全 文 ：1 9 9 9 年 5 月
第 2 期 (总第 4 9 期 )
中 国 林 副 特 产
Q
u a r t e r l y o f F o r e s t B y
一
P r o d u c t a n d S P e e i a l i t y i n C h in a
N o
.
2 ( G S N O
.
4夕)
M
a 夕 . 1 99夕
大 叶染 胡炮制后 主要 药理作 用 的实脸研究
. 干翔龙 原雪梅 杨桂英 徐 晓
. 黑龙江省中医研究院 (哈尔滨 15 0 0 36)
摘 要 大叶某胡伞形科多年生草木植物 , 因有毒性 . 被停止使用 。此文通过加工炮制后对其药效进行 了相关的实
验研究 , 结 果表 明 : 对内毒素致热后 的家兔解 热实验效果显著 ;镇痛作用与柒胡相似 , 杭炎作用优于桑 胡 , 杭 肝损伤
作用与某胡相似 。 实脸显示 : 炮制后 的大叶架胡具有菜胡类似的作用 , 为其应用提供一定依据 。
关链词 大叶菜 胡 炮制 药效
分类号 R 2 8 3 . 1
大叶柴胡 B u p l e u r u m lo n g i r a d i r a t u m T u r e : . 7 0 年 扭体反应 (腹部内凹 . 伸展后肢 , 臂部抬高 )和扭体次数 ,
代前曾作为柴胡广泛应用 , 后因发生中毒事件而被停止
使用 。作者通过加工炮制消除其毒性成分 , 同时 , 对 其炮
制后的大叶柴胡进行了毒性及药效试验 , 通过与柴胡作
对照 , 取得可喜结果 。
l 实验材料
1
.
1 动物 昆明种小鼠 , 雌雄各半 , 体重 2 0 士 2 9 。 s D
大鼠 , 雌雄兼有 , 1 4 0 士 2 0 9 。均由黑龙江中医药大学实验
动物中心提供 。饲养环境安静 , 室温 16 一 18 ℃ , 自然照
明 。
1
.
2 药物与试剂 大叶柴胡炮制品 , 由本课题组采于
黑龙江省阿城县 。炮制方法略 。经水煎煮后制成 1 : l 浓
度 , 临用时以蒸馏水配制成所需浓度 。柴胡对照液 : 由本
院中药饮片药局提供 , 同法制成与大叶柴胡相同煎煮
液 。四氯化碳 :郑州市化学试剂三厂生产 , 批号 : 9 4 0 5 1 5 ,
临用时用花生油稀释成一定浓度 ( v / v ) 。细菌内毒素国
家标准品 : 中国药品生物制品检定所生 产 , 批号 ( lot )
9 6 2
, 单位 7 2 0 0 E u ( U n i t / A m p ) 。 D 一 半乳 糖胺 ( D 一
G al
n
)
: 由哈尔滨医科大学公共 卫 生学院提供 。 6 . 5%
D 一 G al n 溶液配 制 : 称取 G al n 样 品 6 . 5 9 , 溶 解于
80 ml
、
0
.
9 % 消毒生理盐水中 , 在电动磁 力搅拌器搅拌
下 , 以酸度计监测用 l m ol / L 的氢氧化钠溶液调 pH 值
至 7 , 最后再加 0 . 9 % 消毒生理 盐水使溶液至 10 0m l , 置
冰箱中备用 。仪器 : 自动生化分析仪 c O B A s M I R A (瑞
士 ) 。
2 方法和结果
2
.
1 对小鼠的镇痛作用 取健康小鼠 ( 2 0 士 2 9 ) 80 只 ,
雌雄各半 , 随机分为 4 组 , 分别为空白对照组 (等容量蒸
馏水 ) , 柴胡对照组 (柴胡水煎液 9 . 9 9 / k g ) , 大叶柴胡大
剂量组 (大叶柴胡水煎液 9 , 9 9 / k g ) , 大叶柴胡小剂量组
(大叶柴胡水煎液 3 . 3 9 / k g ) , 按上述剂量分别灌 胃给
药 , 一 日一次 , 连续 7 天 。于最后一次给药 30 分钟后 . 各
鼠均腹腔注射 0 . 6 % 醋酸 0 . 2m l/ 只 , 观察各组小鼠出现
收稿 日期 : 1 9 98一 0 7一 0 2
结果如表 1 。
表 1 炮制大叶柴胡对小民的镇痛作用
组别 动物数 给药剂量 扭体反应
(
n
) ( g / k g ) 数 (只 )
蒸馏水 20 等容量 16
柴胡 2 0 9 . 9 6
大叶柴胡 (大剂量 ) 2 0 9 . 9 5
大叶柴胡 (小剂量 ) 2 0 3 . 3 7
表 1 可见 , 大叶柴胡及柴胡 3 种剂量均可抑制小鼠
的扭体反应 。
2
.
2 炮制大叶柴胡对蛋清所致的大鼠脚肿胀抗炎作
用 。
2
.
2
.
1 鸡蛋清的配制 : 取新鲜鸡蛋一只 , 于顶端轻敲
一孔 , 倒 出蛋清于小烧杯内 , 用细玻璃棒搅拌蛋清使均
匀 , 即刻使用 。
2
.
2
.
2 取健康大鼠 ( 12 0一 150 9 ) 4 0 只 , 雌雄兼有 , 随机
分成 4 组 , 空 白组 (等容量生理盐水 ) , 阳性对照组 (柴胡
提取液 4 . 5 9 / kg ) , 大剂量大叶柴胡组 (大叶柴胡提取液
4
.
5 9 / k g )
, 小剂量组 (大叶柴胡提取液 1 . 5 9 / k g ) , 分别
户减一司从屯卜
: , . _ ~ 心一 ~ 、 夭二 2 。 。` . 。 。
, 龟 . 州 . 口口 .
黝羁黔犷ù%.l
士一一一弓一一 《勺
, ` , `
图 1 大叶柴胡对大鼠蛋清肿胀的影响
— 生 理 盐水 . △一△ 柴胡 . … … 小剂 t 大叶柴胡 .一 · 一大剂量大叶柴胡
DOI : 10. 13268 /j . cnki . f bsic . 1999. 02. 015
1 99 9 年 5 月 于翔龙等 :大叶柴胡炮制后主要药理作用的实验研究 第 2期
按上述剂量每天灌胃给药一次 , 连续 7 天 。于最 后一天
给药 1 小时后用注射器吸取刚配制好的蛋清 , 注入大鼠
左后脚跟皮下 (每鼠左后脚爪正面上端用圆珠笔作一清
晰横线 , 排水法测鼠爪体积 ) , 然后于 0 . 5 、 l 、 2 、 4 、 8 、 12
及 16 小时各测鼠爪体积 1 次 。计算鼠爪肿胀百分率 。结
果如图 o1
图 1 显示 大叶柴胡具有明 显的抗炎作用 , 而 且优
于柴胡 。
2
.
2
.
3 对内毒素所致家兔发热作用 内毒素标准液
配制 : 取定量内毒素标准试剂一支 (含内毒素 72 0 E u)
加新制备的注射用生理盐水溶解 , 稀释为 25 6血 / m l。
实验方法 :取健康合格家免 2 0 只 , 按基 础体温层随
机分为 5 组 , 第 1组给同体积生理盐水 , 第 2 、 3 、 4 组分
别用人导尿管经 口向兔胃内灌入大 叶柴 胡提取液 ( 1 :
l ) 2
.
5
、
5
、 ·
7
.
5 9 / k g
, 第 5 组灌入柴胡提取液 5 9 / k g 。给药
·后 l 小时 , 每只兔均从耳缘静脉注射 内毒素 2 5 6 n g / m l
( l m l/ k目 , 于内毒素攻击后每小时各测 一体温 l 次 。 以药
前 2 次 (每 30 分钟测一次 )体温平均值为基数 , 计算各
测定时间兔体温的变化 (△℃ ) , 以此为纵座标 , 以时间
为横座标作图 , 以各测定点体 温作 t 测验统计 , 测定结
果如图 o2
叶柴胡与柴胡都具有显著解热作用 , 且有明显量效关
系 。
2
.
2
.
4 抗肝损伤作用实验
2
.
2
.
4
.
1 对 D 一 半乳糖胺所致小鼠急性肝损伤模型
的作用 取健康小鼠 ( 20 士 2 9 ) 5 0 只 , 雄性 , 随机分为 5
组 : 空白组 , D 一半乳糖胺模型组 , 阳性对照组 , 大叶柴
胡高 、 低剂量组 , 每组 10 只 。 大叶柴胡分别按 3 . 3 、
9
.
9 9 k/ g
, 阳性组按 0 . 2 9 / k g 剂量灌胃同容积联苯双
醋 ;空白组灌胃同容积生理盐水 , 每日灌胃给药一次 , 连
续 7 天 , 于最后一次给药后 l 小时 , 除空白组外 , 其余各
组 小 鼠按 0 . 2 9 / k g 剂 量 给 小 鼠 腹 腔 注 射 D 一
G a l
n o
.
Zm 一/ 20 9 ( 6 5m g / m l ) (腹腔注射前动物禁食不禁
水 ) 2 4 小时后 , 由眼眶摘眼球取血 , 分离血清 , 在自动生
化分析仪上测血清 SG P T 含量 , 结果见表 2o
表 2 大叶柴胡对D一半乳枯按急性肝损伤作用影响( X士 SD )
组 别 动物数 剂量 ( g k/ g ) S G P T
空白对照组
模型对照组
联苯双醋组
高剂量组
低剂量组
l 0
l 0
0
.
2
9
.
9
3
.
3
2 2
.
58 士 1 0 . 14
6 1
.
56 士 1 0 . 9 4
2 6
.
8 1 士 1 0 . 2 4
2 5
.
17 士 1 2 . 2 0
3 7
.
4 0 士 1 2 . 9 8
0
泊 .1J1主
图 2 大叶柴胡对家兔致热作用的影响 ( n = 5)
一 一生理盐水 口一口大叶柴胡 7 . 5 9 / k g 又 … x 柴胡△一△大叶柴胡 5 . 0 9 / k g o 一O 大叶柴胡 2 . 59 / k g
如图所示 , 推注 内毒素后家兔体温开始上 升 , 1一 2
小时峰值为最高 。此后体温稳定于此各有下降 , 至第 3
或 4 小时时再度升高而后逐渐下降 。 实验 表明 , 炮制大
结果所示 : 大叶柴胡 对 D 一半乳糖胺所致小 鼠急
性肝损伤有 明显保护作用 。
2
.
2
.
4
.
2 大叶柴胡对 四氯化碳造成大鼠慢性 肝损伤
保护作用观察 取体重 ( 1 4 0 士 2 0 9 )健康大 鼠 50 只 , 随机
分为正常组 , 高 、 低剂量组 , 肝损伤模型组 , 阳性组 , 每组
10 只 。除正常组外 ,余各组由皮下注射 10 % 四氯化碳花
生油 0 . s m l/ l o o g , 每周 2 次 , 连续 8 周造 成四氯化碳慢
性肝 损伤动物模型 。从实验第二天开始给药 , 试验组按
1
.
5
、
4
.
5 9 / k g 剂量 、 每 日给大鼠灌胃大叶柴胡提取物
( l
: l ) l m l / 1 0 0 9 体重 , 阳性组按 0 . 0 5 9 / k g 剂量灌胃同
体积联苯双醋 , 正常组灌胃同体积生理盐水 。 按上述容
量每日给药一次 ,连续 8 周 , 于末次给药 24 小时后 , 处
死动物取血 , 分离血清 、 于 自动 生化分析仪 上测定血清
表 3
组别
正常对照组
C C L
联苯双醋组
大叶柴胡 (低 )
大叶柴胡 (高 )
剂量 ( g / k g )
大叶柴胡对 C C L造成大鼠慢性肝损伤保护作用影响
T P ( g / L ) A L B ( g / L ) G P T (
u
)
0
.
0 5
4
.
5
6 7
.
5 士 5 . 0 2
39
,
6 士 2 . 1 1
5 2
.
9 士 3 . 1 2 嵌
4 1
.
8 士 4 . 0 4
5 0
.
4 士 4 . 0 4 嵌
4 0
.
1 士 1 . 9 2
23
.
4 士 1 . 16
3 2
.
2 土 2 . 4 1浓
2 5
.
1 士 1 . 79
32
.
1 士2 . 14 浓
6 2
.
2 士 8 . 0 4
1 9 3
.
5 土 31 . 3
1 7 2
.
3 士 1 5 . 8 嵌 浓
1 2 0
.
4 士 1 0 . 80
7 3
.
8 士 1 4 . 1米 米
经脯氨酸 ( m g / 1 0 0 9 )
0
.
8 9 土 0 . 0 8
2
.
1 1 士 0 . 1 1
1
.
6 9 士 . 0 . 1 3 嵌
2
.
0 1 士 0 . 12
1
.
5 4 土 0 . 1 2 嵌
注 : 与正常组比△ P < 0 . 0 5 , 与模型组 比卒 P < 0 . 05 嵌 嵌 P < 0 . 01
9 199 年 5 月
第 2期 (总第 4 9 期 )
中 国 林 副 特 产
Q
u a rt e rly o fF o rs et B y
一
Po rd u et a n d S P e ei a l i ty i n Ch i n a
N o
.
2( G S N O
,
4 9 )
M
a 夕 . 1 9 9 9
甜菊生长规律与丰产栽侣技束回研究
. 王禹斌 黑龙江省第一林业调查规划设计院 (巧 7 00 9)
. 孙岳撤 牡丹江林业科学研究所
甜菊 S t a v ia : e b a u d i a n a B e r t o n i 属菊科多年生短
日照草本植物 , 又名甜叶菊 , 甜草 , 原产南美高海拔地
区 。我国 7 0 年代从 日本引进 , 目前 , 北从黑龙江海林 , 南
到海南岛 , 东起山东半岛 , 西 至新疆塔城都有栽培 。
甜菊喜温 湿 , 较耐寒冷和瘩薄 , 病虫害少 , 适 应性
强 。是高甜度 , 低热能安全无副作用的天然糖料 。
1 试验地点 、 材料与方法
1
.
1 试验地点 试验地点设在牡丹江林业科学研究
所青梅试验 站 。地理位置 为东经 1 2 9’ 42 ’ , 北纬 4 4’ 40 ` ;
年平均气温 3 . 7℃ ;无 霜期 130 天 ; 初霜 日 9 月 2 2 日 ;
终霜 日 5 月 1 3 日 。
1
.
2 试验材料 试验材料为以种子繁殖培育的当年
苗 。
1
.
3 试验方法 移栽前对土壤 深翻 细整 , 每亩施有机
肥 5 0 0 0 k g , 而后做 垄 , 垄距 7 0 e m 。
2 结果与分析
2
.
1 甜菊生 长规律的研 究 从 7 月 10 日至 9 月 10
日 , 对甜菊的高生长和叶生长作跟踪 观测 , 每 5 天观测
一次 。结果见图 1。
由 图 1 中可 以看 出 5 月 23 日 移栽的甜菊在 7 月
2 0 日和 8 月 5 日左右出现 两个生长高峰 。而 5 月 29 日
和 6 月 5 日移栽的 只在 7 月 2 0 日后 出一次生长高峰 ,
且 比 5 月 23 日移栽的甜菊第一次生长高峰滞后 。 由此
可见 , 适时早移栽是甜菊丰产的重要因素之一 , 并在生
长高峰前做好田间管理和追肥工作 。
夕, 矛阅 乒拍
图 1不同移栽时间 日均高 生长蛋曲线
注 : 一 5月 23 日移栽 … 5月 29 日移栽 … … 6 月 5 日移栽
2
.
2 甜菊苗等级对成活率及干叶产量的影响 将甜
菊苗按地径分 为三 级 , I 级 > 2 . s m m 、 n 级 1 . 5 一
2
.
s m m
、
m级 < 1 . s m m , 试验结果表明 , 不 同苗径级对
甜菊移栽成活率和干叶产量具有一定的影响 , 见表 1 。
表 l 不同径级甜菊苗的成活率及单株干叶产 t
径级 成活率 ( % ) 单株干叶产量 ( g ) 增产率 ( % )
1 9 1
.
5 2 3
.
9 1 3 2
1 8 6
.
1 2 1
.
4 1 1 8
.
2
1 7 7
.
2 1 8
.
1 1 0 0
T P
、
A L B
、
G P T
。 取肝左 叶固定于 10 % 福尔马林液中 ,
常规石 腊切片 , 作 H E 染色 , 光镜下做病理组 织学检查 。
余下肝组织放 入 95 % 乙醇脱脂半 日 , 在提取器 中用丙
酮脱脂两天 , 取 出 , 在 110 ℃ 烘箱中烘干 , 磨成粉末 。 测
定肝轻脯氨酸含量 。结果见表 3 。
从表 3 中得知 , 一定剂量的大叶柴胡炮制品提取物
对 C C L 造成的大鼠慢性肝损伤动物模型 、 所致 血 清
G P T 升高有明显降低作用 ;有明显增加血清蛋白 、 白蛋
白的含量 , 能显著降低肝轻 脯氨酸含量 。病理学检查 , 大
剂量组使肝损伤组织明显减轻 。
3 讨论
柴胡是常用中药 , 在临床中用量极大 。大叶柴胡在
7 0 年代前有应用 , 因发生中毒事件而被停止使用 。 本文
应用加工炮制的方法消除大叶柴胡毒性 、 应用毒理学 、
药理学进行了大叶柴胡炮制后的药效学 实验 。实验表
明 : 由大叶柴胡炮制后的提取 物经灌胃途径给药 , 对小
鼠、 大鼠 、 家兔等动物进行的解热 、 抗炎 、 镇病及抗肝损
伤等实验 , 其药理作用与药用柴胡相类似 , 而解热作用
优于柴胡 。为大叶柴胡的重新利用提供一 定依据 。但是 ,
柴胡的作用是多方面的 , 炮制后的大叶柴胡能否作为柴
胡应用 , 尚需进行深入研究 。
参考文献
1 赵吉福等 . 大叶柴胡的毒性成分 . 药学学报 , 19 87 , 22 ( 7) :
50 7一 5 1 1
2 于翔 龙等 . 大叶柴胡炮制去毒后化学成分变化的实验研
究 . 中国林副特产 , 19 9 8( l)
3 陈奇 主编 . 中药药理 研究方法 学 . 人 民卫生 出版社出版 ,
19 9 3
作者 简介 : 于翔 龙 , 男 , 1 9 51 年 出生 , 原籍山 东省蓬
莱县 , 副研 究员 , 毕业于 .嗽龙江 中医学院 中药来 , 先后获
省政府科技成果二 、 三 等奖 , 中医 局科技一 子奖 、 二千笑
及医药局成果奖多项 , 发表论文近五年十余篇 。