全 文 ：ZD 01 年 1月第 1期 中国民族 医药杂志
法测定细叶杜香中熊果酸的含量△
孟彩云 , 巴俊杰 , ’ 毕力格“
l(
. 俩蒙古 医学院 , 内蒙古 呼和浩特 m ol lo ; 2 . 内蒙古 自治 区中蒙医医院 , 内蒙古 呼和浩特 01 仪犯o )
摘 要 : 目的 :建立细叶杜香 中熊采酸的含量测定方 法 。 方法 : 采用 高效液相 色谱 法 , 色谱柱 : igA le n t C I。 ( 4~ x 150 ~ ,
5脚 ) ; 流动相 : 乙睛 : 0 . 05 %磷酸 (7 0 : 30) ;流速 : 1 . 0耐而 ;n 柱温 : 25 ℃ ;检测波长 : 2 0nl 。 结果 : 熊果酸在 0 . 03 75 一 0 . 1375 11唱 /
祖 范围内线性关 系良好 , 平均回收率为 9 . 78 % , RS D = 1 . 247 % ( n 二 6) 。 结论 :该方法简便可行 、 重复性好 , 可作为 细叶杜香
质量评价的依据 。
关键词 : 细叶杜香 ;熊果酸 ; 高效液相色谱法 ;含量测 定
中图分类号 : IU 9 1 . 2 文献标识码 : B 文章编号 : l 《X巧 一 6 8 1以2 0 10) 01 一 印5 1一 m
细叶杜香 ( & 己训网~ L
. 二 . “ 伙罗招han N . B us hc )为 动相 : 乙睛 : 0 . 05 % 磷 酸 ( 7 :0 30) ; 流速 : 1 . 0耐m in ; 柱温 :
杜鹃花科杜香属植物 。 常绿小灌木 , 株高 40 一 50 cm ,枝和
叶可再生 。 主要分布在中国的东北 、 朝鲜 、 日本 、西伯利亚 、
北美和欧洲等地 ,资源丰富〔’ 〕 。 熊果酸 ( u sr o il c a ic d) 又名乌
索酸 , 乌苏酸 , 是存在于天然植物 中的一种三菇类化合物 。
药理实验表明熊果酸具有抗癌 、 抗炎 、 抗菌 、 抗病毒 、 降血
脂 、 降血糖 、 镇静 、 扩张冠状血管和增强机体免疫力等作
用卜 4 〕。 临床主要用作治疗病毒性肝炎 、 原发性高血脂症 、
皮炎 、 口腔炎症和抑郁症等川 。 特别是近年来研究表明熊
果酸抗癌作用潜力巨大 ,具有抗致癌 、 抗促癌 、 诱导肿瘤细
胞凋亡和抗肿瘤血管生成作用 ,极有可能被开发成新型抗
癌药物或抗癌药先导化合物 ,所以熊果酸具有较大的药用
价值和经济价值 61t 。 作者在研究细叶杜香化学成分时发现
其富含熊果酸 。 本文采用高效液相色谱法测定了细叶杜香
中熊果酸的含量 , 旨在一为建立细叶杜香 中熊果酸的含量
测定方法 ,二为细叶杜香的质量评价和质量控制提供依据 。
1 仪器与试药
1
.
1 仪器 : A ig le n t l珊 型高效液相色谱仪 (安捷伦科技有
限公司 ,德国 ) ;AL 一 2以 型电子天平 (上海精密科学仪器有
限公司 ) ; sA 31 20 型超声清洗机 (天津奥特赛恩斯仪器有限
公司 ) ; GM - · … 3 n 型隔膜真空泵 (天津市腾达过滤器件
厂 )
1
.
2 试药 :细叶杜香药材由内蒙古根河市林业局提供 , 经
内蒙古医学院药学院鞠爱华教授和根河市林业局孙亚红研
究员鉴定为杜鹃花科杜香属植物细叶杜香 & 汤姗间。 etr L
二 ` W出倪佩 N BUCS h . ;熊果酸标准品 (中国药品生物制品检
定所 ,批号 : n 0742 一 2X() 516) ; 乙睛为色谱纯 ,其他试剂均为
分析纯 ,流动相用水为重蒸馏水 。
2 方法与结果
2
.
1 色谱条件 :色谱柱 : Aigl e in CI : ( 4~ x 150nIYU , 5脚 ) ;流
25 ℃ ;检测波长 : 220 nl 。 色谱图见图 lo 、
△ 内蒙古自治区教育厅科学研究项 目 (N (J巧126 )
图 1 HP LC色谱图
2
.
2 对照品溶液 :精密称取熊果酸对照品 12 . 50 gm , 加甲醇
定容至 5 0 l ld ,制成浓度为 o . 25 n喇祖 的对照 品溶液 。
2
.
3 供试品溶液 :取细叶杜香粉末 (过 40 目筛 )约 0 . 2 9 ,
精密称定 ,置于具塞锥形瓶 中 ,精密加无水乙 醇 50 d , 密
塞 ,精密称定 ,超声提取 30而 n ,放冷 ,再精密称定 , 用无水乙
醇补足减失的重量 ,摇匀 ,过滤 ,续滤液用 0 . 45 卿 微孔滤膜
过滤 ,即得 。
2
.
4 线性关系的考察 : 分别吸取熊果酸对照品溶液 1 . 5 、 2 .
5
、
3
.
5
、
4
.
5
、
5
.
5耐 置 or 血 容量瓶中 , 用流动相稀释至刻度 ,
摇匀 ,分别精密吸取 20 风 , 进样 ,按 2 . 1 项下色谱条件测定 ,
以峰面积 Y 为纵坐标 , 样品浓度 x ( m创血 )为横坐标作图 。
回归方程为 Y = 3203 . 2 X 一 0 . 54 , 相关系数 r 二 0 .舅砚〕。 结果
表明熊果酸在 0 . 037 5 一 o
.
137 5m创过范围内 ,有 良好线性关
系 。
2
.
5 精密度试验 : 精密吸取供试品溶液 20 风 ,连续进样 5
次 ,按 2 . 1项下色谱条件测定 ,峰面积的 RS D 为 0 . 81 % ,表
明仪器精密摩良好 。
2
.
6 重现性试验 :取同一批供试品 5 份 ,按 2 . 3 项下制备
供试品溶液 ,每份分别进样 20 沁 , 平行测定 5 次 ,计算熊果
酸的平均含量为 19 . 18m岁g , BS D 为 1 . 06 % ,表明该方法重
现性 良好 。
DOI : 10. 16041 /j . cnki . cn15 -1175. 2010. 01. 042
5 2 中闯民族 医药杂志 2 01 0年 l 月第 l 期
2
.
7 稳定性试验 :取同一份供试品溶液 ,分别在 0 、 2 、 4 、 6 、
8
、
12 h 进样 ,按 2 . 1 项下色谱条件测定 ,结果熊果酸峰面积
的 RS D 为 0 . 89 % ,表明供试品在 1h2 内稳定性 良好 。
2
.
8 加样回收率试验 :精密称取已知含量的细叶杜香粉末
6 份 ,分别加人浓度为 o . 25 n l岁而 的熊果酸对照品溶液适
量 。 按 2 . 3 项下制备供试品溶液 ,按 2 . 1项下色谱条件测
定 ,计算回 收率 。 结果熊果酸 的平均回收率为 9 . 78 % ,
RS D 为 1 . 247 % ( n 二 6) ,表明此方法加样回收率较好 。 结果
见表 1 。
表 1 熊果酸的加样回收率实验结果
序号 样品含量 加人对照 实测量 回收率 平均回收率 DRS
时m g 品量 而mg 而mg ( % ) ( % ) (% )
,
汀
4
1, ,ù
98o2
.
896 3
.
864
2
.以巧
1
.
9 18 2
.
0 卯 . 49 卯 . 7 8 1 . 247
,孟ǎ洲
849
4 1
.肠7 2 . 0 3 . 9 1 10 . 6 1
5 0
.
9 74 3
.
X() 4
.
0 46 10 1
.
82
6 1
.
02 1 3
.
0 3
.
9 1 9
.
2 6
2
.
9 样品的含量测定 :分别精密吸取对照品溶液与细叶杜
香供试品溶液各 20 闪 ,按 2 . 1项下色谱条件测定 ,每个样品
进样 3 次 ,取峰面积平均值计算熊果酸的含量 。 结果细叶
杜香中熊果酸含量为 19 . 17 m岁g , RS D 二 1 .肠 % 。
3 讨 论
3
.
1 提取溶剂的选择 :参考熊果酸的溶解性能 ,对无水 甲
醇 、无水乙醇 、 95 % 乙醇不同的提取溶剂进行了优选 , 根据
提取效果及出峰情况选择了无水 乙醇作为提取溶剂 。
3
.
2 提取时间的选择 :本实验对超声提取时间 or 、 20 、 os 、
40 和 50而 n 进行 了考察 , 结果显示超声提取时间在 20 而n
以上提取率无显著差异 , 故选择 30 n l in 为供试 吕超声提取
时间 。
3
.
3 流动相的选择 : 对不同比例的流动相 乙腊 : 0 . 05 %磷
酸从 92 : 8 至 60 : 4D 和稀磷酸的不同浓度从 0 . 05 % 至 0 . 2%
进行了考察 ,最终筛选出了分离度最佳的流动相条件为乙
睛 :稀磷酸 (0 . 05 % ) = 70 : 3仇
参考文献
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2X( 刃年 7 开 6 日收稿
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