全 文 ：第 22卷 ,第 4期 光　谱　实　验　室 Vo l . 2 2 , No . 4
2 0 0 5年 7月 Chinese Journal of Spectroscopy Laboratory July , 2 0 0 5
芫荽籽中总黄酮含量的测定
① 联系人 ,电话: ( 0991) 8582529; E-mai l: lif eng0827@ sohu. com; xiecx@ x ju. edu. cn
作者简介:李锋 ( 1977— ) ,女 ,陕西省汉中市人 ,在读硕士研究生 ,从事应用化学研究工作。
收稿日期: 2004-11-12
李 锋　解成喜①　范维刚　艾尔肯·艾米尔
(新疆大学理化测试中心　乌鲁木齐市　 830046)
摘　　要
　　在波长 510nm下 , NaNO2-AlCl3-NaOH为显色剂 ,分光光度法测定芫荽籽中总黄酮的含量。 在 8—
48μg /mL范围内线性关系良好 ,回归方程为 A= 0. 145+ 7. 9464C , r= 0. 9993,平均回收率为 101. 2% ,
RSD= 1. 83% (n= 3)。 此法简单、快速、准确。
关 键 词　芫荽籽 ,总黄酮 ,分光光度法。
中图分类号: O657. 32　　　文献标识码: B　　　文章编号 : 1004-8138( 2005) 04-0808-03
1　前言
芫荽 (Coriandrum Sativum L . )又名香菜、胡荽 ,为伞形科芫荽属一年或二年生草本植物。在我
国东北、山东、江苏、广西、贵州、西藏、新疆等许多省区均有栽培。全草具有浓烈的香气 ,其籽有驱
风、透疹、健胃、祛痰之效 [ 1] ,还能促进胃肠腺分泌、胆汁分泌 ,有镇咳、平喘作用 [2 ] ,目前在新疆维药
中已得到应用。芫荽籽化学成分包括挥发油、黄酮、脂肪酸、糖、维生素 C、绿原酸等 [2 ]。目前黄酮类
化合物的测定方法常用的有 HPLC法和分光光度法 [3— 5]、薄层色谱法 [ 6]等。关于芫荽籽中总黄酮含
量的测定尚未见文献报道 ,本文采用分光光度法测定了芫荽籽中总黄酮的含量 ,方法简单、快速、可
靠。
2　实验部分
2. 1　仪器与试剂
λ-17紫外 -可见光谱仪 (美国 PE公司 )。
芦丁对照品 (中国药品生物制品检定所 ) ;甲醇 (分析纯 ) ; NaNO2、 AlCl3和 NaOH均为化学纯 ;
实验用水为蒸馏水 ;芫荽籽 (购于新疆维吾尔医医院 )。
2. 2　标准溶液的制备
精确称取芦丁标准品 50mg ,置于 100mL容量瓶中 ,用甲醇定容。 准确移取 20mL,置于 50m L
容量瓶中 ,用水定容至刻度 ,摇匀 ,配成浓度为 0. 2mg /mL的芦丁标准溶液。
2. 3　样品溶液的制备
精确称取 80℃下干燥 3h并粉碎的芫荽籽粉末 1. 0g ,加入 80%甲醇溶液 50mL,回流提取 6h ,
抽滤 ,用 80%甲醇洗涤滤渣 2次 ,以 80%甲醇定容至 100mL。
3　结果与讨论
图 1　芦丁标样显色后的扫描曲线
3. 1　最大吸收波长的确定
准确移取 0. 2mg /m L芦丁标准溶液 8. 0m L,置于
25mL容量瓶中 ,加水至约 10mL,加入 5% NaNO2溶液
0. 7mL,摇匀 ,静置 5min后 ,加入 0. 3mol /L AlCl3溶液
0. 7mL, 摇匀 ,静 置 5min, 加入 1mol /L NaOH溶 液
4. 0mL,用水定容至刻度。对此溶液在 450— 750nm区间
扫描 ,确定最大吸收波长为 510nm。 芦丁标样显色后的扫
描曲线如图 1所示。
3. 2　显色剂的用量
所加入的 NaNO2、 AlCl3和 NaOH溶液分别在 0. 3— 0. 9mL、 0. 3— 0. 9mL、 2. 0— 8. 0mL测定
的吸光度基本不变。实验过程中 ,选用 Na2NO2、 AlCl3各 0. 7mL, NaOH 4. 0mL。
3. 3　提取溶剂浓度的选择
　　精确称取芫荽籽样品 4份 ,分别加入
40%、 60% 、 80%、 100%甲醇溶液 50m L
回流提取 6h,过滤 ,定容至 100mL。准确
表 1　溶剂浓度对提取效果的影响
甲醇浓度 (% ) 40 60 80 100
总黄酮含量 ( mg /g) 3. 897 4. 721 5. 260 4. 700
移取 10m L至 25mL容量瓶中 ,按 3. 5节校准曲线项下测定总黄酮含量 ,结果如表 1。 以 80%甲醇
溶液提取黄酮含量最高 ,并且提取液清澈透明 ,因此本实验选 80%甲醇溶液作为提取溶剂。
3. 4　提取时间的选择
　　准确称取芫荽籽样品 4份 ,加 80%
甲醇溶液 50mL,分别回流提取 2h、 4h、
6h、 8h,过滤 ,以 80%甲醇定容至 100mL。
表 2　提取时间对提取效果的影响
提取时间 (h ) 2 4 6 8
总黄酮含量 ( mg /g) 4. 904 4. 928 5. 260 4. 914
准确移取 10mL至 25mL容量瓶中 ,按 3. 5节校准曲线项下测定总黄酮含量 ,结果如表 2。由测定结
果可知 ,提取时间选用 6h即可。
图 2　校准曲线
3. 5　校准曲线的绘制
准确移取 0. 2mg /mL芦丁标准溶液 1. 0、 2. 0、 3. 0、 4. 0、
5. 0、 6. 0m L,分别置于 25mL容量瓶中 ,加入 5% NaNO2溶液
0. 7mL, 摇匀 ,静置 5min后 ,加入 0. 3mo l /L AlCl3 溶液
0. 7mL,摇匀 ,静置 5min,加入 1mo l /L NaOH溶液 4. 0mL,用
水定容至刻度。以试剂空白作参比 ,在波长 510nm处测定吸光
度。以吸光度 ( A)为纵坐标 ,以芦丁标准溶液的浓度 (C )为横坐
标 ,绘制校准曲线 ,如图 2所示。 用最小二乘法进行回归 ,得回
归方程为: A= 0. 145+ 7. 9464C , r= 0. 9993,表明芦丁浓度在
8— 48μg /mL范围内与吸光度呈良好的线性关系。
3. 6　精密度试验
精确称取 5份芫荽籽样品 ,按样品制备方法制备样品 ,按 3. 5节校准曲线项下测定总黄酮含
量 , RSD为 1. 99% (n= 3)。
3. 7　重现性试验
准确移取 0. 2mg /mL芦丁标准溶液 3mL置于 25mL容量瓶中 ,以水定容 ,测定总黄酮含量 ,
RSD为 1. 79% (n= 6)。
809第 4期 李锋等:芫荽籽中总黄酮含量的测定
3. 8　样品总黄酮含量的测定
准确移取样品溶液 10mL至 25mL容量瓶中 ,按 3. 5节校准曲线项下测定总黄酮含量 ,芫荽籽
中总黄酮含量为 5. 310mg /g , RSD为 1. 87% (n= 5)。
3. 9　加标回收试验
向已知含量的样品中添加一定量的芦丁标准品 ,按 3. 5节校准曲线项下测定总黄酮含量 ,计算
回收率 ,结果见表 3。
表 3　加标回收试验结果 ( n= 3)
测得量
( mg)
加入量
(mg )
加标测得量
( mg )
回收率
(% )
平均回收率
(% )
RSD
(% )
0. 58 0. 20 0. 775 99. 36
0. 58 0. 30 0. 890 101. 1 101. 2 1. 83
0. 58 0. 40 1. 010 103. 1
参考文献
[1 ]中国植物志编委会 .中国植物志 [M ] .第 55卷 .第 1分册 .北京:科学出版社 , 1979. 89.
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[5 ]丁利君 ,吴振辉 ,蔡创海等 .金银花中黄酮类物质最佳提取工艺的研究 [ J] .食品科学 , 2002, 23( 2): 62— 65.
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Determination of Flavonoids inCoriandrum Seed
LI Feng　 XIE Cheng-Xi　 FAN Wei-Gang　 AIERKEN Aimier
( Physics Chemistry Detect ing Center , X inJiang University, Urumqi 830046, P. R.Ch ina )
Abstract
The f lav onoids in coriandrum seed w ere determined by ult raviolet spectrophotometry at
510nm. The linear range is 8— 48μg /mL with the reg ression equa tion of A= 0. 145+ 7. 9464C , r=
0. 9993. The average recovery w as 101. 2% with the RSD o f 1. 83% (n= 3) . The method is simple,
specific and accurate.
Key words　Coriandrum Seed, Flavonoids, Spect ropho tometry.
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　　由于本刊在 2001— 2003年被《中国核心期刊
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810 光谱实验室 第 22卷