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柴胡、竹叶柴胡对小鼠的抗炎镇痛作用研究



全 文 :China Pharmacy 2012Vol.23No.47 中国药房 2012年第23卷第47期
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(收稿日期:2012-02-25修回日期:2012-06-17)*副主任医师。研究方向:中药临床药理。电话:0851-8 50111。
E-mail:puchunmei@medmail.com
柴胡、竹叶柴胡对小鼠的抗炎镇痛作用研究
杨 辉 1*,杨 亮 2,蒋 玲 2(1.贵阳市第一人民医院,贵阳 550002;2.贵阳中医学院第二附属医院,贵阳
550001)
中图分类号 R285;R97 文献标志码 A 文章编号 1001- 408(2012)47-4442-03
DOI 10.6039/j.issn.1001- 408.2012.47.10
摘 要 目的:研究柴胡、竹叶柴胡的抗炎、镇痛作用。方法:采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法观察受试样品的抗炎作用;采用热板
法观察受试样品的镇痛作用。结果:耳廓肿胀试验中,在12g·kg-1剂量下,柴胡、竹叶柴胡可使模型小鼠耳肿胀度显著降低(P<
0.01或P<0.05);热板法镇痛试验中,在12g·kg-1剂量下,柴胡、竹叶柴胡可使小鼠的痛阈值显著延长(P<0.05)。结论:柴胡、竹
叶柴胡均具抗炎与镇痛作用。
关键词 柴胡;竹叶柴胡;抗炎;镇痛
Study on the Anti-inflammatory and Analgesic Activities of Bupleurum chinense and B. marginatum
YANG Hui(Guiyang Municipal First People’s Hospital,Guiyang 550002,China)
YANG Liang,JIANG Ling(The Second Affiliated Hospital of Guiyang TCM College,Guiyang 550001,China)
ABSTRACT OBJECTIVE:To study anti-inflammatory and analgesic effects of Bupleurum chinense and B. marginatum. METH-
ODS:Anti-inflammatory and analgesic effects were observed by means of dimethylbenzene induced mice ear edema model and hot
plate method. RESULTS:In ear edema test,B. chinense and B. marginatum(12g·kg-1)could significantly inhibit the ear edema
(P<0.01or P<0.05),and could significantly extend the pain threshold(P<0.05). CONCLUSION:Both B. chinense and B. mar-
ginatum have anti-inflammatory and analgesic action.
KEY WORDS Bupleurm chinense;Bupleurm marginatum;Anti-inflammatory;Analgesia
􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂
中药柴胡在我国作为药材已有两千多年的历史。2010年
版《中国药典》(一部)[1]收载柴胡来源为伞形科植物柴胡 Bu-
pleurum chinense DC.或狭叶柴胡 B. scorzonerifolium Willd.的
干燥根。据本课题组调查,贵州、四川等地的医院、药房柴胡
使用混乱,大多处方开具柴胡,用的却是竹叶柴胡。竹叶柴胡
收载于2003年版《贵州省中药材、民族药材质量标准》[2],来源
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中国药房 2012年第23卷第47期 China Pharmacy 2012Vol.23No.47
为伞形科植物竹叶柴胡B. marginatum Wall.ex DC.与窄竹叶柴
胡 B. marginatum Wall. ex DC. var. stenophyllum(Wolff.)Shan
et Y. Li的干燥全草。竹叶柴胡抗炎、镇痛作用未见有文献报
道。因此,本课题组对柴胡、竹叶柴胡抗炎、镇痛的药效作用
进行初步研究,为临床合理、规范使用柴胡提供参考。
1 仪器与材料
1.1 仪器
YLS-B6型智能热板仪(安徽省淮北正华生物仪器设备有
限公司);JA-2003型电子天平(上海越平科学仪器有限公司)。
1.2 试药
柴胡(产地:四川,批号:20110301)、竹叶柴胡(产地:贵
州,批号:20110101)均购于贵州济仁堂中药饮片厂;二甲苯
(分析纯,重庆茂业化学试剂有限公司,批号:20110822);阿司
匹林肠溶片(石家庄康力药业有限公司,批号:110333);醋酸
泼尼松片(浙江仙琚制药股份有限公司,批号:110531)。
1.3 动物
昆明种小鼠200只,♀♂兼半,体重18~22g,由贵阳医学
院实验动物中心提供(动物合格证号:SCXK(黔)2002- 001)。
2 方法[3,4]
2.1 样品制备
分别取柴胡、竹叶柴胡适量,加10倍水浸泡0.5h、煎煮
0.5h,水煎煮3次,合并3次煎液,常压浓缩至稠浸膏(密度
1.15~1.20,60℃)。柴胡样品呈棕褐色浸膏,每1g浸膏样品
相当于原生药材6.061g;竹叶柴胡样品呈棕黄色浸膏,每1g
浸膏相当于原生药材6.618g。给药时以原生药材计。
2.2 抗炎实验
实验分为8组,即模型(等容蒸馏水)、醋酸泼尼松(5mg·
kg-1)和柴胡高、中、低剂量(12、6、3g·kg-1)组以及竹叶柴胡
高、中、低剂量(12、6、3g·kg-1)组。ig给药,每天1次,连续5
d。末次给药后1h,取0.02mL二甲苯均匀涂于小鼠右侧耳廓
前后两面,涂二甲苯后20min脱颈椎处死小鼠,剪下小鼠的两
耳,用打孔器在两耳的同一部位打下直径为6mm的耳片,分
别于电子天平上称重,并计算耳肿胀度:耳肿胀度=右耳片
重-左耳片重。
2.3 镇痛实验
取体重18~22g的♀昆明种小鼠,在热板仪(温度:55℃)
上逐一进行筛选,记录小鼠自放入热板仪中至出现添后足反
应所需时间为该小鼠的痛阈值,以痛阈值为5~30s的小鼠为
合格小鼠,将痛阈值<5s、>30s与容易出现跳跃反应的小鼠
剔除。取合格的小鼠80只,随机分成8组,即对照(等容蒸馏
水)、阿司匹林(0.15g·kg-1)和柴胡高、中、低剂量(12、6、3g·
kg-1)组以及竹叶柴胡高、中、低剂量(12、6、3g·kg-1)组。ig给
药,每天1次,连续5d。末次给药后1h,将各组小鼠置于温度
为55℃的热板仪上,观察小鼠出现的舔后足反应,测定其痛阈
值。
2.4 统计学方法
实验数据用SPSS17.0软件包进行统计,计量资料以x±s
表示,组间比较采用 t检验。P<0.05为差异有统计学意义。
3 结果
3.1 抗炎实验结果
与模型组比较,柴胡高剂量与竹叶柴胡高剂量组小鼠耳
肿胀度显著减轻(P<0.01或 P<0.05)。柴胡、竹叶柴胡对模
型小鼠耳肿胀度的影响见表1。
表1 柴胡、竹叶柴胡对模型小鼠耳肿胀度的影响(n=10)
Tab 1 Effect of B. chinenese and B. marginatum on ear ede-
ma of mice(n=10)
组别
模型组
柴胡高剂量组
柴胡中剂量组
柴胡低剂量组
竹叶柴胡高剂量组
竹叶柴胡中剂量组
竹叶柴胡低剂量组
醋酸泼尼松组
剂量/g·kg-1
-
12
6
3
12
6
3
5 mg·kg-1
耳肿胀度/g
6.5±2.01
3.4±2.63**
4.2±2.57
4.6±2.60
4.0±2.75*
5.7±2.11
5.3±1.49
2.0±1.63**
与模型组比较:*P<0.05,**P<0.01
vs.model group:*P<0.05,**P<0.01
3.2 镇痛实验结果
与对照组比较,柴胡高剂量与竹叶柴胡高剂量组小鼠痛
阈值显著升高(P<0.05)。柴胡、竹叶柴胡对模型小鼠痛阈值
的影响见表2。
表2 柴胡、竹叶柴胡对模型小鼠痛阈值的影响(n=10)
Tab 2 Effect of B. chinense and B. marginatum on pain
threshold of mice(n=10)
组别
对照组
柴胡高剂量组
柴胡中剂量组
柴胡低剂量组
竹叶柴胡高剂量组
竹叶柴胡中剂量组
竹叶柴胡低剂量组
阿司匹林组
剂量/g·kg-1
-
12
6
3
12
6
3
5 mg·kg-1
痛阈值/s
10.859±3.648
17.786±6.498*
13.230±4.314
13.074±2.24
16.139±6.455*
14.575±11.076
11.559±6.52
18.596±4.979**
与对照组比较:*P<0.05,**P<0.01
vs.control group:*P<0.05,**P<0.01
4 讨论
中医认为柴胡具有疏肝退热、舒肝解郁、升阳透疹的功
效。药理研究表明,柴胡的解热、抗病原微生物、抗炎、促进免
疫功能等作用是其和解表里功效的药效学基础;保肝、利胆、
降血脂、镇静、镇痛等是其疏肝解郁功效的体现;而其对内脏
平滑肌的作用可能与其升举阳气功效有关[5]。二甲苯致小鼠
耳廓肿胀实验和热板法镇痛实验为抗炎、镇痛的药效学经典
实验。本课题组采用这两种方法观察柴胡、竹叶柴胡的抗炎、
镇痛作用。结果显示,柴胡高剂量组与竹叶柴胡高剂量组小
鼠的耳廓肿胀度较模型组显著降低,柴胡高剂量组与竹叶柴
胡高剂量组小鼠的痛阈值较对照组明显延长,表明高剂量的
柴胡、竹叶柴胡均有抗炎与镇痛作用。同时实验数据表明,柴
胡、竹叶柴胡在抗炎、镇痛作用效果方面无显著性差异,因此
在用于抗炎、镇痛时,柴胡、竹叶柴胡在一定程度上可相互代
替。但由于柴胡、竹叶柴胡的抗炎、镇痛机制尚不清楚,临床
使用时,柴胡、竹叶柴胡是否可以混用,有待进一步研究。
(本研究由贵阳中医学院青年科研基金资助。)
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(收稿回日期:2012-01-06修回日期:2012-05-27)
*讲师。研究方向:分子药理。电话:0812-3911769
心脑肾康对脑缺血再灌注模型大鼠的保护作用研究
梁 岚*(攀枝花学院医学院,四川 攀枝花 617000)
中图分类号 R969.1;R971. 文献标志码 A 文章编号 1001- 408(2012)47-4444-02
DOI 10.6039/j.issn.1001- 408.2012.47.11
摘 要 目的:研究心脑肾康对脑缺血再灌注(MCAO)模型大鼠的保护作用。方法:以线栓法复制大鼠MCAO模型。实验分为6
组,即假阻断(等容生理盐水)、模型(等容生理盐水)、杏灵(2g·kg-1)与心脑肾康高、中、低剂量(32、16、8g·kg-1)组。测定大鼠大
脑皮层生化指标与血小板聚集阻率,TTC染色观察脑梗死病变范围。结果:与模型组比较,心脑肾康高、中、低剂量组大鼠脑梗死
范围显著减小,一氧化氮合酶、活性氧、丙二醛、乳酸水平显著降低,超氧化物歧化酶、三磷酸腺苷水平显著升高,血小板聚集阻率
显著升高(P<0.01)。结论:心脑肾康对脑缺血再灌注模型大鼠有一定保护作用。
关键词 脑缺血;心脑肾康;机制;作用
Protective Effect of Xinnao Shenkang on Cerebral Ischemia-reperfusion Model Rats
LIANG Lan(Medical School of Panzhihua College,Sichuan Panzhihua 617000,China)
ABSTRACT OBJECTIVE:To study the protective effect of Xinnao shenkang on cerebral ischemia model rats. METHODS:The
cerebral ischemia-reperfusion (MCAO) model was induced by thread occlusion method. Those model rats were divided into 6
groups,i.e. sham operation group(constant volume of normal saline),model group(constant volume of normal saline),Xingling
group(2g·kg-1)and Xinnao shenkang high-dose,medium-dose and low-dose groups(32,16,8g·kg-1). The brain tissue biochem-
ical index and platelet aggregation risistance index were determined,and range of cerebral infarction was observed by TTC staining.
RESULTS:Compared with model group,the range of cerebral infarction decreased significantly in Xinnao shenkang high-dose,
medium-dose and low-dose groups,and the levels of NOS,ROS,MDA and LA also decreased significantly. SOD and ATP levels
were increased significantly,and the platelet aggregation resistance index also increased significantly(P<0.01). CONCLUSION:
Xinnao shenkang on cerebral ischemia reperfusion model rats have a protective effect.
KEY WORDS Cerebral ischemia;Xinnao shenkang;Mechanism;Effect
􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚􀤚
心脑肾康由茶多酚(TP)、银杏提取物(Egb761)、三七总皂
苷(PNS)、丹参素组成。其中作用机制较明确的为TP中的儿
茶素,其提取自茶叶,实验证明该成分可显著改善肾缺血再灌
注引起的损伤,起到延缓衰老、抑制氧化的功效[1]。笔者拟将
心脑肾康应用于脑缺血的干预和治疗中,现通过大鼠局灶性
脑缺血再灌注(MCAO)模型对该药进行研究,明确其改善脑
缺血的机制,为进一步开发新药提供理论依据。
1 仪器与材料
1.1 仪器
TYXN-91型血液凝集仪(上海通用电机电技术研究和上
海通用医用仪器公司);JEM1230型显微镜(日本电子株式会
社);DU600型紫外分光光度计(日本岛津公司)。
1.2 试药
心脑肾康由本课题组自制。PNS、Egb761、TP、丹参素(广
西南方天然药材有限公司,批号分别为20090811、20091007、
20090710、20090915,纯度分别为90%、总内酯/总黄酮>6/24、
98%、3%,以1‰DMSO将所有成分助溶,其中TP占40%);杏
灵颗粒(上海杏灵科技药业股份有限公司,批号:20090704,其
中每1g 含总内酯0.24g、总黄酮1.76g);二磷酸腺苷(美国
Sigma 公司,批号:040816);枸橼酸钠(广东省罗浮山白鹤药
厂,批号:034018);红四氮唑(上海化学试剂总厂,批号:
040206);一氧化氮合酶(NOS)、活性氧(ROS)、丙二醛
(MDA)、三磷酸腺苷(ATP)酶、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸
(LA)、考马斯亮蓝试剂盒(上海复生生物工程研究所,批号分
别 为 20091027、20091108、2 090906、2 090824、20091012、
20091109、20091117)。
1.3 动物
96只大鼠,♀♂兼用,体重>0.25kg,由成都达硕实验动
物有限公司提供(动物使用合格证号:SCXK(川)2008-24)。
2 方法
2.1 复制模型[1]
术前禁食12h,末次给药60min后复制模型,将大鼠大脑
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