全 文 ：何可群，李相兴． 民族药金丝梅总黄酮含量的测定［J］． 江苏农业科学，2013，41(5) :307 － 309．
民族药金丝梅总黄酮含量的测定
何可群1，李相兴2
(1．贵州民族大学化学与环境科学学院，贵州贵阳 550025;2．贵州民族大学民族学与社会学学院，贵州贵阳 550025)
摘要:以芸香苷为对照品，用超声辅助提取、紫外 －可见分光光度法测定金丝梅总黄酮含量。结果表明，金丝梅
中总黄酮的相对百分含量为 5． 103%，RSD为 0． 936%;芸香苷对照品在 0． 0137 5 ～ 0． 220 0 mg /mL范围有良好的线性
关系，回归方程为 D = 9． 926 1C + 0． 013，r2 = 0． 999 7。说明该方法操作简便，结果可靠，能为金丝梅药用价值的开发及
扩大资源利用提供科学的依据。
关键词:金丝梅;分光光度法;总黄酮
中图分类号:TS201 文献标志码:A 文章编号:1002 － 1302(2013)05 － 0307 － 02
收稿日期:2012 － 10 － 31
基金项目:国家社会科学基金(编号:12XMZ033)。
作者简介:何可群(1971—) ，女，云南云龙人，硕士，副教授，从事药用
植物学、分析化学研究。Tel: (0851)3612796;E － mail:hekequn
2004@ 163． com。
金丝梅(Hypericum patulum Thunb．)是金丝桃科金丝桃属
植物，别称金丝桃、芒种花、栽秧花、黄花香、土连翘、山栀子
等［1］。金丝梅以全株入药，具有清热解毒、舒经活络、舒肝、
止血的功效。用于肝炎、感冒、痧症、倒经、口腔炎、痢疾、血
崩、小儿疳积等，外用治鼻衄、刀枪伤、骨折狗咬伤、黄水疮
等［1］。目前对金丝梅化学成分的研究还很少，只有少量国外
的文献报道在金丝梅愈伤组织中分离得到一系列戊二烯化的
氧杂蒽酮类黄酮化合物及(－)表儿茶素、齐墩果酸、β －谷甾
醇等［2 － 6］。本试验对金丝梅全草 70%乙醇提取液的紫外光
谱及总黄酮含量进行研究，以便为该民族药的进一步开发及
扩大资源利用提供科学依据。
1 材料与方法
1． 1 试验材料
1． 1． 1 金丝梅 采自贵州省贵阳市花溪十里河滩，经贵州民
族大学民族药物研究所卢文芸副教授鉴定为金丝梅，标本保
存于贵州民族大学化学与环境科学学院药学教研室。
1． 1． 2 仪器 756PC紫外 －可见分光光度计(上海舜宇恒平
科学仪器有限公司) ，METTLERAE240 电子分析天平(上海天
平仪器厂) ，BGZ － 30 电热鼓风干燥箱(上海博迅实业有限公
司医疗设备厂) ，SG3200HE 超声清洗仪(上海冠特超声仪器
有限公司) ，数显恒温水浴锅(江苏省常州博远试验分析仪器
有限公司)。
1． 1． 3 试剂 氢氧化钠、亚硝酸钠、硝酸铝、无水乙醇、石油
醚均为分析纯，芸香苷对照品(色谱纯，购自贵州迪大科技有
限责任公司)。
1． 2 试验方法
1． 2． 1 金丝梅总黄酮提取［7 － 9］ 将自然晾干的金丝梅在电
热鼓风干燥箱中于(60 ± 1)℃下烘 5 h，称取干燥、研碎的金
丝梅粉末适量，按 1 g ∶ 20 mL的固液比用体积分数 70%的乙
醇浸泡，超声提取 30 min，超声频率为 40 kHz，功率 150 W，提
取结束后，合并提取液，过滤，冷却，用沸程 30 ～ 60 ℃ 的石油
醚萃取除去叶绿素，浓缩，用 70%乙醇定容，摇匀备用。
1． 2． 2 芸香苷标准曲线的绘制［10 － 17］ (1)芸香苷标准溶液
的制备。精确称取 120 ℃干燥至恒重的芸香苷 27． 5 mg，置
于 50 mL容量瓶中，加 70%乙醇适量，水浴微热使其溶解、冷
却，加 入 70% 乙 醇 至 刻 度，摇 匀，芸 香 苷 含 量 为
0. 550 mg /mL。(2)标准曲线的绘制。精确吸取质量浓度为
0． 550 mg /mL 的芸香苷标准溶液 0、0． 25、0． 50、1． 00、2． 00、
3. 00、4． 00 mL分别置于 7 支 10 mL 比色管中，加 70%乙醇补
足至 5． 0 mL，分别加入 50 g /L亚硝酸钠溶液 0． 40 mL，摇匀，
放置 6 min，精确加入 50 g /L硝酸铝溶液 0． 40 mL，摇匀，放置
6 min，再精确加入 40 g /L氢氧化钠溶液 4． 00 mL，并用 70%
乙醇稀释至刻度，摇匀，静置 12 min。以试剂空白为参比，于
510 nm波长下测定吸光度 D，以吸光度为纵坐标，显色液中芸
香苷的质量浓度 C(mg /mL)为横坐标，绘制标准曲线，经回归
处理得方程:D = 9． 926 1C + 0. 013，决定系数 r2 = 0． 999 7，芸
香苷浓度在 0． 013 75 ～ 0． 220 0 mg /mL 范围内吸光度与质量
浓度线性关系良好。
1． 2． 3 芸香苷、金丝梅测定波长的选择 精确吸取芸香苷标
准溶液(0． 550 mg /mL)、金丝梅的提取液各 1． 00 mL，分别置
于 2 支 10 mL比色管中，加入体积分数为 70%的乙醇补足至
10． 00 mL，以 70%乙醇溶液建立基线，在 200 ～ 700 nm 波长
范围进行波长扫描，得到芸香苷和金丝梅提取液显色前的紫
外吸收光谱。精确吸取 0． 550 mg /mL 芸香苷标准溶液、金丝
梅的提取液各 1． 00 mL，分别置于 2 支 10mL 比色管中，加
70%乙醇补足至 5． 0 mL，分别加入 50 g /L 亚硝酸钠溶液
0. 40 mL，摇匀，放置 6 min;精确加入 50 g /L 硝酸铝溶液
0． 40 mL，摇匀，放置 6 min;精确加入 40 g /L 氢氧化钠溶液
4. 00 mL，并用 70%乙醇稀释至刻度，摇匀，静置 12 min。以
试剂空白建立基线，在 200 ～ 700 nm波长范围进行波长扫描，
得到芸香苷和金丝梅提取液显色后的紫外吸收光谱。
1． 2． 4 样品测定［10 － 17］ 精确量取“1． 2． 1”所得金丝梅乙醇
提取液 1． 00 mL，按标准曲线的绘制方法加显色剂处理，于
510 nm波长下测得金丝梅的吸光度 D，代入回归方程得金丝
梅的总黄酮类化合物以芸香苷计算的质量浓度 C(mg /mL) ，
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DOI:10.15889/j.issn.1002-1302.2013.05.049
换算为干燥药材中总黄酮的含量。
1． 2． 5 重复性试验 精确称取金丝梅全草样品 5 份，按含量
测定方法进行测定，计算平均含量及 RSD。
1． 2． 6 加标回收试验 精确称取一定量金丝梅全草样品 3
份，再精确加入 0． 550 mg /mL芸香苷标准溶液 4． 00 mL，按样
品含量测定方法进行提取、测定，计算加标回收率及 RSD。
2 结果与分析
2． 1 标准曲线
于 510 nm波长下测定芸香苷标准溶液系列的吸光度 D，
以吸光度为纵坐标，显色液中芸香苷的质量浓度 C(mg /mL)
为横坐标，绘制标准曲线(图 1) ，经回归处理得方程:D =
9. 926 1C + 0． 013，r2 = 0． 999 7，芸 香 苷 浓 度 在
0． 013 75 ～ 0． 220 0 mg /mL 范围内吸光度与质量浓度线性关
系良好。
2． 2 芸香苷、金丝梅测定波长的选择
图 2、图 3 表明，在加显色剂前后，芸香苷标准溶液和金
丝梅样品溶液的紫外吸收光谱均有所改变，显色后在 510 nm
处有较平缓的吸收峰，适于定量测定。
2． 3 样品总黄酮含量的测定
由表 1 可知，金丝梅样品中总黄酮的平均含量为
5. 103%，重复性试验 RSD为 0． 936%，精密度高。
表 1 总黄酮测定及精密度试验结果
测定次数 样品总黄酮含量(%)
1 5． 056
2 5． 065
3 5． 087
4 5． 151
5 5． 157
平均 5． 103
注:RSD = 0． 936%。
2． 4 加标回收率
由表 2 可知，加标回收率为 97． 56% ～ 98． 25%，RSD 为
0． 356%。
表 2 加标回收试验结果
重复
样品重量
(mg)
样品黄酮
含量(mg)
加标量
(mg)
测得量
(mg)
回收率
(%)
1 100． 00 5． 103 2． 200 7． 125 97． 56
2 100． 00 5． 103 2． 200 7． 156 97． 99
3 100． 00 5． 103 2． 200 7． 175 98． 25
平均 97． 93
注:RSD = 0． 356%。
3 结论
本研究首次对金丝梅全草的紫外光谱及总黄酮含量进行
了研究，结果表明，金丝梅干燥全草中黄酮类物质丰富，其含
量平均为 5． 103%，为该民族药的药用价值开发及扩大资源
利用提供了一定的科学依据。
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朱巧萍，高雪平，程 璐，等． 微波辅助提取香榧假种皮挥发油及其对植物病原真菌的抑制活性［J］． 江苏农业科学，2013，41(5) :309 － 311．
微波辅助提取香榧假种皮挥发油及其
对植物病原真菌的抑制活性
朱巧萍1，高雪平1，程 璐1，邱小芸1，郑军晓1，胡绍泉1，徐丽燕1，孙小红2，葛 建2
(1．绍兴文理学院元培学院，浙江绍兴 312000;2．中国计量学院，浙江杭州 310018)
摘要:采用微波水蒸气蒸馏法提取香榧假种皮中的挥发油，以 GC － MS 法分析其成分，并采用离体法测定其对 5
种植物病原真菌的抑菌活性。结果表明香榧假种皮挥发油最佳提取工艺为:微波功率为低火、微波时间 2 min、蒸馏时
间 60 min。从香榧假种皮挥发油中共检测出 43 种成分，鉴定出 36 种成分，主要成分为柠檬烯(25． 333%)、α －蒎烯
(17. 472%)等。在 2 mg /mL浓度下，香榧假种皮挥发油对黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f． sp． cucumerinum)、水稻
稻瘟病菌(Pyricularia oryzae)、玉米小斑病菌(Bipolaris maydis)、黄瓜霜霉病菌(Pseudoperonospora cubensis)和番茄早疫
病菌(Alternaria solani)菌丝生长均有较强的抑制作用，抑制率均达到 85%以上。
关键词:香榧假种皮;挥发油;微波辅助提取;抑菌活性
中图分类号:S664． 5 文献标志码:A 文章编号:1002 － 1302(2013)05 － 0309 － 03
收稿日期:2012 － 11 － 24
基金项目:浙江省分析测试科技计划项目(编号:2011C37044) ;浙江
省绍兴市 2011 年科技计划项目(编号:2011A22009) ;2011 年度浙
江省绍兴市大学生科技创新项目［编号:绍市教高(2012)15 ］。
作者简介:朱巧萍(1990—) ，女，本科生，研究方向为天然产物化学。
通信作者:孙小红，讲师。E － mail:xhsun2000@ 163． com。
香榧(Torreya grandis cv． Merrilli)是红豆杉科(Taxaceae)
榧属(Torreya)植物，是我国特有的经济树种，仅产于浙江省
会稽山区的诸暨、嵊州、绍兴、东阳、磐安等地［1］。其种子是
我国特有的珍稀干果，榧属植物的种子外面有一层很厚的肉
质化假种皮，约占种子鲜重的 50% ～ 60%。仅诸暨市每年就
剥落香榧假种皮 4 000 t。长期以来，剥落的香榧假种皮被丢
弃，既浪费了宝贵的生物资源，又造成了严重的环境污染。前
期研究发现香榧假种皮内含有多种黄酮类化合物和醇、醛、烯
等植物芳香物质［2］。近年来，香榧假种皮挥发油在医药、化
工以及农业等方面都有一定应用［3 － 4］。
由于香榧假种皮挥发油成分复杂，选择合适的提取方法
非常关键。目前香榧假种皮挥发油萃取主要有水蒸气蒸馏法
和超临界 CO2 流体萃取法等
［5 － 6］。微波辅助萃取法是指使用
适合的溶剂在微波反应器中从天然药用植物、矿物、动物组织
中萃取各种化学成分。微波加热过程对于被萃取物料的内外
是同时进行的，缩短了萃取组分分子由物料内部扩散到萃取
溶剂界面的时间，能够使萃取效率提高数倍［7］。微波辅助萃
取具有无溶剂残留、加热速度快、挥发油受热时间短、香气损
失少、节能等优点。
本研究首次采用微波辅助水蒸气蒸馏法从香榧假种皮中
提取挥发油，并利用 GC － MS 方法对挥发油的化学成分和含
量进行分析，并研究挥发油对 5 种常见植物病原菌的抑制活
性，为香榧假种皮挥发油综合开发应用提供基础。
1 材料与方法
1． 1 试验材料
香榧假种皮收集自浙江省绍兴市稽东镇香榧基地，经绍
兴文理学院元培学院金自学教授鉴定为香榧 的假种皮，置于
阴凉通风处自然阴干。黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f．
sp． cucumerinum)、水稻稻瘟病菌(Pyricularia oryzae)、玉米小
斑病菌(Bipolaris maydis)、黄瓜霜霉病菌(Pseudoperonospora
cubensis)和番茄早疫病菌(Alternaria solani)由山东省农业科
学院提供。
1． 2 方法
1． 2． 1 香榧假种皮挥发油的提取方法 准确称取已粉碎香
榧假种皮 30 g，按照 1 ∶ 8 比例加入蒸馏水 240 mL 置于
500 mL 大烧杯中，用保鲜膜封口，然后置于微波炉内加热。
然后将烧杯中的香榧假种皮及其溶液转移至 500 mL 圆底烧
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