全 文 ：　2009年 10 月　　　　　　　　　　　　　　　　　　　湘南学院学报　 Oct., 2009　第 30卷第 5 期　　　　　　　　　　　　　　　Journal of Xiangnan University　 Vol.30 No.5
收稿日期:2009-08-22
基金项目:湖南省科技厅资助课题(课题编号:2008FJ3077), 湖南省大学生创新性实验设计项目([ 2008] No.269)
作者简介:车少林(1985-),男 ,湖南衡阳人 ,研究方向:天然产物开发
＊通讯作者:欧阳玉祝(1956-), 男 ,教授 , 硕士生导师 ,湖南宁远人 , 研究方向:天然产物开发和精细催化.
海金沙总黄酮提取物对花生油抗氧化稳定性影响
车少林 , 欧阳玉祝＊ , 唐赛燕 , 许秋艳
(吉首大学 化学化工学院 , 湖南 吉首　416000)
摘　要:在花生油中添加海金沙总黄酮提取液 ,考查了温度 、过氧水和紫外光对花生油过氧化值的影响.结果表明:常
温反应 10h , 花生油中添加 4mL海金沙总黄酮提取液的过氧化值比不加小 50.26%;分别于 90℃加热和 0.03%过氧水
氧化 10h , 花生油中添加海金沙总黄酮提取液的过氧化值比不加小 21.13%和 17.4%;用紫外灯照射 10h ,添加海金沙总
黄酮提取液的花生油 , 其过氧化值比不加小 11.85%.羟基自由基清除能力实验表明:花生油中添加 10mL海金沙总黄
酮提取物的自由基清除率是不加的 2.57倍.
关键词:海金沙;总黄酮;抗氧化;花生油
中图分类号:O621.29　　　　　　文献标识码:A　　　　　　　文章编号:1672-8173(2009)05-0060-04
海金砂是一种具有抗菌消炎 、清热解毒 、活血通络 、调节血脂和抗氧化 、消除自由基等功效的天然植物.目
前 ,海金沙的研究主要用于临床作为治疗呼吸道感染 、流行性腮炎 、尿路感染的中药用于临床[ 1-3] .胡学球用海
金沙对带状疱疹病的治疗进行了研究 ,治愈率可达 100%[ 4] ;周仁超利用圆纸片法对海金沙等十二种厥类植物
的抗菌作用进行了研究[ 5] ,发现海金沙抗菌活性最强;蔡建秀对海金沙等 22种药用蕨类植物总黄酮含量进行
了研究 ,发现海金沙总黄酮含量为 4.212%[ 6] ;张雷红等人用色谱技术对海金沙草化学成分做了研究 ,分离得
到了 6个化合物 ,其中含有大量的酚酸[ 7] .研究发现合成抗氧化剂 BHA BHT 对人体具有致癌作用 ,这就有效地
促进了天然抗氧剂的迅速发展.天然复合抗氧化剂以其抗氧效率高 ,作用时间长 ,热稳定性好 ,清除氧自由基
能力强 ,毒副作用小的优点成为现今研究的热点[ 8-10] .本文以花生油为原料 ,以过氧化值为指标 ,考查海金沙
总黄酮提取液对花生油过氧化值的影响 ,研究结果能为天然抗氧剂的应用提供依据.
1　实验部分
1.1　主要仪器和试剂
1.1.1　实验仪器
UV-2450紫外可见分光光度计(日本岛津公司);FA2104N电子分析天平(上海精密科学仪器有限公司);
ZD-4调速多用振荡器(江苏大地自动化仪器厂);KQ-250E型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);
FZ102型微型植物粉粹机(天津市泰斯特仪器有限公司);DF-101S 集热恒温磁力搅拌器(郑州长城科工贸有
限公司);ZF-6型三用紫外分析仪(上海嘉鹏科技有限公司).
1.1.2　实验药品
海金沙采于湖南永州 ,样品采回后 ,经洗净 、晾干 ,于 0.1MPa ,60℃下真空干燥 ,用粉碎机打成约 60目粉末
备用;芦丁对照品购置于中国药品生物制品鉴定所;花生油购置于邵阳市机榨油;D101大孔吸附树脂为天津市
光复精细化工研究所生产;无水乙醇 、石油醚 、正丁醇 、氢氧化钠 、盐酸 、亚硝酸钠 、硝酸铝 、冰醋酸 、三氯甲烷 、
邻二氮菲 、硫酸亚铁 、EDTA 、磷酸二氢钠 、双氧水 、I2 等均为国产分析纯试剂.
1.2　实验方法
·60·
1.2.1　海金沙总黄酮的超声提取
取50g 海金沙置于 500mL圆底烧瓶中 ,按 1:4(g mL)固液比加石油醚 200mL ,于 60℃下加热提取 60min ,抽
滤(回收石油醚).滤渣按固液比1:5(g mL)加 70%乙醇 ,在常温下超声提取 70min ,抽滤 ,滤液加活性炭 3g ,于
60℃下反应 60min ,抽滤 ,滤液定容至 500mL备用.
1.2.2　羟基自由基清除能力测定
羟基自由基清除能力按照参考文献[ 11]进行测定 ,按下式计算羟基自由基清除率:
羟基自由基清除率(%)=(A样品 -A损伤)(A空白 -A损伤)×100%
1.2.3　比色法测定油脂过氧化值
1.2.3.1　碘-淀粉标准曲线的绘制
按参考文献[ 12]绘制碘-淀粉比色标准曲线 ,经线性回归得回归方程和相关系数如下:
C=4.6459A　　　R2=0.9992
1.2.3.2　过氧化值(POV)的测定
样品的过氧化值按参考文献[ 12]进行测定 ,用紫外可见光分光光度计测 571nm 处吸光度.根据吸光度和
回归方程计算出碘生成量 ,按下式计算样品的过氧化值.
POV(mmol kg)=碘生成量(mmol)
W(kg)
式中:W为所用油样的质量(kg).
1.2.4　海金沙总黄酮提取液抗氧化实验
在两个 100mL圆底烧瓶中分别加入 50mL10%花生油正丁醇溶液 ,一个加一定量的海金沙总黄酮提取液 ,
另一个不加 ,分别在一定条件下实验 ,每隔 2h取样测其过氧化值 ,考查花生油的抗氧化稳定性.
2　结果与讨论
2.1　海金沙总黄酮提取液用量对花生油过氧化值的影响
在五个100mL锥形瓶中分别加入 50mL 含花生油 10%正丁醇溶液 ,其中四个分别添加不同量的海金沙黄
酮提取液 ,另一个不加 ,置于振荡器上振荡反应 ,每隔 2h取样测其吸光度 ,考查海金沙总黄酮添加量对花生油
过氧化值的影响 ,结果如图 1所示.
图 1　海金砂提取液用量对
花生油过氧化值的影响
图1结果表明:随反应时间的增加 ,油的过氧化值都增大 ,而添
加海金沙总黄酮提取液后花生油的过氧化值比不加的都要小 ,且随
提取液添加量的增加过氧化值增加速度变缓.在室温下反应 10h ,花
生油中添加 4mL 提取液和不加提取液的过氧化值分别为 2.638
4mmol kg 和 5.3047mmol kg ,减少了 50.26%.
2.2　不同温度下添加海金沙总黄酮提取液对花生油过氧化值的影
响
在两个 100mL圆底烧瓶中分别取 50mL10%花生油正丁醇溶液 ,
其中一个加入 2mL 海金沙提取液 ,一个不加 ,分别在不同温度下反
应 ,每隔 2h取样测其过氧化值 ,考查温度对花生油过氧化值影响 ,结果如图 2所示.
图 2　30(a)、70(b)和 90℃(c)温度下添加海金沙总黄酮提取液对花生油过氧化值的影响
·61·
图2结果表明:30℃和90℃温度下分别加热10h ,花生油中添加提取液和不加提取液的过氧化值分别为3.
251mmol kg 、10.1164mmol kg和 3.953mmol kg 、12.827mmol kg ,分别小 17.76%和 21.13%.因为海金沙中的类黄
酮和酚酸能有效清除活性自由基 ,对花生油有良好的保护作用.
2.3　过氧水作用下添加海金沙总黄酮提取液对花生油过氧化值的影响
在两个100mL圆底烧瓶中分别取 50mL 10%花生油正丁醇溶液 ,加不同浓度的过氧水 ,一个加 1mL海金沙
总黄酮提取液 ,一个不加 ,每隔 2h取样测其过氧化值 ,考查过氧水作用下添加海金沙提取液对花生油过氧化
值的影响.结果如图 3所示:
图 3　0.01%(a)和 0.03%(b)过氧水作用下加海金沙总黄酮提取液对花生油过氧化值的影响
图3结果表明:过氧水浓度越大 ,油的过氧化值增加越快.室温下反应 10h ,花生油中加 2ml0.03%过氧水
和不加的过氧化值分别为 5.409mmol kg 和 6.5486mmol kg ,添加海金沙总黄酮提取液后 ,花生油的过氧化值比
不加小 17.4%.因为海金沙中的类黄酮和酚类化合物具有清除自由基来源的作用 ,能够消除过氧水的氧化作
用.
图 4　紫外光照射下加海金沙总黄酮提取
液对花生油过氧化值的影响
2.4　紫外光作用下添加海金沙总黄酮提取液对花生油过氧化值的
影响
在两个100mL圆底烧瓶中分别取 50mL 10%花生油正丁醇溶液 ,
一个加2mL 海金沙总黄酮提取液 ,置于 254nm紫外光下照射 ,光源距
离5cm ,每隔 2h取样测其过氧化值 ,考查紫外光作用下添加海金沙提
取液对花生油过氧化值的影响.结果如图4所示:
图4结果表明:用 254nm 紫外光照射 10h ,花生油中添加海金沙总黄
酮提取液和不加提取液的过氧化值分别为 5.884mmol kg 和 6.
675mmol kg ,减小了 11.85%.这是因为海金沙提取液能消除紫外光作
用产生的活性自由基.
2.5　羟基自由基清除能力测定
取0.005mol L邻二氮菲溶液0.6mL ,加 0.4mL pH7.4磷酸盐 ,0.01mol L 硫酸亚铁溶液 ,0.02mol L EDTA溶
图 5　海金沙提取物羟基自由清除能力比较
液0.3mL ,蒸馏水 0.6mL ,样品液 1mL , 0.1%(v v)双氧水 0.8mL ,37℃
保温 1h ,测定 536nm 处吸光度值为(A样品);以 1mL70%乙醇和 0.
8mL蒸馏水替代提取液和双氧水测定空白吸光值(A空白);以 1mL
体积分数 70%乙醇替代样品测定损伤吸光度(A损伤),计算海金沙
提取物的羟基自由基清除率 ,结果如图 5所示.
图5结果表明:随添加海金沙总黄酮提取液体积的增加 ,花生油
羟基自由基清除率不断增大.添加 10mL海金沙提取物的羟基自由基
清除能力是不加的 2.57倍 ,说明海金沙总黄酮提取液对花生油具有
良好的羟基自由基清除能力 ,能够有效地保护植物油脂不被氧化变
质.
·62·
3　结论
海金沙黄酮提取物具有抗氧化活性高 ,自由基清除能力强 ,对人体毒副作用小的优点 ,是一种天然食品抗
氧剂 ,具有较高的应用价值.实验表明:常温下反应 10h ,花生油中添加4mL 海金沙总黄酮提取液的过氧化值比
不加小50.26%;90℃温度下加热 10h ,花生油中添加 2mL 海金沙总黄酮提取液的过氧化值比不加小 21.13%;
用0.03%过氧水室温氧化 10h ,添加海金沙总黄酮提取液的花生油 ,其过氧化值比不加小 17.4%;用紫外灯照
射10h ,添加海金沙总黄酮提取液的花生油 ,其过氧化值比不加小 11.85%.花生油中添加 10mL海金沙提取物
的羟基自由基清除率是不加的 2.57倍.
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Influence of Flavonoid Extracts from Lygodium Japonicum on
Antioxidant Stability of Peanut Oil
CHE Shao-lin ,OUYANGYu-zhu＊ , TANG Sai-yan , XU Qiu-yan
(College of Chemistry and Chemical Engineering , Jishou University , Jishou 416000 , China)
Abstract:The influence of temperature , hydrogen peroxide and ultraviolet light on peroxide value of the peanut
oil for adding flavonoid extracts from lygodium japonicumwas investigated.The results showed that peroxide values
of the peanut oil for adding 4mL flavonoid extracts from lygodium japonicum decreased 50.26% in comparison
without adding at common temperature reaction 10h.The peroxide value of the peanut oil for adding flavonoid ex-
tracts from lygodium japonicum by 90℃ and 0.03%hydrogen peroxide oxidation for 10h decreased 21.13% and
17.4% in comparison without adding , respectively.The peroxide values of the peanut oil for adding flavonoid ex-
tracts from lygodium japonicum by ultraviolet light for 10h decreased 11.85%in comparison without adding.The
hydroxyl free radical scavenging capacity experiment show that hydroxyl free radical scavenging ratio of peanut oil
at adding 10mL flavonoid extracts from lygodium japonicum was 2.57 times in comparison without.
Key words:Lygodium japonicum;Flavonoid;Antioxidant;Extraction
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