全 文 ：苏州医学院学报 A T c冉 A c月 )臼司人 E M吃 D l。叫人五 , 刀” 。幻 19 9 5 ; ! 5 ( 2 ) : 2 4 1
黄樟油的毒性研究
苏州医学院职」匕扁学教研室 章 瑜 陈跃进
摘共 对黄樟油的急性毒性 、 蓄积毒性及致突变性 、胚胎毒性等实验研究结果 ,小鼠经口 山50
为 25 21 口侧 gk (雄 )和 2 178gm / gk (雌 ) ;采取定期递增法灌 胃染毒测试蓄积系数为 3 . 3 ;致突变试验
中 , 3组受试动物的徽核发生率均明显高于对照组 ;精子崎变试验未发现有明显异常 ;从胚胎毒性的
3 项指标判断 ,显示黄糠油具有胚胎毒性效应 .
关性润 黄樟油 ;蓄积毒性 .致突变 ;胚胎毒性
中圈法分类 9R 洲 · 3
黄樟油中含黄樟素 ( oS 台 od 。 ) , 是天然香
精 , 曾用作食品添加剂 。 近年来 , 国外报道黄
樟素可诱发肝脏肿瘤 , 已禁用于食品 。但由于
有较好的经济价值 ,其应用仍受到重视 . 为
此 ,我们对黄棒油进行毒性研究 。
材 料 与 方 法
黄棒油由核工业总公司某厂提供 . 实验用昆明
种小白鼠由本院动物实验中心纯种公殖 。
一 、 急性毒性试验 : 小白鼠 , 体重 18 ~ 2龙 ,雌雄
各半 . 随机分组 。 根据预试验结果设计各组给药荆
量一次经口染毒 ,观察 1d4 ,记录中毒症状及死亡动
物数。 用 E汤均田 法计半数致死 t ( l工喻 )及 95 %可里
信区 。
二 、 蓄积试验 :小白眼 ,体重 18 ~ 2 9 ,雌雄各半 ,
每天空腹灌胃染毒 ,忆 为 l 个周期 ,第 1周期每天以
0
.
I L D喻染毒 , 以后各期均按等比级数 1 . 5 倍逐级递
增 ,直至半数动物死亡为止 ,计算其蓄积系数 (瓦 . ) 。
一髦纂篡黑器 乙氏 . ( .)乙氏。 ( l )
K < l 为高度 , 积 , 1~ 明显蓄积 , 3~ 中度蓄积 , > 5
轻度蓄积 。
二 、肝重系数侧定 : 小鼠 30 只 ,体重 20 ~ 2如 ,雌
雄各半 , 随机分成 3 组 ,每组 10 只 ,分别以不同剂 t
灌胃给药 ,并于 d7 、 Z dl 后处死 ,称肝湿重和体重 ,求
出两者比例即肝重系数 .
四 、 致突变试验 :
(一 )骨曰嗜多染红细胞 ( P C E )徽核试验 : 小白鼠
24 只 ,体重 25 ~ 309 ,雌雄各半 ,设 4 组 ,每组 6 只 。其
中 2 个组为受试组 ,分别以不同剂 t 给药 ; 阳性对照
组腹腔注射环成酸胺 3 0rI 唱 /kg ; 阴性挤寸照组腹腔注射
受试的溶剂 . 各组给药 3伪 后 ,脱颈处死 ,取股骨骨
位涂片 ,。协m ” 染色 ,油镜砚察 ,每只动物计数 100
个 P℃E ,求出每组平均代王徽核发生率 (%: ) 。
(二 )精子叻变试验 : 成年雄性小鼠 27 只 ,体重
2 5~ 3呢 ,随机分组 ,取受试物设 l /5 、 l八。 、 I / 20 1刀` o
3 个荆 t 组 ,每组 5 只 ,灌胃给药 ,连续 加 ,每天 l 次 ;
另设阳性对照组 (6 只 )腹腔注射环碑酸胺 40n 艳 / k8 ;
阴性对照组 (6 只 )为受试物溶剂 . 4 周后颈椎脱日处
死 ,取附攀侧片 , 镜下 ( 4 0 x 10 )计算每片中 20 0 0 个
精子中崎变的精子数 ,求出每组平均崎变率。 精子崎
形的分类按 w 砂d 州匕方法进行 。
五 、 胚胎毒性试验 : 小鼠体! 25 ~ 3呢 ,按雌雄 2
:
l 的比例合笼交配 ,连续 4 天 , 于文配次日晨查到
阴道栓即为妊振 O天 ,确定为孕鼠后 ,随机将其分配
到各实验组及对照组 ,每组孕眼 9 只 。 实验高剂 t 组
为雌性动物半教致死盆的 1/ 10 , 实验低剂 t 组为双
性动物半数致死 t 的 1/ 30 。 各组于受孕第 9 天一次
性滋胃染毒 ,第 19 天处死 ,计算平均母鼠增 ! 、 胎鼠
体重 、 死胎率等指标 .
结 果
一 、二性毒性试验 : 用黄林油一次性灌胃给药 h4
后 ,出砚静卧 . 少动 ,心睡 . 高荆最组于染毒后 2b6 开
始有死亡 . 7助死亡最多 ,死亡动物仅有肝脏充血 、肿
胀 . 连掩砚察 1d4 后 .雄性 L D响为 2 52 l srn / kg , 95 %可
信限 为 289 5~ 21 9如盯 kg .雌性 L D S。 为 21 78 吨 / kg .
·
2 42
· 苏州医学院学报 第 15 卷
95 %可信限为 25 35 ~ 18 0加咯 /gk .
二 、 蓄积试毅 :结果见附表 。 说明染毒至第 `个
周期 ,即染毒荆盆达 3 . 2` 比喃时 ,半数动物死亡 ,其
蓄积系数 K- 二 3 . 3 ,黄棒油具中等蓄积作用 .
附农 蓄积毒性试毅结果
染 毒 天 数 (d)
l ~ 4 5~ 8 9 ~ 12 13~ 16 17~ 20
作用
讨 论
石o2’02.卜每天染毒荆t
( U入. )
定期染毒总t
( I工肠 )
只积荆 t
( 1工喃 )
动物死亡数
(只 )
累积动物
死亡数 (只 )
.0 1 .0 15
氏 4 0 。 6
.0 2 0
.
3 4
仪 召吕 l 。 3 6
氏 4 1 . 0 1。 朋 3 。 2 4
三 、 肝重系数测定 : 7 天后处 死 : 正常组 为
0
.
0峨7 3 , 2 0 刁哪 /比 (雌 )组为 .0 0阳 7 , 2 6月5吐召 /枯 (雄 )
组为 氏 07 7 6 . 给药组与对照组有显著差异 (P <
0
.
0 1 )
.
2 1 天后处死 :正常组为 0 . 046 7 , l / 30 1工喻组
为 0 . 06 2 6 , 1/ 10 1工喃组为 。 . 07 05 ,给药组与对照组
有显著差异 ( P < 0 . 0 1 ) 。 说明无论是高剂t 短时间还
.是较低剂量长时间给药都明显引起肝脏肿大。
四 、致突变试验 :
〔一 )jJ 、 鼠骨髓嗜多染红细胞试验 :黄樟油诱发
P C E 微核发 生率 (写。 ) : 别% L认 。组 为 括 . 沙, 40 %
以飞。组为 1 5 . 8 . 阳性对照组 为 26 . 3 , 哭性对照组 为
3
.
8
。 各受试组与阴性对照组有显著差异 ( P < 。 . 0 1 ) .
(二 )精子崎变试验 :精子晴变串 (% ) : 15/ L珠。
组为 2 . 3士 0 . 3 , 1/ 1 0 L D ` o组为 2 . 8士 0 . 7 , 1 / 20 L D物
组为 2 . 9土 0 . 8 ,阳性对照组为 12 . 9士 0 . 8 ,阴性对照
组为 2 . e 士 G. 8 。 版性对照组 一与另 刁组比均有显著差
异 (P < 。 . 01 ) ,其他各组间无差别 。
五 、 胚胎毒性试验 : (l )母鼠增重 : 阴性对照组为
3 1
.
4 8
,
1八 0 L D ` o组为 9 . 17 9 , l / 3 0 L D ` o组为 1 0 . 049 。
(2 )胎鼠体重 : 阴性对照组为 1 . 3刁士。 . 3 39 , 1 / 3 0 1刀肠
组为 0 . 65 士 0 . 2 8 9 ( 1 ,l O DL “ 组 由于胎鼠体重过小 ,
无 法称重 , 未计算 ) . (3 )死胎率 : 阴性对照组为
2
.
8%
,
l / 5 0 11 、 。 组 为 33 . 3% , 1 / 10 L D `。 组 为
6 .0 8 %
.
3 项指标侧定结果 ,各染毒组与对照组比较
均有显著性差异 (P < 0 . 0 1 ) ,提示黄樟油具有胚胎毒
近年来认为黄棒素主要诱发荃因突变
( 小鼠琳巴瘤细胞 ) 、 D N 人 报伤 (大鼠肝细脸 )
及诱发肝癌:l[ .黄樟素可引起生长抑制 、体重
减轻 、 器官 ( 胃 、生殖腺等 )萎缩 、组织细胞变
性 。 其中肝脏变化最为明显 ,表现为肝肿大 、
坏死 、硬结形成等 。 美国 J
~
仄将其列为可
疑致癌物 ,其作用花器官可能为肝脏 。本实验
研究急性经 口毒性洲定结果与文献优报道小
鼠经 口 DL . 2 35 0m s /妞相似 。 根据我国工业
毒性分级属低毒类 ,而根据近年来多数国家
采用的 4级分类法属中等毒 。 蓄积系数侧定
为 3 . 3 ,属中等蓄积性 ,具慢性损伤的基本条
件 。 肝湿重与体重之比 ,各给药组明显高于对
照组 ,表明黄樟油对肝脏毒性明显 ,与文献 :a[
报道一致 . 致突变试验中 , 3 个剂量的微核发
生率均明显高于阴性对照组 , 说明该受试物
可能引起骨俄嗜多染红细胞染色体丢失或断
裂 ,具细胞遗传毒性 . 从精子崎变率来看 ,该
物对小鼠精子发生 、 成熟过程无影响 ;从胚胎
毒性测试的 3 项指标判断 ,给药组母 鼠休重
明显减轻 ,胎 鼠体重未正常增重 ,死胎率明显
增加 ,表明黄樟油具有胚胎毒性效应 。
参 考 文 献
[月 J aJ 的es R C J 粉迁 C M . O盯。 侧脚斌奴 nI : 认几山~
p恤 n d bu 价洲月 1 几 (班知 ) 打目u st 刘 t o幻田城罗 . 黝 f成 )
a闻 H妇目ht A P 往 , d。山 加此 W b rkP达巴 陇 w y 公 K
1 9 85 . 30 1
〔2」Rd吮” EJ , 戊 ia . P” 。 d p l. 田目 功戊 bods of t沮次动雌汀
r a v 。、 N 口胃 丫时k 1 982 ; 7 9
〔3〕李寿其 ,等 . 卫生毒理学 成都 : 四川科技出版
社 ` 198 7 : 2 43
〔刃黄幸舒 ,等 . 环境化学物致突变 、 致崎 、 致痛试验
方法 杭州 · 浙江科学技术出版社 198 5 , 2 20
( l ” 4 年 3 月 2 5 日收稿 )