴细胞
悬液加入上述包被好的 96 孔细胞培养板中,除空白对照组外,
每孔 100μl。单药组(PAA-1 组)每孔再分别加入含不同浓度
PAA-1 的,使 PAA-1 的终浓度分别为 5、25、50、100mg /L;混合给
药组 1(PAA-1 + Con A组)每孔分别加入 100μl不同浓度 PAA-1
(终浓度分别为 5、25、50、100mg /L)和 Con A(终浓度为 5 mg /
L) ;混合给药组 2(PAA-1 + LPS组)每孔分别加入 100μl不同浓
度 PAA-1 和 LPS(终浓度为 20 mg /L)的混合液;混合给药组 3
(anti-CD3 组)与阴性对照组每孔再加 100μlRPMI-1640 完全培
养液;空白对照组每空只加 200μl RPMI-1640 完全培养液,每组
均设 4 个复孔。上述细胞和药物均加完,标记好后,将 96 孔细
胞培养板置 37℃、5%CO2 培养箱中连续培养 44 小时;取出培养
板,每孔加入 20μl 配置好的 MTT 液,继续培养 4 小时;取出
1800 × g离心 10 分钟弃上清,每孔加入 150μl DMSO终止反应,
振荡 10 分钟至形成的紫色结晶完全溶解;用酶标仪于 570nm
处测定吸光度 A值,结果吸光度 A 值的高低,来反映小鼠脾淋
巴细胞增殖的情况。
1. 5. 2 MTT法检测 PAA-1 对小鼠 PMΦ 能量代谢水平的影响
方法 Balb /c小鼠脱颈处死,撕开皮肤暴露腹膜,无菌注射器吸
取无血清 RPMI-1640 培养液充分冲洗腹腔。收集细胞悬液离
心弃上清,RPMI-1640 完全培养液重悬,Trypan Blue染色计数活
细胞 95%以上,调整细胞密度为 5 × 109 个 /升。将细胞移入 96
孔细胞培养板,每孔 100μl,CO2 培养箱中培养 2 小时;洗板 1
次弃上清,每孔再加入 100μl的 RPMI-1640 完全培养液,培养板
孔内贴壁细胞即为纯化后的小鼠 PMΦ。实验共分 3 个组,即空
白对照组、阴性组、阳性组。空白对照组每空加入 200μl RPMI-
1640 完全培养液;阴性组每孔分别加入纯化后的 PMΦ100μl 和
100μl RPMI-1640 完全培养液;阳性组每孔分别加入纯化后的
PMΦ100μl和 100μl 含不同浓度 PAA-1 的 RP MI-1640 完全培
养液,使 PAA-1 终浓度分别为 5、25、50、100mg /L,每组均设 4 个
复孔。上述细胞置 37 ℃、5% CO2 培养箱中培养 20 小时;取出
细胞培养板,每孔加入 20μl 配制好的 MTT,继续培养 4 小时;取
出后于 1800 × g离心 10 分钟弃上清,每孔加入 150μl DMSO 终
止反应,振荡 10 分钟至形成的紫色结晶完全溶解;用酶标仪于
570nm处测定吸光度 A值,结果以 A570 值表示 PMΦ 能量代谢
水平的高低。
1. 5. 3 中性红吞噬实验检测药物对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功
能的影响方法 按 1. 5. 2. 2 分组给药法培养 24 小时的 PMΦ,
取出细胞培养板于 1800 × g 离心 10 分钟弃上清,每孔加入
100μ 0. 1%中性红生理盐水液,37 ℃、5% CO2 培养箱中继续培
养 30 分钟;取出于 1800 × g 离心 10 分钟弃上清,每孔加入
200μl PBS冲洗,弃上清,重复操作 2 次;每孔再 100μl加入细胞
溶解液(乙酸:无水乙醇 = 50:50) ,室温静置过夜待细胞溶解;
翌日用酶标仪于 540 nm波长处测量吸光度 A值,以 A540 值表
示小鼠 PMΦ对中性红的吞噬能力。
1. 5. 4 Griess法测定巨噬细胞分泌 NO 量方法 NO 易氧化,
半衰期短它能迅速分解成亚硝酸盐(NO2
-)和硝酸盐(NO3
-) ,通
过间接间接测定 NO2
-含量,推测 NO的变化。
精密称取 NaNO2 6. 9mg,加入无色的 RPMI-1640 定容至
100ml,配制成 1 mmol /L,分别精密吸取 1 mmol /L NaNO2 液 0.
5、1. 0、1. 5、2. 0ml,加无色的 RPMI-1640 至 100ml 分别配制成
50、100、150、200mmol /L;取 50、100、150、200mmol /L NaNO2 液各
100μ1,加入 Griess试剂 100μ1,室温放置 10 分钟,在 490nm 处
测定各孔吸光度值;以浓度值(C)为横坐标、相应的吸光度值
(A)为纵坐标绘制成 NO 标准曲线,结果为:C(nmol /L)= 210.
2293A + 1. 0240 r = 0. 9999。按 1. 5. 2 分组给药法培养 24 小时
的 PMΦ 继续培养 96 小时后每孔取 100μl 的培养液上清和
100μl的 Griess试剂充分混合,静置 10 分钟,用酶标仪于 490nm
波长处测定各孔吸光度 A值,从 NO标准曲线上找出相应的 NO
浓度值。
1. 5. 5 检测 NK细胞杀伤活性方法 取按 1. 5. 1 方法制备的
小鼠脾细胞悬液,放于无菌皮氏培养皿中,置 37℃、5% CO2 培
养箱中培养 2 小时,去上清;RPMI-1640 重悬吸附细胞,调整细
胞浓度为 5 × 109 个 /L 的细胞悬液,加入 96 孔细胞培养板,每
孔 100μl,每孔再加入 100μl 含不同浓度 PAA-1 的 RPMI-1640
完全培养液,使 PAA-1 的终浓度分别为 0、5、25、50、100mg /L,
37℃、5% CO2 培养箱中培养 24 小时。收集培养 24 小时状态良
好、呈对数生长期的 Yac-1 细胞用 RPMI-1640 完全培养液离心、
洗涤 2 次后,再用含 0. 5% BSA 的 RPMI-1640 完全培养液洗 1
次,然后用含 0. 5% BSA RPMI-1640 完全培养液重悬,调整细胞
浓度至 1 × 108 个 /ml,此悬液即为检测 NK 细胞杀伤活性的靶
细胞悬液。试验共分 3 组,分别为实验组、效应细胞对照组、靶
细胞对照组。实验组加效应细胞和靶细胞培养液各 100μl,调
整效靶比(E:T)= 50:1。;效应细胞对照组加效应细胞、RPMI-
1640 完全培养液各 100μl;靶细胞对照组加靶细胞、培养液各
100μl,每组均设 4 个复孔。37℃、5% CO2 培养箱中培养 20 小
时后,取出培养板,每孔加入 20μl配置好的 MTT液,继续培养 4
小时;取出 1800 × g离心 10 分钟弃上清,每孔加入 150μl DMSO
终止反应,振荡 10 分钟至形成的紫色结晶完全溶解;用酶标仪
于 570nm处测定吸光度 A值。结果以 NK 细胞杀伤率(cytotox-
icity)表示:NK 细胞杀伤率(%)=[(实验孔(效 +靶) -效应
细胞对照孔 )∕靶细胞对照孔 -效应细胞对照孔]× 100% 。
2 结果
2. 1 PAA-1 对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响 结果表明,PAA-1
单药组,在低浓度(5mg /L)时对小鼠脾淋巴细胞增殖无明显增
强作用;在 25、25、100 mg /L浓度下对小鼠脾淋巴细胞的增殖有
显著增强作用;PAA-1 协同 Con A 刺激 T 细胞,在各浓度(5、
64 中药药理与临床 2012;28(2)
25、50、100 mg /L)均有极显著的增强作用,且表现为剂量依赖
性;而 PAA-1 协同 anti-CD3mAb刺激 T 淋巴细胞增殖在低浓度
(5、25mg /L)无明显增强作用;在较高浓度(50、100mg /L)时对
脾淋巴细胞的增殖有显著或极显著的增强作用;PAA-1 协同
LPS刺激 B细胞,在各浓度下(5、25、50、100 mg /L)对 B 细胞的
增殖率均有极显著增强作用,也呈剂量依赖性,见表 1。
表 1 PAA -1 对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响(珋x ± s,n = 3)
PAA - 1
(mg /L)
PAA - 1 PAA - 1 + LPS PAA - 1 + Con A PAA - 1 + CD3
0 0. 0881 ± 0. 0028 0. 1835 ± 0. 0035 0. 2066 ± 0. 0066 0. 0997 ± 0. 00151
5 0. 1078 ± 0. 0027 0. 2077 ± 0. 0011**0. 2214 ± 0. 0010**0. 1122 ± 0. 015994
25 0. 1943 ± 0. 0892**0. 2131 ± 0. 0031**0. 2280 ± 0. 0062**0. 1203 ± 0. 006769
50 0. 1645 ± 0. 0038**0. 2247 ± 0. 0070**0. 2330 ± 0. 0027** 0. 131 ± 0. 014364*
100 0. 2109 ± 0. 0008**0. 2406 ± 0. 0100**0. 2470 ± 0. 0065** 0. 176 ± 0. 01191**
2. 2 PAA-1 对小鼠 PMΦ能量代谢水平的影响 如表 2 所示,
结果显示,PAA-1 低浓度(5mg /L)时对小鼠 PMΦ的能量代谢水
平刺激作用不明显(P > 0. 05) ;而在中、高浓度(25、50、100mg /
L)下能显著或极显著提高小鼠 PMΦ的能量代谢水平(P < 0. 05
或 P < 0. 01)。
表 2 PAA -1 对小鼠 PMΦ能量代谢水平的影响(珋x ± s,n = 3)
PAA -1 浓度(mg /L) 平均 OD值
0 0. 0861 ± 0. 000862
5 0. 0894 ± 0. 00115
25 0. 1086 ± 0. 004013*
50 0. 1197 ± 0. 002974**
100 0. 1459 ± 0. 005828**
2. 3 PAA-1 对小鼠 PMΦ吞噬中性红的影响 如表 3 所示,结
果表明,小鼠 PMΦ经 PAA-1 的 25、50、100 mg /L三个剂量刺激
下,吞噬中性红能力均有的极显著的增强 (P < 0. 01) ,并随剂
量的增大而增加;在 5 mg /L剂量时,吞噬能力也增强,但结果经
分析差异不显著(P > 0. 05)。
表 3 PAA -1 对小鼠 PMΦ吞噬中性红水平的影响(珋x ± s,n = 3)
PAA -1 浓度(mg /L) 平均 OD值
0 0. 0934 ± 0. 00251
5 0. 1144 ± 0. 00438
25 0. 1242 ± 0. 002547**
50 0. 1292 ± 0. 008641**
100 0. 1437 ± 0. 004923**
2. 4 PAA-1 对 巨噬细胞分泌 NO的影响 如表 4 所示,小鼠
PMΦ经 PAA-1 的 5、25、50、100 mg /L四个剂量刺激下,NO的分
泌量均有的极显著的增强 (P < 0. 01) ,并随剂量的增大而增
加。
表 4 PAA -1 对巨噬细胞产生 NO的影响(珋x ± s,n = 3)
PAA -1 浓度(mg /L) NO浓度(μM/L)
0 0. 0708
5 1. 0759
25 1. 2365
50 1. 5740
100 1. 8330
2. 5 PAA-1 对小鼠 NK细胞杀伤活性的影响 如表 5 所示,结
果显示,在 PAA-1 剂量为 25、50、100mg /L下,对小鼠 NK细胞对
靶细胞 YAC-1 细胞的杀伤率均有极显著的增强作用(P < 0.
01) ;在剂量为 5mg /L下,作用不显著(P > 0. 05) ,表现出明显的
剂量依赖性。
表 5 PAA -1 对小鼠 NK细胞杀伤活性的影响(珋x ± s,n = 3)
PAA -1 浓度(mg /L) NK细胞杀伤率(%)
0 28. 36
5 32. 42
25 60. 13
50 81. 44
100 98. 11
3 讨论
各浓度的 PAA-1 单独或者协同有丝分裂原 LPS、Con A 或
anti-CD3mAb能显著刺激小鼠脾淋巴细胞的增殖。Con A 主要
作用于 T淋巴细胞,介导机体特异性的细胞免疫应答。CD3 是
T淋巴细胞的一种分化抗原,与 T 细胞抗原受体(TCR)一起构
成 TCR-CD3 复合物,在 T细胞识别抗原及活化过程中起重要作
用。抗 CD3 抗体具有很强的丝裂原作用,无论体内外均可单独
启动 T细胞活化,从而使其分裂、增殖。抗 CD3 抗体活化 T 细
胞依赖于抗体本身的完整性,其激活 T 细胞机制可能为该抗体
与 CD3 抗原结合,导致 TCR-CD3 复合体构型改变,激活多种信
号传递途径,诱导内源性 IL-2 等淋巴因子释放,IL-2 受体表达,
对 IL-2 反应性增强而致使细胞分裂增殖。LPS 主要作用于 B
淋巴细胞,介导机体特异性的体液免疫应答。实验结果说明了
PAA-1 具有增强小鼠的细胞免疫和体液免疫的功能。
巨噬细胞是机体免疫系统的一种重要的免疫细胞,不仅具
有很强的吞噬功能,而且是主要的抗原提呈细胞,在特异性免疫
应答的诱导和调节中起关键作用。适度调控巨噬细胞的活化对
于提高机体的免疫力也有重要意义。巨噬细胞在免疫活化或受
刺激时,能产生大量的一氧化氮自由基,以杀伤入侵病原体和肿
瘤。NO是一种重要的介质分子,参与机体的多种生理与病理
过程,包括神经传递和炎症;在免疫功能的调节中也起着十分广
泛而复杂的作用。既是天然免疫中的一个重要免疫分子,能够
发挥非特异性杀菌和杀伤肿瘤细胞的作用,又是一种重要的信
使分子,可以调节获得性免疫。试验证实,各浓度的 PAA-1 能
够刺激 PMΦ增殖;增强 PMΦ吞噬中性红的能力,并促进 NO的
分泌,说明 PAA-1 可活化巨噬细胞,增强其吞噬能力。
NK细胞是机体免疫监视功能的重要执行者,是机体一种
重要的免疫细胞,可杀伤某些肿瘤细胞或病毒感染的细胞,先于
T细胞发挥作用,处于机体抗肿瘤的第一道防线。NK细胞的靶
细胞主要有某些肿瘤细胞(包括部分细胞系)、病毒感染细胞、
某些自身组织细胞(如血细胞)、寄生虫等,因此 NK细胞是机体
抗肿瘤、抗感染的重要免疫因素。本实验中利用 Yac-1 细胞株
作为靶细胞,能被 NK细胞杀伤,杀伤活性差异极显著(P < 0.
01)。PAA-1 对小鼠 PMΦ吞噬功能以及 NK细胞杀伤活性的增
强作用,说明 PAA-1 还能够增强小鼠非特异性免疫功能。
参考文献
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Effects of proanthocyanidin A-1 from Rhododendron spiciferum on mice immunocyte
Liu Yingzi1,Luo Youliang2,Zhou Tiezhong1
(1 Liaoning Medical University,Jinzhou 121001;2 Shenyang Hezhong Feed CO.,LTD ,Shenyang 110000)
Objetive:Proanthocyanidin A-1 (PAA-1)was isolated from Rhododendron spiciferum in ethylacetate,its effects on regulating immune
system in mice were researched. Methods:Immune cells were treated with different concentrations of PAA-1 were determined by MTT in
vitro,cell proliferation of splenocytes,peritoneal macrophages energy metabolism ,activation of Natural killer cells (NK cells) ,phagocytic
activity of the macrophage and NO secreted by peritoneal macrophage were tested. Results:At concentrations of 5 ~ 100 mg /L ,PAA-1 en-
hanced cell proliferation of splenocytes and peritoneal macrophages energy metabolism,PAA-1 can enhance macrophage phagocytic function
on neutral red significantly and induce macrophage nitric oxide(NO)production,PAA-1enhanced NK function to kill target YAC-1 cell.
Conclusion:PAA-1 can enhance immune function in mice.
Key words proanthocyanidin A-1;Balb /c mice;splenocytes;macrophages;natural killer cells
三七总皂苷伍用淫羊藿苷改善血管性痴呆大鼠空间学习记忆及抗脂质过氧化研究
金情政,郑彩霞
(浙江衢化医院,衢州 324004)
摘 要 目的:研究三七总皂苷(PNS)伍用淫羊藿苷(ICA)对血管性痴呆大鼠学习记忆、血液流变学及脑组织脂质过氧化的
影响。方法:SD大鼠给药组各 10 只,阳性药组 10 只,采用反复夹闭双侧颈总动脉(CCA)再灌注同时腹腔注射硝普钠方法建立血
管性痴呆大鼠模型,连续给药 21 天后,用跳台法判断给药前后大鼠的空间学习和记忆能力,再进行血液流变学和脑组织 SOD、MDA
的测定。结果 :与假手术组大鼠相比,模型大鼠跳台学习和记忆错误次数明显增加(P < 0. 05) ,大鼠造模前后连续口服三七总皂
苷伍用淫羊藿苷 2. 5 + 20、5 + 40、10 + 80 mg /kg各剂量组 21d后,大鼠上述行为学指标得到明显改善(P < 0. 05) ,全血粘度得到
明显改善(P < 0. 05) ,脑组织 SOD活性提高(P < 0. 05)和 MDA含量降低(P < 0. 01)。结论:三七总皂苷伍用淫羊藿苷对血管
性痴呆大鼠空间学习和记忆障碍有显著的预防和治疗作用,可能与通过改善血管性痴呆大鼠大脑血液供应和自由基代谢有关,从
而起到保护大脑的作用。
关键词 淫羊藿苷;三七总皂苷;SOD;MDA
淫羊藿苷 (icariin,Ica)是淫羊藿的黄酮类化合物,也是其
主要活性成分,迄今已发现淫羊藿苷的主要药理活性在于改善
心脑血管系统功能、增强机体免疫力及调节内分泌等方面[1]。
三七总皂苷 (Panax notoginseng saponins,PNS)由人参皂苷
Rg1、Rb1、Re和三七皂苷 R等成分组成,是三七主要活性部位。
现代药理研究发现,三七总皂苷的药理活性主要在于改善血液
系统和心血管系统功能、滋补强壮、调节免疫等方面[2]血管性
痴呆(Vascular Dementia,VD)是由于缺血或出血性脑血管病以
及全脑缺血、缺氧而引起的认知障碍。脑血管病是导致痴呆的
重要原因之一,既往的研究已阐明了这一点,但无一种理论能
圆满地解释其真正的发病机制[3]。本实验应用反复夹闭双侧
颈总动脉(CCA)再灌注同时腹腔注射硝普钠方法建立血管性
痴呆大鼠模型,观察三七总皂苷伍用淫羊藿苷对该模型的影响。
1 材料
1. 1 试验药物 淫羊藿苷从浙江康恩贝制药股份有限公司购
得,含量为 55%,批号:080722。三七总皂苷从浙江康恩贝制药
股份有限公司购得,含量为 90%,批号:080914。
1. 2 动物 雄性 SD大鼠 72 只,6 周龄,浙江省实验动物中心,
二级,动物合格证号 SCXK(浙)2008-0002。
1. 3 试剂 硝普钠(北京双鹤药业) ,培磊能(杭州赛诺菲圣德
84 中药药理与临床 2012;28(2)