全 文 ：紫花大叶柴胡中柴胡皂苷 a的闪式提取工艺研究
方应权
(重庆三峡医药高等专科学校，重庆 404020)
收稿日期:2013-07-09
基金项目:重庆市教委自然科学基金项目 (kt121805)
作者简介:方应权 (1973—) ，男，硕士生，副教授。主要从事中草药资源开发与应用研究。Tel:E-mail:862120258@ qq. com
摘要:目的 研究闪式提取紫花大叶柴胡中柴胡皂苷 a的最佳工艺条件。方法 以柴胡皂苷 a得率为指标，采用正交
试验设计，对闪式提取法的影响因素进行考察。并在提取率、提取时间、溶剂用量和耗电量等方面与传统的柴胡皂苷
a提取方法进行比较。结果 闪式提取的最佳工艺为 75%乙醇，料液比 1 ∶ 12，提取时间 3. 0 min。结论 闪式提取法
操作简便、节能、提取率高，可用作紫花大叶柴胡的开发利用。
关键词:闪式提取;紫花大叶柴胡;柴胡皂苷;正交试验
中图分类号:Ｒ284. 2 文献标志码:B 文章编号:1001-1528(2013)12-2736-03
doi:10. 3969 / j． issn． 1001-1528. 2013. 12. 041
柴胡为临床常用中药， 《中国药典》 (2010 版一部)
收载本品为伞形科植物柴胡 Bupleurum chinense D C． 或狭
叶柴胡 Bupleurum scorzonerifolium Willd． 的干燥根［1］。紫花
大叶柴胡 Bupleurum longiradiatum var． porphyranthum为柴胡
属植物的一种，多年生草本，分布在河南、四川、陕西、
甘肃等地。具有发表祛风、清泄心火、清肝利胆、通经之
功效，主治肝气不舒、虚劳骨蒸、月经不调、感冒、黄疸
等症［1-2］，疗效确切，在三峡库区的巫溪、石柱、巴东和巫
山等地使用尤为广泛［3］。三萜类皂苷为柴胡属植物的主要
有效成分之一，其中含量较多的有柴胡皂苷 a、c、d［4］。
柴胡皂苷 a (saikosaponin-a)是柴胡抗癫痫作用的主要生
物活性成分［5］。柴胡皂苷传统提取方法包括水提取法［6］、
乙醇浸渍法［7-8］以及超声提取法［9］等，这些方法都不同程
度地存在提取时间长、耗能多、以及溶剂消耗大等缺点。
闪式提取是近年来发展起来的一种中药提取方法，该方法
利用高速剪切力和搅拌力将药材粉碎至细微颗粒，在局部
负压渗透的作用下使组织内有效成分迅速达到溶解平衡，
从而实现高效提取，具有高效节能、快速 (1 ～ 3 min)、操
作简便等优点［10-11］。本实验首次以闪式提取法提取紫花大
叶柴胡中的柴胡皂苷 a，并采用正交设计优化提取工艺，
为开发柴胡制剂提供实验依据。
1 仪器与材料
JHBE—50S型中草药闪式提取器 (河南金鼎科技发展
有限公司) ;Agilent 1100 系列高效液相色谱仪，安捷伦
ChemStation色谱工作软件 (美国安捷伦公司) ;ＲE 52—
86A 旋转蒸发器 (上海亚荣生化仪器厂) ;SB 3200-超声波
提取器 (上海必能信超声有限公司) ;Millipore simplicity-
185 超纯水器 (美国密里博公司) ;METTLEＲ AE240 电子
分析天平 (瑞士梅特勒-托利多公司)。
紫花大叶柴胡，2012 年 8 月中旬采集于重庆巫溪海拔
约1 500 m的红池坝山，经重庆师范大学陈邵成教授鉴定为
伞形科柴胡属紫花大叶柴胡。取其根，干燥，制成粗粉，
备用;柴胡皂苷 a对照品 (供定量测定用，购自中国食品
药品检定研究院，批号:110777-20050) ;甲醇为色谱纯，
实验用水为超纯水，其余试剂为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 紫花大叶柴胡中柴胡皂苷 a测定方法 参考文献［2］，
对紫花大叶柴胡中柴胡皂苷 a的量进行测定。色谱条件为:
Phenomenex Luna C18色谱柱 (250 mm × 4. 6 mm，5 μm) ;
以甲醇-水 (74 ∶ 26，V /V)为流动相;体积流量为 0. 9
mL /min;柱温为 35 ℃，检测波长为 200 nm;进样量 20
μL。柴胡皂苷 a进样量在 0. 11 ～ 4. 40 μg 与峰面积呈线性
关系 (r = 0. 999 9)。柴胡皂苷 a 平均回收率为 97. 42%，
ＲSD为 1. 42%。
2. 2 正交试验
2. 2. 1 考察因素和水平的确定 影响闪式提取得率的主要
因素包括粉末粒径大小、闪式提取电压、提取溶剂种类和
浓度、料液比、以及提取时间等［12-13］。综合相关文献报道
及前期预试验结果，影响提取闪式提取紫花大叶柴胡中柴
胡皂苷 a的主要因素包括:提取溶剂乙醇的体积分数、料
液比和提取时间［7，9，14］。试验中，保持粉末粒径为粗粉，闪
式提取电压为 100 V及以乙醇为提取溶剂进行其它因素的
考察。
取干燥紫花大叶柴胡根粗粉 50 g，置闪式提取罐中，
进行闪式提取，提取完成后过滤提取液，滤液加水稀释至
1 000 mL，按 2. 1 项测定柴胡皂苷 a的量，以柴胡皂苷 a得
率作为考察指标，采用单因素法考察乙醇体积分数、料液
比和提取时间对闪式提取的影响。结果显示，当乙醇体积
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分数为 75%，液料比为 1 ∶ 12，提取时间为 2. 0 min时，得
到柴胡皂苷 a得率较高。
2. 2. 2 正交试验结果及方差分析 选取乙醇体积分数
(A)、料液比 (B)和提取时间 (C)为考察因素，各因素
设置 3 个水平，采用 L9(3
4)正交表，各因素水平设置为:
乙醇 (65%、75%和 85%)、料液比 (1 ∶ 9、1 ∶ 12 和 1 ∶
15)、提取时间 (1. 0 min、2. 0 min和 3. 0 min) ，如表 1 所
示，考察以上 3 个因素对紫花大叶柴胡中柴胡皂苷 a 提取
工艺的影响。试验安排及结果见表 2，方差分析见表 3。
由 Ｒ值 (表 2)可知，各因素对提取率影响大小为:
A ＞ B ＞ C，即乙醇体积分数对柴胡皂苷 a 提取率影响最大，
其次为料液比，提取时间影响最小。方差分析结果 (表 3)
显示，因素 A (乙醇)和 B (料液比)对提取率的影响呈
现显著性 (P ＜ 0. 05) ，而闪提时间对得率影响不显著
(P ＞ 0. 05)。通过 K 值可判断出最佳提取条件为 A2B2C3，
即乙醇体积分数为 75%，料液比 1 ∶ 12，闪式提取时间
3 min。
表 1 正交试验因素水平
水平
因素
A 乙醇 /
%
B 料液比 /
(g·mL －1)
C 提取
时间 / min
D 空白
1 65 1 ∶ 9 1. 0 1
2 75 1 ∶ 12 2. 0 2
3 85 1 ∶ 15 3. 0 3
表 2 正交试验结果
编号 A B C D
柴胡皂苷 a提取率 /
(mg·g － 1)
1 1 1 1 1 12. 42
2 1 2 2 2 13. 56
3 1 3 3 3 13. 68
4 2 1 2 3 14. 23
5 2 2 3 1 15. 62
6 2 3 1 2 14. 56
7 3 1 3 2 13. 63
8 3 2 1 3 14. 10
9 3 3 2 1 14. 30
k1 13. 220 13. 427 13. 693 14. 113
k2 14. 803 14. 427 14. 030 13. 917
k3 14. 010 14. 180 14. 310 14. 003
Ｒ 1. 583 1. 000 0. 617 0. 196
表 3 方差分析
方差来源 离差平方和 自由度 均方 F P
A 3. 760 2 1. 880 64. 514 0. 015*
B 1. 628 2 0. 814 27. 946 0. 035*
C 0. 572 2 0. 286 9. 814 0. 092
误差 Error 0. 058 2 0. 029
注:F0. 05(2，2)= 19. 00，F0. 01(2，2)= 99. 00，* P ＜ 0. 05
2. 3 验证试验 取大叶柴胡干燥根粗粉 50 g，置闪式提取
罐内，按最优工艺进行闪式提取，即加入 75% 乙醇 600
mL，提取 3 min，滤过，滤液加水稀释至 1 000 mL，即得
闪式提取液，重复 5 次，按 2. 1 项下测定柴胡皂苷 a。5 批
大叶柴胡的柴胡皂苷 a 得率分别为 15. 42、15. 86、16. 02、
15. 38、15. 56 mg /g，ＲSD为 1. 79%，表明该提取方法重复
性好，本研究确定的最佳工艺条件切实可行。
2. 4 闪式提取法与传统乙醇回流提取法比较 根据文
献 ［6］，采用水提法，取大叶柴胡干燥根，加 8 倍量的水，
提取 2 h，提取液浓缩相当于至每 1 mL 含 1 g 药材，重复 3
次，得柴胡皂苷 a 的评价得率为 0. 31 mg /g，与文献报道
一致。
根据文献［8，15］报道，采用浸渍法，即选用 60%乙
醇为溶剂，加 5 倍量，提取 3 次，每次浸提 3 d，重复 3
次，按 2. 1 项下测定，柴胡皂苷 a 的平均得率为 4. 86
mg /g，与文献报道一致。
根据文献［9］报道，采用超声提取柴胡皂苷 a，即提取
时间 93 min、超声功率 150 W、液固比 60。测得柴胡皂苷 a
得率为 6. 21 mg /g，与文献报道一致。
3 讨论
通过正交试验得到了闪式提取大叶柴胡中柴胡皂苷 a的
最优工艺条件，即 75%的乙醇，料液比 1 ∶ 12，闪式提取
3. 0 min。该方法操作简单、迅速、提取率高、生产成本低。
闪式提取时，需将柴胡适当粉碎，以保证药材在闪式
提取罐中被刀头打碎，实验中发现，将柴胡制成过 20 目筛
的粗粉，即可保证提取率。
与水提法相比，闪式提取得率为其 50 倍，提取时间为
水提法的 1 /120，虽然闪提法需要使用乙醇作为溶剂，但
在得率、操作时间和能耗上明显优于水提法。与乙醇浸渍
法相比，闪提法乙醇消耗量与其基本相当，得率约为浸渍
法的 5 倍，时间则仅为其 1 /4 320。与超声提取法相比，闪
式提取法得率约为其 2. 5 倍，闪式提取器功率按 800 W计
算，消耗能量为超声提取法的 11. 4%，耗时为后者的1 /31。
综上所述，闪式提取在柴胡皂苷 a 得率、能耗和操作简单
迅速等方面比传统的提取方法具有明显的优势。
闪式提取法适用于植物硬、软材料的快速高效提取，
具有提取温度低、高效节能等优点。但该方法也存在一定
的缺点，如因药材过粗过硬容易损坏刀头;为安全起见，
工作电压和功率需控制住一定范围内。因此，目前该方法
主要用于实验室研究，对于工业化、产业化应用尚需进一
步探索。
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康复新液对慢性胃溃疡愈合环境和营养的影响
刘童婷1， 黄秀深1* ， 陈 瑾2 黄媛莉2
(1． 成都中医药大学，四川 成都 611137;2． 四川好医生攀西药业有限责任公司，四川 西昌 615000)
收稿日期:2013-01-12
作者简介:刘童婷 (1986—) ，女，硕士生，从事消化系统疾病复方配伍规律的理论、临床研究。Tel:13228217961，E-mail:
liutongting2010@ 163. com
* 通信作者:黄秀深 (1955—) ，男，教授，主要从事脾胃疾病相关复方研究工作。Tel:13608031734，E-mail:jcbl7747@ sina. com
摘要:目的 通过对乙酸烧灼型胃溃疡模型进行干预，旨在探索康复新液对慢性胃溃疡愈合环境和营养的影响。方法
大鼠随机分为造模组和假手术组，造模组随机分为乙酸模型组、康复新液组、雷尼替丁组、奥美拉唑组和达喜组。
采用 ELISA法测定胃组织血管内皮生长因子 (VEGF)、一氧化氮 (NO)、前列腺素 (PGE2)和胃黏膜谷氨酰胺
(Gln)的水平。结果 大鼠胃浆膜下注射 10%乙酸后，与假手术组比较，乙酸模型组的溃疡指数和胃组织 NO有显著
性差异 (P ＜ 0. 01) ，胃组织 PGE2 和胃黏膜 Gln有显著性差异 (P ＜ 0. 01) ，胃组织 VEGF无统计学意义 (P ＞ 0. 05)。
经治疗后，与乙酸模型组比较，胃组织 NO升高且具有显著性差异 (P ＜ 0. 01) ，胃组织 PGE2 的水平下降与 VEGF 的
水平均无统计学意义 (P ＞ 0. 05) ，胃黏膜 Gln的水平升高显著且具有显著性差异 (P ＜ 0. 01)。结论 康复新液促进
慢性胃溃疡的愈合可能与溃疡局部 NO、Gln的合成和表达有关，对 VEGF和 PGE2 的水平作用不明显，为溃疡的修复
提供良好的环境和营养状态，作用强于西药治疗组。
关键词:康复新液;愈合环境;营养;一氧化氮;谷氨酰胺
中图分类号:Ｒ285. 5 文献标志码:B 文章编号:1001-1528(2013)12-2738-03
doi:10. 3969 / j． issn． 1001-1528. 2013. 12. 042
美洲大蠊 Periplaneta americana L． 属昆虫纲有翅目蜚
蠊科，为蠊目中的一个优势种，俗称“蟑螂”，是世界上
最古老、繁衍最成功的一个昆虫类群。 《神龙本草经》上
记载“味咸，寒，有毒。主治瘀血，症坚，寒热，破积聚，
喉咽痹。内塞无子，通利血脉”［1］。
现代药理研究发现，其生物制剂康复新液能促进胃肠
道溃疡愈合，提高愈合的质量。本实验通过对康复新液对
大鼠乙酸烧灼型胃溃疡模型进行干预，旨在探讨康复新液
对慢性胃溃疡愈合期胃黏膜修复环境和营养的影响。
1 材料与方法
1. 1 试验药物 康复新液，规格:50 mL /瓶，四川好医生
攀西药业有限责任公司，批号:090422。盐酸雷尼替丁片，
规格:0. 15g /片，西南合成制药股份有限公司，批号:
091203。奥美拉唑镁肠溶片，规格 20 mg /片，阿斯利康制
药有限公司，批号:LK8936，分包装批号:0911087。达喜
(铝碳酸镁片) ，规格:500 mg /片，拜耳医药保健有限公
司，规格:116070。
1. 2 动物 清洁级 SD大鼠，体质量 200 ～ 220 g，雌雄各
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