全 文 ：1 8 9同济医科大学学报 l 。。 o :一。( 3 ) :1 98
羊掷踢根治疗慢性肾小球肾炎的
实验及临床研究’
同济医科大学基础医学部病理学教研室
熊 密 彭杰青 陈昌纬
同济医科大学附属协和医院
罗永众 李焰卿
摘要 本文用反复静脉注射小剂量牛血清白蛋白复制家兔慢性肾炎 , 用羊哪踢根治疗 . 同 时 ,
用该药对慢性肾炎病人进行疗效观察 。 阳性组兔肾小球呈现中至 重度颗粒形免疫荧光 , ’肾组织 呈明
显慢性硬化性肾小球肾炎改变 , 尿蛋白士 一 + 。 治疗组兔及病人治疗后病变及症状均明显 减 轻或
消失 . 结果提示抵环免疫复合物反复沉着可引起兔类似人类的慢性硬化性肾小球肾炎 , 羊 哪 踢根
对病变有一定的控制和治疗作用 , 这可能与其抑制免疫发病机制有关。
关健词 肾小球肾炎 ; 免疫复合物病 : 羊掷踢 : 荧光抗体技术
慢性肾小球肾炎的病 因、 发病机理与免
疫反应有关 , 目前尚无有效的防治方法 。 中
药羊哪踢根对风湿病 、 类风湿性关节炎有一
定疗效 〔 ’ ] , 对与免疫反应有关的肾小球肾炎
是否也有疗效 , 尚未见有类似研究报道 。 因
此 , 本文采用牛血清白蛋白.复制家兔慢性肾
小球肾炎 , 用羊哪踢根进行治疗 , 同时结合
应用该药治疗10 例慢性肾炎病人 的 临 床资
料 , 探讨其对慢性肾小球肾炎的 疗 效 及机
理 。
材料和方法
雄性家兔 2 5只 (体重 1 . 5~ 2 . o k g ) , 用
抽签法随机分成实验组 ( 21 只 ) 和正常对照
组 ( 4 只 ) 。
实验组每只兔背部皮下分点注射弗 氏完
全佐剂 1 m l含牛血清白蛋白( B S A ) 10 m g作
预免疫 . 6 d后作致病免疫 , 甸天 1 次耳 静
脉注射B S A 10 m g (溶于生理盐水溶液 1 m l) ,
连续 4 d 。 然后每天 1 次耳静脉 注 射 B S A
2 0 m g (溶于生理盐水溶液 1 . 5 m l ) , 连 续 1
* 国家 自然科学基金委员会资助课题
周 。 再后隔天 1 次耳静脉注射 B s A 50 m g (溶
于生理盐水溶液 2 m l) , 共 9 一 13 周 。 致病
免疫后 1 周 , 每只兔背部皮下分点注射弗氏
完全佐剂 1 m l含B S A 10 gnI 作辅 助免疫 。 正
常对照组单纯给予等量的生理盐水注射 。
致病免疫 2 周后 , 分别收集各组动物尿
液 , 用醋酸加热法检查尿蛋白 。 当实验组兔
出现蛋白尿 ( 16 只 ) , 又按上法随机分成实
验治疗组 ( 10 只 ) 及阳性对照组 ( 6 只 ) ,
治疗组在注射B s A 的同时用中药羊哪踢根制
剂治疗 ( 4 ~ 8 周 ) 。 按体表面积折算法计
算每只家兔用药量为 0 . 8~ 1 . 3 9闰 , 一次经
口喂服 。 阳性对照组继续注射B s A 。 动物于
实验第 1 3周处死 。
病理学检查 : ①取小块肾皮质组织作冰
冻切片 , 用异硫氰酸荧光素结合 的 羊 抗兔
I gG 染色 , 用荧光显微镜检查 , 并 用 U in va r
显微分光光度计测定 gI G 免疫荧光强度 ; ②
取数小块肾皮质及肝组织 , 用 3 肠戊二醛迅
速固定 , 饿酸后固定 , E oP n 包埋 , 酷 酸 铀
和构椽酸铅染色 , 透射电镜观察 ; ③取部分
肾、 肝组织用 10 肠中性福尔马林液固定 , 石
1 9 9
蜡包埋切片 , 除H E染色外 , ’肾切片做 P A S 、
P A S M染色 , 光镜观察 。
、 本文观察的临床病例属慢性肾炎普通型
8 例 , ’肾病综合征 亚型 2 例 : 口服羊哪镯根
片 (每 片含生药 0 . 3 9 ) 每次。 . 9~ 1 . 5 9 , 1
d 3 次 , 饭后服 。 有效者连服半年 , 若服 1
月无效者停用 。
结 果
动物实验结果见附表 : ①免疫荧光法检
查 : 阳性对照组兔肾小球内均可见中度到重
度的gI G颗粒形荧光 (图 1 ) ; 治疗组兔 肾
小球内可见轻度到中度 的 I g G 颗粒形荧光
(图 2 ) ; 用 U in v ar 显微分光光度计测定
附表 家兔实验性慢性肾炎阳性对照组和治疗组 的主要变化
分 兔
光 镜
肾 小 球 肾小管 -
电 镜 尿蛋白
示全程化变致积密物沉攀小肾球底膜上合、变平消失上皮细胞足突肾 融小葵球底膜增厚
蛋白管型萎缩水变性浊肿细白胞浸润细胞数增多小肾球化硬新月体形成基底膜增厚血管间质基增多血管间质细胞增生
组 号
肾免
小
球疫
颗。
J戈粒
形光
土一 土
士 一 1, 卜
+ 哟 1, 1.
十 一十
土 时 +
士一 士
十-H+土++什士+土
什
6
8
9
1 3
+ 叶 ++ + 士 士 一 一 + 十 + +
什
一 一 + +
一+一+带份什工十上一+一+什+土士+阳性对
+
排份什+
璧 1`
土士十 土 一 一 十 + +
一 一 + 士 一
+ 叶 土
什 +- 一
+ 叶一
+ 叶 土
十叶一
士一 土
+ 一 土
十+- 一
+ 衬 士
士一 士
一士+十
土
土
士
+ 叶科
+
土一士土一一+一+一+一一一一一+十+十
一+士,`O`n甘O`4,几二Zn`内
组
注 : 士示 偶 见 , + 示轻度 , 什示中度 , 排示重度
gI G免疫荧光的强度 , 阳性对照组肾小球 gI G
免疫荧光强度 ` ( 见 土 s) 为60 . 39 士 12 . 53 ,
明显大于治疗组的 13 . 3 0 土 3 . 53 , 差异 有极
显 著 意 义 ( t = 2 0 . 27 , p < 0 . 0 1 ) 。 ② 光
镜下 : 阳性对照组 6 只兔中 , 3 只分别于免
疫后 9 ~ 13 周形成慢性硬化性肾小球肾炎 ,
多数肾小球呈不同程度的玻璃样变 、 纤维化 ,
相应的肾小管萎缩 、 消失 , 少数肾小球可见
上皮性新月体以至纤维性新月体 , 少数肾球
囊腔内含均质红染的纤维蛋白 , 肾小管管腔
内可见蛋白管型 (图 3 ) 。 另 3 只兔呈增生
性肾小球肾炎改变 。肝组织切片 , 镜 下 见 肝
0 20
细胞浊肿及轻度脂肪变性 。 治疗组兔镜下见
部分肾组织呈轻度增生性肾小球肾炎改变 。
另一部分兔的肾组织仅见肾小球毛细血管丛
内血管间质细胞增生 , 血管间质基质轻度增
多 , 或是肾小球毛细血管基底膜程度不等的
增厚 , ’肾小管上皮细胞呈浊肿和轻度水变性
(图 4 ) , 未见肾小球玻璃样变及纤维化 。 肝
组织切片 , 镜下见少数肝细胞浊肿及轻度脂
肪变性 。 ③透射电镜观察 : 阳性对照组大多
数兔肾小球毛细血管基底膜上有程度不等的
电子致密物沉积 ,足突融合 、 变平坦 , 基底膜
不规则增厚 (图 5 ) ; 治疗组部分兔的肾小
球毛细血管基底膜不规则增厚 , 可见少量电
子致密物沉积 , 偶见上皮细胞足突 融 合 变
平坦 (图 6 ) 。 治疗组免肾小管上皮细胞及
肝细胞除线粒体轻度肿胀外 , 未见其他明显
变化 。 ④尿的变化 : 阳性对照组兔尿蛋白为
“ 士~ + ” ;治疗组兔在用药 4 ~ 8 周后尿蛋
白逐渐减轻至消失 。
临床疗效观察 : 10 例病人中 , 9 例有程
度不等的水肿 , 治疗后 8 例水肿消退 ; 4 例
血压升高 , 治疗后 3 例恢复正常 : 10 例均有
蛋白尿 ( -H ~ 拼 ) , 治疗后 4 例尿蛋白消失 ,
4例逐渐减少至 ( + ) 时持续存在 , 继发性
肾病综合征 (狼疮性肾炎 ) 2 例蛋白尿无明
显疗效 。 10 例病人中 2 例食欲稍减退 , 无其
他明显副反应 。
病变与人类慢性硬化性肾小球肾炎相似 , 如
肾小球玻璃样变、 纤维化等 。 这为深入研究
慢性肾小球肾炎的发病机理提供了有用的动
物模型 。 至于为何有的动物诱发出慢性硬化
性肾小球肾炎 , 有的为增生性肾小球肾炎 ,
可能与动物免疫反应的个体差异有关 。
羊哪踢 (R h o d o d e n d r o n M o l l e G . D o n )
为杜鹃花科植物 , 其花为闹洋花 , 果实为八
里麻 , 均有镇痛、 镇静和降压作用 〔们 , 其根
制剂对风湿性及类风湿性关节炎 有 一 定疗
效 〔’ 1 。我们的实验结果及临床资料表明 :羊哪
镯根不仅能减轻和消除蛋白尿 、 水肿及高血
压 , 而且对病变的发展有一定的控制作用 ,
提示羊哪镯根制剂可能通过抑制免疫反应而
影响循环免疫复合物肾炎的病理过程 。
(本图 l ~ 6 见第2 1 6页 )
参 考 文 献
讨 论
人类慢性肾小球肾炎的动物模型有些已
能复制 〔“一 6 1 , 但与人类慢性硬化性肾小 球肾
炎相似的动物模型 , 则少见报道 。 本文用小剂
只B s A反复多次静脉注射 , 于免疫后 9 一 13
周复制成功家兔慢性硬化性肾小球肾炎 , 其
孙 逢 , 张 炜 . 复方闹洋花侧根治疗风湿
性 、 类风湿性关节炎10 0例 . 新医学 1 97 :
s ( 3 ) : 1 2 2
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A l b i n i B
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T he im m u n o P a t h o l o g y
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D a r m a d y E M
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M a e vl e r A G
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I m m u n o -
l o g i e a l b a s i s o f g l o m e r u l a r d i s e a s e
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( 1 0 5。年 l 月 1 9 日收稿 )
2 0 1
E x Pe r im e nt a l a nd Cl i nie a l S t ud ie s o nChr o nie
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Cl o m e r ul o ne
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M o l l e G
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D o n
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,
P e n g J i e q i n g
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r o o t s o f t h e R h o d o d e n d r o n M o l l e G
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M e a n w h i l e
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a n d t h e u r i n a r y p r o t e i n w a s b e tw e e n
“ 士一 什 ” . I n r a b b i t s o f t h e t r e a t e d g r o u p a n d
P a t i e n t s
, a l l p a t h o l o g i e a l e h a n g e s a n d s y m p t o m s o b v i o u s l y s u b s i d e d o r d i s a p P e a r e d
.
T h e r e s u l t s s u g g e s t e d t h a t t h e r e P e a t e d d e P o s i t s o f e i r e u l a t o r y i m m u n e e o m P l e x
m i g h t i n d u e e r a b b i t e h r o n i e s e l e r o t i e g l o m e r u l o n e P h r i t i s s i m i l a r t o t h a t o f h u m a n
b e i n g s
.
T h e r o o t s o f R h o d o d e n d r o n M o l l e G
.
D o n e o u ld e o n t r o l a n d e u r e t h e p a t h o 一
l o g i e a l e h a n g e s a n d t h e s y m P t o m s P r o b a b l y b y d e P r e s s i n g i m m u n o P a t h o g e n e t i e
m e C h a n i s m
K e y w o r d s g l o m e r u l o n e P h r l t i s ; i m m u n e e o m P le x d i s e a s e ; R h o d o d e n d r o n M O l l e
G
.
D o n ; f l u o r e s e e n t a n t i b o d y t e e h n i q u e
甲状腺激素对大白鼠骨代谢的实验研究
〔T 桂芝 , H . W . M i n n e 。 中华医学杂志 1 9 9 0 ; 7 0 ( 4 ) : 1 9 8〕
本文为进一步了解甲状腺激素对骨代谢的影响 , 对手术切除甲状腺的大鼠进行了骨的物理学和组织学等
方面多项检测指标的实验研究 . 并通过外源性甲状腺激素的替代治疗观察其疗效 。 实验 结 果表明甲状腺激素
减少或缺乏可致骨质疏松 , 与正常对照组相 比 , 除血清钙外 , 各项检测指 标 差 异 均 有 显著性意义 ( p <
0
.
0 5 ~ 。 . 0 1 ) 。 T `的替代治疗可部分抑制骨质减少 , 与未给 T ;替代治疗组 比较 , 绝大多数观测指标差异显
著。 在 T 3 、 T `水平相等时 , 甲状腺全切后的大鼠骨质减少可能是由于降钙素缺乏所致 。
21 6
羊掷踢根治疗慢性肾小球肾炎的实验及临床研究
〔正 文 见第1 9 8页〕
口 1
日 2
圈 3
阅
圈 4
田 5
曰 6
阳性对照组兔 , 免疫荧光显示肾小球内中度到重度gI G 呈颗粒状沉积于毛细血管壁 x 20 。
治疗组兔 , 免疫荧光显示肾小球内轻度到中度 I g G 呈颗粒状沉积于毛细血管壁 x 20 0
阳性对照组兔 , 肾小球玻璃样变 、 纤维化 , 肾小管萎缩 、 ’ 扩大 , 肾小管管腔 内 可 见蛋白管
型 H E x 2 0 0
治疗组兔 , 肾小球血管间质细胞轻度增生 , 基质轻度增多 H E x 2 0
阳性对照组兔 , 肾小球毛细血管基底膜有电子致密物 ( D ) 沉积 , 基底膜不规则增厚 , 足突
( P ) 变平坦 、 融合 x 1 5 5 0 0
治疗组兔 , 肾小球毛细血管基底膜有电子致密物 ( D ) 沉积 , 肾小球毛细血管基底膜 及 足
突 ( P ) 无明显改变 只 1 7 5 0 0